郑仕诚；魏筱玉；徐朝斌；谢惠琴
自发性细菌性腹膜炎(SBP)是慢性重型肝炎(简称慢重肝)和肝硬化腹水常见并发症,多数为医院感染.对168例慢重肝和肝硬化腹水并发SBP患者的临床资料进行分析,旨在探讨SBP早期诊断,合理有效使用抗菌药物,减少SBP危险因素.
作者：张玉江；张仕岭；王巧林；闫洪凤；谭永星 刊期： 2003年第07期
自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis, SBP)是肝硬化合并腹水患者的常见与严重的并发症,发生率高达10%～30%,这与肝硬化患者免疫功能明显降低,特别是肝内网状内皮系统严重受损、巨噬细胞吞噬功能以及白细胞黏附趋化与吞噬功能降低等原因有关.
作者：翁心华 刊期： 2003年第07期
目的了解猪戊型肝炎病毒 (HEV) 感染情况,探讨猪HEV基因型与人HEV的关系.方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)分别检测猪血清抗-HEV IgG抗体和猪HEV RNA,并用Vector NTI Suite 7和TreeView软件进行人与猪HEV核酸序列和基因进化树分析. 结果猪抗-HEV抗体阳性率为16.67% (18/108),并从18份抗-HEV IgG阳性的猪血清中扩增到2株 (11.11%, 分别命名为S18和S43) HEV 开放读码框(ORF)1片段(102～387bp),两者核苷酸序列同源性为99%,与HEV基因型1～8的核苷酸序列同源性分别为76%～77%、78%、76%～79%、85%～86%、77%、80%、79%和75%～79%.其中1株 (S18) 还扩增出HEV ORF2片段(5994～6297bp),与HEV基因型1～4的核苷酸序列同源性分别为76%～78%、74%、74%～77%、85%～94%. 结论分离的2株猪HEV属于HEV基因型4.
作者：朱永红；庄辉；董庆鸣；陈焰锋；李政泰；吴华；柳剑 刊期： 2003年第07期
乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)潜在的促凋亡和抗凋亡作用一直受到争议,现通过建立一个可调控HBX蛋白表达的系统来探讨HBX对人肝细胞系L02的影响.
作者：王海平；陈孝平；何松清；丁磊 刊期： 2003年第07期
在抗人类免疫缺陷病毒(HIV)研究中发现双脱氧核苷类化合物具有抑制逆转录酶,终止DNA链延伸,而抑制HIV复制作用.随后证实同样可以终止乙型肝炎病毒(HBV) DNA链的延伸,而达到抑制HBV复制的作用.以体外培养2.2.15细胞为模型,观察新合成的核苷类化合物β-L-D4A的抗HBV作用.
作者：吴金明；林菊生；姜凤超；章金艳；梁扩寰 刊期： 2003年第07期
以DNA测序结果为标准,采用寡核苷酸芯片技术和基于荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的UniArray技术分析24例使用拉米夫定治疗12个月以上的慢性乙型肝炎(CHB)患者YMDD变异的情况,检测HBV DNA和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,以探讨上述两种方法检测YMDD突变的价值及拉米夫定治疗乙型肝炎过程中出现的耐药状况.
作者：张红河；张卫英；陈岳明；项国谦；雷勇 刊期： 2003年第07期
目的通过前S2合成肽对肝细胞癌(HCC)组织中浸润T淋巴细胞亚群表达状况的分析,探讨前S2合成肽是否能改变乙型肝炎病毒(HBV)导致的HCC组织中浸润T淋巴细胞亚群表达的百分数和CD4+/CD8+比值,达到特异性治疗HCC. 方法用Merrifield固相化学合成法合成HBV中前S2抗原性强的P120～146多肽段.测序后,用0.01mol/L磷酸盐缓冲液溶解除菌后作为抗原.选择12例术后病理诊断为HCC,术前血清经酶联免疫吸附法测得HBsAg、HBeAg、抗-HBC阳性和HBV DNA阳性,且HBsAg在HCC组织中表达为阳性病例作为研究对象.在96孔培养板上,每孔加入经密梯度离心获得的单个核细胞悬液100μl(1×106细胞),设每孔含量为1μg、5μg、10μg、白细胞介素-2 500U和阴性对照共5组,每组均设3复孔,作用7d后制片,采用APAAP法观察CD3+、CD4+、CD8+的百分数和CD4+/CD8+的比值变化. 结果 发现在含有前S2合成肽5μg/孔组中,CD4+表达明显增加(34.1±3.2),与自身对照(29.3±3.5)相比差异有显著性 (t＝3.508,P<0.01),CD4+/CD8+比值(1.19±0.43)与自身对照(0.81±0.41)相比差异有显著性(t＝2.235,P＜0.05).在白细胞介素-2组中,CD3+表达有增加,与自身对照相比有差异,其它各组T淋巴细胞亚群几乎处于不变化的状态. 结论在适当的剂量下,前S2合成肽能够改变HCC组织中T淋巴细胞亚群的表达,使CD4+增加,并能改变CD8+静息状态,使二者互为达到杀伤肿瘤细胞的目的,为特异性运用前S2蛋白提供客观依据.
作者：郑仕诚；魏筱玉；徐朝斌；谢惠琴 刊期： 2003年第07期
目的通过对三种检测乙型肝炎病毒(HBV)YMDD突变方法的比较,评价其在监测拉米夫定抗HBV治疗中发生耐药突变的价值. 方法用熔解曲线法、聚合酶链反应微板核酸杂交-酶联免疫吸附法(PCRmnh-ELISA)和错配聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析法(mPCR-RFLP)对拉米夫定治疗过程中出现HBV DNA由阴转阳的44例慢性乙型肝炎患者的血清进行YMDD突变检测,比较它们的敏感性,并与直接测序法比较它们的特异性. 结果 mPCR-RFLP法、PCRmnh-ELISA法和熔解曲线法检出HBV DNA的灵敏度分别为104、105和106拷贝/ml.44例患者血清中,用mPCR-RFLP法检出26例为YMDD突变株,18例为野生株.在26例突变株中,熔解曲线法检出16例,PCRmnh-ELISA法检出18例;而在18例野生株中,熔解曲线法检出2例突变株,PCRmnh-ELISA法检出13例突变株.将上述三种方法检测结果不一致的16例标本进行测序,mPCR-RFLP法、熔解曲线法和PCRmnh-ELISA与测序的符合率分别为93.8%(15/16)、43.8%(7/16)、18.8%(3/16),差异有极显著性(χ2＝18.7,P<0.01). 结论 mPCR-RFLP法检测YMDD突变株具有较好的可靠性,是监测拉米夫定耐药株的一种非常有效的方法;熔解曲线法和PCRmnh-ELISA法需要进一步完善以提高敏感性和特异性.
作者：胡盈莹；江家骥；李丹；林彩文；李勤光；陈怡 刊期： 2003年第07期
作者： 刊期： 2003年第07期
自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis,SBP)在肝硬化患者的发生率为10.0%～25.0%,重型肝炎患者SBP的发生率为17.7%～47.0%.
作者：秦波；郭树华 刊期： 2003年第07期
丙型肝炎(简称丙肝)是慢性肝病的主要病因之一,目前全世界约有1.7亿名丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染者,而慢性丙肝易发展为肝硬化、甚至肝细胞癌.有关丙肝慢性化的机制涉及到病毒准种复杂度(quasispecies complexity)、病毒基因型、宿主因素以及信号转导异常等多个方面.
作者：樊文梅；朱万孚 刊期： 2003年第07期
患者,男,67岁,因腰痛伴双下肢放射性疼痛半年入院.入院前半年无明显诱因出现腰痛,并伴有双下肢放射痛,呈进行性加重.
作者：陈映霞；何泽明；常英展；秦叔逵 刊期： 2003年第07期
循环肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)为一内分泌系统,能分泌血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ),AngⅡ具有广泛的生物学效应,作用于全身多个器官,主要通过AngⅡ和特异性的膜受体作用来调控.在许多组织或器官,如肾脏、心脏和血管中存在着独立的局部RAS[1],亦可合成AngⅡ,AngⅡ以旁分泌、自分泌、细胞内分泌等形式作用于组织和细胞,与组织细胞特异性受体结合,发挥一系列功能调控作用.新近研究表明,肝脏亦存在着局部RAS[2,3],肝脏局部RAS、循环RAS与肝纤维化、肝硬化有着密切的关系.
作者：申凤俊；阴赪宏；王宝恩 刊期： 2003年第07期
目的对重型肝炎中肝前体细胞的某些标志物进行检测以明确其存在并探讨其在不同病理类型肝组织中的分布范围及特点. 方法采用免疫组织化学的方法分别对59例重型肝炎病例肝组织标本表达干细胞因子受体(c-kit)、谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)、白细胞分化抗原34(CD34)、细胞角蛋白19(CK19)、细胞角蛋白18(CK18)、甲胎蛋白(AFP)的情况进行检测.同时,对58例急慢性普通肝炎病例进行检测作为对照. 结果在重型肝炎中存在肝前体细胞,大部分以管状细胞即非典型胆管增殖(ADP)的形式存在,多位于门静脉汇管区、纤维间隔、汇管区或假小叶周边肝实质及炎症灶的周围,可表达c-kit、GST-π、CK19及CK18,而CD34和AFP为阴性;一部分以小肝细胞样细胞的形式存在,可表达c-kit、GST-π及CK18,而CK19、CD34及AFP为阴性.重型肝炎ADP范围明显大于普通肝炎(χ2＝63.63,P<0.05),亚急性重型肝炎和慢性重型肝炎病例ADP范围明显大于急性重型肝炎病例. 结论在病毒性肝炎的再生过程中,不同病理类型的特点也不同.普通型肝炎和慢性肝炎轻度主要是以肝细胞的增殖为主,在慢性肝炎中重度有肝前体细胞的参与,而在重型肝炎中,肝细胞的增殖受到损害或抑制,肝脏主要是通过肝干细胞的活化和增殖进行再生.但肝干细胞不是直接分化成成熟的功能细胞,在它们之间可能存在一种或多种过渡细胞.在人重型肝炎中主要是管状细胞,也有一部分是小肝细胞样细胞.
作者：胡中杰；郎振为；宋晨朝；张世杰 刊期： 2003年第07期
乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异被认为与拉米夫定治疗有关[1-3].为证实YMDD变异是由药物所致,还是因为其本身与野生株病毒共存,在药物作用下逐渐成为优势株,对未经治疗的110例慢性乙型肝炎(CHB)患者进行YMDD变异株的检测.
作者：颜鸣鹤；张长；凌乔；周仁芳 刊期： 2003年第07期
目的通过经母婴传播获得乙型肝炎病毒(HBV)感染的慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者(ASC) 母子体内HBV PreS/S基因序列研究,了解来源相同的HBV在不同程度病毒血症情况下PreS/S基因变异的特点. 方法选择15对母孕前为HBV感染、未接种过乙型肝炎疫苗且均未使用过抗HBV药物的ASC母子.应用T-A克隆技术构建重组质粒pGEM-PreS/S、双酶切进行鉴定,每个患者选2个酶切鉴定正确的克隆测序并进行分析. 结果选择15对ASC母子,根据HBV病毒血症高低分为3组,每组5对,A组母子均为高病毒血症,B组子女为高病毒血症、母亲为低病毒血症,C组子女为低病毒血症、母亲为高病毒血症.高病毒血症患者均为乙型肝炎e抗原(+),低病毒血症均为抗-HBe(+).母子HBV亚型相同,各组中有4/5对母子为B/adw2、1/5对母子为C/adrq+亚型.对每组中B/adw2亚型HBV患者的PreS/S基因进行分析显示:高病毒血症组间或低病毒血症组间HBV PreS/S基因变异数目及位点差异均无显著性,变异与年龄无关,低病毒血症患者变异数目及位点明显高于高病毒血症患者.两个低病毒血症组PreS/S基因绝大多数变异位点相同(113个),其中变异热点85个、可引起37个氨基酸变异,这些变异的氨基酸大多位于免疫表位内或(和)其附近. 结论 HBV变异可能与感染的时间长短无关;在发生乙型肝炎e抗原血清转换后的低病毒血症患者体内,HBV PreS/S基因出现较多的变异,且有规律,可能与病毒逃避免疫攻击有关.
作者：许红梅；彭明利；凌宁；卿玉玲；任红 刊期： 2003年第07期
目的构建大鼠肝再生增强因子(rALR)酵母重组表达质粒,在毕赤酵母菌GS115中进行表达.表达产物经超滤方法纯化后在体外进行生物活性研究. 方法以重组质粒pcDNA3.1-rALR为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增rALR编码区的DNA,构建重组质粒pPIC9K-rALR,然后电转化至毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下进行表达.表达产物经1.5% SDS-PAGE电泳和western blot鉴定后进行超滤纯化.用3H-TdR掺入法检测重组大鼠ALR(rrALR)体外刺激QGY和HepG2人肝癌细胞株和原代大鼠肝细胞的增殖情况. 结果重组质粒经酶切及PCR证实rALR编码区DNA正确插入质粒载体中.重组大鼠ALR被GS115菌以外分泌方式表达,其DNA分子量约为1.5×104,与理论预期值相符,western bolt鉴定发现rrALR能与抗人ALR多克隆抗体发生特异性反应,说明人和大鼠ALR抗原性上存在部分交叉.超滤纯化获得大量高纯度的rrALR.在所测定的剂量范围内,rrALR在体外以剂量依赖方式刺激QGY和HepG2肝癌细胞株增殖,但对原代大鼠肝细胞无刺激增殖作用. 结论 rrALR在毕赤酵母菌GS115中获得分泌性高效表达,rrALR在体外以剂量依赖方式刺激QGY和HepG2肝癌细胞株增殖,但对原代大鼠肝细胞无刺激增殖作用,表明肝癌细胞和正常肝细胞表达的ALR受体不同.人和大鼠ALR在生物学活性和抗原性上存在交叉.
作者：余慧峰；刘杞 刊期： 2003年第07期
乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该疫苗分子中增加了小鼠白细胞介素-12(IL-12)基因,观察IL-12对其免疫应答的影响.
作者：柯金山；赵平；吴淑梅；戚中田 刊期： 2003年第07期
目的探讨肝硬化患者与血小板α-颗粒膜蛋白(CD62P)、血小板糖蛋白(CD63)、血浆CD62P(SCD62P)水平及血小板[Ca2+]i的关系. 方法利用流式细胞术检测血小板CD62P、CD63,酶联免疫吸附法测定SCD62P和荧光分光光度法测定血小板[Ca2+]i. 结果肝硬化患者血小板[Ca2+]i、CD62P、CD63、SCD62P分别为(103.1±22.2)nmol/L、(47.6±20.0)%、(47.1±24.6)%和(67.6±37.6)μg/L,对照组分别为(57.6±13.1)nmol/L、(3.1±0.7)%、(2.5±0.7)%和(24.0±6.5)μg/L,两组比较差异有显著性,t值为6.148～19.067,P＜0.05;上消化道出血组分别为(120.3±18.8)nmol/L、(64.9±14.7)%、(70.9±14.5)%和(103.6±14.9)μg/L,无出血组分别为(91.1±14.3)nmol/L、(34.6±11.9)%、(30.2±14.4)%和(40.8±24.0)μg/L,两组比较差异有显著性,t值为5.380～14.601,P＜0.05.但两组间血小板数差异无显著性(t＝0.161,P>0.05). 结论肝硬化患者血小板高度活化,检测血小板CD62P、CD63、SCD62P对判断肝硬化的严重程度有一定参考价值.
作者：唐中；周京国；黄文方；杨明清 刊期： 2003年第07期
目的明确免疫活性细胞回输法治疗慢性乙型肝炎(CHB)时肝组织损害情况. 方法随机选择16例CHB患者用自体免疫活性细胞回输法治疗,追踪52周.治疗前后行两次肝穿刺获得肝组织,苏木精-伊红染色评价肝脏组织炎症情况,Masson染色评价肝组织纤维化情况,检测乙型肝炎病毒(HBV)复制指标以及肝功能,评价免疫治疗对肝组织的影响. 结果完整随访14例患者,4例患者治疗前后完成2次肝穿刺,其中1例患者结果显示治疗后肝细胞坏死和小叶内炎症程度明显减轻(G3→G1),纤维化程度改善(S2→S1).其余3例肝脏组织学变化不明显,但无加重或恶化.免疫活性细胞体外培养前后,进行免疫荧光抗体染色,经流式细胞仪分析,细胞表型有明显的改变,CD4+细胞比例逐渐下降,CD8+细胞比例从20%上升至60%～80%.回输治疗后52周的随访结果,HBV DNA阴转率为42.86%(6/14),乙型肝炎e抗原阴转并伴有抗-HBe阳性的血清转换率为42.86%(6/14),无1例发生乙型肝炎表原抗原阴转.丙氨酸氨基转移酶的复常率为42.86%(6/14).在回输治疗时以及治疗后的随访中未发生严重的不良反应. 结论免疫活性细胞回输法治疗CHB不引起肝组织损害,其免疫调节作用是通过非细胞毒机制途径达到对病毒抑制或清除的作用.
作者：高燕；魏来；陈红松；孙婧；王松霞；王宇 刊期： 2003年第07期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
