张弛；王吉耀；贺伯明
目的观察内毒素血症时肝组织和游离肝细胞中CD14基因和CD14蛋白的表达。方法经尾静脉注入脂多糖（LPS，E coli O111.B4）建立大鼠急性内毒素血症动物模型，并用原位胶原酶灌注法分离肝细胞。用流式细胞仪（FCM）测定异硫氢酸荧光素（FITC）-CD14阳性肝细胞数及其荧光强度。同时用逆转录-PCR和Western blot法测定肝组织和肝细胞中CD14 mRNA和CD14蛋白的表达。结果 FCM显示：内毒素血症大鼠6h和12h FITC-CD14阳性细胞数明显增多，荧光强度也明显增加。RT-PCR显示，肝组织和肝细胞中CD14 mRNA的表达在3h时明显增强，6h达高峰，24h恢复正常水平；Western blot分析示肝组织和肝细胞中CD14蛋白的表达在6h明显增高，12h达高峰，24h仍有一定表达，各时相点间比较有显著差别（P＜0.01)。结论内毒素血症时能明显上调肝细胞CD14基因和CD14蛋白的表达。
作者：李生伟；吴传新；石毓君；刘长安 刊期： 2001年第02期
一、材料与方法 1. 病例选择：1997年9月～1999年3月中山医科大学附属第三医院住院的患者，入选并完成疗程者50例，全部符合1995年北京全国传染病与寄生虫病学术会议肝硬化诊断标准。且入选病例还需满足下列条件之一：(1)门静脉内径（DPV）≥14mm或脾静脉内径（DSV）≥9mm；(2)脐静脉开放；(3)食道胃底静脉曲张；(4)无腹水或少量腹水。剔除标准：合并上消化道出血、大量腹水、有明显出血倾向或PT显著延长（PT≥18s）。
作者：杨桂林；陆玮伦；郑荣琴；谢冬英；崇雨田 刊期： 2001年第02期
一、材料与方法 1. 肝癌细胞株SMMC-7721引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。 2. 试剂：端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸（ASODN-t）及无关寡聚核苷酸（N-ODN）由上海生工生物工程公司合成，全硫代修饰。 3. 对细胞抑制作用的观察：取2×107/L肝癌细胞接种于96孔的细胞培养板中，每孔100μl，设3个复孔。分别加入ASODN-t，调节浓度使ASODN-t终浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L，N-ODN的终浓度为3μmol/L，培养24、48、72、96h，于结束前4h加入5g/L MTT 20μl，继续培养4h，再加入SDS溶液100μl，终止反应。用酶联免疫检测仪检测各孔在波长570nm的吸光度A值。
作者：许兰涛 刊期： 2001年第02期
目的研究大鼠肝再生增强因子（augmenter of liver regeneration，ALR）在大鼠基因组中的存在方式。方法以大鼠基因组DNA为模板，根据ALR cDNA序列设计引物，用多聚酶链反应（PCR）扩增产物，连入pGEM Teasy Vector后测序。结果 PCR法扩增出两条产物，其一经测序发现为ALR的假基因，预测氨基酸序列与ALR的同源性为88.8%。结论作为肝细胞再生过程中重要的生长刺激因子，大鼠ALR存在假基因，提示可能存在ALR多基因家族。为研究ALR分子的进化规律提供了依据。
作者：董菁；成军；刘友昭；王刚；施双双；王勤环；斯崇文 刊期： 2001年第02期
我们利用Vero、 HepG2两种细胞系同时来验证人乳铁蛋白的抗HCV作用并初步确定蛋白的作用对象—细胞还是病毒，以此为该蛋白用于抗HCV临床治疗提供理论依据。一、材料与方法 1．细胞和血清：HepG2细胞系（Dr. Schinazi馈赠），Vero细胞系（由湖北医科大学病毒研究所保存）；细胞培养方法见文献[1]。阳性血清：７份HCV患者血清，混合后作为病毒接种物（测得HCV阳性混合血清的+RNA阳性，-RNA阴性；HCV RNA 拷贝数为5×104；HAV和HBV阴性）由湖北医科大学附属第一和第二医院传染科提供；阴性血清：2份（HCV和抗-HCV均为阴性）来自一健康体检者。
作者：洪俊；林雨霖；洪流 刊期： 2001年第02期
对慢性肝炎肝纤维化及早期肝硬化之中医治疗多以活血化瘀为主，兼以益气补虚、养血柔肝或滋补肝肾。国内研究发现抗肝纤维化有效的单味中药有丹参、黄芪、柴胡、桃仁、当归、冬虫夏草、齐墩果酸、葫芦素Ｂ等；而各家根据中医理论、临床经验或动物实验研究结果所拟定的中药复方，亦取较好的效果，并运用现代细胞及分子生物学手段对其抗纤维化机理进行了较为深的研究。比较有代表性抗肝纤维化中药复方有861合剂、319方、鳖甲软肝片等。
作者：贾继东；王宝恩 刊期： 2001年第02期
目的观察内毒素肝损伤过程中库普弗细胞（KC）清道夫受体（SR）表达的动态变化，进而探讨内毒素肝损伤的机理。方法经尾静脉内注射不同剂量（1mg/kg、10mg/kg）大肠杆菌内毒素（LPS），复制内毒素肝损伤模型。采用免疫组织化学方法观察小鼠肝脏SR表达变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测定肝组织TNFFα、IL-6的水平，光镜观察肝组织学变化。结果 (1)内毒素肝损伤过程中，KC表面SR表达呈进行性下调，且与内毒素呈明显的量效关系。(2)SR表达的平均光密度值（A值）与肝组织TNFα、IL-6及血清ALT、TBil呈显著的负相关。结论内毒素肝损伤过程中，随着SR表达下调，KC对内毒素的清除作用下降，内毒素对KC的激活作用则相应增强。KC SR表达变化与肝损伤密切相关。
作者：谢国旗；蒋建新；朱佩芳；王正国；邱俊 刊期： 2001年第02期
我们检测了慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者血清TNF-α水平，并同步观察了肝组织FasL的表达，现将结果报告如下。一、资料与方法 1. 病例来源：我院1999年3月～2000年3月经过肝穿刺活检确诊的28例慢乙肝患者。男23例，女5例。年龄18～56岁。慢性轻度8例，中度10例，重度10例。肝组织病理学改变符合1995年病毒性肝炎修订的诊断标准。
作者：郑瑞丹；张闽峰；徐忠玉；林福地；饶日春；张阳根 刊期： 2001年第02期
食管胃底静脉曲张破裂出血是门静脉高压主要的并发症，常引起出血性休克或诱发肝性脑病，如不及时采取有效措施，可导致患者死亡。食管胃底静脉曲张出血的内科治疗程序如下。 1. 基础治疗：补充血容量，纠正酸碱失衡。(1)大出血病人应立即进行的是恢复血容量治疗而不是急诊内镜检查，进行快速补液，常用的是平衡液或糖盐水。
作者：尚佳主任 刊期： 2001年第02期
近年来肝硬化基因治疗的研究已越来越受到关注。现对实验性肝硬化的基因治疗研究进展作一简单介绍并对应用前景进行展望。一、治疗策略和目的基因 由于肝硬化是一种肝脏内实质细胞广泛破坏和再生以及结缔组织弥漫性增生引起肝小叶和血管结构发生紊乱的慢性疾病，因此理想的肝硬化的治疗策略应该包括促进肝细胞再生、防止纤维化的发生、逆转已发生的纤维化以及促使正常肝结构的形成等方面[1]。
作者：郭津生；王吉耀 刊期： 2001年第02期
肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的修复反应，其形成与发展是肝病慢性化的重要成因。肝纤维化的治疗包括病因防治、抗肝纤维化及对症治疗三方面，但不少病例祛除原发病因后，主动性肝纤维化仍继续发展，故抗肝纤维化治疗成为控制慢性肝病进展不可缺少的环节。
作者：曾民德 刊期： 2001年第02期
目的通过离散因子/肝细胞生长因子（scatter factor/Hepatocyte growth factor，SF/HGF）cDNA转染肝癌SMMC7721细胞来探讨SF/HGF对肝癌生长和转移的影响。方法用脂质体法进行基因转染，以ELISA和western blot检测SF/HGF及其受体c-met的表达，通过生长曲线、划痕实验比较转染前后细胞的增长状况及细胞的运动能力。以转染前后细胞分别接种裸鼠，观察移植瘤的生长及转移情况。结果转染后细胞表达SF/HGF的量为694pg/ml，其受体c-met量未见明显变化；转染后细胞增殖明显加快，运动能力增强，并伴明显的形态学变化。初步动物实验显示转染后细胞生长较快，瘤组织中有瘤栓形成，并在肺内发现转移灶。结论 SF/HGF在肝癌细胞中的高表达能促进肝癌细胞生长、侵袭及转移。
作者：谢倩；刘康达；胡美玉；吴祥甫；周康 刊期： 2001年第02期
目的尝试用抗体工程技术研制乙型肝炎导向干扰素。方法利用PCR技术进行体外重组，将α-2b干扰素（IFN-α2b）基因分别与抗-HBsAg人源抗体的轻链及重链Fd基因融合，IFN-α2b基因位于融合基因的3'端，为避免干扰素结构域与抗体结构域在空间上互相影响，在二者之间引入一条15个氨基酸的柔性短肽。分别构建上述融合肽链的CHO表达质粒（轻链-IFN表达质粒pLIC以pcDNA3.1(+)为载体，重链Fd-IFN表达质粒pFID以pCdhfr1为载体），表达质粒以下述三种组合转染CHO(dhfr-)细胞：I, pLIC + pHFD; II, pLIC + pFID; III, pLFC + pFID。其中pLFC为抗-HBsAg轻链全长表达质粒，pHFD为抗-HBsAg重链全长表达质粒。结果 I组和II组上清液具有干扰素活性，但仅I组具有HBsAg结合活性。结论用基因工程的手段成功地在CHO细胞中表达了具有HBsAg结合能力的融合干扰素分子。
作者：童贻刚；王海涛；徐静；付玲；于长明；刘国奇 刊期： 2001年第02期
目的探讨己酮可可碱（pentoxifylline，PTX）对人α1(Ⅰ)前胶原（COL1A1）基因启动子活性的作用及其机制。方法构建含人COL1A1基因启动子序列-2483～+42bp片段与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因的重组体pCOLH2.5，将其瞬时转染至人皮肤成纤维细胞，加入PTX或/和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及胰岛素，测定CAT活性。结果 0.4mmol/L、2mmol/L和10mmol/L的PTX使pCOLH2.5的活性降至对照的（82±9）%、（58±8）%与（32±13）%。IGF-1与胰岛素能促进pCOLH2.5的活性。PTX能拮抗IGF-1与胰岛素的这一促进作用。结论 PTX能下调人COL1A1启动子的活性，而IGF-1与胰岛素能上调该启动子的活性。PTX 能拮抗IGF-1与胰岛素的这一上调作用。
作者：伍严安；高春芳；万伟东；仲人前；孔宪涛 刊期： 2001年第02期
目的探讨bcl-2、bax及肝细胞凋亡在丁型肝炎发病机理中的作用。方法采用免疫组织化学单、双标记染色和TUNEL技术，检测77例丁型肝炎患者肝组织HDAg、bcl-2、bax及肝细胞凋亡表达，以67例乙型肝炎作对照。结果 bcl-2和bax均以肝细胞浆表达为主。HDAg以肝细胞核表达为主。HDAg和Bax与凋亡细胞表达及分布有相关性，三成分在各型肝炎中的表达强度差异有显著意义（P＜0.05）。结论 HDAg、bax和肝细胞凋亡表达强度和阳性细胞分布均与肝组织炎症活动及病理损害程度相关，HDV感染可诱导肝细胞表达bax，增强肝细胞凋亡，这一机制在丁型肝炎发病机理中可能有一定重要作用。
作者：顾小红；李奇芬；王宇明 刊期： 2001年第02期
目的探讨肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC) 热休克蛋白70（heat shock proteins 70，HSP70）的表达及其与自发性癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法和原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测68例HCC手术标本中HSP70表达和细胞凋亡指数，以癌旁肝组织作为对照。结果 HCC和癌旁组织中HSP70阳性率分别为71%和28%，过表达分别为53%和21%，两组之间差异有非常显著意义（P＜0.01)，HSP70阳性率和凋亡指数有正相关关系（r＝0.8765，P＜0.05)，两者都随HCC 组织学分级增高而增加。结论 HCC组织中存在HSP70过表达和自发性癌细胞凋亡，两者正相关性机理尚不明了，可能是HCC生物学恶性行为的标志。
作者：尹燕明；秦庆亮；赵晶；张长丽；张伟；于建国 刊期： 2001年第02期
一氧化氮（NO）在门静脉高压以及肝病的损伤过程的作用受到重视。本实验目的在于了解肝硬化消退中肝组织NO水平的变化。 1. 材料与方法：大鼠肝硬化模型以CCl4加乙醇法制备,共12周。第12、16、19、22、25周各取5～6只行病理检查及NO测定。肝组织切片按照Knodell和国际肝病协会推荐的慢性肝炎诊断标准、王宝恩等的肝纤维化分级标准分别进行组织炎症活动性和纤维化评分。肝组织NO测定应用南京建成公司试剂盒。NO与组织学改变的相互关系应用相关分析,相关系数的显著性差异应用t检验。
作者：张弛；王吉耀；贺伯明 刊期： 2001年第02期
国家科学技术部近公布1999年科技论文统计与分析度研究报告。1999年度我国已有科技期刊4400余种，进入国家统计源期刊的为1372种。1999年中华肝脏病杂志影响因子为0.897,排序第12名,在医学同类期刊中排名第7.
作者： 刊期： 2001年第02期
目的对11株经输血传播病毒（transfusion transmit virus，TTV）进行基因型分析。方法用巢式PCR扩增不同地区不明病因的急、慢性肝炎，肝硬化、肝癌和自然健康人群TTV DNA片段，并对此巢式PCR产物进行克隆，测序分析和同源性比较。结果 11例标本的222bp（引物序列除外）的TTV DNA同源性比较结果为：武汉WH1、WH2、WH3 3个患者血清中TTV DNA序列与N22同源性分别为97.0%、97.0%和98.0%；广州GZ1、GZ2、GZ3 3患者血清中TTV DNA 序列与N22同源性分别为98.0%、95.0%和95.0%；山东SD2、SD3 TTV DNA序列与N22同源性分别为94.6%和95.5%；广州GZ4、山东SD1，新疆XJ1患者TTV DNA序列与TX011同源性分别为98.0%、98.0%和95.0%。结论根据 Okamoto的分类方法，这11株TTV可属于两个亚型，即基因1型的a和b亚型。
作者：肖红；梁蔚芳；王燕军；张建树；骆抗先 刊期： 2001年第02期
目的探讨经输血传播病毒（TTV）在肝及肝外组织的定位、分布及其意义。方法采用PCR及原位杂交方法，对13例非甲－非庚型病毒性肝炎患者的尸解肝、胰、肾、脾、睾丸和心脏石蜡包埋组织中的TTV DNA进行了检测。结果 5例肝组织、3例肾脏及胰腺、脾脏组织各2例中检出了TTV核酸杂交信号，2例睾丸及心肌组织各检出1例。阳性信号主要定位于肝及肝外组织实质细胞的核内。这些肝外组织未见明显的病理损伤改变。PCR的检出率与原位杂交基本一致。结论 TT病毒能感染肝及肝外组织，肝外组织中的感染可能与TT病毒的再度感染及在不同人群中的较高感染率有关。
作者：郎振为；金荣华；阎惠平；罗朝霞；黄德庄；王勇；周育森 刊期： 2001年第02期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
