陈凯红
病毒性肝炎时凋亡的肝细胞可采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的末端标记技术(TdT- mediated dUTP nick end labeling, TUNEL )进行原位显示，随着这一检测技术的广泛应用，逐渐发现操作过程中一些因素对实验结果的可靠性有较大的影响，我们以不同蛋白酶K浓度对TUNEL检测结果的影响进行了探讨。
作者：郎振为；廖慧钰；罗朝霞；李俊强；宋晨朝 刊期： 2000年第03期
目的研究慢性肝炎患者纤维化不同分期时肝左叶上下径、前后径的变化规律及其联合血清纤维化指标对无创诊断中晚期肝纤维化或早期肝硬化的价值。方法经肝活检确定72例慢性肝炎患者肝纤维化分期。肝穿前一日，B超测定肝左叶上下径、前后径等及肝穿刺点定位。放射免疫法测定血清HA、LN、CⅣ和PCⅢ含量。结果随纤维化程度增加，肝左叶上下径呈缩短趋势，其S4期测值为（5.7±1.5）cm明显短于S0期测值（7.7±1.4）cm；肝左叶前后径呈增长趋势，其S4期测值长于S0期分别为（6.5±1.1）cm和（5.3±0.7）cm。血清HA、LN、CⅣ和PCⅢ含量亦随纤维化增加而升高，HA、PCⅢ在S3期开始显著升高，均高于同组S0期［（273.4±131.3）μg/L对（66.2±35.0）μg/L、（167.4±48.1）μg/L对（103.4±23.8）μg/L］。结论肝左叶上下径、前后径及血清HA、PCⅢ含量变化可能间接反映了活动性肝纤维化中晚期或早期肝硬化。
作者：连粤湘；李月娥；雷春亮；唐小平；邓子德 刊期： 2000年第03期
目的研究血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）与乙型肝炎(乙肝)分级(G)和分期(S)的关系。方法 250例乙肝患者肝活检标本用VEGF单克隆抗体进行免疫组织化学(S-P法)染色。结果 VEGF在肝组织表达有胞浆型、膜窦型及窦内皮细胞型；VEGF主要由肝细胞分泌，其次在肝窦内皮细胞、贮脂细胞、成肌纤维细胞及单核细胞也示阳性。无明显病变的血管内皮细胞及肝细胞VEGF染色阴性。提示随分级增高VEGF表达增强，其间差异有极显著意义（χ2＝90.43，P＜0.01）；而S低分值者VEGF多有阳性表达，分值较高者多为强阳性表达，两者差异明显（χ2＝115.74，P＜0.01）。结论 VEGF表达与乙肝G和S相关。
作者：严家春；陈文笔；马勇；孙新华 刊期： 2000年第03期
我们从肝功能、肿瘤坏死因子（TNF-α）的变化，来探讨甘利欣保护D-氨基半乳糖（D-GaLN）造成肝损伤的作用机理。 1. 材料与方法：动物模型：选用体重2.0～3.0kg新西兰纯种兔36只，随机分为三组，即D-GaLN 肝损伤组(A组),甘利欣治疗组(B组)及对照组(C组)，每组各为12只。A组兔腹腔内注射D-GaLN(重庆医科大学化学教研室提供，批号：91420）600mg/kg（配成10％溶液，pH值为7.0)腹腔注射，同时每8h耳静脉注射生理盐水10ml共9次；B组腹腔内注射同量D-GaLN，同时每8h从耳静脉注射甘利欣注射液（江苏天晴制药厂，批号：990210）15mg/次，共9次，C组腹腔内注射生理盐水5ml, 以同样方法从耳静脉注射生理盐水10ml。以上各组在腹腔注射D-GaLN前及注射后 24h、72h抽血测肝功能及TNF-α，同时在72h后剖腹取肝脏作光镜病理检查。统计学分析用t检验和χ2检验。
作者：黄以群；林珍辉；王崇国 刊期： 2000年第03期
患者，女，1.5岁，因蜂螫2d，皮肤黄染1d入院。患者入院前2d不慎被数只马蜂叮咬，次日全身皮肤迅速出现黄染，伴尿量减少，尿色深黄，无茶色尿，无发热、呕吐及抽搐。过去无肝炎病史及其接触史。体检：体温37.1℃，神志清醒，头面部及双上肢可见多处马蜂叮咬痕迹，局部淤血、坏死，全身皮肤及巩膜黄染。心、肺未见异常。腹平软，肝右肋下3.5cm可触及，质中，肝触痛，脾未及。神经系统未见异常。血常规：血红蛋白82g/L，白细胞25.2×109/L，中性粒细胞0.477，淋巴细胞0.506，网织红细胞0.45%；肝功能：总胆红素58.5μmol/L，ALT 215U/L；乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒标志物：阴性；尿常规：蛋白（+），血红蛋白尿（-），血尿素氮 5.8mmol/L，肌酐62.4μmol/L，二氧化碳结合力15.1mmol/L。诊断：蜂螫致中毒性肝炎，伴轻度肾损害。经输液、保肝、抗毒等治疗6d后，患者黄疸明显减轻，肝缩小至肋下1.5cm，总胆红素降至26.5μmol/L，ALT降至87U/L，尿蛋白（±），病情好转，自动出院。 讨论：根据患儿有明确的蜂螫伤病史，并迅速出现黄疸，肝肿大，肝触痛及肝功能和肾功能损害表现，患者既往无肝炎及其接触史，乙型肝炎、丙型肝炎实验室检查阴性，临床可除外病毒性肝炎，可诊断蜂螫致中毒性肝炎。一般认为，蜂毒液主要含蚁酸和神经性毒素，蜂螫后轻者仅局部红肿、刺痛和坏死，严重者可引起过敏或休克而危及生命。本例螫伤后引起中毒性肝炎，临床少见，可能与蜂毒液中含肝毒素有关，后者可引起肝脂肪变性与肝小叶中心坏死，故表现中毒性肝炎的临床症状。
作者：覃江萍；韦立功 刊期： 2000年第03期
编者按 1999年11月29至12月1日在四川成都召开了第四届全国肝癌学术会议，经与会代表充分讨论，修订并通过了原发性肝癌诊断标准，提出了原发性肝癌临床分期标准，并广泛征求意见。现将修订后的诊断标准刊出，供临床医师参考。
作者：中国抗癌协会肝癌专业委员会 刊期： 2000年第03期
目的探讨HCV感染在肝炎发生中的病原学作用。方法对89例急性肝炎进行HCV标志物分析，并从HCV RNA阳性的5例非甲非乙型急性肝炎患者血清中提取HCV RNA，经随机引物逆转录合成cDNA，先以型别特异的PCR法分型，再用巢式PCR扩增部分核心基因区序列，将产物连接p-GEM-T载体，在大肠杆菌中表达后测序分析。结果非甲非乙型急性肝炎中HAV、HBV和HCV阳性分别占47.2%、28.1%和15.7%, HAV和HBV双重感染占14.6%，非甲、非乙和非丙肝炎占9%；HCV分型显示Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅱ/Ⅲ混合型分别占85.8%、7.1%和7.1%；Ⅱ型血清用于序列分析，扩增序列424bp与原设计完全一致。急性肝炎株间核苷酸同源性在98.1%～99.5%。氨基酸同源性在97.6%～99.2%；前者的同源性在Ⅰ型为91.9%，在Ⅱ型为94.3%～95.6%；后者与Ⅰ型、Ⅱ型的同源性在92.3%～95.8%。结论 HCV为引起非甲非乙型急性肝炎的主要病毒之一，以Ⅱ型为主，应引起临床重视。
作者：蒋道荣；姚登福；董志珍；邱历伟；陆建新 刊期： 2000年第03期
例1：兄，12岁，因腹胀2年，双下肢浮肿2周以肝炎后肝硬化收入院。在院外按肝炎后肝硬化治疗近２年无明显疗效。家族史：其伯父40岁死于肝硬化，其父Ｂ超提示多发性肾囊肿。查体：皮肤巩膜无黄染，无肝掌蜘蛛痣，心肺无异常，腹膨隆，腹壁静脉曲张，肝肋下2cm，剑突下3cm，脾肋下8cm，质硬，移动性浊音阳性，双下肢轻度凹陷性水肿。入院时查肝功能ALT、AST、胆红素均正常，总蛋白60g/L，白蛋白35g/L，ALP 194U/L，凝血酶原活动度76%，蛋白电泳γ21.4%。血常规：血红蛋白（Hb）61g/L，血小板75×109/L，白细胞3.1×109/L。抗HAV IgM、HBV M、HBV DNA、抗HCV、HCV RNA、抗HGV、HGV RNA、抗CMV IgM、抗EBV IgM均阴性，DNA、dsDNA、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体、类风湿因子等自身免疫指标均阴性。Ｂ超：肝脾肿大，腹水，双肾水肿。肝活检光镜检查结果：宽的纤维组织间隔包绕肝小叶，间隔内条索状胆管增生明显，肝细胞未见明显病变。诊断：先天性肝纤维化。经对症治疗，病情好转出院。
作者：朱世殊；张鸿飞；杨晓晋；赵景民 刊期： 2000年第03期
目的探讨肠源性内毒素血症在硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）所致肝损伤模型发病机制中的地位和作用。方法选用雄性Wistar大鼠26只，随机分为4组，即正常组（N）及结肠切除（C）对照组；TAA损伤组（T）和结肠切除+TAA组（C+T）。采用生化检测法测定血浆内毒素含量和ALT活性。结果单纯给予TAA组，血浆内毒素水平和ALT活性显著高于其它三个组；而结肠切除+TAA组的血浆内毒素水平与结肠切除对照组和正常对照组相比无明显升高，ALT活性结肠切除组+TAA组和正常对照组比较明显升高，但比TAA组却明显减低。T组与C+T组血浆内毒素水平与ALT活性变化之间呈正相关关系（r＝0.985，P＜0.01）。结论 TAA所导致的内毒素血症是肠源性内毒素血症；TAA本身有直接致肝细胞损伤的作用，但其所形成的肠源性内毒素血症造成的肝损伤更为严重。
作者：刘立新；韩德五；任大宾 刊期： 2000年第03期
目的探讨靶向肝细胞的反义RNA抗HBV作用。方法以糖化多聚赖氨酸为载体，将能转录HBV C区反义RNA的真核质粒pREP4-aC定向导入2.2.15细胞，潮霉素筛选阳性克隆。研究过程中用ELISA和斑点杂交方法检测多个时期培养上清液中HBsAg、HBeAg 和HBV DNA，同时观察对细胞的毒性作用。结果导向后24h出现对HBsAg、HBeAg和HBV DNA的抑制，6d左右抑制率达高水平。未发现对2.2.15细胞的毒性作用。结论糖化多聚赖氨酸导向肝细胞的C区反义RNA，能有效抑制HBV抗原表达和DNA复制。
作者：张建军；陈枫；钟森；唐坤华；史小玲；王明勇；彭建一 刊期： 2000年第03期
目的从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。方法用固相化HBsAg对所构建的噬菌体抗体库进行三轮淘筛，从中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。结果第三轮淘筛后洗脱下来的噬菌体，较第一轮增加80倍，含有抗体轻链基因和重链基因的克隆，也由淘筛前的17%增至100%，经ELISA证实，筛选到的抗HBsAg噬菌体抗体对HBsAg具有良好的结合活性，而与牛血清白蛋白和HAVAg等无关抗原均不反应。结论 HBsAg对抗体库的淘筛，富集了表面呈现抗HBsAg的单克隆抗体的噬菌体。
作者：王志毅；刘杞；张定凤；万泽生 刊期： 2000年第03期
目的研究乙型肝炎病毒Ｘ（hepatitis B virus，HBx）蛋白对生长因子激活作用，探讨HBx蛋白对肝细胞癌生长的影响。方法构建Ｘ基因真核表达载体，转染入HepG2细胞后，细胞组织化学和免疫印迹法检测胰岛素样生长因子－Ⅰ受体（insulin-like growth factor Ⅰreceptor，IGF-ⅠR）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达。结果转染HBx基因HepG2细胞（X细胞）IGF-ⅠR表达阳性率为84%±3%，转染空载体对照细胞（X0细胞）为26%±4%；免疫印迹法检测Ｘ细胞有明显条带。VEGF表达Ｘ细胞阳性率为83%±5%，X0细胞为28%±6%，差异有非常显著意义；Ｘ细胞IGF-ⅠR表达增高近1.5倍。结论 HBx蛋白可同时激活IGF-ⅠR和VEGF，在肿瘤恶性生长、转移中起有重要作用。
作者：陶小红；张晓实；任红；张大志；叶珈；古柏燕；沈鼎明 刊期： 2000年第03期
我们的目的了解乳果糖对肝病肠源性内毒素血症（endotoxaemia，ETM）治疗作用，并探讨细胞因子变化与ETM的关系。一、资料与方法 1. 研究对象：急性肝炎28例，慢性肝炎32例，肝硬化29例，男56例，女33例，平均年龄43.5岁, 诊断根据1995年北京第五次全国传染病寄生虫学术会议制订的病毒性肝炎方案标准。各病例组随机分为两组，在常规护肝的基础上，一组口服乳果糖，另一组不服乳果糖。乳果糖剂量10～30g/d, 并调节至大便2～3次，疗程为20d，并分别于入院后次日及20日常规抽血检测。
作者：张顺财；戴茜；王吉耀；贺伯明 刊期： 2000年第03期
1993年8月至1996年1月，我院传染科住院确诊的病毒性甲型肝炎13岁以下藏族儿童165例，诊断标准按上海第六届病毒性肝炎会议修订标准。 流行病学：西藏拉萨病毒性甲型肝炎全年均有发生，以秋季发病率高。调查165例，饭前便后不洗手、吃不洁食物、用手抓东西吃、喝生水、随地大小便等不良卫生习惯占87.46%，其次是与甲型肝炎病人密切接触。165例均未接种甲型肝炎疫苗。临床资料：男118例，占71.52%，女47例，占28.48%，男性高于女性，年龄≤4岁11例占6.67%，≤7岁38例占23.03%，≤10岁62例占37.45%，≤13岁52例占32.85%，165例藏族儿童甲型肝炎分析，７至13岁发病率高。症状：除与成年人相同外，发烧者多（占87.88%），腹部胀气，腹痛。黄疸者多（占98.18%），无黄疸型３例占1.82%，以黄疸型占多数，查体肝脏增大，化验检查胆红素中度增高，转氨酶增高，肝功能中度损害。用西药及藏药治疗，165例患者对药物均敏感，症状消失快，肝功能比成人恢复快，全部治疗出院，无死亡。 讨论：应加强卫生知识宣传教育，养成良好卫生习惯，搞好环境卫生，加强水源及粪便管理，加强饮食卫生监督管理，搞好托儿所、幼儿园及学校卫生，发现肝炎病人及时报告，及时消毒隔离治疗，采取综合措施，预防减少甲型肝炎发生。
作者：李红兵；姜美君 刊期： 2000年第03期
贵刊一向致力于肝脏病的研究进展及其防治的报道，对肝癌的基础研究及其临床治疗也更为关注。攻克癌症，寻找新的治癌方法也颇受众多学者的关注。我们根据国外文献报道，介绍一种新的治疗肝癌的方法—温热化疗法，以供同行参考。
作者：曹玮；王执民 刊期： 2000年第03期
实验证实甘氨脱氧胆酸（glycodeox-ycholic acid，GDC）≥250μmol/L可导致大鼠肝细胞坏死，细胞膜流动性降低[1]。磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）过量释放和/或激活在多系统器官衰竭的发展中起着关键作用。用GDC处理原代培养大鼠肝细胞，以探讨GDC对sPLA2酶活性的激活，酶蛋白和基因表达的影响。
作者：黄文方；杨明清；康格非；涂植光；陈宏础；蒋虹；颜英俊；唐中 刊期： 2000年第03期
1. 核医学检查的主要特点：核医学具有自己的特殊优势，是观察癌症微观分子结构与宏观组织器官变化的钮带，正在从受体水平迈向基因水平。核医学是利用组织或器官病灶内、外核素分布的浓度差为依据，显示组织器官和病变的位置、形态、大小等解剖学结构，同时提供了血流、功能、代谢方面十分有用的信息，是功能解剖学。核素显像的主要贡献是有助于疾病的早期诊断。 2. 肝癌的断层显像：单光子发射型计算机断层仪（single photon emission computed tomography，SPECT或称ECT），是以注入人体的放射性核素为放射源，通过仪器在体表连续或间隔一定角度旋转，采集多体位平面影像的数据，再由计算机重建成各断层影像，后对信息加工处理，重建断层影像。旋转总度数为360°，３°或6°/1帧、每帧10～12s（约120K计数）。由于计算机重建了横断面、矢状面及冠状面三维图像，对占位性病变的检出率不受深度的影响，对较小病变的检出率有明显提高。经过SPECT连续断层分析，能够鉴别某些由于正常结构所致的假缺损，从而使假阳性降低。敏感性可达94%，准确性为91.5%，特异性89%，检出的小病变为1.0cm。
作者：邓候富 刊期： 2000年第03期
原发性肝癌（下称肝癌）是我国常见的恶性肿瘤。肝癌的诊断，尤其是早期诊断，多依赖各种辅助检查。为了规范诊断程序和便于非专科医师掌握，有必要制订一个诊断标准。肝癌是一个进行性发展的疾病，不同的病期所采取的治疗方案不同，预后亦不相同，所以亦应有一个关于分期的标准。
作者：杨秉辉；任正刚；汤钊猷 刊期： 2000年第03期
1. 材料与方法：乳哺动物细胞表达载体pBK-CMV，长约4.5kb，带有T7公用序列。pCP10是pBR322 EcoRI位点中插入双拷贝头尾相接的HBV ayw亚型全基因HBV DNA重组质粒。PCR引物XI1：1428-1448 nt 5′CGT CCC GTC GGC GCT GAA TCC 3′，XI2：1672-1653 nt 5′AGT CCA AGA GTC CTC TTA AG 3′。人肝癌细胞系SMMC-7721，由上海细胞所提供。将EcoRⅠ酶切后回收的全基因HBV片段，在T4 DNA连接酶作用下，与EcoRⅠ酶切后的pBK-CMV粘端连接。利用pBK-CMV具有T7公用序列，选用XI2、T7作为引物，PCR出现1.7kb阳性条带为反接，并命名为pBK-AHBV。用FUGENETM6转染试剂转染SMMC-7721细胞。在含10%FCS的RPMI 1640（pH7.4）培养基中培养至60h后，用总RNA抽提试剂（Trizol Reagent）提取转染的SMMC-7721细胞，依次获得总RNA、DNA。
作者：陈公英；娄国强；徐岱；王信子；陈智 刊期： 2000年第03期
目的探讨肝脏局灶性结节性增生（focal nodular hyperplasia，FNH）与AFP阴性肝癌的鉴别诊断。方法回顾性分析本所1996年3月～1999年３月三年间经手术病理证实的18例FNH及254例AFP阴性肝癌的临床、影像学资料。结果 FNH多见于青壮年（40岁以下占66.7%）、多无症状（66.7%）、肝炎背景多阴性（83.3%）、肝功能多正常（72.0%）；71.4%在彩色多普勒超声见到特征性的粗大中央血管（1～3mm），血液流速高、阻力系数低；CT动态扫描85.7%早期显著增强，53.3%强化均匀，部分有中央星状疤痕，73.3%静脉相等密度；MRI检查中央疤痕在T2WI呈高信号，83.3%增强后早期明显强化，66.7%信号均一。而AFP阴性肝癌多见于中老年（40岁以上85.8%），多有症状（74.0%），多有肝炎背景（87.4%），肝功能多异常（66.1%）；彩色多普勒超声示动脉血流高流速、高阻力，常见晕圈、门静脉栓子；CT动态扫描早期强化明显但不均匀（96.6%），89.7%静脉相低密度；MRI早期明显强化，信号不均一（91.7%）。结论 FNH在临床及影像学上有一定特征，多种检查方法联合应用并与临床相结合，部分病人可与AFP阴性肝癌鉴别。
作者：叶青海；汤钊猷；马曾辰；吴志全；樊嘉；钦伦秀；王文平 刊期： 2000年第03期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
