邓候富
目的探讨肝脏局灶性结节性增生（focal nodular hyperplasia，FNH）与AFP阴性肝癌的鉴别诊断。方法回顾性分析本所1996年3月～1999年３月三年间经手术病理证实的18例FNH及254例AFP阴性肝癌的临床、影像学资料。结果 FNH多见于青壮年（40岁以下占66.7%）、多无症状（66.7%）、肝炎背景多阴性（83.3%）、肝功能多正常（72.0%）；71.4%在彩色多普勒超声见到特征性的粗大中央血管（1～3mm），血液流速高、阻力系数低；CT动态扫描85.7%早期显著增强，53.3%强化均匀，部分有中央星状疤痕，73.3%静脉相等密度；MRI检查中央疤痕在T2WI呈高信号，83.3%增强后早期明显强化，66.7%信号均一。而AFP阴性肝癌多见于中老年（40岁以上85.8%），多有症状（74.0%），多有肝炎背景（87.4%），肝功能多异常（66.1%）；彩色多普勒超声示动脉血流高流速、高阻力，常见晕圈、门静脉栓子；CT动态扫描早期强化明显但不均匀（96.6%），89.7%静脉相低密度；MRI早期明显强化，信号不均一（91.7%）。结论 FNH在临床及影像学上有一定特征，多种检查方法联合应用并与临床相结合，部分病人可与AFP阴性肝癌鉴别。
作者：叶青海；汤钊猷；马曾辰；吴志全；樊嘉；钦伦秀；王文平 刊期： 2000年第03期
我们用与野生模板等长和等效扩增的突变模板作为内参照,通过竞争PCR对HBV基因进行扩增，并引入微反应板酶联杂交技术对扩增产物定量分析。 1. 资料与方法：(1)HBV DNA标准品：质粒pADR-1 DNA 经BamH I酶切线性化后精确定量。(2)PCR2.1-WS319和PCR2.1-MS319质粒：均由长征医院感染科实验室（简称本室）构建。(3)HBV DNA阳性血清抽提物（10份）本室冻存。(4)竞争PCR：在0.2ml薄壁PCR反应管内，每管加入25μl PCR mix、引物EP1和EP2各1μl、按不同实验要求所需的各种模板，加双蒸水，使终体积为50μl。PCR扩增参数: 94℃，5min后；94℃，30s；54℃，30s；72℃，30s，共25个循环；再72℃延伸3min。(5)微反应板酶联杂交定量：由本室建立。(6)野生模板初始量的确定：采用Clementi等[1]介绍的公式: M/W=M'/W'。(7)统计学方法用Student's t检验。
作者：缪晓辉；孔宪涛；戚中田 刊期： 2000年第03期
1993年8月至1996年1月，我院传染科住院确诊的病毒性甲型肝炎13岁以下藏族儿童165例，诊断标准按上海第六届病毒性肝炎会议修订标准。 流行病学：西藏拉萨病毒性甲型肝炎全年均有发生，以秋季发病率高。调查165例，饭前便后不洗手、吃不洁食物、用手抓东西吃、喝生水、随地大小便等不良卫生习惯占87.46%，其次是与甲型肝炎病人密切接触。165例均未接种甲型肝炎疫苗。临床资料：男118例，占71.52%，女47例，占28.48%，男性高于女性，年龄≤4岁11例占6.67%，≤7岁38例占23.03%，≤10岁62例占37.45%，≤13岁52例占32.85%，165例藏族儿童甲型肝炎分析，７至13岁发病率高。症状：除与成年人相同外，发烧者多（占87.88%），腹部胀气，腹痛。黄疸者多（占98.18%），无黄疸型３例占1.82%，以黄疸型占多数，查体肝脏增大，化验检查胆红素中度增高，转氨酶增高，肝功能中度损害。用西药及藏药治疗，165例患者对药物均敏感，症状消失快，肝功能比成人恢复快，全部治疗出院，无死亡。 讨论：应加强卫生知识宣传教育，养成良好卫生习惯，搞好环境卫生，加强水源及粪便管理，加强饮食卫生监督管理，搞好托儿所、幼儿园及学校卫生，发现肝炎病人及时报告，及时消毒隔离治疗，采取综合措施，预防减少甲型肝炎发生。
作者：李红兵；姜美君 刊期： 2000年第03期
目的研究乙型肝炎病毒Ｘ（hepatitis B virus，HBx）蛋白对生长因子激活作用，探讨HBx蛋白对肝细胞癌生长的影响。方法构建Ｘ基因真核表达载体，转染入HepG2细胞后，细胞组织化学和免疫印迹法检测胰岛素样生长因子－Ⅰ受体（insulin-like growth factor Ⅰreceptor，IGF-ⅠR）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达。结果转染HBx基因HepG2细胞（X细胞）IGF-ⅠR表达阳性率为84%±3%，转染空载体对照细胞（X0细胞）为26%±4%；免疫印迹法检测Ｘ细胞有明显条带。VEGF表达Ｘ细胞阳性率为83%±5%，X0细胞为28%±6%，差异有非常显著意义；Ｘ细胞IGF-ⅠR表达增高近1.5倍。结论 HBx蛋白可同时激活IGF-ⅠR和VEGF，在肿瘤恶性生长、转移中起有重要作用。
作者：陶小红；张晓实；任红；张大志；叶珈；古柏燕；沈鼎明 刊期： 2000年第03期
目的在大肠杆菌XL1-Blue中表达可溶性的抗HCV非结构蛋白NS3的人源单链可变区抗体（single-chain variable fragment antibody，ScFv）。方法以重组的HCV NS3为抗原，利用噬菌体抗体库技术筛选含有抗-HCV NS3 ScFv基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒，经SfiI/NotⅠ酶切鉴定后，亚克隆到pCANTAB5E载体；转化大肠杆菌XL1-Blue，提取质粒进行DNA序列测定；异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（isopropylthio-β-D-galactoside，IPTG）诱导表达HCV NS3可溶性单链可变区抗体。ELISA和斑点吸印杂交检测其与不同来源的抗原的结合活性。结果筛选到的HCV NS3的单链抗体基因，经限制性内切酶酶切和序列分析表明，该抗体基因由750bp组成，ELISA和斑点吸印杂交结果表明，在大肠杆菌XL1-Blue中表达的HCV NS3的单链抗体，可与不同来源的NS3抗原结合。结论大肠杆菌XL1-Blue表达的NS3-ScFv具有结合不同来源的HCV NS3的活性和特异性。
作者：钟彦伟；成军；刘妍；董菁；杨继珍；张玲霞 刊期： 2000年第03期
1. 材料与方法：刺五加皂甙（acan-thophopanaxenticosus，ASS）由白求恩医科大学化学教研室提供，1640培养液稀释抽提。人HepG2肝癌细胞株由空军广州医院肝病研究所提供。细胞周期动力学测定：将HepG2肝癌细胞置37℃二氧化碳孵箱培养，调节细胞浓度为1×109/L，分别加入含ASS和RA的1640完全培养液，ASS终浓度为1g/L、0.5g/L及0.25g/L，按上述浓度分为高浓度组、中浓度组及低浓度组，另设细胞空白对照组，每组测定3管。继续培养16h、24h和48h，收集细胞，流式细胞仪检测，记录细胞周期各时相的比例，计算凋亡细胞百分率。
作者：叶红军；叶炯贤；房家智 刊期： 2000年第03期
原发性肝癌（下称肝癌）是我国常见的恶性肿瘤。肝癌的诊断，尤其是早期诊断，多依赖各种辅助检查。为了规范诊断程序和便于非专科医师掌握，有必要制订一个诊断标准。肝癌是一个进行性发展的疾病，不同的病期所采取的治疗方案不同，预后亦不相同，所以亦应有一个关于分期的标准。
作者：杨秉辉；任正刚；汤钊猷 刊期： 2000年第03期
我们对人肝癌组织ALP比活性及同工酶的改变以及手术前后血清中ALP及其同工酶的动态变化进行研究，以探讨原发性肝癌时其来源及变化情况。 1. 资料与方法：PHC患者31例，取手术切除的新鲜肝脏标本分为肿瘤和癌旁组织，分别称取1g湿重组织A和B两份：A份加5ml匀浆液（pH8.6，0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液）提取可溶性ALP；B份加5ml含0.5% TritonX-100匀浆液，提取总ALP。在YQ-3型匀浆机上高速匀浆后，离心留上清液备用。其中4 例有肿瘤细胞变性、坏死。其中22例收集到血清标本，分别与术前1d，术后1周（第7天），术后2周（第14天）清晨空腹采血 (其中2例术后住院不足2周，仅收集到术后1周血)。正常组为体检正常者血清30例。血清及匀浆液中ALP总活性、匀浆液蛋白及ALP同工酶测定参照文献[1]。
作者：肖明兵；黄介飞；鲍柏军；张弘；倪润洲；魏群；江枫 刊期： 2000年第03期
乙肝散是一种用于治疗慢性乙型肝炎的中药，系苗族药改进而成。主要含天王叶、地人参及猕猴桃等成分；主要功能为清热解毒、疏肝利胆、健脾化湿、活血化瘀等，近年发现它还具有抗HBV作用。现将全国十六家单位有关乙肝散治疗乙型肝炎的多中心基础与临床情况总结如下。
作者： 刊期： 2000年第03期
实验证实甘氨脱氧胆酸（glycodeox-ycholic acid，GDC）≥250μmol/L可导致大鼠肝细胞坏死，细胞膜流动性降低[1]。磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）过量释放和/或激活在多系统器官衰竭的发展中起着关键作用。用GDC处理原代培养大鼠肝细胞，以探讨GDC对sPLA2酶活性的激活，酶蛋白和基因表达的影响。
作者：黄文方；杨明清；康格非；涂植光；陈宏础；蒋虹；颜英俊；唐中 刊期： 2000年第03期
通过对肝癌患者血清可溶性Fas（sFas）水平及免疫指标的检测，探讨肝癌患者血清sFas水平与免疫功能的关系及其临床意义。 1. 临床资料：186例肝癌初治患者，系本院1997年1月～1999年6月收治的患者，诊断依据肝穿刺活体组织检查、CT及MRI、AFP等确诊，其中男118例，女68例，年龄35～72岁，平均50.2岁。40例肝硬化患者，经肝穿刺活体组织检查证实，男30例，女10例，年龄30～68岁，平均49.8岁；所有患者不包括严重感染、自身免疫性疾病、造血系统疾病及肾衰等合并症。健康献血员为42例，男24例，女18例，年龄31～60岁，平均48.5岁。
作者：谢家印；孙贵银；郑成位；张培炽 刊期： 2000年第03期
编者按 1999年11月29至12月1日在四川成都召开了第四届全国肝癌学术会议，经与会代表充分讨论，修订并通过了原发性肝癌诊断标准，提出了原发性肝癌临床分期标准，并广泛征求意见。现将修订后的诊断标准刊出，供临床医师参考。
作者：中国抗癌协会肝癌专业委员会 刊期： 2000年第03期
患者，女，1.5岁，因蜂螫2d，皮肤黄染1d入院。患者入院前2d不慎被数只马蜂叮咬，次日全身皮肤迅速出现黄染，伴尿量减少，尿色深黄，无茶色尿，无发热、呕吐及抽搐。过去无肝炎病史及其接触史。体检：体温37.1℃，神志清醒，头面部及双上肢可见多处马蜂叮咬痕迹，局部淤血、坏死，全身皮肤及巩膜黄染。心、肺未见异常。腹平软，肝右肋下3.5cm可触及，质中，肝触痛，脾未及。神经系统未见异常。血常规：血红蛋白82g/L，白细胞25.2×109/L，中性粒细胞0.477，淋巴细胞0.506，网织红细胞0.45%；肝功能：总胆红素58.5μmol/L，ALT 215U/L；乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒标志物：阴性；尿常规：蛋白（+），血红蛋白尿（-），血尿素氮 5.8mmol/L，肌酐62.4μmol/L，二氧化碳结合力15.1mmol/L。诊断：蜂螫致中毒性肝炎，伴轻度肾损害。经输液、保肝、抗毒等治疗6d后，患者黄疸明显减轻，肝缩小至肋下1.5cm，总胆红素降至26.5μmol/L，ALT降至87U/L，尿蛋白（±），病情好转，自动出院。 讨论：根据患儿有明确的蜂螫伤病史，并迅速出现黄疸，肝肿大，肝触痛及肝功能和肾功能损害表现，患者既往无肝炎及其接触史，乙型肝炎、丙型肝炎实验室检查阴性，临床可除外病毒性肝炎，可诊断蜂螫致中毒性肝炎。一般认为，蜂毒液主要含蚁酸和神经性毒素，蜂螫后轻者仅局部红肿、刺痛和坏死，严重者可引起过敏或休克而危及生命。本例螫伤后引起中毒性肝炎，临床少见，可能与蜂毒液中含肝毒素有关，后者可引起肝脂肪变性与肝小叶中心坏死，故表现中毒性肝炎的临床症状。
作者：覃江萍；韦立功 刊期： 2000年第03期
对HCV分子生物学特性的深入探讨很大程度上依赖于实验模型。近年来，随着HCV全基因组的克隆以及多种HCV感染检测方法的建立并运用于动物试验，HCV感染的实验模型已取得重要进展。一、动物试验模型 黑猩猩是目前唯一成功用于HCV感染模型的实验动物。以完整的HCV病毒静脉注射接种是常用的实验感染方式，这与人类输血感染HCV的方式极为相似。除了完整的HCV病毒及HCV感染者的血清外，用HCV全基因克隆也能感染黑猩猩，Beard等[1]用HCV-1b型的全基因cDNA克隆在体外转录为RNA后，行肝内穿刺接种黑猩猩，3周后即可在外周血中检出HCV RNA，接种后13周即能检出高滴度持续存在的抗-HCV。
作者：秦山；赵连三 刊期： 2000年第03期
目的研究肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注的价值。方法将42例肝癌根治性切除患者随机分为观察组和对照组。肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注患者21例为观察组；肝癌根治性切除术后单纯肝动脉化疗栓塞患者21例为对照组。结果观察组１年、２年、３年的肝内复发率（0、19.05%、57.14%）较对照组（28.57%、47.62%、85.71%）降低（χ2值分别是4.86、3.86、4.20，P＜0.05）；观察组２年、３年的生存率（85.71%、61.90%）较对照组（57.14%、28.57%）提高（χ2值分别是4.20、4.71，P＜0.05）。结论肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注是控制肝内复发率，提高患者生存率的有价值的治疗方法。
作者：偰利宇；庞瑞麟；金银慧；向述天；李红芬 刊期： 2000年第03期
目的探讨靶向肝细胞的反义RNA抗HBV作用。方法以糖化多聚赖氨酸为载体，将能转录HBV C区反义RNA的真核质粒pREP4-aC定向导入2.2.15细胞，潮霉素筛选阳性克隆。研究过程中用ELISA和斑点杂交方法检测多个时期培养上清液中HBsAg、HBeAg 和HBV DNA，同时观察对细胞的毒性作用。结果导向后24h出现对HBsAg、HBeAg和HBV DNA的抑制，6d左右抑制率达高水平。未发现对2.2.15细胞的毒性作用。结论糖化多聚赖氨酸导向肝细胞的C区反义RNA，能有效抑制HBV抗原表达和DNA复制。
作者：张建军；陈枫；钟森；唐坤华；史小玲；王明勇；彭建一 刊期： 2000年第03期
例1：兄，12岁，因腹胀2年，双下肢浮肿2周以肝炎后肝硬化收入院。在院外按肝炎后肝硬化治疗近２年无明显疗效。家族史：其伯父40岁死于肝硬化，其父Ｂ超提示多发性肾囊肿。查体：皮肤巩膜无黄染，无肝掌蜘蛛痣，心肺无异常，腹膨隆，腹壁静脉曲张，肝肋下2cm，剑突下3cm，脾肋下8cm，质硬，移动性浊音阳性，双下肢轻度凹陷性水肿。入院时查肝功能ALT、AST、胆红素均正常，总蛋白60g/L，白蛋白35g/L，ALP 194U/L，凝血酶原活动度76%，蛋白电泳γ21.4%。血常规：血红蛋白（Hb）61g/L，血小板75×109/L，白细胞3.1×109/L。抗HAV IgM、HBV M、HBV DNA、抗HCV、HCV RNA、抗HGV、HGV RNA、抗CMV IgM、抗EBV IgM均阴性，DNA、dsDNA、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体、类风湿因子等自身免疫指标均阴性。Ｂ超：肝脾肿大，腹水，双肾水肿。肝活检光镜检查结果：宽的纤维组织间隔包绕肝小叶，间隔内条索状胆管增生明显，肝细胞未见明显病变。诊断：先天性肝纤维化。经对症治疗，病情好转出院。
作者：朱世殊；张鸿飞；杨晓晋；赵景民 刊期： 2000年第03期
目的探讨肠源性内毒素血症在硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）所致肝损伤模型发病机制中的地位和作用。方法选用雄性Wistar大鼠26只，随机分为4组，即正常组（N）及结肠切除（C）对照组；TAA损伤组（T）和结肠切除+TAA组（C+T）。采用生化检测法测定血浆内毒素含量和ALT活性。结果单纯给予TAA组，血浆内毒素水平和ALT活性显著高于其它三个组；而结肠切除+TAA组的血浆内毒素水平与结肠切除对照组和正常对照组相比无明显升高，ALT活性结肠切除组+TAA组和正常对照组比较明显升高，但比TAA组却明显减低。T组与C+T组血浆内毒素水平与ALT活性变化之间呈正相关关系（r＝0.985，P＜0.01）。结论 TAA所导致的内毒素血症是肠源性内毒素血症；TAA本身有直接致肝细胞损伤的作用，但其所形成的肠源性内毒素血症造成的肝损伤更为严重。
作者：刘立新；韩德五；任大宾 刊期： 2000年第03期
目的研究血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（grycylproline dipeptidyl aminopeptidase，GPDA）同工酶对PHC的诊断价值，提高早期PHC和AFP阴性PHC诊断水平。方法采用阶段梯度垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行血清GPDA同工酶分离检测，同步测定比较PHC患者血清GPDA同工酶与GPDA总活性（TGPDA）、AFP、肿瘤大小及ALT的关系。结果血清GPDA按其泳动速度可分为快带（GPDA-F）与慢带（GPDA-S）两种同工酶。PHC患者血清GPDA-F的阳性率为85.3%，而肝外肿瘤、转移性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎中阳性率均较低，正常对照组以及良性肝占位全部阴性。GPDA-F阳性率在TGPDA活性增高组明显高于正常组（94.4%对75.0%），GPDA-F与AFP及肿瘤大小无关系。良性肝病ALT升高组GPDA-F阳性率高于ALT正常组,而PHC患者GPDA-F与ALT无关。PHC患者GPDA-F呈持续阳性，良性肝病患者GPDA-F常为一过性阳性。结论 GPDA-F为一新的PHC血清标志物，有助于PHC的定性诊断，尤其对早期PHC及AFP阴性PHC的诊断具有重要价值。
作者：李梅；倪润洲；黄介飞；肖明兵；张弘；魏群；江枫；孟宪镛 刊期： 2000年第03期
目的探讨TTV在肝脏及肝外组织中的定位、分布及其意义。方法通过PCR方法扩增TTV基因组ORF2中123bp的DNA片段，构建TTV DNA质粒并克隆，序列分析表明与日本ABO11494序列具有高度同源性。采用地高辛标记TTV DNA探针并与组织进行原位杂交，检测了22例因肝病死亡患者的肝脏、脾脏、肾脏、胃、小肠等组织内TTV DNA感染状况。结果 8例肝脏检出TTV DNA，5例肾脏、４例脾脏、２例小肠、２例胃检出TTV DNA。阳性信号在组织中分布呈局灶性或散在胞浆型。肝脏感染度较其它组织高。阳性细胞与组织炎症坏死无固定病理解剖学关系。结论支持TTV有嗜肝性的观点；TTV可以感染肝外多种组织并可能导致TTV持续感染。
作者：樊玲；赵西平；王宝菊；张俊；杨东亮；郝连杰；张东绅 刊期： 2000年第03期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
