樊玲；赵西平；王宝菊；张俊；杨东亮；郝连杰；张东绅
目的从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。方法用固相化HBsAg对所构建的噬菌体抗体库进行三轮淘筛，从中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。结果第三轮淘筛后洗脱下来的噬菌体，较第一轮增加80倍，含有抗体轻链基因和重链基因的克隆，也由淘筛前的17%增至100%，经ELISA证实，筛选到的抗HBsAg噬菌体抗体对HBsAg具有良好的结合活性，而与牛血清白蛋白和HAVAg等无关抗原均不反应。结论 HBsAg对抗体库的淘筛，富集了表面呈现抗HBsAg的单克隆抗体的噬菌体。
作者：王志毅；刘杞；张定凤；万泽生 刊期： 2000年第03期
我们的目的了解乳果糖对肝病肠源性内毒素血症（endotoxaemia，ETM）治疗作用，并探讨细胞因子变化与ETM的关系。一、资料与方法 1. 研究对象：急性肝炎28例，慢性肝炎32例，肝硬化29例，男56例，女33例，平均年龄43.5岁, 诊断根据1995年北京第五次全国传染病寄生虫学术会议制订的病毒性肝炎方案标准。各病例组随机分为两组，在常规护肝的基础上，一组口服乳果糖，另一组不服乳果糖。乳果糖剂量10～30g/d, 并调节至大便2～3次，疗程为20d，并分别于入院后次日及20日常规抽血检测。
作者：张顺财；戴茜；王吉耀；贺伯明 刊期： 2000年第03期
贵刊一向致力于肝脏病的研究进展及其防治的报道，对肝癌的基础研究及其临床治疗也更为关注。攻克癌症，寻找新的治癌方法也颇受众多学者的关注。我们根据国外文献报道，介绍一种新的治疗肝癌的方法—温热化疗法，以供同行参考。
作者：曹玮；王执民 刊期： 2000年第03期
目的探讨靶向肝细胞的反义RNA抗HBV作用。方法以糖化多聚赖氨酸为载体，将能转录HBV C区反义RNA的真核质粒pREP4-aC定向导入2.2.15细胞，潮霉素筛选阳性克隆。研究过程中用ELISA和斑点杂交方法检测多个时期培养上清液中HBsAg、HBeAg 和HBV DNA，同时观察对细胞的毒性作用。结果导向后24h出现对HBsAg、HBeAg和HBV DNA的抑制，6d左右抑制率达高水平。未发现对2.2.15细胞的毒性作用。结论糖化多聚赖氨酸导向肝细胞的C区反义RNA，能有效抑制HBV抗原表达和DNA复制。
作者：张建军；陈枫；钟森；唐坤华；史小玲；王明勇；彭建一 刊期： 2000年第03期
对HCV分子生物学特性的深入探讨很大程度上依赖于实验模型。近年来，随着HCV全基因组的克隆以及多种HCV感染检测方法的建立并运用于动物试验，HCV感染的实验模型已取得重要进展。一、动物试验模型 黑猩猩是目前唯一成功用于HCV感染模型的实验动物。以完整的HCV病毒静脉注射接种是常用的实验感染方式，这与人类输血感染HCV的方式极为相似。除了完整的HCV病毒及HCV感染者的血清外，用HCV全基因克隆也能感染黑猩猩，Beard等[1]用HCV-1b型的全基因cDNA克隆在体外转录为RNA后，行肝内穿刺接种黑猩猩，3周后即可在外周血中检出HCV RNA，接种后13周即能检出高滴度持续存在的抗-HCV。
作者：秦山；赵连三 刊期： 2000年第03期
目的研究丙型肝炎病人的系列血清中HCV 5′-NCR及核心区基因变化。方法 4例因献血感染HCV病人的系列血标本, 用特异性引物扩增5′-NCR和核心区基因并进行测序。结果所有HCV分离株基因序列均为1b和2a型，5′-NCR序列差异只与型别有关，与病人和不同时点采集的标本无关。核心区基因序列差异因病人和基因型别而异，未发现同一病人的同一基因型序列随时间而变化。结论 5′-NCR序列保守性大于核心区。型别是导致基因变化的主要原因。未发现该2区段基因的核苷酸改变与时间有关。
作者：张庶民；李河民；祁自柏；张华远；庄辉；Anders Widell 刊期： 2000年第03期
原发性肝癌（下称肝癌）是我国常见的恶性肿瘤。肝癌的诊断，尤其是早期诊断，多依赖各种辅助检查。为了规范诊断程序和便于非专科医师掌握，有必要制订一个诊断标准。肝癌是一个进行性发展的疾病，不同的病期所采取的治疗方案不同，预后亦不相同，所以亦应有一个关于分期的标准。
作者：杨秉辉；任正刚；汤钊猷 刊期： 2000年第03期
1. 材料与方法：刺五加皂甙（acan-thophopanaxenticosus，ASS）由白求恩医科大学化学教研室提供，1640培养液稀释抽提。人HepG2肝癌细胞株由空军广州医院肝病研究所提供。细胞周期动力学测定：将HepG2肝癌细胞置37℃二氧化碳孵箱培养，调节细胞浓度为1×109/L，分别加入含ASS和RA的1640完全培养液，ASS终浓度为1g/L、0.5g/L及0.25g/L，按上述浓度分为高浓度组、中浓度组及低浓度组，另设细胞空白对照组，每组测定3管。继续培养16h、24h和48h，收集细胞，流式细胞仪检测，记录细胞周期各时相的比例，计算凋亡细胞百分率。
作者：叶红军；叶炯贤；房家智 刊期： 2000年第03期
患者，女，1.5岁，因蜂螫2d，皮肤黄染1d入院。患者入院前2d不慎被数只马蜂叮咬，次日全身皮肤迅速出现黄染，伴尿量减少，尿色深黄，无茶色尿，无发热、呕吐及抽搐。过去无肝炎病史及其接触史。体检：体温37.1℃，神志清醒，头面部及双上肢可见多处马蜂叮咬痕迹，局部淤血、坏死，全身皮肤及巩膜黄染。心、肺未见异常。腹平软，肝右肋下3.5cm可触及，质中，肝触痛，脾未及。神经系统未见异常。血常规：血红蛋白82g/L，白细胞25.2×109/L，中性粒细胞0.477，淋巴细胞0.506，网织红细胞0.45%；肝功能：总胆红素58.5μmol/L，ALT 215U/L；乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒标志物：阴性；尿常规：蛋白（+），血红蛋白尿（-），血尿素氮 5.8mmol/L，肌酐62.4μmol/L，二氧化碳结合力15.1mmol/L。诊断：蜂螫致中毒性肝炎，伴轻度肾损害。经输液、保肝、抗毒等治疗6d后，患者黄疸明显减轻，肝缩小至肋下1.5cm，总胆红素降至26.5μmol/L，ALT降至87U/L，尿蛋白（±），病情好转，自动出院。 讨论：根据患儿有明确的蜂螫伤病史，并迅速出现黄疸，肝肿大，肝触痛及肝功能和肾功能损害表现，患者既往无肝炎及其接触史，乙型肝炎、丙型肝炎实验室检查阴性，临床可除外病毒性肝炎，可诊断蜂螫致中毒性肝炎。一般认为，蜂毒液主要含蚁酸和神经性毒素，蜂螫后轻者仅局部红肿、刺痛和坏死，严重者可引起过敏或休克而危及生命。本例螫伤后引起中毒性肝炎，临床少见，可能与蜂毒液中含肝毒素有关，后者可引起肝脂肪变性与肝小叶中心坏死，故表现中毒性肝炎的临床症状。
作者：覃江萍；韦立功 刊期： 2000年第03期
乙肝散是一种用于治疗慢性乙型肝炎的中药，系苗族药改进而成。主要含天王叶、地人参及猕猴桃等成分；主要功能为清热解毒、疏肝利胆、健脾化湿、活血化瘀等，近年发现它还具有抗HBV作用。现将全国十六家单位有关乙肝散治疗乙型肝炎的多中心基础与临床情况总结如下。
作者： 刊期： 2000年第03期
我们应用生长抑素（施他林，瑞士Serono药厂生产）治疗食管静脉曲张破裂出血与垂体后叶素治疗效果对比观察，旨在探讨一种新的有效的止血方法。一、资料与方法 1．病例选择：52例均经胃镜检查证实为食管静脉曲张破裂出血的住院患者。男性43例，女性9例，平均年龄（48±12）岁，其中肝炎后肝硬化42例，酒精性肝硬化10例，随机分成两组：施他林组25例，首次静脉推注施他林250μg，继以250μg/h的速度持续静脉滴注24～96h；垂体后叶素组27例，首次静脉推注10U垂体后叶素（15min），继以0.4U/min速度持续静滴24～96h。两组对象的年龄、性别、出血量，食管静脉曲张程度和肝功能Child-Pugh分级等项目差异无显著性意义。
作者：高健；沈鼎明；李孝生；吴显才；梅浙川 刊期： 2000年第03期
内毒素（lipopolysaccharide，LPS）在体外可以诱导肝细胞发生凋亡[1]。细胞凋亡的发生发展与许多凋亡相关基因表达的改变有密切的关系。 1. 材料与方法：采用Seglen法将雄性Wistar大鼠的肝细胞分离后培养24h。在培养基中直接加入LPS 10mg/L，分别在3h、6h、12h、和24h收集肝细胞，同时设正常对照组。用Moore等[2]的方法提取培养细胞的DNA片段。一步法提取RNA。半定量RT-PCR法检测在不同时间点基因PCR产物的含量。
作者：梁秀彬；尹镭；赵嘉惠；乔中东；贺晓东；韩德五 刊期： 2000年第03期
1. 资料与方法：(1)研究对象：19例慢性乙型肝炎患者均符合1995年第6次全国病毒性肝炎会议诊断标准，为瑞金医院1998年门诊及住院患者，年龄12～46岁，平均32.79岁，女4例，男15例。同时收集PBMC和配对血清，并记录病程及ALT浓度。(2)分离PBMC及提取DNA：抽取肝素抗凝血7ml，用比重1.077的聚蔗糖－泛影葡胺液分离淋巴细胞，2500r/min，15min，吸出淋巴细胞，用HanKs液将细胞清洗5次，以去除可能残留的血浆DNA，分别收集第5次洗涤液（500μl）及细胞，提取PBMC DNA，DNA溶于500μl TE缓冲液。(3)血清及洗液中DNA的抽提：从500μl PBMC洗液及100μl血清中提取DNA后，分别溶于30μl及20μl TE缓冲液。
作者：周霞秋；廖丹；谢青；张蕾青；何丽芳；姚忻；闻玉梅 刊期： 2000年第03期
目的研究肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注的价值。方法将42例肝癌根治性切除患者随机分为观察组和对照组。肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注患者21例为观察组；肝癌根治性切除术后单纯肝动脉化疗栓塞患者21例为对照组。结果观察组１年、２年、３年的肝内复发率（0、19.05%、57.14%）较对照组（28.57%、47.62%、85.71%）降低（χ2值分别是4.86、3.86、4.20，P＜0.05）；观察组２年、３年的生存率（85.71%、61.90%）较对照组（57.14%、28.57%）提高（χ2值分别是4.20、4.71，P＜0.05）。结论肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注是控制肝内复发率，提高患者生存率的有价值的治疗方法。
作者：偰利宇；庞瑞麟；金银慧；向述天；李红芬 刊期： 2000年第03期
我们对人肝癌组织ALP比活性及同工酶的改变以及手术前后血清中ALP及其同工酶的动态变化进行研究，以探讨原发性肝癌时其来源及变化情况。 1. 资料与方法：PHC患者31例，取手术切除的新鲜肝脏标本分为肿瘤和癌旁组织，分别称取1g湿重组织A和B两份：A份加5ml匀浆液（pH8.6，0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液）提取可溶性ALP；B份加5ml含0.5% TritonX-100匀浆液，提取总ALP。在YQ-3型匀浆机上高速匀浆后，离心留上清液备用。其中4 例有肿瘤细胞变性、坏死。其中22例收集到血清标本，分别与术前1d，术后1周（第7天），术后2周（第14天）清晨空腹采血 (其中2例术后住院不足2周，仅收集到术后1周血)。正常组为体检正常者血清30例。血清及匀浆液中ALP总活性、匀浆液蛋白及ALP同工酶测定参照文献[1]。
作者：肖明兵；黄介飞；鲍柏军；张弘；倪润洲；魏群；江枫 刊期： 2000年第03期
我们从肝功能、肿瘤坏死因子（TNF-α）的变化，来探讨甘利欣保护D-氨基半乳糖（D-GaLN）造成肝损伤的作用机理。 1. 材料与方法：动物模型：选用体重2.0～3.0kg新西兰纯种兔36只，随机分为三组，即D-GaLN 肝损伤组(A组),甘利欣治疗组(B组)及对照组(C组)，每组各为12只。A组兔腹腔内注射D-GaLN(重庆医科大学化学教研室提供，批号：91420）600mg/kg（配成10％溶液，pH值为7.0)腹腔注射，同时每8h耳静脉注射生理盐水10ml共9次；B组腹腔内注射同量D-GaLN，同时每8h从耳静脉注射甘利欣注射液（江苏天晴制药厂，批号：990210）15mg/次，共9次，C组腹腔内注射生理盐水5ml, 以同样方法从耳静脉注射生理盐水10ml。以上各组在腹腔注射D-GaLN前及注射后 24h、72h抽血测肝功能及TNF-α，同时在72h后剖腹取肝脏作光镜病理检查。统计学分析用t检验和χ2检验。
作者：黄以群；林珍辉；王崇国 刊期： 2000年第03期
目的研究脂质（甘油三酯和极低密度脂蛋白）对大鼠HSC低密度脂蛋白（low-density lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）受体的影响。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流，Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSC；应用125I-LDL和125I-HDL3配体进行放射性配基结合实验测定脂质对HSC膜LDL、HDL受体的影响。结果 HSC膜表面存在LDL、HDL受体;脂质可增加LDL受体对LDL的亲合力，但降低HDL受体对HDL3的亲合力。结论 HSC膜上的 LDL、HDL受体对脂蛋白代谢及胆固醇的调节有重要作用,为阐明脂肪肝肝纤维化的发生提供了新的实验依据。
作者：陆伦根；曾民德；李继强；华静；茅益民；范竹萍；邱德凯 刊期： 2000年第03期
1. 材料与方法：乳哺动物细胞表达载体pBK-CMV，长约4.5kb，带有T7公用序列。pCP10是pBR322 EcoRI位点中插入双拷贝头尾相接的HBV ayw亚型全基因HBV DNA重组质粒。PCR引物XI1：1428-1448 nt 5′CGT CCC GTC GGC GCT GAA TCC 3′，XI2：1672-1653 nt 5′AGT CCA AGA GTC CTC TTA AG 3′。人肝癌细胞系SMMC-7721，由上海细胞所提供。将EcoRⅠ酶切后回收的全基因HBV片段，在T4 DNA连接酶作用下，与EcoRⅠ酶切后的pBK-CMV粘端连接。利用pBK-CMV具有T7公用序列，选用XI2、T7作为引物，PCR出现1.7kb阳性条带为反接，并命名为pBK-AHBV。用FUGENETM6转染试剂转染SMMC-7721细胞。在含10%FCS的RPMI 1640（pH7.4）培养基中培养至60h后，用总RNA抽提试剂（Trizol Reagent）提取转染的SMMC-7721细胞，依次获得总RNA、DNA。
作者：陈公英；娄国强；徐岱；王信子；陈智 刊期： 2000年第03期
目的探讨肠源性内毒素血症在硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）所致肝损伤模型发病机制中的地位和作用。方法选用雄性Wistar大鼠26只，随机分为4组，即正常组（N）及结肠切除（C）对照组；TAA损伤组（T）和结肠切除+TAA组（C+T）。采用生化检测法测定血浆内毒素含量和ALT活性。结果单纯给予TAA组，血浆内毒素水平和ALT活性显著高于其它三个组；而结肠切除+TAA组的血浆内毒素水平与结肠切除对照组和正常对照组相比无明显升高，ALT活性结肠切除组+TAA组和正常对照组比较明显升高，但比TAA组却明显减低。T组与C+T组血浆内毒素水平与ALT活性变化之间呈正相关关系（r＝0.985，P＜0.01）。结论 TAA所导致的内毒素血症是肠源性内毒素血症；TAA本身有直接致肝细胞损伤的作用，但其所形成的肠源性内毒素血症造成的肝损伤更为严重。
作者：刘立新；韩德五；任大宾 刊期： 2000年第03期
原发性肝癌的治疗手段很多，但至今能手术切除的肝癌仍以切除的效果好。通过亚临床期肝癌的发现、肝癌的早期切除、肝癌复发后的再切除和不能切除肝癌的缩小后再切除等方法在一定程度上提高了术后生存率。然而有作者报道，40%～60%左右的肝癌在手术时已有肝内或远处转移，而部分病灶用常规的影像学检查，如超声显像、CT、MRI、肝动脉造影也难予分辨。国内外的学者报道，直径小于4cm的肝癌手术切除术后５年复发率60%左右，大部分的复发者在术后18个月内出现。国内外的资料表明，仅依靠单纯的外科手段来降低肝癌术后的复发率，已是非常困难，难以有新的突破，要采取综合措施。
作者：李锦清 刊期： 2000年第03期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
