覃江萍；韦立功
病毒性肝炎时凋亡的肝细胞可采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的末端标记技术(TdT- mediated dUTP nick end labeling, TUNEL )进行原位显示，随着这一检测技术的广泛应用，逐渐发现操作过程中一些因素对实验结果的可靠性有较大的影响，我们以不同蛋白酶K浓度对TUNEL检测结果的影响进行了探讨。
作者：郎振为；廖慧钰；罗朝霞；李俊强；宋晨朝 刊期： 2000年第03期
我们的目的了解乳果糖对肝病肠源性内毒素血症（endotoxaemia，ETM）治疗作用，并探讨细胞因子变化与ETM的关系。一、资料与方法 1. 研究对象：急性肝炎28例，慢性肝炎32例，肝硬化29例，男56例，女33例，平均年龄43.5岁, 诊断根据1995年北京第五次全国传染病寄生虫学术会议制订的病毒性肝炎方案标准。各病例组随机分为两组，在常规护肝的基础上，一组口服乳果糖，另一组不服乳果糖。乳果糖剂量10～30g/d, 并调节至大便2～3次，疗程为20d，并分别于入院后次日及20日常规抽血检测。
作者：张顺财；戴茜；王吉耀；贺伯明 刊期： 2000年第03期
目的探讨肝脏局灶性结节性增生（focal nodular hyperplasia，FNH）与AFP阴性肝癌的鉴别诊断。方法回顾性分析本所1996年3月～1999年３月三年间经手术病理证实的18例FNH及254例AFP阴性肝癌的临床、影像学资料。结果 FNH多见于青壮年（40岁以下占66.7%）、多无症状（66.7%）、肝炎背景多阴性（83.3%）、肝功能多正常（72.0%）；71.4%在彩色多普勒超声见到特征性的粗大中央血管（1～3mm），血液流速高、阻力系数低；CT动态扫描85.7%早期显著增强，53.3%强化均匀，部分有中央星状疤痕，73.3%静脉相等密度；MRI检查中央疤痕在T2WI呈高信号，83.3%增强后早期明显强化，66.7%信号均一。而AFP阴性肝癌多见于中老年（40岁以上85.8%），多有症状（74.0%），多有肝炎背景（87.4%），肝功能多异常（66.1%）；彩色多普勒超声示动脉血流高流速、高阻力，常见晕圈、门静脉栓子；CT动态扫描早期强化明显但不均匀（96.6%），89.7%静脉相低密度；MRI早期明显强化，信号不均一（91.7%）。结论 FNH在临床及影像学上有一定特征，多种检查方法联合应用并与临床相结合，部分病人可与AFP阴性肝癌鉴别。
作者：叶青海；汤钊猷；马曾辰；吴志全；樊嘉；钦伦秀；王文平 刊期： 2000年第03期
目的研究肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注的价值。方法将42例肝癌根治性切除患者随机分为观察组和对照组。肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注患者21例为观察组；肝癌根治性切除术后单纯肝动脉化疗栓塞患者21例为对照组。结果观察组１年、２年、３年的肝内复发率（0、19.05%、57.14%）较对照组（28.57%、47.62%、85.71%）降低（χ2值分别是4.86、3.86、4.20，P＜0.05）；观察组２年、３年的生存率（85.71%、61.90%）较对照组（57.14%、28.57%）提高（χ2值分别是4.20、4.71，P＜0.05）。结论肝癌根治性切除术后肝动脉化疗栓塞，联合LAK细胞/IL-2肝动脉灌注是控制肝内复发率，提高患者生存率的有价值的治疗方法。
作者：偰利宇；庞瑞麟；金银慧；向述天；李红芬 刊期： 2000年第03期
1. 材料与方法：乳哺动物细胞表达载体pBK-CMV，长约4.5kb，带有T7公用序列。pCP10是pBR322 EcoRI位点中插入双拷贝头尾相接的HBV ayw亚型全基因HBV DNA重组质粒。PCR引物XI1：1428-1448 nt 5′CGT CCC GTC GGC GCT GAA TCC 3′，XI2：1672-1653 nt 5′AGT CCA AGA GTC CTC TTA AG 3′。人肝癌细胞系SMMC-7721，由上海细胞所提供。将EcoRⅠ酶切后回收的全基因HBV片段，在T4 DNA连接酶作用下，与EcoRⅠ酶切后的pBK-CMV粘端连接。利用pBK-CMV具有T7公用序列，选用XI2、T7作为引物，PCR出现1.7kb阳性条带为反接，并命名为pBK-AHBV。用FUGENETM6转染试剂转染SMMC-7721细胞。在含10%FCS的RPMI 1640（pH7.4）培养基中培养至60h后，用总RNA抽提试剂（Trizol Reagent）提取转染的SMMC-7721细胞，依次获得总RNA、DNA。
作者：陈公英；娄国强；徐岱；王信子；陈智 刊期： 2000年第03期
我们应用生长抑素（施他林，瑞士Serono药厂生产）治疗食管静脉曲张破裂出血与垂体后叶素治疗效果对比观察，旨在探讨一种新的有效的止血方法。一、资料与方法 1．病例选择：52例均经胃镜检查证实为食管静脉曲张破裂出血的住院患者。男性43例，女性9例，平均年龄（48±12）岁，其中肝炎后肝硬化42例，酒精性肝硬化10例，随机分成两组：施他林组25例，首次静脉推注施他林250μg，继以250μg/h的速度持续静脉滴注24～96h；垂体后叶素组27例，首次静脉推注10U垂体后叶素（15min），继以0.4U/min速度持续静滴24～96h。两组对象的年龄、性别、出血量，食管静脉曲张程度和肝功能Child-Pugh分级等项目差异无显著性意义。
作者：高健；沈鼎明；李孝生；吴显才；梅浙川 刊期： 2000年第03期
目的研究血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（grycylproline dipeptidyl aminopeptidase，GPDA）同工酶对PHC的诊断价值，提高早期PHC和AFP阴性PHC诊断水平。方法采用阶段梯度垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行血清GPDA同工酶分离检测，同步测定比较PHC患者血清GPDA同工酶与GPDA总活性（TGPDA）、AFP、肿瘤大小及ALT的关系。结果血清GPDA按其泳动速度可分为快带（GPDA-F）与慢带（GPDA-S）两种同工酶。PHC患者血清GPDA-F的阳性率为85.3%，而肝外肿瘤、转移性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎中阳性率均较低，正常对照组以及良性肝占位全部阴性。GPDA-F阳性率在TGPDA活性增高组明显高于正常组（94.4%对75.0%），GPDA-F与AFP及肿瘤大小无关系。良性肝病ALT升高组GPDA-F阳性率高于ALT正常组,而PHC患者GPDA-F与ALT无关。PHC患者GPDA-F呈持续阳性，良性肝病患者GPDA-F常为一过性阳性。结论 GPDA-F为一新的PHC血清标志物，有助于PHC的定性诊断，尤其对早期PHC及AFP阴性PHC的诊断具有重要价值。
作者：李梅；倪润洲；黄介飞；肖明兵；张弘；魏群；江枫；孟宪镛 刊期： 2000年第03期
对HCV分子生物学特性的深入探讨很大程度上依赖于实验模型。近年来，随着HCV全基因组的克隆以及多种HCV感染检测方法的建立并运用于动物试验，HCV感染的实验模型已取得重要进展。一、动物试验模型 黑猩猩是目前唯一成功用于HCV感染模型的实验动物。以完整的HCV病毒静脉注射接种是常用的实验感染方式，这与人类输血感染HCV的方式极为相似。除了完整的HCV病毒及HCV感染者的血清外，用HCV全基因克隆也能感染黑猩猩，Beard等[1]用HCV-1b型的全基因cDNA克隆在体外转录为RNA后，行肝内穿刺接种黑猩猩，3周后即可在外周血中检出HCV RNA，接种后13周即能检出高滴度持续存在的抗-HCV。
作者：秦山；赵连三 刊期： 2000年第03期
1. 核医学检查的主要特点：核医学具有自己的特殊优势，是观察癌症微观分子结构与宏观组织器官变化的钮带，正在从受体水平迈向基因水平。核医学是利用组织或器官病灶内、外核素分布的浓度差为依据，显示组织器官和病变的位置、形态、大小等解剖学结构，同时提供了血流、功能、代谢方面十分有用的信息，是功能解剖学。核素显像的主要贡献是有助于疾病的早期诊断。 2. 肝癌的断层显像：单光子发射型计算机断层仪（single photon emission computed tomography，SPECT或称ECT），是以注入人体的放射性核素为放射源，通过仪器在体表连续或间隔一定角度旋转，采集多体位平面影像的数据，再由计算机重建成各断层影像，后对信息加工处理，重建断层影像。旋转总度数为360°，３°或6°/1帧、每帧10～12s（约120K计数）。由于计算机重建了横断面、矢状面及冠状面三维图像，对占位性病变的检出率不受深度的影响，对较小病变的检出率有明显提高。经过SPECT连续断层分析，能够鉴别某些由于正常结构所致的假缺损，从而使假阳性降低。敏感性可达94%，准确性为91.5%，特异性89%，检出的小病变为1.0cm。
作者：邓候富 刊期： 2000年第03期
1993年8月至1996年1月，我院传染科住院确诊的病毒性甲型肝炎13岁以下藏族儿童165例，诊断标准按上海第六届病毒性肝炎会议修订标准。 流行病学：西藏拉萨病毒性甲型肝炎全年均有发生，以秋季发病率高。调查165例，饭前便后不洗手、吃不洁食物、用手抓东西吃、喝生水、随地大小便等不良卫生习惯占87.46%，其次是与甲型肝炎病人密切接触。165例均未接种甲型肝炎疫苗。临床资料：男118例，占71.52%，女47例，占28.48%，男性高于女性，年龄≤4岁11例占6.67%，≤7岁38例占23.03%，≤10岁62例占37.45%，≤13岁52例占32.85%，165例藏族儿童甲型肝炎分析，７至13岁发病率高。症状：除与成年人相同外，发烧者多（占87.88%），腹部胀气，腹痛。黄疸者多（占98.18%），无黄疸型３例占1.82%，以黄疸型占多数，查体肝脏增大，化验检查胆红素中度增高，转氨酶增高，肝功能中度损害。用西药及藏药治疗，165例患者对药物均敏感，症状消失快，肝功能比成人恢复快，全部治疗出院，无死亡。 讨论：应加强卫生知识宣传教育，养成良好卫生习惯，搞好环境卫生，加强水源及粪便管理，加强饮食卫生监督管理，搞好托儿所、幼儿园及学校卫生，发现肝炎病人及时报告，及时消毒隔离治疗，采取综合措施，预防减少甲型肝炎发生。
作者：李红兵；姜美君 刊期： 2000年第03期
1. 对象与方法：观察组29例，平均年龄55.6岁。对照组18例，平均年龄54.5岁。两组均为男性，均符合酒精性肝病的诊断标准，治疗前均戒酒，常规用维生素B族、维生素C及能量合剂、支链氨基酸等治疗。观察组加用静脉滴注还原谷胱甘肽，每日600mg或间日1200mg，连续用四周。
作者：余慧青；李伟道 刊期： 2000年第03期
目的从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。方法用固相化HBsAg对所构建的噬菌体抗体库进行三轮淘筛，从中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。结果第三轮淘筛后洗脱下来的噬菌体，较第一轮增加80倍，含有抗体轻链基因和重链基因的克隆，也由淘筛前的17%增至100%，经ELISA证实，筛选到的抗HBsAg噬菌体抗体对HBsAg具有良好的结合活性，而与牛血清白蛋白和HAVAg等无关抗原均不反应。结论 HBsAg对抗体库的淘筛，富集了表面呈现抗HBsAg的单克隆抗体的噬菌体。
作者：王志毅；刘杞；张定凤；万泽生 刊期： 2000年第03期
原发性肝癌（下称肝癌）是我国常见的恶性肿瘤。肝癌的诊断，尤其是早期诊断，多依赖各种辅助检查。为了规范诊断程序和便于非专科医师掌握，有必要制订一个诊断标准。肝癌是一个进行性发展的疾病，不同的病期所采取的治疗方案不同，预后亦不相同，所以亦应有一个关于分期的标准。
作者：杨秉辉；任正刚；汤钊猷 刊期： 2000年第03期
1. 资料与方法：67例为我科住院的重型肝炎患者，全部病例均有不同程度的乏力，纳差，肝脏肿大，病程10d以上，化验TBil＞200μmol/L，符合1995年北京全国传染病寄生虫病学术会议制定的诊断标准。67例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组37例，男24例，女13例，平均年龄38.7岁，其中急性重型肝炎11例，亚急性重型肝炎19例，慢性重型肝炎８例；对照组30例，男19例，女11例，平均年龄34.6岁，其中急性重型肝炎９例，亚急性重型肝炎14例，慢性重型肝炎７例。两组患者的临床表现，肝功能检查，病程及年龄无明显差异，具有可比性。治疗组采用阿波莫斯针剂（德国MERZ制药有限公司生产，每１安瓿10ml中含有5g L-鸟氨酸、L-天门冬氨酸盐）。用5%葡萄糖液250ml中加入阿波莫斯针剂20ml静滴，每日２次。阿波莫斯应用１周后改为每日１次，20d为一疗程。对照组采用促肝细胞生长素，前列腺素E1等药物治疗。疗效判定：显效，黄疸完全消退或下降幅度达治疗前的70%以上；有效，黄疸下降70%；无效，黄疸下降幅度小于20%或无变化。
作者：缪新权；鲁慎文；梅光涛；杨智彬；孔庆芬；刘姝惠；陈华平；段云庆 刊期： 2000年第03期
目的研究乙型肝炎病毒Ｘ（hepatitis B virus，HBx）蛋白对生长因子激活作用，探讨HBx蛋白对肝细胞癌生长的影响。方法构建Ｘ基因真核表达载体，转染入HepG2细胞后，细胞组织化学和免疫印迹法检测胰岛素样生长因子－Ⅰ受体（insulin-like growth factor Ⅰreceptor，IGF-ⅠR）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达。结果转染HBx基因HepG2细胞（X细胞）IGF-ⅠR表达阳性率为84%±3%，转染空载体对照细胞（X0细胞）为26%±4%；免疫印迹法检测Ｘ细胞有明显条带。VEGF表达Ｘ细胞阳性率为83%±5%，X0细胞为28%±6%，差异有非常显著意义；Ｘ细胞IGF-ⅠR表达增高近1.5倍。结论 HBx蛋白可同时激活IGF-ⅠR和VEGF，在肿瘤恶性生长、转移中起有重要作用。
作者：陶小红；张晓实；任红；张大志；叶珈；古柏燕；沈鼎明 刊期： 2000年第03期
乙肝散是一种用于治疗慢性乙型肝炎的中药，系苗族药改进而成。主要含天王叶、地人参及猕猴桃等成分；主要功能为清热解毒、疏肝利胆、健脾化湿、活血化瘀等，近年发现它还具有抗HBV作用。现将全国十六家单位有关乙肝散治疗乙型肝炎的多中心基础与临床情况总结如下。
作者： 刊期： 2000年第03期
目的在大肠杆菌XL1-Blue中表达可溶性的抗HCV非结构蛋白NS3的人源单链可变区抗体（single-chain variable fragment antibody，ScFv）。方法以重组的HCV NS3为抗原，利用噬菌体抗体库技术筛选含有抗-HCV NS3 ScFv基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒，经SfiI/NotⅠ酶切鉴定后，亚克隆到pCANTAB5E载体；转化大肠杆菌XL1-Blue，提取质粒进行DNA序列测定；异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（isopropylthio-β-D-galactoside，IPTG）诱导表达HCV NS3可溶性单链可变区抗体。ELISA和斑点吸印杂交检测其与不同来源的抗原的结合活性。结果筛选到的HCV NS3的单链抗体基因，经限制性内切酶酶切和序列分析表明，该抗体基因由750bp组成，ELISA和斑点吸印杂交结果表明，在大肠杆菌XL1-Blue中表达的HCV NS3的单链抗体，可与不同来源的NS3抗原结合。结论大肠杆菌XL1-Blue表达的NS3-ScFv具有结合不同来源的HCV NS3的活性和特异性。
作者：钟彦伟；成军；刘妍；董菁；杨继珍；张玲霞 刊期： 2000年第03期
肝癌的有效治疗方法至今仍是根治性切除。一般周围型肝癌切除可采用常规肝脏部分切除术。但当肝癌巨大且与邻近解部结构紧密粘连时术野显露极差，侧支循环又极为丰富，按常规方法切肝常可造成大量以至不能控制的出血，肝癌累及下腔静脉者尤甚；肝癌侵犯膈肌或腹部、甚至胸部脏器时，强行经肝癌组织分离，既不能完整切除肝癌，又可能造成肝癌组织脱落种植，如先切除腹腔脏器再切断肝脏又易造成术野污染。因此手术困难、风险极大、并发症多的肝癌称为难切性肝癌，既往遇这种情况常放弃手术，为使这部分病人得到切除机会，不少学者在探索新的切除方法。1994年以来我们不使用特殊器械作逆行肝脏部分切除术切除难切性肝癌100例均取得成功。
作者：吴志全 刊期： 2000年第03期
目的研究丙型肝炎病人的系列血清中HCV 5′-NCR及核心区基因变化。方法 4例因献血感染HCV病人的系列血标本, 用特异性引物扩增5′-NCR和核心区基因并进行测序。结果所有HCV分离株基因序列均为1b和2a型，5′-NCR序列差异只与型别有关，与病人和不同时点采集的标本无关。核心区基因序列差异因病人和基因型别而异，未发现同一病人的同一基因型序列随时间而变化。结论 5′-NCR序列保守性大于核心区。型别是导致基因变化的主要原因。未发现该2区段基因的核苷酸改变与时间有关。
作者：张庶民；李河民；祁自柏；张华远；庄辉；Anders Widell 刊期： 2000年第03期
通过对肝癌患者血清可溶性Fas（sFas）水平及免疫指标的检测，探讨肝癌患者血清sFas水平与免疫功能的关系及其临床意义。 1. 临床资料：186例肝癌初治患者，系本院1997年1月～1999年6月收治的患者，诊断依据肝穿刺活体组织检查、CT及MRI、AFP等确诊，其中男118例，女68例，年龄35～72岁，平均50.2岁。40例肝硬化患者，经肝穿刺活体组织检查证实，男30例，女10例，年龄30～68岁，平均49.8岁；所有患者不包括严重感染、自身免疫性疾病、造血系统疾病及肾衰等合并症。健康献血员为42例，男24例，女18例，年龄31～60岁，平均48.5岁。
作者：谢家印；孙贵银；郑成位；张培炽 刊期： 2000年第03期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
