学术投稿

幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白分子内佐剂融合疫苗的构建、纯化及活性研究

高原;邹全明;张卫军

关键词:幽门螺杆菌, 中性粒细胞激活蛋白, 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位, 疫苗, 分子内佐剂
摘要:目的 构建幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白基因(napA)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labile enterotoxin B subunit,LTB)的分子内佐剂融合蛋白疫苗,并通过口服免疫小鼠研究其抗原性,为疫苗的开发奠定基础.方法 利用分子克隆技术构建携带napA-LTB融合基因的重组原核表达质粒pET-22b-napA-LTB,转化E.coli BL21(DE3),进行原核表达,重组表达蛋白采用亲和层析柱Chelating Sepharose进行纯化,Tris-Tricine电泳和Western blot鉴定,GM1-ELISA检测rNAP-LTB与神经节苷脂的结合.口服免疫BALB/c小鼠,检测重组融合蛋白的抗原性.结果 重叠延伸PCR扩增出了约760 bp的napA-LTB融合基因,其核苷酸序列与GenBank公布的相关序列一致.重组融合蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,表达量约占细菌总蛋白的30%,Tris-Tricine初步测定目的 蛋白的相对分子质量(Mr)约29 000,纯化后纯度大于90%.Western blot检测其具有良好的抗原性.该重组蛋白保持了与GM1神经节苷脂结合的生物学活性.动物实验表明,分子内佐剂疫苗口服免疫小鼠后血清特异性IgG,IgA和胃黏液、肠黏液的抗原特异性sIgA抗体显著高于无佐剂单一亚单位疫苗.结论 所获得的重组融合蛋白具有良好的抗原性和黏膜佐剂活性,为进一步的疫苗研究奠定了基础.
中国药业杂志相关文献
  • 住院患者不合理用药现象分析

    目的 通过病历分析,促进临床合理、规范用药.方法 通过调查2003年12月~2005年6月出院患者病历1 000份,分析存在的不合理用药现象.结果 住院患者大部分用药合理,但部分存在不合理现象,不合理用药率达33.8%.结论 要加强对临床用药的监督,发挥药师的干预作用.

    作者:徐伏莲 刊期: 2006年第18期

  • 支原体对氟喹诺酮类药物体外耐药性调查

    目的 调查支原体对氟喹诺酮类药物(FQs)的耐药状况,为临床治疗提供参考依据.方法 将2005年国内公开发表的53篇文献报道的支原体对6种FQs的耐药率进行了统计分析.结果 统计涉及国内13个省市共计30 832株支原体,左氧氟沙星(LEV)、氧氟沙星(OFL)、环丙沙星(CIP)、司帕沙星(SPA)在各省之间高和低耐药率分别有极显著差异(P<0.005),耐药率范围分别是4.6%~68%,17.2%~82.7%,10.3%~65.3%,8.2%~60%,高耐药率都已达到或超过60%;4种药物的耐药率男女之间均有极显著差异(P<0.005),在2000-2004年5年中均有不同程度增长;总的平均耐药率LOM接近1/5,LEV超过1/4,OFL和SPA将近1/3,CIP和NOR则超过1/2.结论 CIP和NOR耐药率较高,临床应放弃这两种药物对支原体的经验治疗,加强药物敏感监测,选择敏感药物.

    作者:翟文海;刘汉丹;张燕 刊期: 2006年第18期

  • 达克宁栓联合氟康唑片治疗复杂性外阴阴道念珠菌病92例

    目的 探讨药物治疗复杂性外阴阴道念珠菌病的有效方法.方法 对复杂性外阴阴道念珠菌病患者92例给予达克宁栓200 mg阴道上药,7 d为1个疗程,共3个疗程;同时口服氟康唑片(依利康)150 mg,第3天重复1次,以后于每次月经前口服150 mg,共用3个月经周期.结果 近期治愈率为100%,远期治愈率为93.1%.结论 外用达克宁栓配合口服氟康唑足疗程治疗复杂性外阴阴道念珠菌病,疗效确切.

    作者:晏永莲 刊期: 2006年第18期

  • 等吸收度法测定苯扎溴铵消毒液中主药含量

    目的 测定苯扎溴铵消毒液中主药的含量.方法 等吸收度法.结果 亚硝酸钠在383.3 nm和262.5 nm波长处等吸收,苯扎溴铵浓度在100.0~350.0μg/mL范围内与383.3 nm和262.5 nm波长处的吸收度之差△A线性关系良好,△A=1.251 25 C-0.001 63,r=0.999 8(n=6).苯扎溴铵的平均回收率为100.16%,RSD=0.36%(n=6).结论 等吸收度法具有操作简便、灵敏度和准确度高、重现性好等优点.

    作者:朱雅艳;华俊彦;田伟强;吴丽兰 刊期: 2006年第18期

  • 单味中药防治脂肪肝作用的研究进展

    脂肪肝发病率已跃居为肝病第一位,中药治疗脂肪肝有显著效果.该文综述了近十多年来单味中药防治脂肪肝作用的研究进展情况,发现许多中药是通过调节血脂、保护肝脏免受脂质过氧化损伤来达到防治目的 ,而像广昆布、海藻等既能调节血脂,又能软坚散结,阻止脂肪肝向肝纤维化、肝硬化发展的药物,更应引起开发研究者和临床应用者的重视.

    作者:梅全喜;林慧;孔祥廉 刊期: 2006年第18期

  • 非洛地平-美托洛尔复方经皮贴剂单次给药降压作用研究

    目的 评价非洛地平-美托洛尔复方经皮贴剂的降压作用.方法 研制非洛地平-美托洛尔复方透皮给药系统,并将其应用于高血压大鼠,进行药效学评价.结果 单次给药后,3个剂量组对收缩压、舒张压和心率的影响均呈剂量依赖性降低,分别与空白对照组和灌胃给药组比较,均有显著性差异(P<0.05).结论 非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂的降压效果确切,降压作用平稳,持续时间长;其降压作用强度和持续时间具有剂量依赖性,降压效果优于非洛地平和美托洛尔的口服给药.

    作者:裴保香;冯洁;王文刚 刊期: 2006年第18期

  • 22批盐酸小檗碱片质量分析

    目的 分析盐酸小檗碱片不合格的内在原因,同时验证含量测定方法的专属性和可靠性.方法 用高效液相色谱法(HPLC法)和容量法测定含量,用紫外分光光度法(UV法)测定溶出度,对盐酸小檗碱与盐酸药根碱紫外图谱及吸收值进行分析.结果 用滴定法测定时样品含量合格,而用HPLC法测定时样品含量低(因为盐酸小檗碱中混杂有盐酸药根碱).结论 用HPLC法测定盐酸小檗碱含量,结果准确、可靠,专属性强.

    作者:何琳 刊期: 2006年第18期

  • 某院门诊2003-2005年地高辛合并用药分析

    目的 了解地高辛的合并用药情况,为临床合理用药提供参考.方法 利用浙江省医院管理系统药房管理子系统,对2003年3月~2005年12月期间某院所有含地高辛的门诊处方进行回顾性分析.结果 与地高辛有药代动力学相互作用的合并用药包括11种口服抗菌药物、13种P-糖蛋白抑制剂和2种促胃肠动力药,分别占地高辛总处方量的5.5%,64.7%和0.7%.同一张处方中与地高辛并用药物含2种以上P-糖蛋白抑制剂的占5.2%,含口服抗菌药物与P-糖蛋白抑制剂的占3.2%.结论 地高辛在目前临床合并用药中,产生药代动力学相互作用的可能性较大.药师应做好处方审查和患者用药教育;在加用或撤除一些并用药物时,必须注意可能引起的地高辛药代动力学变化;必要时对某些可疑相互作用进行血药浓度监测.

    作者:王欧明;宋美芳;周权 刊期: 2006年第18期

  • 阿立哌唑治疗精神分裂症25例

    目的 探讨阿立哌唑治疗精神分裂症的疗效和不良反应.方法 将50例精神分裂症患者随机分成两组,分别给予阿立哌唑和利培酮治疗,疗程6周.以阳性症状和阴性症状量表(PANSS)评定疗效,以副反应量表(TESS)评定不良反应.结果 阿立哌唑组显效率72%,利培酮组显效率76%.结论 阿立哌唑与利培酮疗效相似,但副作用小,患者容易接受,可以更好地提高治疗效果.

    作者:陈建国 刊期: 2006年第18期

  • 利凡诺凝胶质量控制标准研究

    目的 建立利凡诺凝胶的质量控制标准.方法 建立了酸碱度、卫生学、定性鉴别、含量测定等质量控制方法.结果 利凡诺凝胶的pH值为6.5~6.8,卫生学检查符合规定,定性鉴别方法简便易行,含量测定平均回收率为99.26%,RSD=0.74%(n=5).结论 制订的质量标准可以控制利凡诺凝胶的质量.

    作者:朱亚丽 刊期: 2006年第18期

  • 反相高效液相色谱法测定雷米普利血药浓度

    目的 建立以反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定雷米普利血药浓度的方法.方法 用固相萃取小柱提取雷米普利血浆样品,以水杨酸为内标,流动相为乙腈-pH值为2.0的磷酸盐缓冲液(30:70),柱温为60℃,检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min.结果 雷米普利浓度在5~100 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好,日内和日间RSD<15%(n=5).结论 RP-HPLC法具有较高的准确性、精密性和灵敏度,且操作简便、快速,适用于雷米普利血药浓度监测.

    作者:张相彩;徐颖颖;吕小琴 刊期: 2006年第18期

  • 药物性肝炎的致病因素及防治

    目的 了解药物性肝炎的致病因素及防治.方法 对国内外近5年公开发表的有关药物性肝炎致病因素及其防治的文献进行分析整理.结果 多种药物可引起药物性肝炎,其治疗方法 除使用保肝药物外,还可结合中成药或中草药汤剂进行治疗,并应从用药方面注意对药物性肝炎的预防.结论 临床医师、临床药师在用药时应重视药物性肝炎的预防和治疗.

    作者:吴寒寅;孟德胜 刊期: 2006年第18期

  • 高效液相色谱法测定安胃颗粒中延胡索乙素含量

    目的 建立安胃颗粒中延胡索乙素的含量测定方法.方法 采用Kromasil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相(用三乙胺调节pH=7.8)为甲醇-0.1%磷酸溶液(64:36),检测波长为280 nm.结果 延胡索乙素进样量在0.101~1.616μg范围内与峰面积线性关系良好,回收率为98.9%,RSD为1.3%.结论 高效液相色谱法简便、可靠,可用于安胃颗粒的质量控制.

    作者:吴雷 刊期: 2006年第18期

  • 肿瘤化疗药物静脉渗漏的处置

    检索相关文献,并结合临床处置经验,介绍了常见肿瘤化疗药物静脉渗漏的相关因素、预防保护措施、处置原则与方法.

    作者:童郁韫;黄阿农;郑苏芹 刊期: 2006年第18期

  • 高血压合并糖尿病患者降压药物的选择

    简述高血压合并糖尿病患者选择降压药物时须关注的几个问题,并对利尿剂、β-肾上腺素受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、α-肾上腺素受体阻滞剂等作出相应评价.

    作者:王远光;潘洁;张信平 刊期: 2006年第18期

  • 多效胃镜乳的处方改进及稳定性考察

    目的 改进多效胃镜乳处方,提高多效胃镜乳的稳定性,控制制剂的质量.方法 通过外观质量检查、显微镜观察、离心试验、耐寒耐热试验、常温留样及含量测定等,考察了不同乳化剂对多效胃镜乳质量的影响,确定优处方.结果 以0.8%司盘-80,1.6%西黄蓍胶和5%司盘-80,2%CMC-Na配制的多效胃镜乳稳定性好.结论 改进后的多效胃镜乳处方可用于制剂生产.

    作者:于西全;晏明 刊期: 2006年第18期

  • 反相高效液相色谱法测定茵陈退黄合剂中黄芩苷含量

    目的 用反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定茵陈退黄合剂中黄芩苷的含量.方法 采用Alltech色谱柱,检测波长为274 nm,流动相为甲醇-水-冰醋酸(50:50:1),流速为1 mL/min.结果 黄芩苷浓度在0.021 14~0.211 4 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好,回归方程Y=1.235 9×107X-1.380 8×105,r=0.999 9,平均回收率为97.31%,RSD为1.28%,3批菌陈退黄合剂中黄芩苷含量在1.47~3.16 mg/mL之间.结论 RP-HPLC法简便,准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.

    作者:翁金月;陈凌云;张纯纯 刊期: 2006年第18期

  • 注射用比阿培南的含量测定方法研究

    目的 探讨注射用比阿培南含量测定的佳方法.方法 以紫外分光光度法(UV法)与高效液相色谱法(HPLC法)对样品及对照品进行测定.结果 比阿培南浓度与吸收度值或高效液相色谱峰面积均呈良好的线性关系,回归方程分别为A=0.056 38 C-0.006 233(r=0.999 8),Y=563 807.6+11 924 676.4 C(r=0.999 9),两方法回收率、稳定性良好,含量测定差值为±1%.结论 用HPLC法测定含量能同时准确监控产品中的有关物质,可更好地控制产品质量.

    作者:张菁;邢亮彬 刊期: 2006年第18期

  • 前列地尔联合利多卡因治疗糖尿病周围神经病变疗效观察

    目的 探讨前列地尔联合利多卡因治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效.方法 将60例DPN患者随机分为3组,A组前列地尔联合利多卡因,B组为单用前列地尔,C组为单用利多卡因,每组各20例,均静脉滴注给药,1次/d,2周为一疗程.结果 A组总有效率与B,C组比较有显著性差异(P<0.05),起效时间也明显缩短,不良反应则明显减少.结论 前列地尔联合利多卡因治疗DPN起效快,不良反应少,疗效显著,具有临床应用价值.

    作者:曾兆良;李锦华;苏胜 刊期: 2006年第18期

  • 运用Excel程序快速计算片剂的溶出度参数

    利用Excel的线性回归功能,能快速算出片剂溶出度试验中的溶出度参数(T50,Td,m)及任何时刻的溶出度,减少了作图法的烦琐过程,避免了因人而异的操作误差,与文献方法比较,结果一致,但操作更简便,计算更快速.

    作者:方崇波 刊期: 2006年第18期

中国药业杂志

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主管:国家食品药品监督管理局

主办:重庆市食品药品监督管理局