学术投稿

一种肝癌多药耐药细胞系的建立及鉴定

梅英;石毓君;刘长安;龚建平;简华刚;丁雄

关键词:多药耐药, 阿霉素, 细胞株, P-糖蛋白
摘要:目的 建立肝癌细胞系HepG2的多药耐药细胞系HepG2/ADM,为研究肝癌细胞多药耐药创造前提条件.方法 用0.01~2 μg/mL的阿霉素(ADM)分级诱导HepG2细胞的多药耐药性,使其在含高浓度的ADM(2 μg/mL)的DMEM培养基中保持90%的存活率,并能正常地传代、冻存和复苏;用MTT法分析ADM、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)和氨甲蝶呤(MTX)四种药物在其1 Cmax,10 Cmax,20 Cmax和30 Cmax时分别作用于HepG2和HepG2/ADM时的细胞生长抑制率;用免疫组化法观察细胞膜P-糖蛋白(P-gp)170的表达;用流式细胞仪(FCM)分析细胞膜P-gp 170对进入细胞内药物罗丹明-123的泵出效果.结果 HepG2/ADM细胞系表现了较强抗药活性;免疫组化法观察到HepG2/ADM细胞膜有较强P-gp 170表达;FCM检测到HepG2/ADM细胞能有效泵出罗丹明-123,而HepG2细胞则不能有效泵出罗丹明-123.结论 用ADM梯度诱导耐受法成功诱导出了HepG2细胞的多药耐药细胞系HepG2/ADM.
中国药业杂志相关文献
  • 门诊患者喹诺酮类药物使用分析

    目的 了解门诊患者喹诺酮类药物的使用情况.方法 抽取第三军医大学大坪医院2005年10~12月门诊西药房处方82 649张,从中挑选含喹诺酮类药物处方8 316张,对年龄、科室、剂型、药物利用指数、抗菌药物联合用药情况进行统计分析.结果 喹诺酮类药物因其抗菌谱广、抗菌活性强,已广泛应用于临床各科室,喹诺酮类药物与其他抗菌药物的联用以二联为主.结论 该院喹诺酮类药物的应用基本合理,但在老年人用药、儿童用药、抗菌药物联合应用中存在一些不合理现象.

    作者:阮玉琼;孟德胜;温悦;吴寒寅 刊期: 2006年第20期

  • 差示分光光度法测定盐酸环丙氟哌酸制剂的含量

    目的 测定盐酸环丙氟哌酸制剂的含量.方法 采用差示分光光度法,不经分离直接测定.溶剂为0.1 mol/L氢氧化钠溶液及0.1 mol/L盐酸溶液,检测波长为283 nm.结果 盐酸环丙氟哌酸的线性范围为3~15 μg/mL,回归方程△A=0.062 47 C+0.015(r=0.999 8),平均回收率为101.0%,RSD为0.42%.结论 差示分光光度法简便、快速、准确,可作为盐酸环丙氟哌酸制剂的质量控制方法.

    作者:白林;黄晓舞 刊期: 2006年第20期

  • 硫酸伪麻黄碱凝胶骨架型缓释片的制备与释放度试验

    目的 研制硫酸伪麻黄碱缓释片并对其释放度的影响因素进行考察.方法 以羟丙甲纤维素(HPMC)为骨架材料制备硫酸伪麻黄碱凝胶骨架型缓释片,采用紫外分光光度法测定体外硫酸伪麻黄碱,并对缓释片进行释放度试验.结果 HPMC用量增加时释放速度变慢,磷酸氢钙用量增加时片剂可压性得以改善.结论 该制剂缓释效果良好.

    作者:王菲 刊期: 2006年第20期

  • A族维生素的抗氧化和促氧化作用

    A族维生素具有广泛拮抗多种理化因素(镍剂、梭曼、紫外线、辐射、香烟烟雾等)所致氧化损伤的作用,可加强酶系抗氧化剂的功能,但在一定条件下仍表现出明显的促氧化作用.A族维生素与维生素E、维生素C等其他抗氧化维生素存在着相互作用,其机制已有了进一步研究.

    作者:颜怀城;刘同华 刊期: 2006年第20期

  • 不同添加剂对双氯芬酸钾凝胶剂稳定性的影响

    目的 研究不同添加剂对双氯芬酸钾凝胶剂稳定性的影响.方法 制备凝胶剂过程中加入不同添加剂,考察制剂稳定性.结果 丙二醇、0.5%吐温-80有利于凝胶剂的稳定性,甘油、异丙醇、1.0%吐温-80容易使双氯芬酸钾从凝胶剂中析出.结论 不同添加剂对双氯芬酸钾凝胶剂稳定性有不同的影响,合适的添加剂有利于凝胶剂的稳定.

    作者:梁荣才;范本杰;孙考祥;王爱萍 刊期: 2006年第20期

  • 反相高效液相色谱法测定脑安颗粒中阿魏酸含量

    目的 建立测定脑安颗粒中阿魏酸含量的方法.方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC法),色谱柱为 Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm,4 μm),以甲醇-水-冰醋酸(30:70:1)为流动相,流速为0.85 mL/min,柱温为15℃,检测波长为323 nm.结果 阿魏酸进样量在0.117~2.340 μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 9,回收率为98.92%,RSD为1.27%(n=6).结论 RP-HPLC法操作简便,测定结果准确,可用于脑安颗粒中阿魏酸含量的测定.

    作者:邢协望;姜义武 刊期: 2006年第20期

  • 郁金银屑片联合胸腺肽治疗银屑病156例

    目的 探讨用郁金银屑片联合胸腺肽治疗寻常型银屑病的疗效和安全性.方法 156例寻常型银屑病患者口服郁金银屑片5片/次,3次/d,肌肉注射胸腺肽20 mg/d,治疗中病情明显改善后,郁金银屑片减为维持量(3片/次,3次/d),胸腺肽改为20 mg,隔日1次,以1个月为1个疗程,共2个疗程,用PASI积分评价疗效,并记录不良反应.结果 随着治疗时间的延长,患者PASI总积分逐渐下降,有效率逐步提高,治疗结束时治愈达65.4%,有效率达85.9%,治疗期间未见明显不良反应.结论 郁金银屑片联合胸腺肽治疗银屑病具有良好疗效和安全性.

    作者:梁静;郑金福;焦庆华 刊期: 2006年第20期

  • 头孢呋辛酯治疗下呼吸道感染45例

    目的 观察头孢呋辛酯治疗下呼吸道感染的疗效.方法 将90例下呼吸道感染患者随机均分为两组,治疗组45例口服头孢呋辛酯(250 mg/次,2次/d),对照组45例口服头孢克洛(250 mg/次,3次/d),疗程均为5~10 d.结果 治疗组和对照组的治愈率分别为57.78%和37.78%(P<0.05),总有效率分别为88.89%和84.44%(P>0.05),细菌清除率分别为87.80%和85.00%(P>0.05),不良反应发生率均为4.44%.结论 头孢呋辛酯治疗细菌性下呼吸道感染安全、有效.

    作者:沈佐莲;吕光 刊期: 2006年第20期

  • 我院医嘱的合理用药监测系统审查分析

    目的 通过合理用药监测系统(PASS)医嘱的审查,对出现的问题进行分析,为临床合理用药提供依据.方法 调取PASS审核的医嘱,总结被警示医嘱的药物、数量、警告内容以及被警示后医嘱修改率.结果 在审核的102 999条医嘱中,记录有问题医嘱97 013条,占医嘱总量的94.19%,其中严重警示2 557条(占2.48%),修改率为17.87%;较严重警示3 908条(占3.79%),修改率为3.79%;一般警示90 548条(占87.91%),修改率为1.86%.结论 PASS能帮助医生、药师审核医嘱,有助于减少药物不良反应,提高临床合理用药水平.

    作者:吴汉斌 刊期: 2006年第20期

  • 复方烟酸缓释片在beagle犬体内药代动力学研究

    目的 研究复方烟酸缓释片在beagle犬体内的缓释成分烟酸的药代动力学和生物等效性.方法 根据交叉试验方法给予复方烟酸缓释片和烟酸普通片,采用反相高效液相色谱法测定血液中烟酸的浓度.结果 单剂量试验品500 mg给药后药时曲线下面积(AUC)为(292.6±35.8)μg·h/mL,峰浓度(Cmax)为(69.2±10.2)μg/mL,达峰时间(Tmax)为(3.3±0.3)h,消除半衰期(t1/2)为(2.1±0.3)h.结论 两种制剂的Cmax,Tmax和AUC均有显著性差异(P<O.05),被试制剂相对生物利用度为(99.5±17.0)%.

    作者:牛华英;刘彬;孔玉梅;刘冰弥;孟凡瑞 刊期: 2006年第20期

  • 荧光偏振免疫法监测环孢素A血药浓度的稳定性分析

    目的 评价荧光偏振免疫法(FPIA法)测定环孢素A(CsA)血药浓度的稳定性.方法 采用FPIA法测定移植患者术后全血CsA浓度,运用统计学方法对其稳定性进行评价.结果 FPIA法监测CsA血药浓度日内差、日间差和1年中随行质控的变异系数分别为3.77%,5.41%,6.36%,回收率分别为98.98%~101.80%,97.99%~100.81%,97.86%~101.78%,结果均符合《中国药典》生物样品检测规定.结论 FPIA法在长期的临床应用中是稳定、准确和可靠的.

    作者:魏筱华;易诚予;聂益军;刘明珪 刊期: 2006年第20期

  • 一种肝癌多药耐药细胞系的建立及鉴定

    目的 建立肝癌细胞系HepG2的多药耐药细胞系HepG2/ADM,为研究肝癌细胞多药耐药创造前提条件.方法 用0.01~2 μg/mL的阿霉素(ADM)分级诱导HepG2细胞的多药耐药性,使其在含高浓度的ADM(2 μg/mL)的DMEM培养基中保持90%的存活率,并能正常地传代、冻存和复苏;用MTT法分析ADM、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)和氨甲蝶呤(MTX)四种药物在其1 Cmax,10 Cmax,20 Cmax和30 Cmax时分别作用于HepG2和HepG2/ADM时的细胞生长抑制率;用免疫组化法观察细胞膜P-糖蛋白(P-gp)170的表达;用流式细胞仪(FCM)分析细胞膜P-gp 170对进入细胞内药物罗丹明-123的泵出效果.结果 HepG2/ADM细胞系表现了较强抗药活性;免疫组化法观察到HepG2/ADM细胞膜有较强P-gp 170表达;FCM检测到HepG2/ADM细胞能有效泵出罗丹明-123,而HepG2细胞则不能有效泵出罗丹明-123.结论 用ADM梯度诱导耐受法成功诱导出了HepG2细胞的多药耐药细胞系HepG2/ADM.

    作者:梅英;石毓君;刘长安;龚建平;简华刚;丁雄 刊期: 2006年第20期

  • 银杏叶含药血清的抑菌活性试验

    目的 考察银杏叶及其含药血清的抑菌活性效果.方法 采用低抑菌浓度(MIC)测定方法和抑菌活性试验.结果 银杏叶提取液(GBE)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、变形杆菌、幽门螺杆菌均有较强的抑制作用,其MIC分别为8%,6%,5%,6%,6%的GBE浓度.结论 GBE抑菌活性为低敏,而其含药血清基本无抑菌效果.

    作者:梅林;石开云;胡承波;龙春 刊期: 2006年第20期

  • 抗菌中草药的筛选及其有效成分的分离提取和初步鉴定

    目的 筛选抗菌中草药并分离鉴定其有效成分.方法 用纸片法筛选出具有明显抑菌效果的中草药,分别用渗漉法和索氏法粗提,进一步用离子交换树脂分离法和超滤法分离,后通过薄板层析纯化并初步鉴定抑菌有效成分.结果 苦参、地榆、冰片、丹参、田七、金银花等6种中草药具有较好的抑菌效果,渗漉提取法好于索氏提取法,离子交换树脂分离法中水洗脱优于氨洗脱,初步鉴定出的抑菌有效成分有生物碱、黄酮类、酚类和醌类物质.结论 地榆、冰片和苦参有较好的抑菌效果,并且其抑菌有效成分易被分离提取.

    作者:王航;孟春;石贤爱;陈东仕 刊期: 2006年第20期

  • 不同厂家辛伐他汀口服制剂溶出度比较

    目的 考察国内不同厂家辛伐他汀口服制剂的体外溶出度情况,并同默沙东公司产品进行比较.方法 色谱柱为Waters symmetry C18柱,流动相为乙腈-pH值为4.5的0.025 mol/L磷酸二氢钠(65:35),流速为1.6 mL/min,检测波长为238 nm,测定不同厂家的9个品种的体外溶出度,采用SPSS对各组之间溶出度值的方差齐性进行检查.结果 辛伐他汀浓度线性范围是1.592~25.47 μg/mL(r=0.999 9),平均加样回收率为99.8%(RSD=0.68%),各个品种的溶出度都大于80%,但各组溶出度方差差异较大.结论 不同厂家辛伐他汀口服制剂溶出度都符合要求,但溶出度均一性差异较大,舒降之各样品之间的体外溶出度差异小.

    作者:刘治安;汤远亮;李红玲;莫炫永;姚国新 刊期: 2006年第20期

  • 高效液相色谱法测定丹皮酚-β-环糊精包合物片的含量

    目的 采用高效液相色谱法(HPLC法)测定丹皮酚-β-CD片中丹皮酚的含量.方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(60:40)为流动相,检测波长为274 nm.结果 丹皮酚进样量在0.20~1.0 μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 9,平均加样回收率为100.9%,RSD=0.38%(n=6).结论 HPLC法方便快捷,准确,灵敏度高,重现性好.

    作者:杨宗发 刊期: 2006年第20期

  • 益母调经合剂的制备及临床应用

    目的 制备益母调经合剂,探讨其临床应用.方法 采用薄层色谱法(TLC法)鉴别方中的益母草、丹参,并观察制剂的临床疗效.结果 在薄层色谱图中可准确鉴别出益母草、丹参,经临床210例妇科患者使用,总有效率为95.24%.结论 该制剂组方合理,临床疗效显著.

    作者:柴清军;潘国良;马艳平;张付轩;崔晓战 刊期: 2006年第20期

  • 吸毒者与青少年苯二氮(艹卓)类药物滥用情况调查分析

    目的 促进精神药物的管理.方法 对重庆市精神卫生中心住院自愿戒毒者528例和重庆市万盛区两所中学学生457人的苯二氮(艹卓)类药物滥用情况进行调查分析.结果 苯二氮(艹卓)类药物滥用现象已在青少年和吸毒人群中占相当比例,分别占15.92%和99.06%,特别是吸毒人员更为突出.结论 应加强该类药品的管理,普及药物依赖基本知识.

    作者:牟元云;任军;汪涛 刊期: 2006年第20期

  • 骨髓增生异常综合征并发自身免疫性疾病2例临床分析

    目的 探讨骨髓异常增生综合征(MDS)并发自身免疫性疾病的发病特点及治疗学特点.方法 回顾性分析2例MDS并发自身免疫性疾病患者的临床资料及相关资料.结果 2例MDS并发自身免疫性疾病患者均存在长期免疫功能异常.结论 MDS与自身免疫性疾病可能互为因果,免疫抑制剂对MDS尤其有免疫异常的MDS治疗有效.

    作者:田杨;张淑慎 刊期: 2006年第20期

  • 正交试验法优选柴胡醇沉工艺

    目的 确定柴胡的醇沉工艺.方法 以柴胡皂苷a含量为指标,采用正交试验法优选柴胡的醇沉工艺.结果 药液浓缩至比重为1.15,加1.5倍量95%乙醇,醇沉温度28℃,醇沉时间24 h,可使柴胡皂苷a含量达0.30%.结论 正交试验结果可为柴胡醇沉工艺的确定提供实验依据,工艺经生产实践检验,切实可行.

    作者:徐新 刊期: 2006年第20期

中国药业杂志

中国药业杂志

主管:国家食品药品监督管理局

主办:重庆市食品药品监督管理局