廖怀伟;韩超;刘丽忠;曹闽军
目的:制备特异性抗组氨酸标签(His-tag)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以合成的15个组氨酸的多肽耦联牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫Balb/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性克隆及有限稀释法进行克隆化,用Protein G柱亲和纯化抗体及ELISA 检测纯化抗体的效价、相对亲和力及抗体亚类,用ELISA及Western blotting对mAb的特异性进行鉴定,并与含His-tag的重组蛋白特异性抗体配对建立双抗夹心ELISA定量检测对应的重组蛋白。结果筛选出5株能稳定分泌抗 His-tag的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1(κ),其中1-G2亲和力高(1.27×1010),并且1-G2在ELISA及 Western blotting中能与不同类型的含 His-tag的重组蛋白结合,能与降钙素原(PCT )抗体构建双抗夹心ELISA定量检测含 His-tag的PCT重组蛋白,灵敏度达到4.6 ng/mL。结论成功制备了特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗His-tag的mAb ,该抗体能应用于ELISA及 Western blotting等多种 His-tag的检测方法,为蛋白质研究检测、定位、相互作用等提供了工具。
作者:戚大梁;王强;易维京 刊期: 2013年第32期
目的:寻找糖尿病肾病敏感的血浆分子标志物。方法对8例早期糖尿病肾病患者的血浆和正常血浆进行蛋白质组学荧光差异双向电泳(2-D DIGE)分析,选择表达差异大于1.5倍的蛋白斑点进行质谱分析。结果成功建立糖尿病肾病和正常血浆的胶内差异双向凝胶电泳图谱,通过分析共鉴定出13种差异蛋白质,包括C3补体、C4补体、载脂蛋白E等。结论2-D DIGE能够客观地显示糖尿病肾病与正常血浆之间的蛋白质表达差异,本研究鉴定的13种蛋白有可能为糖尿病肾病的早期诊断提供潜在的血浆分子标志物。
作者:卢洪梅;汤水福;胡坤华 刊期: 2013年第32期
目的:动态监测颞叶胶质瘤患者术后颅内压(ICP)的变化,探讨持续ICP监测在其术后的价值。方法收集该科2011年1~11月的77例颞叶恶性胶质瘤患者(Ⅲ级37例,Ⅳ级40例)术后ICP数值,观察术后ICP变化规律,探讨ICP与术后治疗及预后的关系。结果术后6h内ICP多波动于正常范围(5.76±5.42)mmHg;6~72hICP逐渐升高(10.51±10.21)mmHg;72h后ICP达峰值并趋向稳定(12.25±10.72)mmHg。与其他时间段比较,术后6h内ICP数值低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ICP监测能够早于临床观察,及时发现颅内高压,提高了颞叶胶质瘤术后治疗的安全性。
作者:康睿;陈刚 刊期: 2013年第32期
目的:探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠相关性哮喘的可能相关机制。方法 SD大鼠30只,随机分为对照组、RSV组和抗神经生长因子(NGF)组,每组10只。RSV组采用每周1次RSV滴鼻法复制RSV感染模型。抗NGF组先腹膜腔内注射山羊抗大鼠β-NGF抗体,3 h后按照RSV组相同的方法进行RSV感染。电镜观察肾上腺髓质细胞超微结构变化,ELISA检测血清NGF和肾上腺素浓度变化,免疫组织化学检测肾上腺髓质细胞NGF表达变化,RT-PCR检测肾上腺髓质细胞NF-L mR-NA表达差异。结果(1)电镜下 RSV组髓质细胞线粒体丰富,嗜铬颗粒浓度明显降低,细胞膜可见明显杵状突起生长现象。(2)ELISA结果显示,RSV组大鼠血清NGF浓度明显高于对照组和抗NGF组(P<0.05),而对照组和抗NGF组大鼠血清NGF浓度差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,RSV组和抗NGF组血清肾上腺素浓度明显下降(P<0.01);与抗NGF组相比,RSV组血清肾上腺素浓度明显下降(P<0.05)。(3)免疫组织化学显示,与对照组和抗NGF组相比,RSV组肾上腺髓质细胞NGF阳性表达明显增强;与对照组相比,抗NGF组肾上腺髓质细胞 NGF阳性表达也明显增强。(4)RT-PCR结果显示,与对照组相比,RSV组和抗NGF组肾上腺髓质细胞NF-L mRNA表达明显增强;与RSV组相比,抗NGF组肾上腺髓质细胞NF-L mR-NA表达明显减弱。结论 RSV感染相关性哮喘的发生可能与NGF诱导肾上腺髓质细胞向神经元细胞转化导致血清中肾上腺素浓度下降有关。
作者:王爱平;李秋根;汪俊;喻杰;夏莺;蔡金莲 刊期: 2013年第32期
目的:探讨慢性感染性创面的治疗。方法回顾性分析2000~2010年该院收治225例慢性感染性创面患者的临床资料。结果(1)慢性感染性创面以创伤性溃疡、压疮、术后溃疡、糖尿病性溃疡、血管性溃疡为主,占80.4%(181/225)。(2)创面细菌培养阳性率为87.1%(196/225),共培养46种,342株病原菌,革兰阳性菌40.6%(139/342),革兰阴性菌57.6%(197/342),真菌1.8%(6/342),以金黄色葡萄球菌(52株)、大肠埃希菌(43株)、铜绿假单胞属(44株)、肺炎克雷伯(27株)等为主,对青霉素、红霉素、氨苄西林、庆大霉素、复方新诺明等高度耐药,多重耐药率达37.1%(127/342)。从2007年后慢性创面及多重耐药菌呈迅速增加趋势。(3)201例行局部抗菌药物治疗,208例(49例行再手术)行手术封闭创面治疗,213例治愈,12例因经济等原因未愈出院。结论慢性创面感染受多种因素共同影响,注重清创,合理的选择,循环、交替使用抗菌药物以及创面床准备,早期手术封闭创面,能有效控制创面感染,促进创面愈合。
作者:陈文海;果磊;王灿;蒲晓姝;魏东山 刊期: 2013年第32期
目的:探讨以单腔气管导管插管法行Robertshaw双腔支气管插管的可行性。方法选择80例ASAⅠ~Ⅱ级需行双腔支气管插管的胸科手术患者,随机分为单腔气管导管插管法组(A组)和传统插管法组(B组),每组40例。分别观察两组患者插管一次到位的成功率及插管并发症发生率。结果 A组患者插管一次到位成功率明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组插管并发症发生率低于B组,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论以单腔气管导管插管法行Robertshaw双腔支气管插管较传统插管法一次到位成功率高,插管并发症发生率低,安全可行。
作者:卢增停;马钧阳;曾丽蓉;钟梅英 刊期: 2013年第32期
目的:应用实时荧光PCR法检测临床标本中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA )。方法收集40份分离鉴定含有M RSA的临床标本,应用实时荧光PCR法检测标本中的mecA基因和nuc基因,并与vitek2-compact细菌快速培养和药敏检测系统、M RSA鉴定培养基结果进行比较。结果实时荧光PCR法检测出36份mecA基因、nuc基因均为阳性的含有M RSA的临床标本。实时荧光PCR法与vitek2-compact细菌鉴定、M RSA鉴定培养基检测临床标本中的M RSA具有较好的一致性, MRSA检出率分别为90%、100%和95%,三者差异无统计学意义(χ2=7.62,P>0.05)。结论实时荧光PCR法检测临床标本中的mecA基因和nuc基因,可以直接、有效地筛查M RSA ,可免去培养、常规生化鉴定,为临床上M RSA的检测提供一种快速、有效的方法。
作者:方莉;龙思琪;许媛;唐中;赵维皎;黄义山;廖涛 刊期: 2013年第32期
目的探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在脑星形细胞肿瘤中的表达与肿瘤侵袭性的相关性。方法用免疫组化检测PDCD4在脑星形细胞肿瘤中的表达情况,同时通过测量核磁共振影像上的瘤周水肿低信号范围,并与免疫组化表达结果作比较分析。结果在星形细胞肿瘤中随着肿瘤的恶性程度的增加,PDCD4表达下调;肿瘤恶性程度与肿瘤侵袭性指标MRI扫描图像上表现的瘤周水肿低信号范围分级呈正相关(P<0.05),而PDCD4表达与肿瘤侵袭性指标MRI扫描图像上瘤周水肿低信号范围分级呈负相关(P<0.01)。结论PDCD4可以作为脑星形细胞肿瘤的预后判断指标和侵袭指标之一。
作者:万志先;王雄伟;董元训;汪雷;田春雷;王旭光 刊期: 2013年第32期
由于我国Rh(D)阴性人口只占0.2%~0.3%[1],所以,Rh (D)阴性血液库存普遍不足;即使建立Rh(D)阴性稀有血型血库或将日常富余的 Rh (D )阴性血液制备成冰冻红细胞保存[2],也难以及时满足所有 Rh (D )阴性患者的抢救用血。关于Rh (D )阴性患者的科学安全输血,兰炯采等[3-4]、郭祥萍等[5]专家学者也作了一些专题指导。在医疗纠纷日趋上升的今天,用Rh(D)阳性血液抢救Rh(D)阴性患者,现行法规没有明确规定。所以,即使是在面对生命垂危的R h (D )阴性患者,无法及时给予ABO同型Rh(D)阴性血液抢救时,医务人员也担心用Rh(D)阳性血液配合型输血抢救患者后会惹上医疗纠纷而不敢为之。因此,如何科学、有效地对R h (D )阴性患者给予Rh (D )阳性血液配合型输血抢救,同时又能避免发生医疗纠纷,也就成了大家关心的话题。本文作者就紧急给予 Rh (D)阳性血液配合型输血抢救Rh(D)阴性患者,从法规与技术方面的可行性进行探讨,使医院和医务人员能够积极主动、尽职尽责地抢救更多的Rh (D )阴性患者。
作者:李文平 刊期: 2013年第32期
目的:探讨经眉弓入路微创治疗前颅底和鞍区病变优点与疗效。方法回顾性分析该院2009年1月至2012年1月行眉弓入路微创治疗前颅底和鞍区病变28例(治疗组),与经额入路治疗26例(对照组)比较两种手术入路方法的临床疗效及各自的优缺点。结果治疗组切除肿瘤程度与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗组在手术时间、住院时间、输血等情况均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经眉弓入路具有损伤小、恢复快、痛苦小、操作时间短、住院时间短、花费少等优点,是目前显微手术中一项新技术,值得广泛应用。
作者:刘振波 刊期: 2013年第32期
目的:用不同种类液体对重度失血性休克大鼠进行复苏后,对比大鼠心肌组织中热休克蛋白(HSP)90α的表达、变化规律及大鼠生存率,为临床治疗失血性休克选择复苏液体提供参考。方法建立失血性休克大鼠模型,分别运用乳酸林格液、聚明胶肽注射液、高渗氯化钠右旋糖酐进行液体复苏,测定大鼠心肌组织中HSP90α蛋白的表达及大鼠死亡率。结果重度失血性休克后运用不同种类液体进行复苏,大鼠心肌组织HSP90α表达、大鼠死亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度失血性休克可以诱导大鼠心肌组织中HSP90α的表达,当用不同液体进行复苏后各组HSP90α的表达不同且具有一定的规律性,提示HSP90α作为一个重要的调控分子参与失血性休克后心肌组织的保护机制。
作者:杨晓鲲;徐明元;徐贵森 刊期: 2013年第32期
目的:分析脑胶质瘤患者的存活、预后影响因素。方法对该院2001~2010年收治的133例脑胶质瘤患者进行回顾性分析,选择患者的性别、年龄、手术前的K PS评分、病理分级、肿瘤长径、手术是否完全切除肿瘤、是否行术后放射治疗等因素进行单因素和多因素分析。结果全组患者中位随访时间36个月,随访率为93%,随访满3年者73例,1、2、3年生存率分别为93%、82%、70%,中位生存时间为62.7个月。多因素回归分析显示病理分级、肿瘤长径、是否行术后放射治疗对生存率有影响。结论高病理分级、肿瘤长径大于或等于6 cm的脑胶质瘤预后不良,手术治疗联合术后放射治疗可以提高脑胶质瘤的远期生存率。
作者:韦军葆;朱小东;陈龙;杨云利;黄江琼;刘颖新 刊期: 2013年第32期
目的:探讨某三级甲等医院实施抗菌药物专项整治活动成效。方法采用回顾性分析方法,对2011年7~11月(整治前)和2012年7~11月(整治后)抗菌药物临床应用相关数据进行统计分析。结果抗菌药物费用比例、门诊患者抗菌药物处方比例、住院患者抗菌药物使用率和抗菌药物使用强度分别由整治前的13.73%、16.97%、59.93%和72.71 DDDs/100人天下降到整治后的7.37%、13.83%、44.88%和40.08 DDDs/100人天;清洁手术预防使用抗菌药物各项指标极大改善;抗菌药物用药结构发生明显变化。结论经过抗菌药物专项整治,该院抗菌药物临床应用趋于合理,多项指标已符合卫生部规定,其整治经验值得借鉴。但仍存在一些问题,需引起重视。
作者:郑双江;张成志;李佳芯;吕富荣 刊期: 2013年第32期
从1950年我国正式实行护理中专教育开始,我国护理教育事业经历着不断的变革。其逐渐由护理中专教育的单一体系向护理专科教育、护理本科教育、护理研究生教育和其他继续教育形式并存发展的这一综合体系的转变[1]。护理本科教育作为我国高等护理教育未来发展的主体,肩负着发展护理专业、提高专业水平的重要使命。临床护理实践环节是护理本科教育的一个重要组成部分,是培养护理本科生实践技能的关键阶段。临床带教老师是学生实习过程中的重要支持,是学生专业自我概念形成的重要影响人士[2]。因此,临床带教老师素质的高低直接影响着临床护理教学的任务能否顺利完成。本研究通过德尔菲专家咨询法和层次分析法构建合理的准入指标体系,意在对河南省本科护理教育临床护理师资队伍的建设收集意见和建议,并提供有益的参考。
作者:侯睿;杨培常;张艳 刊期: 2013年第32期
目的:了解新生儿及成人ABO血型系统中,A、B、O血型红细胞上A、B、H抗原强度的差异。方法将标准血清倍比稀释,采用试管法检测被测标本红细胞与不同稀释度标准血清的凝集强度直至阴性。将各标本与不同稀释度血清凝集强度计分并累计,后总积分用SPSS 13.0软件行统计学分析。结果新生儿A、B、H抗原强度均显著低于成人;无论是新生儿还是成人,A抗原的表达强度显著高于B抗原;成年男性与女性之间A、B、H抗原强度无显著差异。结论新生儿与成人之间A、B、H同种抗原强度存在显著差异,抗原种类对A、B、H抗原强度有影响,性别对成人A、B、H抗原强度没有影响。
作者:陆华;肖瑞卿;隆晓秋 刊期: 2013年第32期
目的:探讨改良低张法肠系超声造影在老年小肠疾病患者检查中的应用价值。方法 A组为临床可疑28例小肠疾病患者和常规腹部超声检查可疑肠道肿瘤患者8例,行甘露醇法、低张法、改良低张法肠系超声造影对比。B组为37例经胃镜或X线钡餐造影确诊的十二指肠球部溃疡、息肉、降部憩室患者行饮水法、低张法、改良低张法肠系超声造影对比。结果 A组病灶检出从9例增加到12例,B组病灶检出率从13例提高到33例。改良低张法肠系超声造影比传统造影更加明显地消除肠道气体,更充分弛张肠腔,提高病灶检出率。结论改良低张法肠系超声造影可作为老年小肠疾病患者诊断的常规检查方法。
作者:曾南萍;曾玲;张和林;易斐;肖丽敏;祝中荣;吴艳红 刊期: 2013年第32期
神经阻滞和神经毁损是癌痛药物三阶梯治疗的有效补充手段,是晚期癌性疼痛治疗的“第四阶梯”[1],其作用机制是应用乙醇使神经细胞脱水、变性,细胞凝固、凋亡和神经纤维脱髓鞘作用达到毁损神经节及纤维,阻断疼痛的传导,达到镇痛目的[2]。近10年来,C T引导下进行腹腔神经丛阻滞治疗腹部疼痛已经被越来越多的疼痛科医生所采用,相对于阿片类镇痛药物,其镇痛效果显著、镇痛持续时间长,不良反应少和无成瘾性的特点逐渐被疼痛患者接受和认可。本科2010~2011年对26例癌症中晚期疼痛患者进行治疗,取得了满意的长期临床镇痛疗效,现报道如下。
作者:苏琳 刊期: 2013年第32期
目的:观察温针灸配合推拿治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法将72例受试患者分为治疗组(温针灸配合推拿)36例,对照组(推拿)36例。于治疗前和治疗4个疗程后对两组患者的膝关节疼痛程度、膝关节运动功能进行评定。结果治疗组总有效率94.45%,对照组83.33%,两组比较差异有统计学意义( P<0.05);治疗组与对照组患者的视觉模拟评分(VAS)、Lysholm膝关节评分组内对比差异有统计学意义(P<0.05);VAS、Lysholm膝关节评分组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论温针灸配合推拿能有效缓解膝关节骨性关节炎患者的疼痛症状和改善运动功能。
作者:黄科 刊期: 2013年第32期
目的:探讨Caveolin-1和增殖细胞核抗原(PCNA)在食管鳞癌中的蛋白表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法分别检测150例食管鳞癌组织和35例正常食管黏膜组织(距离癌灶边缘5 cm以上经病理证实)中Caveolin-1和PCNA蛋白表达情况。结果 Caveolin-1蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显高于正常食管黏膜组织(P<0.05),且其表达与淋巴结转移密切相关;PCNA蛋白在正常食管黏膜组织中的表达明显低于食管鳞癌组织(P<0.05),且其蛋白表达与患者年龄、淋巴结转移和肿瘤长度密切相关;Caveolin-1和PCNA蛋白的表达呈正相关(r=0.266,P<0.05)。结论 Caveolin-1与 PCNA蛋白过表达可能与食管鳞癌的发生、发展以及浸润转移有关。
作者:赵醒;焦春敬;李春辉;胡潺潺 刊期: 2013年第32期
肝硬化腹水是肝硬化失代偿期常见的临床表现[1],是多种慢性肝损害动态发展的严重阶段[2],属中医“鼓胀”、“肿胀”等病的范畴,以“腹大如鼓,皮色苍黄,腹部青筋显露”为特征,为中医四大危重症之一。目前西医对该病仍未取得理想的治疗效果且复发率高,而中医从整体观念辨证论治和特色治疗出发,取得了一定的疗效。本文将对近年来肝硬化腹水的中医药治疗情况进行概述。
作者:夏莉(综述);祝峻峰(审校) 刊期: 2013年第32期