学术投稿

Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测布鲁菌病的研究

刘艳红;王清

关键词:Taqman MGB探针, 荧光定量PCR, 布鲁菌, DNA
摘要:目的 建立血液标本布鲁菌DNA荧光定量检测方法,探讨其临床应用价值.方法 用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染DH5a菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在布鲁菌基因组IS711序列设计一对引物和TaqMan MGB探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,并对该方法进行评价.结果 建立的布鲁菌DNA荧光定量PCR方法低检出率为400拷贝/ml;批内误差为1.8%~6.5%,批间误差为2.6%~9.1%;在4.0×102~4.0×108拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性(Ct =-1.391 1 Ln (x) +41.65,r=-0.995 8);具有较好的稳定性.在布鲁菌临床监测中发现,157份血液标本,用荧光定量PCR检测与临床检查结果(临床阳性、慢性期患者、症状可疑、阳性畜周围人群与重点职业人群(重点人群)的阳性率和阴性对照的符合率分别为90.3%、40%、6.7%、12.2%和100%.结论 建立的荧光定量PCR检测方法能鉴定布鲁菌种属,具有良好的特异性、灵敏度和稳定性.在临床布鲁菌基因诊断方面具有重要意义.
现代预防医学杂志相关文献
  • 小儿支原体肺炎87例临床分析

    目的 分析小儿支原体肺炎的临床表现、临床诊断与治疗方法,以提高对该病的认识.方法 选择某院1998年9月~2011年9月87例小儿支原体肺炎患儿的临床资料进行回顾性分析.结果 本组87例患儿中<1岁10例,占11.49%;1~3岁21例,占24.13%;3~6岁41例,占47.13%;>6岁15例,占17.24%;诊断情况为40例伴有喘鸣音,占46.%;36例患儿伴有呼吸音减低,41.38%;同时发生肺外并发症40例,占46.%;采用酶联免疫分析进行MP-IgM检测,显示为阳性.X线平片检查符合支原体肺炎的诊断标准.所有患儿均给予阿奇霉素治疗,68例在2个疗程内临床症状明显好转,其余19例患儿经甲基泼尼松龙静脉滴注,12例治疗有效.另有7例患儿治疗所有症状未见缓解,加用400mg/(kg·d)丙种球蛋白治疗,本组患儿中治愈68例,好转2例,无效17例,总有效率79.31%.结论 小儿支原体肺炎不受季节、年龄的限制,任何季节、任何年龄均可发病,由于缺乏特异的临床表现,因此,应通过实验室检验、临床体征结合X线进行综合分析,当常规抗生素治疗无效时,应及时行肺炎支原体感染检查.阿奇霉素是小儿支原体肺炎的有效药物.

    作者:张仲祥 刊期: 2013年第07期

  • 成都市武侯区食源性疾病危险因素主动监测网的监测结果分析

    目的 对成都市武侯区食源性致病因素监测网的监测结果进行分析.方法 2008~2010年在全区12个监测点采集并检测13大类共1 042件食品样品.结果 2008~2010年共检测食品1 042份,合格888份.总合格率为85.22%;各年度标化合格率分别为77.65%、81.58%和84.46%;水产品合格率54.76%,豆制品合格率62.64%;大肠菌群超标、菌落总数超标、甲醛残留及镉超标共占不合格项目总数的近80%;城乡标化合格率分别为86.09%、85.18%和82.28%.结论 2008~2010年成都市武侯区食品卫生水平趋于上升,主要问题在于微生物超标、重金属超标以及甲醛残留,且城乡之间食品卫生水平存在差异.

    作者:何伟;郑森平 刊期: 2013年第07期

  • 儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征局部治疗疗效分析

    目的 探讨局部治疗手段对OSAHS患儿的疗效.方法 对175例儿童OSAHS患者进行局部治疗,治疗前后行PSG检查,并对呼吸紊乱相关指标结合临床症状改善情况进行综合分析.结果 ①保守治疗后患儿家长描述症状改善;②治疗后体征明显改善,双下鼻甲、扁桃体、腺样体缩小;③治疗前后呼吸紊乱指数(apnea hyponea index,AHI)、低血氧饱和度(LSaO2)等差异有统计学意义(P<0.05).结论 局部治疗对OSAHS患儿疗效较好,能较好解除因扁桃体、腺样体肥大造成的小儿鼻腔及鼻咽部阻塞,且所承担的风险、对患儿的损伤也较小,是一种值得推广的治疗方法.

    作者:蒋先雁;张晓晴;周锦;曾萍 刊期: 2013年第07期

  • 乌海市2010年人间布鲁氏菌病现况的调查与分析

    目的 了解乌海市人间布鲁氏菌病的发病情况.方法 对全市从事饲养(牛羊)、放牧、屠宰、乳肉加工、销售、贩卖、兽医防疫等7~70岁与牲畜有密切接触史的1 800名重点人群进行流行病学调查、血清学检测及防治知识知晓率调查.结果 调查新发病例8例,报告发病率为1.57/10万,重点人群感染率为0.44%,布病防治知识知晓率为14.32%.结论 人间布病疫情增高趋势明显,要进一步加强疫情监测力度,落实各项防控措施.

    作者:白莉萍;黄喜平;董雅龙 刊期: 2013年第07期

  • 白藜芦醇抑制人肺癌A549细胞生长过程中长链非编码RNA BC043009的作用

    目的 探讨白藜芦醇抑制人肺癌A549细胞生长过程中长链非编码RNA BC043009的作用.方法 运用CCK-8检测白藜芦醇对人肺癌A549细胞的生长抑制作用,运用实时荧光定量PCR检测BC043009在A549细胞及人类正常支气管上皮细胞16HBE中的表达水平.瞬时转染siRNA(小分子干扰RNA)下调BC043009的表达水平,检测BC043009表达水平下调对A549细胞增殖能力的影响.结果 白藜芦醇能有效抑制A549细胞生长并存在剂量反应关系.与16HBE相比,A549细胞中BC043009的表达水平升高(21.81±6.25)倍;白藜芦醇处理后A549细胞中BC043009的表达水平下降到(3.80±2.30)倍.瞬时转染siRNA-2后BC043009的表达水平下降到(0.10±0.03)%,增值率下降到(0.87±0.07)%.结论 BC043009在A549细胞中高表达,白藜芦醇可降低A549细胞中BC043009的表达水平,BC043009表达水平的降低会使A549细胞的增殖能力下降,推断BC043009在白藜芦醇抑制人肺癌A549细胞生长过程中可能发挥重要作用.

    作者:刘斌斌;韩志远;蒋义国 刊期: 2013年第07期

  • 孟鲁司特协同布地奈德治疗哮喘的增效减副临床研究

    目的 观察探讨孟鲁司特协同布地奈德治疗支气管哮喘的增效减副的效果与作用机制.方法 90例支气管哮喘患儿随机分为3组,分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,每组各30例,Ⅰ组患儿每次吸入布地奈德200 μg,2次/日;Ⅱ组口服孟鲁司特4~5 mg,每晚1次;Ⅲ组每次吸入布地奈德200 μg,2次/日,每次口服孟鲁司特4~5 mg,每晚1次,3组均治疗12周,比较3组临床疗效、症状缓解时间、肺功能改善、治疗期间急性发作次数与时间的差异.结果 Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组的显效率分别为46.67%、43.33%和76.67%,Ⅰ组与Ⅱ组差异无统计学意义(x2=0.0673,P>0.017),Ⅰ组明显小于Ⅲ组(x2=5.7109,P<0.017),Ⅱ组明显小于Ⅲ组(x2=6.9444,P<0.017).3组均未发生严重不良反应.结论 孟鲁司特联合小剂量布地奈德吸入治疗支气管哮喘,可达到增效减副作用,推荐作为儿童支气管哮喘治疗方案.

    作者:郭敬民;邱君;陈要;欧萍;连大华 刊期: 2013年第07期

  • 宝山区2010~2011年水痘暴发疫情分析

    目的 了解宝山区近两年的水痘暴发情况及暴发点水痘疫苗接种情况,为水痘疫情的防控提供参考依据.方法 对2009年10月~2011年9月发生在上海市宝山区的水痘暴发疫情进行描述性分析,并对突破病例与自然感染病例的临床症状进行比较.结果 宝山区近两年的水痘暴发疫情主要发生在学校和幼托机构,各暴发点罹患率在0.35%~5.88%之间;61.5%的暴发病例分布在6~11岁;暴发病例中有明确的水痘疫苗接种史者占26.87%; 93.27%的突破病例接种间隔在3年以上;突破病例的临床症状轻于自然感染病例.结论 目前宝山区水痘暴发疫情的防控形势严峻,应严格落实各项防控措施,通过扩大卫生宣传、提高水痘疫苗免疫接种率、并适时地推广水痘疫苗的应急接种和加强接种策略等综合性措施,有效防止水痘的暴发流行.

    作者:杨佳平;李明珠;李晓军;朱江;吴铭;陈永君;赵世莹 刊期: 2013年第07期

  • 武陵山区小城镇机关事业单位体检人员血脂异常分析

    目的 了解鹤峰县机关事业单位健康体检人员血脂异常的分布特点,为血脂异常防治工作提供依据.方法 对2010年全县机关事业单位共5 043名干部职工健康检查结果进行统计和分析.结果 血脂异常2 563人(50.82%),年龄分布在22~91岁,差异有统计学意义(P<0.05);男性血脂异常检出率高于女性,男女比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血脂异常的发生与年龄、性别有关,提示合理饮食、加强体育锻炼对血脂异常的防治有重要意义.

    作者:王银洲;向娅妮;沈杰;张腊英;林坤平;骆渊海 刊期: 2013年第07期

  • 浙江省新生代农民工社会支持状况的调查

    目的 了解浙江省新生代农民工社会支持的状况.方法 采用分层抽样的方法,依据社会支持量表测定浙江省930名新生代农民工的社会支持状况,并与第一代农民工和15~30岁的城市对照组进行比较.结果 新生代农民工社会支持总分低于第一代农民工和城市对照组,婚姻状况对社会支持的影响较大.对婚姻分层分析后表明,已婚新生代农民工的社会支持低于城市对照组,未婚者低于第一代农民工和城市对照组,离异或丧偶者差异无统计学意义(P>0.05).结论 新生代农民工的社会支持水平较低,需提高其社会支持状况,促进城市融入,以维护社会的稳定和城市的长治久安.

    作者:邢海燕;于伟;陈三妹;谈荣梅;赵伟英 刊期: 2013年第07期

  • 血清脑钠肽水平对心肺复苏后脑损伤的预测价值研究

    目的 探讨血清脑钠肽(BNP)对心肺复苏后脑损伤的预测的价值.方法 34例经心肺复苏后自主循环恢复的患者,以心肺复苏成功后2个月格拉斯哥昏迷评分(GCS)≥12为轻度脑损伤(Ⅰ组),男6例,女8例;9≤GCS≤11为中度脑损伤(Ⅱ组),男4例,女6例;3≤GCS≤8为重度脑损伤(Ⅲ组),男5例,女5例.另外选取14例健康者(女8例,男6例)作为对照组.所有患者均在自主循环恢复后2、8、12、24及48 h分别采集静脉血,用酶联免疫吸附法检测血清脑钠肽.结果 心肺复苏组和对照组在年龄、性别、停搏至复苏开始时间等方面比较差异均无统计学意义(P>0.05);在2、8、12、24及48 h血清脑钠肽水平对比中,Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ组明显高于对照组(P<0.05);而试验组中,Ⅰ组明显低于Ⅱ组(P<0.05);Ⅱ组又明显低于Ⅲ组(P<0.05).结论 血清脑钠肽水平能反映心肺复苏后早期缺血缺氧性脑损伤,对心肺复苏后脑复苏的评估有重要的价值.

    作者:李钦浩;巩晓娜;周娆娆;刘朋;张磊;亓雪梅;蒋芳杰 刊期: 2013年第07期

  • 嘉禾县2009~2011年3046例狂犬病暴露者的流行病学调查

    目的 了解2009~2011年嘉禾县狂犬病暴露者流行病学特征,为加强狂犬病控制策略提供依据.方法 对3046例狂犬病暴露者的相关资料进行分析.结果 2009~2011年嘉禾县疾病预防控制中心预防接种门诊部共接种暴露人群3 046例,其中男性1 858人,女性1 188人,男女之比为1.56∶1.年龄小的2月,大的88岁.0~15岁年龄组受伤多,占37.75%其次是30~岁组占19.27%.暴露者的时间分布主要在8月份,占11.62%,少的为12月,占5.71%.暴露者中以下肢受伤居多,占50.72%;其次为上肢,占38.35%.暴露级别主要以Ⅱ级为主,占77.08%.伤后能在24 h内注射狂犬病疫苗者占94.39%.暴露者中主要是犬致伤的,占81.35%.结论 2009~2011年嘉禾县狂犬病暴露人群较多,要减少狂犬病的发生,受伤后要及时、彻底清洗消毒伤口,全程接种狂犬疫苗,同时要加强狂犬病的健康教育和犬类管理,以降低狂犬病的发病率.

    作者:李友;朱劼;刘红;曹亮 刊期: 2013年第07期

  • 青年伏案工作者颈椎病的发病特点及预防措施

    目的 通过分析青年伏案工作者颈椎病的发病特点,探讨提前采取有效措施预防颈椎病的重要意义,以降低颈椎病在青年伏案工作者中的发病率.方法 选取2009年9月~2010年9月来中国医科大学附属第一医院骨科门诊就诊的995例病人,对他们的病史、生活习惯进行详细的调查,完善相关体格检查和影像学检查,年龄在35岁以下的患者归为青年组,年龄在35岁以上的归为非青年组,并从颈椎病占就诊患者比例、不同工作年限颈椎病的发病率以及颈椎病患者的发病危险因素三方面进行比较.结果 青年组中颈椎病占就诊患者比例为29%,非青年组为15%,P<0.05,差异有统计学意义.青年人从事伏案工作时间越长,颈椎病发病率越高,发病危险因素对劲椎病发病率有明显影响.结论 青年人颈椎病发病率明显升高,特别是伏案工作者,应该提前采取预防措施以减低颈椎病在青年人群的发病率.

    作者:黄涛;张方;李修成;邹春平;冯殿鹏 刊期: 2013年第07期

  • 综合性医院消化道症状首诊的艾滋病临床分析

    目的 探讨艾滋病消化道临床表现特点,减少艾滋病延诊及漏诊.方法 回顾性分析2009年1月~2011年11月某综合性省级医院以消化道症状首诊的32例艾滋病患者临床资料.结果 32例患者中,20例(62.5%)有院外就诊史并漏诊;32例(100%)均有食欲减退,29例(90.6%)有消瘦,16例(50%)有发热;反复腹泻、多发淋巴结肿大、肝脾肿大、肝硬化病例分别为12例(37.5%)、9例(28.1%)、8例(25%)、3例(9.4%).17例(53.1%)有腹痛,其中无结石性胆囊炎4例(23.5%)、急性胰腺炎3例(17.6%)、肠梗阻1例(5.9%);CT提示肝内外胆管扩张1例(5.9%),经胃镜确诊消化性溃疡3例(17.6%)、慢性糜烂性胃炎1例(5.9%),4例(23.5%)可能与肠道病变、腹膜炎、腹腔占位有关.结论 艾滋病消化系统临床表现具有多样性,综合性医院临床医生需提高对艾滋病相关消化系统临床表现认识,减少艾滋病漏诊与延诊.

    作者:张玲玲;黄国美 刊期: 2013年第07期

  • 贵阳市成年健康女性跟骨强度与日本标准值比较研究

    目的 了解贵阳市成年健康女性的跟骨强度情况,以及日本的标准值是否适合本人群,为骨质疏松的防治及诊断标准的制定提供参考依据.方法 采用定量超声的方法,测定贵阳市20~80岁健康女性居民右侧跟骨骨强度,共测定了2 344人,指标有骨强度指数(STI)、T值、Z值和相应年龄百分比.结果 骨强度指数有随年龄增加逐渐下降的趋势,峰值出现在22岁年龄组;按照仪器诊断标准,骨量降低的人数比例有随年龄增加的趋势,而骨质疏松率自55岁组之后增加较快,骨质疏松总的患病率为2.43%;除48岁组外,其余各组人群骨强度指数高于仪器日本标准值的人数比例均在60%以上,各年龄组的相应年龄%均值都在100以上,提示了贵阳市女性骨强度指数有高于日本标准值的趋势.结论 日本女性的骨强度标准值和诊断标准不适合本人群,确定适合本人群乃至全国的各年龄段骨强度标准值和骨质疏松的诊断标准还有待进一步调查研究.

    作者:殷明月;聂四平;石清明;杨光耀;陶霖 刊期: 2013年第07期

  • p75NTR、D2-40和P63在乳腺癌中的表达及HER-2基因检测中的应用

    目的 探讨p75NTR、D2-40和P63肌上皮标记物在乳腺纤维腺瘤、导管内癌和浸润性导管癌中的表达,鉴别乳腺癌组织中浸润性导管癌与导管内癌并检测其HER-2基因状态.方法 用EnVision法对68例乳腺纤维腺瘤、导管内癌和浸润性导管癌分别进行p75NTR、D2-40和P63免疫染色,用FISH技术检测28例乳腺癌组织中浸润性导管癌和导管内癌的HER-2基因状态.结果 p75NTR、D2-40、P63在乳腺纤维腺瘤与导管原位癌中的表达差异没有统计学意义,在导管原位癌与浸润性导管癌中的表达差异有统计学意义.同时对28例乳腺癌组织切片上的浸润癌和导管内癌部分进行HER-2基因检测,二者HER-2基因状态的一致率为7.14% (2/28).结论 联合使用p75NTR、P63和D2-40是比较理想的乳腺肌上皮细胞的标记物,应用这些抗体保证检测乳腺浸润性导管癌HER-2基因的准确性.

    作者:钟惠玲;吴叶菊 刊期: 2013年第07期

  • 前列腺电汽化术联合双侧睾丸切除术在治疗前列腺癌中的临床观察

    目的 探讨前列腺电汽化术联合双侧睾丸切除术在晚期前列腺癌中的临床效果.方法 回顾性分析某院自2006年采用前列腺电汽化术联合双侧睾丸切除术治疗晚期前列腺癌患者,总结并分析治疗前后尿流动力学及血清PSA变化.结果 术后3个月进行患者尿流动力学及血清水平情况明显改善,手术治疗后大尿流率(M FR)、平均尿流率(AFR)和残余尿(ARV)与手术前相比差异有统计学意义(P<0.05).术前、术后3个月复查血前列腺特异性抗原(PSA)水平差异有统计学意义(P<0.05).结论 在晚期前列腺癌伴随尿路梗阻患者的治疗中,前列腺电汽化术联合双侧睾丸切除术同时给予雄激素阻断治疗可明显改善患者生活质量,延缓病情的进展.

    作者:任承德 刊期: 2013年第07期

  • 不同麻醉方法在HIV剖宫产手术中的应用效果观察

    目的 探讨不同麻醉方法在HIV感染孕妇剖宫产手术中的应用效果及安全性.方法 将16例人类免疫缺陷病毒(HIV)感染阳性妊娠孕妇随机分为两组各8例,其中使用单纯硬膜外麻醉的产妇为EA组,使用腰硬联合麻醉的产妇为CSEA组,比较麻醉效果、不良反应及T淋巴细胞亚群比值等指标变化情况.结果 CSEA组麻醉起效时间、麻醉完善时间明显快于EA组,两组比较差异存在统计学意义(P< 0.05); CSEA组麻醉效果优良率100.00% (8/8)稍高于EA组75.00% (6/8),但是比较差异无统计学意义(P> 0.05);CSEA组术中并发症发生率CSEA组稍高于EA组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05);新生儿1 min、5 min Apgar评分两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+两组术前及术后组间比较差异无统计学意义(P>0.05),CSEA组、EA组组内手术前后比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 硬膜外麻醉、腰硬联合麻醉用于HIV感染产妇剖宫产手术中均可行,麻醉安全性高,对免疫功能有轻度抑制作用,但差异并无统计学意义,相对腰硬联合麻醉较硬膜外麻醉具有更大优越性.

    作者:刘晓欧 刊期: 2013年第07期

  • 广东省大学生健康教育现况与健康知识认知情况调查

    目的 了解广东省大学生健康教育的现状和大学生对健康知识的掌握情况,以便为加强高校健康教育工作提供依据.方法 采用随机抽样方法,对广东省内10所高校的1 080个学生进行问卷调查.结果 70.5%的学生在学校接受过健康教育;88.5%的学生认为学校有必要开设健康教育课程;对健康知识问题进行计分评价,平均得分9.09±2.61;医学院校学生、女生、来自城镇学生、接受过健康教育和对健康教育重视程度高的学生对健康知识的掌握情况相对较好.结论 应加强高校的健康教育,提高大学生健康知识水平,促进其健康成长.

    作者:林见鑫;姚卫光;张茹茹;李晓雨;谢家明 刊期: 2013年第07期

  • 广州地铁三号线室内空气卫生状况调查

    目的 调查分析广州地铁三号线的室内空气卫生状况及其影响因素.方法 根据《公共场所卫生监测技术规范》的要求,对广州地铁三号线18个地铁站的站厅、站台和3列列车车厢的室内空气进行卫生监测.结果 部分地铁站和车厢的温度、噪声、照度、空气细菌总数不合格:(1)候车区少数检测点温度高于标准,车厢大部分检测点温度低于标准; (2)噪声超标情况较严重,超标率车厢(100%)>站台(66.67%)>站厅(36.67%); (3)少数站厅检测点照度低于标准; (4)空气细菌总数超标率站厅(14.44%)>站台(7.78%)>车厢(6.67%).结论 广州地铁三号线室内空气质量存在一些卫生问题,有待改进.客流量是导致理化指标超标和空气细菌污染物浓度升高的重要因素,加强地铁站空调系统卫生管理对于确保室内空气质量有积极意义.

    作者:刘慧;钟嶷;郭重山;李小晖;谭铭雄 刊期: 2013年第07期

  • 七氟醚麻醉对肾功能损伤保护作用的研究

    目的 探讨七氟醚在麻醉过程中对患者肾脏功能的影响,评价七氟醚麻醉应用于临床的安全性.方法 选择某院自2009年11月~2011年12月的1 500例行普外科手术的患者,按照患者登记的先后顺序,将偶数组患者作为七氟醚组(M组),奇数组患者作为地氟醚组(D组),每组750例.新鲜气流量1.2~4.0 L/min,吸入2~3 min,之后降至0.18~0.3L/min.M组和D组患者的呼气末浓度分别维持在2.7%~4.0%、6.0%~10.0%.监测呼吸环路内氟甲基二氟乙烯醚的浓度及吸入氧浓度.测定术前、术毕和术后2、24、72 h血清氟离子(F-)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度,测定术前、术毕和术后24、48、72 h尿中总蛋白(TP)、β2-微球蛋白(β2-MG)和N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平.结果 术后两组血清Cr、BUN浓度及尿NAG/Cr与术前比较差异无统计学意义(P>0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05).术后1,2,3d的尿液B-MG明显高于术前水平(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 七氟醚麻醉可以安全的应用于普通外科的手术过程中,对循环系统的影响较小,无明显的不良反应,对患者的肾功能无影响.

    作者:郭云亮;王建设;胡楠;范哲;方洁 刊期: 2013年第07期

现代预防医学杂志

现代预防医学杂志

主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 四川大学华西公共卫生学院