王维鹏；胡昌明；毕欣；袁海明
先证者男,27岁,婚后7年未育.身高180 cm,智力发育、表型及外生殖器均无明显异常.精液常规检查提示严重少精,否认腮腺炎病史.Y染色体AZF区及SRY基因检测未见异常.细胞遗传学检查:在征得其知情同意后抽取外周血样,常规进行淋巴细胞培养,制备染色体,G显带分析,计数50个分裂相,镜下分析5个核型,患者核型为47,XY,+mar(图1),其母亲核型为46,XX[33]/47,XX,+mar[7](图2).其父亲和妻子核型未见异常.夫妻二人于2015年8月借助卵胞浆内单精子显微注射技术成功怀孕,孕中期羊水穿刺检查未见胎儿染色体异常,于2016年5月剖宫产一健康女婴.
作者：王娜；刘丽丽；盛晴；许蓬 刊期： 2018年第01期
目的 构建人ABO血型A101、B101及其CisAB01、Ael05、B(A)04和Bw03亚型真核表达载体,为研究ABO血型基因及亚型基因的功能奠定基础.方法 从已知ABO基因分型的标本中(A101,B101)提取总RNA,将其逆转录合成cDNA,经特异性引物扩增目的基因片段,将其定向连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体;采用定点突变PCR的方法构建CisAB01、Ael05、B(A)04和Bw03亚型真核表达载体,通过测序鉴定其序列正确.将ABO血型A101、B101及其CisAB01、Ael05、B(A)04和Bw03亚型真核表达载体分别转染Hela细胞系,通过免疫荧光和Western印迹检测各ABO基因在细胞中的表达.结果 测序结果显示扩增到的A101及B101 cDNA以正确序列和方式插入载体,CisAB01、Ael05、B(A)04和Bw03亚型真核表达载体的测序结果显示相应位点均成功突变;免疫荧光和Western印迹结果显示A101、B101及其CisAB01、Ael05、B(A)04和Bw03亚型在Hela细胞中均有表达.结论 成功构建了ABO血型基因及亚型基因真核表达载体,体外转染Hela细胞成功表达糖基转移酶,为后续研究奠定了基础.
作者：冯智慧；胡彬；王同显；焦淑贤；逄淑涛 刊期： 2018年第01期
目的 对一个姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factor FⅫ,Ⅻ)缺陷症家系进行实验室表型和FⅫ基因突变的分析,探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及9名家系成员活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)等凝血常规功能、FⅫ活性(FⅫactivity,FⅫ∶C)和FⅫ抗原(FⅫantigen,FⅫ∶Ag)含量,进行表型诊断;用DNA直接测序法分析先证者FⅫ基因所有14个外显子、侧翼、5'和3'非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实突变.采用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,并同时采用4个生物信息学评分软件(PolyPhen-2,PROVEAN,SIFT和MutationTaster)分析突变对蛋白质功能的影响.结果 先证者(Ⅳ2)和哥哥(Ⅳ1)APTT明显延长(分别为61.6s和68.6s),FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别降低为12％、10％和11％、10％;先证者祖母(Ⅱ2)、外祖母(Ⅱ3)、父亲(Ⅲ2)、母亲(Ⅲ6)、大姑(Ⅲ1)和大姨(Ⅲ5) APTT正常,FⅫ∶C和FⅫ∶Ag均降低约为正常值的一半;先证者小姑(Ⅲ3)和大舅(Ⅲ4)各项指标及家系成员其它指标均正常.基因测序发现先证者(Ⅳz)和其哥哥(Ⅳ1)FⅫ基因第10外显子存在c.1078G＞A(p.Gly341Arg)纯合错义突变;先证者祖母(Ⅱ2)、外祖母(Ⅱ3)、父亲(Ⅲ2)、母亲(Ⅲ6)、大姑(Ⅲ1)和大姨(Ⅲ5)均存在p.Gly341Arg杂合错义突变;先证者小姑(Ⅲ3)和大舅(Ⅲ1)为正常野生型.ClustalX-2.1-win软件保守性分析结果表明,Gly341在同源物种间高度保守.4个生物信息学软件对该突变的预测结果一致:PolyPhen-2评分(0.934分)、PROVEAN评分(-6.214分)均预示为有害突变;MutationTaster评分(0.976分)预示可引起相应疾病;SIFT评分(0.01分)预示可影响蛋白质功能.结论 Gly341Arg纯合错义突变是该家系遗传性FⅫ缺陷症的分子发病机制,与先证者父母近亲结婚有关.
作者：杨丽红；金赛燕；季伟丹；程晓丽；李小龙；金艳慧；王明山 刊期： 2018年第01期
目的 探讨一个家族性腺瘤性息肉病(familial adenomatous polyposis,FAP)家系APC和MLH1基因的突变情况.方法 通过临床表现、家族史及组织病理学等诊断1例FAP女性患者.患者两年后出现子宫内膜上皮内瘤变(endometrial intraepithelial neoplasia,EIN),而后者是Ⅱ型Lynch综合征的病变之一.提取患者及其家系成员的外周血DNA,采用Sanger测序的方法筛查APC和MLH1基因突变.结果 该家系同时存在APC基因第7外显子的杂合性突变c.637C＞T(p.R213X)和MLH1基因第12外显子的杂合性突变c.1153C＞T(p.R385C).两种突变同时出现的情况既往未见报道.前者突变造成终止密码子提前出现,后者突变了造成氨基酸的改变.结论 同时出现的APC基因c.637C＞T (p.R213X)和MLH1基因c.1153C＞T(p.R385C)突变是该家系的致病性突变,其出现临床表现的年龄较晚,且严重程度存在差异.对于FAP患者,应询问其家族史并对APC基因进行突变筛查,同时关注其是否存在肠外病变.对于出现子宫内膜病变的患者,可进行MMR基因的筛查,以确定是否同时存在Lynch综合征.
作者：尚晨光；刘林枝；王小慧；董颖；张岩 刊期： 2018年第01期
目的 采用遗传病相关基因外显子测序的方法确定1例皮肤松弛症患儿的致病基因,并对其相关的临床表型及基因型进行总结.方法 收集先证者及其父母的临床资料,首先对先证者进行遗传病相关基因的外显子测序,确定了可能的致病突变,对先证者及其父母进行Sanger测序验证,确定基因突变位点.结果 先证者存在A TP6V0A2基因c.187C＞T(p.R63X)杂合突变和c.1189G＞C(p.A397P)杂合突变,先证者父母分别携带ATP6V0A2基因c.1189G＞C(p.A397P)杂合突变和c.187C＞T(p.R63X)杂合突变.结合患儿临床表型,诊断为常染色体隐性遗传皮肤松弛症2A型(autosomal recessive cutis laxa type 2A,ARCL2A).结论 通过遗传学方法确诊了ARCL2A型患儿,总结了ARCL2A患儿的典型临床特征,新突变的发现扩大了ATP6V0A2基因的突变谱.外显子测序可作为诊断复杂遗传病致病基因的重要工具.
作者：张平平；王昕；高志杰；刘晓雁；陈倩 刊期： 2018年第01期
孕妇29岁,G1P0,因“停经12+周、唐筛18三体高风险”前来咨询.既往体健,表型、智力正常,不嗜烟酒,孕期及孕前无不良接触史.其丈夫表型正常,夫妇非近亲结婚,否认家族遗传病史.辅助检查:唐筛:游离绒毛膜促性腺激素β亚单位(free beta subunit of human chorionic gonadotropin,free β-hCG) 2.10ng/mL,校正中位数0.03(参考范围0～2.5);妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy associated plasma protein-A,PAPP-A) 413.0mU/L,校正中位数0.11(参考范围＞0.43);颈项透明层(nuchal translucency,NT) 2.2 mm,校正中位数1.53;18三体风险值1∶119.孕12+周B超:胎儿颅内囊肿(0.8 cm×0.7cm),NT 2.2 mm.
作者：潘丽；苏文；林道彬 刊期： 2018年第01期
目的 分析伴15q11q13拷贝数重复的自闭症患儿的遗传学特点及基因型-表型对应关系.方法 应用染色体核型分析、染色体微阵列(chromosomal microarray analysis,CMA)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术联合对患儿及父母进行检测和验证.结果 核型分析提示8例患儿核型均携带标记染色体(supernumerary marker chromosome,SMC),2例患儿核型正常,但CMA结果显示其均在15q11q13区的拷贝数重复(前者为4个重复,后者为3个重复),且均覆盖Prader Willi/Angelman综合征关键区(Prader-Willi/Angelman syndrome critical region,PWACR).通过对其父母进行CMA检测,证实患儿在该区域重复均为新生突变,并应用Chromosome Analysis Suite Software软件对患儿及父母该区域单核苷酸多态性位点进行比对,证实患儿该拷贝数重复片段为母源性,诊断为15q11q13重复综合征.应用该区域特异位点FISH探针对核型分析显示携带SMC的患儿样本进行检测,证实了该SMC即为15q11q13拷贝数重复片段,且为两个拷贝,与CMA检测结果相吻合.结论 联合应用核型分析、CMA和FISH技术对临床10例自闭症患儿做出了诊断,并建立了临床表型与基因型之间的联系.
作者：王维鹏；胡昌明；毕欣；袁海明 刊期： 2018年第01期
目的 探讨将八探针荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)联合R显带染色体核型分析应用于儿童急性髓系细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)诊断的价值.方法 应用八探针FISH(AML1/ETO、PML-RARa、CBFβ/MYH11、MLL、P53、5q-、7/7q 、20q-等8种DNA探针)和R显带染色体核型分析技术,对214例AML患儿进行了联合检测.结果 八探针FISH技术在118例患儿中检出了细胞遗传学改变,总体阳性率为55.1％,包括AML1/ETO、PML/RARa、CBFβ/MYH11、MLL、P53、5q-、7/7q-、20q-等8种细胞遗传学异常.R显带核型分析检出染色体异常55例,阳性率为25.7％,其中4例染色体异常FISH未检出.两种方法检出阳性率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 八探针FISH技术较R显带染色体核型分析具有准确、高效、省时、省力等优点,可与染色体核型分析有效互补,并且每种细胞遗传学异常都可为儿童AML的诊断、预后评估和个体化治疗提供重要依据.
作者：赵鼎；李林飞；李娴；陈重芬 刊期： 2018年第01期
患者男,51天.发现血遗传代谢异常1月余,新生儿血遗传代谢病筛查结果示肉豆蔻烯酰肉碱(C14∶1)3.30 μmol/L(正常参考值:0.02～0.4 μmol/L),今来我院寻求诊治.查体及血液生化内分泌检查无阳性发现.血糖监测均正常.心电图示窦性心动过速.彩超示卵圆孔未闭.纳食夜眠可,精神佳,大小便正常.入院再次行血遗传代谢病筛查结果示肉豆蔻烯酰肉碱(C14∶1)2.20 μmol/L,仍明显偏高.经家属签署知情同意书后,抽取患儿及父母外周血2 mL,用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,送至郑州金域临床检验中心,应用QIAampDNA提取试剂盒(德国QIAGEN公司)抽提基因组DNA,通过PCR扩增并Sanger测序技术对受检者ACADVL(NM_000018.3)基因的外显子编码区进行直接测序.
作者：李林飞；刘洋利；赵鼎；陈重芬 刊期： 2018年第01期
例1孕妇,28岁,G1P0,孕17+4周时因无创DNA产前检测结果提示性染色体异常高风险来我院就诊.孕妇及其配偶非近亲结婚,否认有家族遗传史、有毒有害物质接触史.此次为促排卵后(因卵泡不破裂)妊娠.行羊膜穿刺羊水细胞培养,胎儿核型为48,XXXX.见图1.夫妻双方染色体检查均正常.
作者：李照侠；朱瑞芳；顾雷雷；张颖；薛原；李洁 刊期： 2018年第01期
目的 分析结节性硬化症患者的临床特征及基因突变,为产前诊断提供依据.方法 对临床诊断为结节性硬化症的10个家系的先证者的TSC1和TSC2基因编码区及其邻近的内含子区进行高通量测序.应用Sanger测序法对发现的突变进行验证,并针对致病突变进行产前诊断.结果 10例先证者均检出了突变,其中T SC1突变1例,TSC2突变9例(包括错义突变6例、无义突变2例、框移突变1例).为其中9例提供了产前诊断,发现1例突变阳性胎儿.结论 对10例结节性硬化症患者进行了基因突变分析,发现1例新突变(TSC2 c.2415_2416 insGT),为患病家系的遗传咨询和产前诊断提供了线索.
作者：潘玉纯；吴维青；罗彩群；谢建生；徐志勇；耿茜；郝颖 刊期： 2018年第01期
先证者男,27岁,其妻孕2产0,两次均于孕50+天发生胚胎停育.细胞遗传学检查:在获得其知情同意后,抽取双方的外周血样,常规细胞培养,收获制片,G显带分析.先证者核型为46,XY,t(7;13) (7pter→7q34∷13q22→ 13qter;13pter→ 13q22∷7q34→7qter)(图1),其妻核型为46,XX.先证者父母拒绝接受染色体检查.
作者：封纪珍；魏淑彦；杨会欣；李天洁 刊期： 2018年第01期
目的 分析Turner综合征患儿额外小标记染色体的来源与形态.方法 对于经过G显带染色体核型分析发现的5例带有额外小标记染色体的Turner综合征患儿,用双色荧光原位杂交技术进一步明确其额外小标记染色体的来源与形态.结果 5例患儿中有3例的额外小标记染色体来源于X染色体,2例患儿的额外小标记染色体来源于Y染色体.其中3例为X染色体来源的额外小标记染色体,2例为环状染色体,1例为染色体小片段状.标记染色体2例Y染色体来源的额外小标记染色体中,1例以环状染色体和带有双着丝粒的染色体两种形态存在,另1例为双着丝粒染色体.结论 存在额外小标记染色体的Turner综合征患儿,其标记染色体多数来源于性染色体,来源于X染色体的额外小标记染色体主要以环状形式存在,其次为染色体小片段;来源于Y染色体的额外小标记染色体主要以双着丝粒染色体形式存在,其次为环状染色体.对于带有额外小标记染色体的Turner综合征患儿,应进一步采用双色荧光原位杂交技术鉴定额外小标记染色体的来源,以指导遗传咨询及临床诊治方案的制定.
作者：刘楠；佟彤；陈悦；陈艳玲；蔡春泉 刊期： 2018年第01期
目的 探讨21-羟化酶缺陷症与男性睾丸发育不良的关系.方法 回顾分析8例男性不育患者的临床资料及其21-羟化酶基因的检测结果,总结其临床特征及治疗经验.结果 8例患者均表现为小睾丸(单侧睾丸平均体积为6.1mL),精液分析提示为无精或严重少精症.性激素检测卵泡刺激素、黄体生成素明显低于正常,睾酮正常或偏高,孕酮明显升高,促肾上腺皮质激素正常或偏高,皮质醇正常或偏低.3例伴睾丸肾上腺残余肿瘤.CT检查提示肾上腺皮质增生,5例呈腺瘤改变,1例呈肾上腺髓脂肪瘤.所有患者均给予地塞米松替代治疗.治疗3～6个月后,6例出现精子或精子浓度升高,5例的配偶成功妊娠.在8例患者中,共发现7个已知致病突变.结论 21-羟化酶缺陷症可导致男性睾丸不发育并损害生精功能,通过手术和地塞米松替代治疗可以取得良好的疗效.8例患者均为21-羟化酶基因复合杂合突变,均携带导致男性化表型的p.Ile172Asn致病突变.
作者：蒋波；马定远；陈欢欢；杨晓玉；崔毓桂；许争峰；刘嘉茵 刊期： 2018年第01期
目的 对两个中国人原发性限局性皮肤淀粉样变家系进行致病基因的突变鉴定.方法 在取得知情同意后,采集家系成员的外周血,使用酚-氯仿法提取基因组DNA;应用PCR扩增两家系先证者OSMR基因的全部17个外显子及外显子/内含子衔接区,通过Sanger测序鉴定候选致病突变;通过PCR-限制性片段长度多态性分析以及高分辨熔解曲线分析进行致病突变的家系验证.结果 家系1中6例患者均携带OSMR基因第10外显子c.1538G＞A错义突变,家系2中4例患者均携带OSMR基因第14外显子c.2081C＞T错义突变;两个家系中所有正常个体及健康对照均未携带上述突变.结论 在两个原发性限局性皮肤淀粉样变家系中发现了OSMR基因内的两个错义突变(c.1538G＞A和c.2081C＞T).该结果与既往的报道一致,再次证明了这些突变的致病性.
作者：茅彬；姚煦；王铮；赵秀丽 刊期： 2018年第01期
目的 了解精神发育迟滞患儿异常染色体核型分布及病因学分析.方法 常规外周血淋巴细胞培养,制备染色体,G显带进行核型分析.结果 在982例精神发育迟滞患儿中,共发现异常染色体401例,检出率为40.8％.其中21三体综合征(包括标准三体型、嵌合型和易位型)共326例,占异常核型的81.3％.除21三体核型外,其余异常核型75例,包括染色体易位、缺失及多态等异常.结论 染色体异常是引起儿童精神发育迟滞的晕要原因.应开展相关的遗传咨询及产前诊断,以减少缺陷患儿的出生率.
作者：李瑞；谢博；王美烨；许召杰 刊期： 2018年第01期
目的 对1个遗传性多发性骨软骨瘤(hereditary multiple exostosis,HME)家系的先证者进行候选致病基因EXT1和EXT2的所有外显子检测,以寻找该HEM家系的致病性突变.方法 应用PCR技术扩增EXT1、EXT2的全部外显子并进行直接Sanger测序分析.结果 测序结果显示先证者EXT1基因第4外显子存在c.1202delT(p.I401Tfs*2)杂合缺失突变,该突变导致401位后的编码氨基酸发生移码,并在第402位引入终止密码,使EXT1编码的全长746氨基酸组成的蛋白质缩减至由402个氨基酸组成的截短型蛋白.该家系的其他6例患者均存在EXT1 c.1202delT的杂合移码突变,而表型正常家系成员未检测到该突变,符合基因型-表型共分离.未检测到EXT2基因的可疑突变.结论 EXT1c.1202delT杂合移码突变是导致这个HME家系患者发病的分子机制.
作者：娄桂予；杨科；秦立涛；张玉薇；王红丹；侯巧芳；何淼；廖世秀 刊期： 2018年第01期
二代测序技术(next generation sequencing,NGS)在临床的应用为广泛开展遗传病的基因检测、病因诊断、治疗及预防奠定了基础,但同时也伴随着一系列的问题,其中很重要的一个环节就是基因检测报告缺乏统一或基本的标准.首届“临床基因检测标准与规范专题研讨会”于2017年10月28日在深圳召开,来自全国138家机构的250多位遗传学专家、临床专家及第三方检测机构的代表共同探讨了遗传病基因检测报告的标准和规范问题.本文根据此次研讨会专家的意见和建议,就遗传病基因检测报告的原则、规范以及基因检测行业的发展进行了讨论,并发布了临床基因检测报告规范共识,以促进检测报告的规范化和标准化,推进我国基因检测行业的健康有序地发展.
作者：黄辉；沈亦平；顾卫红；王伟；王一鸣；祁鸣；沈珺；邱正庆；于世辉；周在威；陈白雪；陈蕾；陈云弟；崔欢欢；杜娟；高勇；郭一然；胡婵娟；胡亮；黄颐；李培培；李厦戎；李秀蓉；刘雅萍；卢洁；马端；马永毅；彭嵋；宋昉；孙洪业；汪亮；王大伟；王静敏；王玲；王正远；王志农；吴继红；吴静；伍建；许怡民；姚宏；杨东声；杨旭；杨艳玲；张颖；周裕林；朱宝生；曾思聪；彭智宇；黄尚志 刊期： 2018年第01期
孕妇 35岁,孕5产1.胚停2次,药流1次,剖宫产分娩一男婴,现10岁,智力稍低下,生长发育稍落后.本次妊娠无病毒感染,无有毒、有害物质及放射线接触史.孕妇及其父母均非近亲婚配,否认家族遗传病或先天畸形史.孕妇因高龄及不良孕产史,经知情同意后于孕18周行羊膜腔穿刺术,经羊水细胞培养,染色体G显带分析结果显示胎儿核型为46,XN,21q?(图1).进一步行羊水细胞微阵列比较基因组杂交检测,结果显示8p23.3p23.1区存在11.7 Mb的重复,孕妇及其配偶外周血染色体核型分析未见异常.
作者：史青杨；姜雨婷；罗丽丽；刘彦红；李琳琳；靖吉丽 刊期： 2018年第01期
目的 对1例Waardenburg综合征Ⅱ型先证者及其家系成员进行SOX10基因的突变分析,探讨其可能的分子生物学致病原因.方法 抽提先证者及其家系成员的外周血基因组DNA,芯片捕获高通量测序方法对MITF、PAX3、SOX10、SNA12、END3和ENDRB基因的全部外显子及其侧翼序列进行检测.根据高通量测序结果,对先证者及其父母进行突变位点的Sanger测序验证分析.结果 Sanger测序结果显示先证者存在SOX10 c.127 C＞T(p.R43X)杂合突变,导致SOX10基因第43位编码精氨酸的密码子(CGA)突变为终止密码子(UGA),产生截短蛋白,影响蛋白质功能的正常发挥.经检索人类基因突变数据库,该突变为未报道过的新突变.患儿父母未检测到该突变.结论 先证者SOX10基因c.127C＞T(p.R43X)杂合突变可能是其分子生物学致病原因.
作者：郑雷；闫有圣；陈雪；张钏；张庆华；冯暄；郝胜菊 刊期： 2018年第01期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
