高利洁；龙艳明；张荣；李爽；张凤环；何国平
目的 了解陕西地区苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因突变特征,为该地区苯丙酮尿症的基因诊断和产前诊断提供参考.方法 选择陕西地区55例苯丙氨酸浓度大于2.0 mg/dL的PKU患儿,应用聚合酶链反应结合测序技术对其PAH基因13个外显子及其侧翼序列进行分析.结果 55例患儿110个PAH等位基因中共检出98个突变等位基因,突变检出率为89.10％(98/110)；第7外显子为高频突变区域,包含9种突变,相对突变频率为33.67％00(33/98),其次为第12外显子(14.29％)和第3外显子(12.24％)；共检出PAH基因突变38种,p.R243Q为突变热点,占总突变的24.49％(24/98),3种突变p.A47E、p.I65S和p.A259T国内未见报道,p.C334X经PAHdb和HGMD数据库比对查新,为未报道过的PAH基因新突变.结论 初步得到了陕西地区的PAH基因突变图谱,发现1例新突变,为本地区PKU基因诊断、产前诊断积累有价值的资料.
作者：强荣；余伍忠；蔡娜；王晓斌；秦翠云；张利平；马晓萍；王林；施选性 刊期： 2014年第01期
患者 男,27岁,农民,结婚2年,未避孕,未育,既往无慢性病史.体格检查:身高168 cm,体重60kg,喉结发育不明显,阴毛胡须正常,无男性乳房女性化,双侧睾丸体积均为8 mL,质地正常,阴茎长8 cm,周径8 cm.精液常规检查:精液量1.6mL,pH7.0,3次检查精子浓度均为0,离心沉淀未见精子.
作者：李琳琳；侯毅；朱玉琢；胡祝明；刘睿智；于晓伟 刊期： 2014年第01期
目的 探讨白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)基因和白细胞介素4受体(interleukin-4 receptor,IL-4R)基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘的相关性.方法 应用SNaPshot方法对400例哮喘患者和200名正常对照的IL4基因启动子区rs2243250、rs2243283和IL-4R基因rs1805012、rs1801275、rs1805010共5个多态位点的基因多态性进行检测.结果 哮喘组rs1805012位点TC基因型频率为8.8％,低于对照组的15.5％,差异有统计学意义(x2=6.498,P=0.039),哮喘组TC+ CC基因型频率为9.0％,低于对照组的15.5％,差异有统计学意义(x2=5.522,P=0.019);哮喘组C等位基因频率为4.6％,低于对照组的7.7％,差异有统计学意义(x2=4.729,P=0.039).其余rs2243250、rs2243283、rs1801275和rs1805010这4个位点的基因型和等位基因频率在哮喘组与对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).IL-4单倍型频率在哮喘组与对照组间差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-4R基因rs1805012位点多态性与青岛地区汉族成人哮喘存在相关性,其TC+ CC基因型可能是哮喘病的保护因子.但是IL-4的基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘无相关关系.
作者：梁文华；周兆山；吉中强；王燕青；薛卫林；张小燕 刊期： 2014年第01期
患者 男,30岁.其妻(孕2产0,)第1胎孕早期自然流产,第2胎孕25-周常规产前检查彩超提示:胎儿发育异常,唇裂合并腭裂;Dandy-Walk畸形?双足内翻,胎儿持续右脐静脉,胎儿各径小于孕周.夫妻表型及智力正常,无有毒有害等环境物质接触史.
作者：郑来萍；傅文婷；许玲；钟银环；王游声 刊期： 2014年第01期
目的 探讨精子DNA损伤(sperm DNA fragmentation,SDF)在男性不育症中的诊断价值.方法 将本院生殖中心就诊的299例男性分为两组:原发性不育患者157例及正常生育对照组142人.根据世界卫生组织标准(1999年)对其进行常规精液参数(精子浓度、精子活动力和精子形态)测定,采用精子染色质扩散试验检测其SDF水平,即精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI).结果 原发性不育组和正常生育对照组的精子DFI分别为(17.1±9.3)％和(14.2±9.0)％,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01),两组男性的年龄、配偶年龄及精液常规参数比较差异均无统计学意义(P＞0.05).精子DFI诊断男性不育的受试者工作特征曲线下面积为0.861,95％可信区间为0.814～0.907,诊断阈值为15.1％,敏感性为81.8％,特异性为88.2％.根据精子DFI对男性不育的诊断阈值,将299例男性分为DFI≥15.1％(A组)120例和DFI＜ 15.1％(B组)179例,两组不育男性的百分率分别为79.2％和34.6％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),两组男性发生不育的优势比为7.2(95％可信区间为4.2～12.3).结论 高水平SDF可降低男性的生育能力,精子DFI对男性不育有重要的诊断价值.
作者：费前进；黄航；金建远；黄学锋 刊期： 2014年第01期
目的 通过对我国Rett综合征(Rett syndrome,RTT)患者的系统研究,了解我国RTT的遗传特点以评估再发风险,为患者家庭提供遗传咨询.方法 应用聚合酶链式反应、DNA测序、多重连接依赖探针扩增技术对405例RTT患儿的甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein2,MECP2)基因、细胞周期蛋白依赖激酶样5 (cyclin-dependent kinase-like 5,CDKL5)基因及FOXG1 (forkhead box protein G1)基因进行突变分析；应用等位基因特异性PCR分析患儿MECP2基因突变来源；对292例患儿的母亲进行MECP2基因突变分析；根据在有活性与失活X染色体上雄激素受体第1个外显子甲基化的不同,应用甲基化敏感限制性内切酶分析X-染色体失活类型(X-chromosome inactive pattern,XCI),观察其对RTT表型的影响.结果 MECP2突变在我国RTT患儿中的检出率为86.9％(352/405),仅发现3例早发惊厥型RTT患儿具有CDKL5突变,未发现FOXG1基因突变.94.4％(85/90)的MECP2突变位于父亲来源的X染色体上,以点突变为主要类型,占90.6 ％(77/85).80％的母源突变为小缺失.仅1例(0.34％,1/292)表型正常母亲携带致病突变,其XCI呈高度非随机失活,女儿为保留语言型不典型RTT,XCI呈随机失活.结论 MECP2为我国RTT的主要致病基因,早发惊厥型RTT患儿MECP2基因突变筛查阴性者,应进行CDKL5基因突变分析.MECP2突变以父源新生突变为主,可以解释RTT患儿中女孩多于男孩的遗传特点.母亲突变携带率仅为0.34％,提示RTT再发风险较低.由于X染色体非随机失活可使携带MECP2基因突变的女性具有正常表型,因此对表型正常的患儿母亲进行基因突变筛查,有利于对RTT家庭提供遗传咨询.
作者：张晓英；赵滢；包新华；张晶晶；曹广娜；吴希如 刊期： 2014年第01期
目的 探讨遗传因素与月经异常的关系.方法 应用常规染色体制片及G显带方法,对2009年1月至2012年7月在广西壮族自治区妇幼保健院就诊的93例月经异常患者进行染色体核型分析.结果 在93例患者中检出22例异常核型,检出率为23.66％.数目异常12例、占12.90％,包括45,X及其嵌合体各6例；结构异常7例、占7.52％,包括X缺失3例、X等臂2例、易位2例；9号染色体倒位1例、占1.08％；46,XY假两性2例、占2.16％.结论 染色体核型分析有助于为月经异常患者的临床治疗提供指导.
作者：欧珊；唐斌；杜娟；蒙达华；陈少科；耿国兴；李东明 刊期： 2014年第01期
先证者(Ⅳ1) 男,7岁.生后健康、1岁半会走路.自3岁起出现四肢无力,肌肉酸痛,行走较同龄儿缓慢,易跌跤,上肢上举费力;起坐困难,需要用特殊姿势来完成.逐渐出现全身肌肉萎缩、关节僵硬、小腿增粗变硬,行走时向两侧上下摆动,现已不能行走,以坐轮椅和卧床为主.查体:中度营养不良,反应迟钝.心率110次/分,律规整,双肺呼吸音粗.除头面部骨骼肌轻度萎缩,其它部位呈重度萎缩,大关节挛缩畸形,腓肠肌明显增粗、肥大、质硬、触痛.四肢肌张力降低,双侧对称.肌力Ⅰ-Ⅱ级,腱反射消失,病理反射未引出.在山东大学齐鲁医院就诊,查血清酶肌酸激酶、乳酸脱氢酶正常,转氨酶(GOT)43 U/L(正常值0～37 U/L).心电图:窦性心动过速.肌电图示:肌源性改变.诊断为进行性肌营养不良.
作者：艾大萍；张成秋 刊期： 2014年第01期
目的 对1个近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅶ(coagulation factor Ⅶ,FⅦ)与因子Ⅹ(factor Ⅹ,FⅩ)联合缺陷症家系进行基因突变检测,探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系共6名成员的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、血浆FⅦ活性(FⅦactivity,FⅦ∶C)、FⅩ活性(FⅩ activity,FⅩ∶C)及FⅦ抗原(FⅦantigen,FⅦ∶Ag)、FⅩ抗原(FⅩ antigen,FⅩ∶Ag)；用DNA直接测序法分析先证者F7、F10基因的全部外显子、侧翼、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实所发生的突变.结果 先证者PT(76.4s)和APTT(60.2s)明显延长,FⅦ∶C(4％)、FⅦ∶Ag(6％)和FⅩ∶C(6％)、FⅩ∶Ag(33％)明显降低；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿的PT(分别为16.4s、15.8s、16.9s、16.5s)和APTT(分别为44.0s、42.1s、41.1s、43.5s)稍延长,FⅦ∶C(分别为34％、39％、31％、40％)、FⅩ∶C(分别为50％、58％、47％、42％)和FⅩ∶Ag(分别为51％、54％、58％、47％)稍降低,其FⅦ∶Ag及弟弟的凝血表型指标均在正常参考范围.测序结果显示先证者F7基因第8外显子发生了g.11267C＞T纯合突变,导致Arg277Cys,F10基因第8外显子存在g.28139G＞T纯合突变,导致Val384Phe；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿均存在F7基因第8外显子g.11267C＞T和F10基因第8外显子g.28139G＞T杂合突变；先证者弟弟F7与F10基因为正常野生型.结论 该遗传性凝血因子Ⅶ与Ⅹ联合缺陷症家系先证者的F7和F10基因分别存在g.11267C＞T(Arg277Cys)、g.28139G＞T(Va1384Phe)纯合突变,且遗传自近亲结婚的父母.F7基因g.11267C＞T(Arg277Cys)和F10基因g.28139G＞T(Val384Phe)与该遗传性凝血因子Ⅶ与Ⅹ联合缺陷症家系的FⅦ和FⅩ水平降低有关.
作者：金艳慧；王明山；王莹宇；杨小丽；杨丽红；谢耀盛；谢海啸；朱丽青；余方友 刊期： 2014年第01期
先证者 男,48岁.因“双腋下、腹股沟水疱伴瘙痒破溃18年,糜烂加重半月”于2012年11月22日来我科门诊就诊.患者18年前无明显诱因出现双腋下红斑、水疱,伴瘙痒,后发展至双侧腹股沟.水疱成群,搔抓易破,后形成糜烂面,并有大量渗出及结痂.皮疹反复发作,夏重冬轻,未予系统治疗.患者此次发病以来无其他不适,既往体健.否认其他遗传性疾病史.查体:全身系统检查未见异常.皮肤科检查:双侧腋窝可见境界清楚皮损,局部皮肤粗糙肥厚,布满密集扁平丘疹,伴破溃糜烂并有结痂,皮损四周有米粒至绿豆大小丘疹散在于色素沉着处.双侧腹股沟可见皮肤肥厚粗糙,表面湿润呈白色浸渍状,边缘呈暗红色日有色素沉着.阴囊及阴茎皮肤糜烂、肥厚呈灰白色(图1).
作者：胡丹丹；丁博月；蔡丽；刘丽娟；罗雪姣；丁政云 刊期： 2014年第01期
患者 女,29岁.月经初潮12岁,月经周期31天,经期5天.结婚3年,先后流产3次,每次均发生于受孕2个月内.前2次流产未进行胚胎细胞遗传学检查.第3次妊娠经过:末次月经为2013年4月29日,常规监测卵泡.待卵泡成熟时,肌注人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)10 000 U,指导同房,黄体支持.5月31日阴道有少许咖啡色液体,2天后自净,患者未重视.
作者：杨本海；武其文；彭弋峰；贾超；陶绍能；杨白予 刊期： 2014年第01期
患儿 男,2岁.因“智力障碍,运动发育落后”于2013年5月来我院就诊.查体:患儿有先天愚儿面容.头型短小,面圆而扁平,眼裂上斜,眼距宽,鼻梁低平,鼻孔上翘,吐舌,腭弓高,耳位低.双手通贯掌,手指短小,小指只有1条褶纹,脚躅指与其余四指分离较远,有脚底褶纹.心、肺无杂音,脑CT正常,体格发育较差,反应迟钝等指标都较同龄儿童落后.
作者：赵鼎；杨建丽；郭振欣；李瑞 刊期： 2014年第01期
目的 探讨多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在羊水细胞染色体非整倍体及染色体结构异常检测中的应用.方法 应用MLPA技术对286份羊水样本进行检测,并与常规染色体核型分析进行对比,对于检测到的染色体结构异常应用微阵列比较基因组杂交技术(array comparative genomic hybridization,aCGH)进行验证.结果 在286份羊水中,共检测到10例21-三体,2例18三体,1例13三体,1例嵌合21-三体,1例X单体,1例X染色体短臂大片段缺失,1例18号染色体短臂部分三体,1例18号染色体长臂和短臂大片段缺失.所有MLPA结果与染色体核型分析均一致.对于检测到的染色体结构异常均应用aCGH技术验证,检测结果符合率100％.结论 MLPA可快速检出常见染色体非整倍体以及染色体结构异常包括大片段缺失与重复,为临床产前诊断提供有价值的信息.
作者：张菁菁；胡平；罗春玉；季修庆；周静；刘安；马定远；许争峰 刊期： 2014年第01期
患儿 男,13个月.因“生长发育迟缓、智力低下”就诊.其父40岁、母39岁生育该患儿,系第2胎,足月剖宫产,出生时体重3kg.其后生长发育落后于同龄儿童.查体:特殊外貌,眼距宽,眼裂小,低鼻梁,小耳,低耳位,外耳廓畸形,高腭弓.双手通贯掌,四肢肌张力低.心脏听诊有杂音,心脏彩超提示:先天性心脏病,室间隔缺损(膜周部),室间隔膜部瘤,房间隔缺损(继发孔型),三尖瓣轻度返流.其父母、兄长表型、智力正常,未做染色体检查,其父母非近亲结婚,无遗传病家族史.
作者：王少敏；曲林琳；王军荣 刊期： 2014年第01期
目的 研究绒毛组织细胞培养及其染色体制备的简易方法.方法 弃用传统绒毛组织培养前处理方法中用胰酶或胶原酶消化绒毛组织的步骤,直接提取78例含有被剪得更碎的、经培养液悬浮的、适当自然下沉后的较小绒毛组织块的上层培养液作绒毛组织细胞培养,采用具有防污染功能的含透气孔瓶盖的培养瓶,每例接种3瓶,每瓶含培养液3 mL；并在消化法绒毛染色体制备中,吸弃混杂于含有贴壁细胞的洗脱液中的自然下沉的底层组织块后,再按常规染色体制备方法制备绒毛细胞染色体.结果 78例绒毛组织中的75例同时含有5个以上可分析的染色体核型、20个以上可计数的染色体核型,成功率为96.16％；有68例在2～3周内收获,占90.67％；在3例失败的标本中,2例染色体分裂相差、达不到报告要求,1例无细胞生长.所有标本无细菌污染发生.结论 绒毛组织细胞培养及其染色体制备的简易方法具有操作简便、节省试剂费用、减少操作污染、不降低实验成功率的优点,值得在临床尤其是在产前诊断中推广应用.
作者：翁炳焕；杨红卫；毛愉婵；舒静；沈敏；张雪琴；郭庆云；马裕；沈国松 刊期： 2014年第01期
干细胞具有多向分化的潜能,成年哺乳动物的生殖腺中存在生殖干细胞,在成体生殖腺中的生殖干细胞有精原干细胞,卵巢表皮细胞,极小胚胎样干细胞和卵巢干细胞.生殖干细胞具有干细胞的特性又具有分化为配子的功能.目前对于它的认识和应用仍然有限.本文诣在对生殖干细胞的生物学特性及其临床应用价值的新进展作一综述.
作者：宋丹；史轶超 刊期： 2014年第01期
目的 探讨宁夏回族地区苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因突变特点,为该地区苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)的基因诊断和产前诊断提供依据.方法 应用PCR产物直接测序法,对宁夏地区35例回族PKU患儿和50名正常健康个体的PAH基因第1～13外显子及其旁侧内含子区域进行基因突变分析.结果 共检出20种突变类型,包括错义突变8种(40％)、无义突变5种(25％)、剪切位点突变4种(20％)、缺失突变3种(15％),等位基因突变检出率为68.57％(48/70).常见的基因突变类型是p.R243Q(12.86％)、p.R241C(11.43％)、EX6-96A＞G(5.71％)、p.Y356X(5.71％)、p.R413P(4.29％)和p.Q232X(4.29％)；较常见的突变类型为S16fsX10(2.86％)、p.R111X(2.86％)和p.L430P(2.86％).其中S16fsX10、p.L430P、p.D222G和IVS11+1G→A突变为国内首次报道,p.Y414X和S303fsX38突变为国内本名族中首次报道.50名正常对照中未检出上述突变.结论 宁夏回族地区PAH基因的突变特点有别于我国其他地区,表现出基因突变的多样性、复杂性和地域性,具有显著的民族特色.
作者：毛新梅；何江；刘媛；李晓强；余伍忠 刊期： 2014年第01期
目的 探讨位于X染色体上的H2BFWT基因外显子中单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与西南地区男性不育发病风险的关系.方法 PCR扩增H2BFWT基因外显子并测序,分析来自西南地区的312例男性不育患者及211名正常男性标本,对所发现的SNP位点在病例组及正常组中的分布频率进行统计学分析.结果 检测到的SNP位点主要分布在H2BFWT基因的第1外显子中；SNP位点368G/A(rs553509)与-9C/T(rs7885967)在病例组中的分布频率均高于正常对照组,且差异具有统计学意义.联合368G/A及-9C/T两位点进行分析发现,368G与-9T两个等位基因的同时出现将增加男性不育的发病风险.结论 H2BFWT基因中368G/A与-9C/T两个SNP位点与西南地区男性不育的发生具有一定的相关性,可能是导致西南地区男性不育的基因易感性因素之一.
作者：李天俊；丁显平；陈林；李凌霄；张小慧 刊期： 2014年第01期
目的 鉴定1例人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)新等位基因.方法 应用双链及单链测序法进行基于序列的分型(sequence based typing,SBT),通过群体调查了解该等位基因的群体分布频率.结果 该等位基因HLA-A* 33:44,与A*33:03:01第4外显子相差1个核苷酸,使第866位碱基由G变为A,第265个密码子由GGT变为GAT,相应氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸.与IMGT/HLA数据库中的HLA-A等位基因的序列进行对比,该突变为新的单核苷酸多态性位点.结论 该新HLA等位基因在中国汉族人群中的分布频率小于0.0003,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会命名为HLA-A* 33:44(序列注册号为HQ873871).研究新等位基因的序列可为HLA基因相关研究和应用提供信息.
作者：丁浩强；叶欣；黄颖烽；邵媛；陈扬凯；夏文杰；熊白玉 刊期： 2014年第01期
目的 探讨在白血病耐药细胞K562/A02中核因子κB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)是否参与葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,PgP)的调节作用,并研究在该调节作用信号通路中NF-κB与细胞外信号调节激酶(extracelluar signalregulated kinase,ERK)的相互关系.方法 应用特异性的GCS小干扰RNA(GCS small interfering RNA,GCSsiRNA)抑制GCS基因后,实时荧光定量PCR方法检测靶基因抑制率以及对多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MDRl) mRNA表达水平的影响；同时应用Western印迹检测各种蛋白的表达情况.使用NF-κB的特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制NF-κB后,应用Western印迹检测P-gp的表达情况.U0126抑制P-ERK(phosphorylated-ERK)后,Western印迹检测细胞核内以及总的NF-κB p65和P-gp的表达.结果 GCSsiRNA转染48 h后,GCSmRNA的表达被抑制,抑制率为62％(51％～73％),同时下调MDR1mRNA的表达,抑制率为52％(43％～61％),与阴性干扰对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)；GCSsiRNA转染72 h后,GCSsiRNA组细胞核内NF-κB p65及P-ERK的表达水平均明显下调(P＜0.05),同时对P-gp的表达亦有显著的抑制作用(P＜0.05).NF-κB的抑制剂PDTC处理K562/A02细胞后,对P-gp有明显的抑制作用(P＜o.05).P-ERK抑制剂U0126处理K562/A02细胞,除了能显著抑制P-ERK1/2的表达外(P＜0.01),还可明显抑制细胞核内NF-κB p65的表达和P-gp的表达(P＜0.01).结论 NF-κB介导了白血病多药耐药细胞中GCS对P-gp的调节作用,且在这一调节作用信号通路中位于ERK下游.
作者：张秀芬；谢可鸣；邹健；李玉玲；穆会君；张滨；谢平 刊期： 2014年第01期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
