张秀芬；谢可鸣；邹健；李玉玲；穆会君；张滨；谢平
例1 男,汉族,8岁.4岁时因经常跌跤在我院拟诊为进行性肌营养不良,8岁时于外院进行基因检测,确诊为进行性肌营养不良,同时怀疑核型为47,XXY,到我院检查染色体.细胞遗传学检查:常规外周血染色体核型分析检查,患儿核型为47,XXY(图1),其父母身体健康,染色体核型正常.
作者：潘梅；张小琼；胡正 刊期： 2014年第01期
患者 男,汉族,31岁,身高178 cm,体重85 kg.结婚5年,妻子未怀孕.于201 2年3月来我院就诊.精液常规检查结果为重度少精.患者全血分析、生化、免疫、B超、心电图、影像等常规检查均正常.细胞遗传学检查:取患者外周血进行染色体核型分析检查,核型为:46,XY,der(4)(13qter→ 13q10∶∶4p14→4qter),der(6) (6pter→6q15∶∶ 8q21.2→8qter),der(8)(8pter→8q10∶∶ 14p10→ 14pter),der(13)(13pter→ 13p10∶∶ 8q10→8q21.2∶∶4p14→4pter),der(14)(6qter→ 6q15∶∶14q10←14qter),22pstk+ps+(图1).其妻及其父母不配合,未做染色体核型分析.
作者：曹东华；邹朋书；马明；张金艳 刊期： 2014年第01期
目的 通过对我国Rett综合征(Rett syndrome,RTT)患者的系统研究,了解我国RTT的遗传特点以评估再发风险,为患者家庭提供遗传咨询.方法 应用聚合酶链式反应、DNA测序、多重连接依赖探针扩增技术对405例RTT患儿的甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein2,MECP2)基因、细胞周期蛋白依赖激酶样5 (cyclin-dependent kinase-like 5,CDKL5)基因及FOXG1 (forkhead box protein G1)基因进行突变分析；应用等位基因特异性PCR分析患儿MECP2基因突变来源；对292例患儿的母亲进行MECP2基因突变分析；根据在有活性与失活X染色体上雄激素受体第1个外显子甲基化的不同,应用甲基化敏感限制性内切酶分析X-染色体失活类型(X-chromosome inactive pattern,XCI),观察其对RTT表型的影响.结果 MECP2突变在我国RTT患儿中的检出率为86.9％(352/405),仅发现3例早发惊厥型RTT患儿具有CDKL5突变,未发现FOXG1基因突变.94.4％(85/90)的MECP2突变位于父亲来源的X染色体上,以点突变为主要类型,占90.6 ％(77/85).80％的母源突变为小缺失.仅1例(0.34％,1/292)表型正常母亲携带致病突变,其XCI呈高度非随机失活,女儿为保留语言型不典型RTT,XCI呈随机失活.结论 MECP2为我国RTT的主要致病基因,早发惊厥型RTT患儿MECP2基因突变筛查阴性者,应进行CDKL5基因突变分析.MECP2突变以父源新生突变为主,可以解释RTT患儿中女孩多于男孩的遗传特点.母亲突变携带率仅为0.34％,提示RTT再发风险较低.由于X染色体非随机失活可使携带MECP2基因突变的女性具有正常表型,因此对表型正常的患儿母亲进行基因突变筛查,有利于对RTT家庭提供遗传咨询.
作者：张晓英；赵滢；包新华；张晶晶；曹广娜；吴希如 刊期： 2014年第01期
患者 男,27岁,农民,结婚2年,未避孕,未育,既往无慢性病史.体格检查:身高168 cm,体重60kg,喉结发育不明显,阴毛胡须正常,无男性乳房女性化,双侧睾丸体积均为8 mL,质地正常,阴茎长8 cm,周径8 cm.精液常规检查:精液量1.6mL,pH7.0,3次检查精子浓度均为0,离心沉淀未见精子.
作者：李琳琳；侯毅；朱玉琢；胡祝明；刘睿智；于晓伟 刊期： 2014年第01期
干细胞具有多向分化的潜能,成年哺乳动物的生殖腺中存在生殖干细胞,在成体生殖腺中的生殖干细胞有精原干细胞,卵巢表皮细胞,极小胚胎样干细胞和卵巢干细胞.生殖干细胞具有干细胞的特性又具有分化为配子的功能.目前对于它的认识和应用仍然有限.本文诣在对生殖干细胞的生物学特性及其临床应用价值的新进展作一综述.
作者：宋丹；史轶超 刊期： 2014年第01期
目的 建立筛选稀有血型抗原K、Ytb的多重PCR体系,了解这两种血型抗原在维吾尔族人群中的分布情况.方法 针对血型抗原K、Ytb的编码基因KEL和ACHE单核苷酸多态性位点设计序列特异性引物,通过优化PCR反应条件,构建可同时检测K、Ytb血型抗原的多重PCR体系,用该体系对362份新疆维吾尔族随机献血者样本进行相应抗原筛选,并对筛选到的稀有样本进行杂合性分析.结果 成功构建可同时检测低频血型抗原K、Ytb的多重PCR体系,362份维吾尔族样本中共检出9例K+k+,41例Yt(a+b+),4例Yt(a-b+).结论 建立的检测K、Ytb血型抗原的多重PCR体系简便有效.通过筛选所获得的维吾尔族稀有血型数据,可为临床输注配合性血液提供参考资料.
作者：谢莉；贺云蕾；库热西江；叶璐夷；朱自严 刊期： 2014年第01期
目的 探讨中国湖北地区人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA-DQA1)基因rs9272346单核苷酸多态性与慢性乙型肝炎不同转归的关联.方法 采用病例-对照研究,招募湖北地区汉族35岁以上住院乙型重型肝炎(acute liver failure,ALF)173例、乙肝相关性肝硬化(liver cirrhosis,LC)292例、乙肝相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC) 325例、无症状乙肝携带者(asymptomatic HBV carrier,AHC)238例.应用TaqMan MGB探针实时PCR技术检测rs9272346位点基因型,应用T检验、卡方检验和非条件Logistic回归进行统计分析.结果 G等位基因型在ALF、LC、HCC组与AHC组分布差异无统计学意义(P=0.312、0.314、0.264).在显性模型下,校正性别年龄因素后,GG+GA与AA基因型相比,与ALF(OR=1.08,95％CI:0.70～1.68)、LC(OR=1.11,95％CI:0.87～1.26)、HCC(OR=0.93,95％CI:0.65～1.33)患病风险无相关性.性别分层后显性模型下显示的女性患者中,GG+ GA基因型与AA基因型相比为进展为重型肝炎的保护因素(OR=0.30,95 ％CI:0.1～0.87).结论 HLA-DQA1基因rs9272346位点单核苷酸多态性与乙型肝炎不同转归无相关性,女性患者中G等位基因携带可能是进展为重型肝炎的保护因素.
作者：余金玲；姚津剑；里进；安会敏；陈曼；宋起龙；林菊生 刊期： 2014年第01期
目的 探讨白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)基因和白细胞介素4受体(interleukin-4 receptor,IL-4R)基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘的相关性.方法 应用SNaPshot方法对400例哮喘患者和200名正常对照的IL4基因启动子区rs2243250、rs2243283和IL-4R基因rs1805012、rs1801275、rs1805010共5个多态位点的基因多态性进行检测.结果 哮喘组rs1805012位点TC基因型频率为8.8％,低于对照组的15.5％,差异有统计学意义(x2=6.498,P=0.039),哮喘组TC+ CC基因型频率为9.0％,低于对照组的15.5％,差异有统计学意义(x2=5.522,P=0.019);哮喘组C等位基因频率为4.6％,低于对照组的7.7％,差异有统计学意义(x2=4.729,P=0.039).其余rs2243250、rs2243283、rs1801275和rs1805010这4个位点的基因型和等位基因频率在哮喘组与对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).IL-4单倍型频率在哮喘组与对照组间差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-4R基因rs1805012位点多态性与青岛地区汉族成人哮喘存在相关性,其TC+ CC基因型可能是哮喘病的保护因子.但是IL-4的基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘无相关关系.
作者：梁文华；周兆山；吉中强；王燕青；薛卫林；张小燕 刊期： 2014年第01期
目的 了解陕西地区苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因突变特征,为该地区苯丙酮尿症的基因诊断和产前诊断提供参考.方法 选择陕西地区55例苯丙氨酸浓度大于2.0 mg/dL的PKU患儿,应用聚合酶链反应结合测序技术对其PAH基因13个外显子及其侧翼序列进行分析.结果 55例患儿110个PAH等位基因中共检出98个突变等位基因,突变检出率为89.10％(98/110)；第7外显子为高频突变区域,包含9种突变,相对突变频率为33.67％00(33/98),其次为第12外显子(14.29％)和第3外显子(12.24％)；共检出PAH基因突变38种,p.R243Q为突变热点,占总突变的24.49％(24/98),3种突变p.A47E、p.I65S和p.A259T国内未见报道,p.C334X经PAHdb和HGMD数据库比对查新,为未报道过的PAH基因新突变.结论 初步得到了陕西地区的PAH基因突变图谱,发现1例新突变,为本地区PKU基因诊断、产前诊断积累有价值的资料.
作者：强荣；余伍忠；蔡娜；王晓斌；秦翠云；张利平；马晓萍；王林；施选性 刊期： 2014年第01期
患者 女,29岁.月经初潮12岁,月经周期31天,经期5天.结婚3年,先后流产3次,每次均发生于受孕2个月内.前2次流产未进行胚胎细胞遗传学检查.第3次妊娠经过:末次月经为2013年4月29日,常规监测卵泡.待卵泡成熟时,肌注人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)10 000 U,指导同房,黄体支持.5月31日阴道有少许咖啡色液体,2天后自净,患者未重视.
作者：杨本海；武其文；彭弋峰；贾超；陶绍能；杨白予 刊期： 2014年第01期
目的 探索ABO基因的α-1,3半乳糖基转移酶基因905A＞G突变对B抗原表达的影响.方法 通过标准血型血清学方法鉴定3例B亚型,应用聚合酶链反应-序列特异性引物检测、ABO基因第6、7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO亚型基因分型和序列分析.结果 3例B亚型测序结果与B101序列比对第7外显子存在905A＞G突变,导致多肽链D302G替换.结论 α-1,3半乳糖基转移酶基因nt905A＞G突变导致B抗原表达减弱.
作者：林凤秋；章旭；李剑平 刊期： 2014年第01期
目的 探讨位于X染色体上的H2BFWT基因外显子中单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与西南地区男性不育发病风险的关系.方法 PCR扩增H2BFWT基因外显子并测序,分析来自西南地区的312例男性不育患者及211名正常男性标本,对所发现的SNP位点在病例组及正常组中的分布频率进行统计学分析.结果 检测到的SNP位点主要分布在H2BFWT基因的第1外显子中；SNP位点368G/A(rs553509)与-9C/T(rs7885967)在病例组中的分布频率均高于正常对照组,且差异具有统计学意义.联合368G/A及-9C/T两位点进行分析发现,368G与-9T两个等位基因的同时出现将增加男性不育的发病风险.结论 H2BFWT基因中368G/A与-9C/T两个SNP位点与西南地区男性不育的发生具有一定的相关性,可能是导致西南地区男性不育的基因易感性因素之一.
作者：李天俊；丁显平；陈林；李凌霄；张小慧 刊期： 2014年第01期
目的 探讨在白血病耐药细胞K562/A02中核因子κB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)是否参与葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,PgP)的调节作用,并研究在该调节作用信号通路中NF-κB与细胞外信号调节激酶(extracelluar signalregulated kinase,ERK)的相互关系.方法 应用特异性的GCS小干扰RNA(GCS small interfering RNA,GCSsiRNA)抑制GCS基因后,实时荧光定量PCR方法检测靶基因抑制率以及对多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MDRl) mRNA表达水平的影响；同时应用Western印迹检测各种蛋白的表达情况.使用NF-κB的特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制NF-κB后,应用Western印迹检测P-gp的表达情况.U0126抑制P-ERK(phosphorylated-ERK)后,Western印迹检测细胞核内以及总的NF-κB p65和P-gp的表达.结果 GCSsiRNA转染48 h后,GCSmRNA的表达被抑制,抑制率为62％(51％～73％),同时下调MDR1mRNA的表达,抑制率为52％(43％～61％),与阴性干扰对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)；GCSsiRNA转染72 h后,GCSsiRNA组细胞核内NF-κB p65及P-ERK的表达水平均明显下调(P＜0.05),同时对P-gp的表达亦有显著的抑制作用(P＜0.05).NF-κB的抑制剂PDTC处理K562/A02细胞后,对P-gp有明显的抑制作用(P＜o.05).P-ERK抑制剂U0126处理K562/A02细胞,除了能显著抑制P-ERK1/2的表达外(P＜0.01),还可明显抑制细胞核内NF-κB p65的表达和P-gp的表达(P＜0.01).结论 NF-κB介导了白血病多药耐药细胞中GCS对P-gp的调节作用,且在这一调节作用信号通路中位于ERK下游.
作者：张秀芬；谢可鸣；邹健；李玉玲；穆会君；张滨；谢平 刊期： 2014年第01期
目的 研究绒毛组织细胞培养及其染色体制备的简易方法.方法 弃用传统绒毛组织培养前处理方法中用胰酶或胶原酶消化绒毛组织的步骤,直接提取78例含有被剪得更碎的、经培养液悬浮的、适当自然下沉后的较小绒毛组织块的上层培养液作绒毛组织细胞培养,采用具有防污染功能的含透气孔瓶盖的培养瓶,每例接种3瓶,每瓶含培养液3 mL；并在消化法绒毛染色体制备中,吸弃混杂于含有贴壁细胞的洗脱液中的自然下沉的底层组织块后,再按常规染色体制备方法制备绒毛细胞染色体.结果 78例绒毛组织中的75例同时含有5个以上可分析的染色体核型、20个以上可计数的染色体核型,成功率为96.16％；有68例在2～3周内收获,占90.67％；在3例失败的标本中,2例染色体分裂相差、达不到报告要求,1例无细胞生长.所有标本无细菌污染发生.结论 绒毛组织细胞培养及其染色体制备的简易方法具有操作简便、节省试剂费用、减少操作污染、不降低实验成功率的优点,值得在临床尤其是在产前诊断中推广应用.
作者：翁炳焕；杨红卫；毛愉婵；舒静；沈敏；张雪琴；郭庆云；马裕；沈国松 刊期： 2014年第01期
患者 男,30岁.其妻(孕2产0,)第1胎孕早期自然流产,第2胎孕25-周常规产前检查彩超提示:胎儿发育异常,唇裂合并腭裂;Dandy-Walk畸形?双足内翻,胎儿持续右脐静脉,胎儿各径小于孕周.夫妻表型及智力正常,无有毒有害等环境物质接触史.
作者：郑来萍；傅文婷；许玲；钟银环；王游声 刊期： 2014年第01期
遗传性脊髓小脑共济失调17型是一种常染色体显性遗传的进行性神经系统退行性疾病,又称类Huntington舞蹈病4型,主要临床表现包括共济失调、肌张力障碍、精神症状等,其致病基因已被定位和克隆.该基因编码TATA结合蛋白,编码区内的CAG重复序列扩展突变可引起蛋白多聚谷氨酰胺链延伸从而致病.现就近年来SCA17在临床、病因、病理及发病机制等方面的研究进展进行综述.
作者：张瑾；顾卫红 刊期： 2014年第01期
目的 建立一种质控性较高的高效变性液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,检测短串联重复序列(short tandem repeats,STR)位点,用于排除母源污染,提高产前诊断的准确性.方法选取20个处于孕期的患有遗传病的家系,分别提取父母外周血和胎儿羊水DNA,扩增16个STR位点,根据STR数据库报道16个STR位点的等位基因分布范围设定DHPLC 分析片段的大小,进行DHPLC分析.同时,将母体DNA与胎儿羊水DNA以1∶1、1∶4、1∶9、1∶19、1∶99的比例混合,应用DHPLC对vWA STR位点进行检测,确定该技术的检测灵敏度.结果 应用DHPLC 分析16个STR位点,母亲与胎儿等位基因不同的STR位点均在10个以上,排除母源污染的检测率达66.7％,检测灵敏度为1％～10％.结论 DHPLC技术可准确快速地排除羊水的母源污染且具有较高的灵敏度,质控性较好,达到了欧洲要求的检测技术标准,为产前诊断提供可靠的检测质控技术.
作者：高利洁；龙艳明；张荣；李爽；张凤环；何国平 刊期： 2014年第01期
目的 对我院2007年至2011年5599例因先天畸形等原因来我院做染色体核型检查的结果进行分析.方法 常规外周血淋巴细胞培养,制备染色体G显带标本,分析核型.结果 共发现异常核型1027例(18.34％),涉及异常核型111种.其中常染色体异常719例,性染色体异常306例,另有2例48,XXY,+21；染色体数目异常757例,结构异常228例,兼有两者异常的42例.21三体综合征、Turner综合征及46,XY女性/46,XX男性的异常例数分别为638、156、86例,分别占染色体异常的62.12％、15.19％、8.37％.结论 染色体核型检测对于指导临床干预、改善染色体异常儿童的生活质量和减少其早年病死率具有重要的价值.
作者：金华盛；王秀敏；董关萍；黄轲；傅君芬 刊期： 2014年第01期
目的 对1个近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅶ(coagulation factor Ⅶ,FⅦ)与因子Ⅹ(factor Ⅹ,FⅩ)联合缺陷症家系进行基因突变检测,探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系共6名成员的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、血浆FⅦ活性(FⅦactivity,FⅦ∶C)、FⅩ活性(FⅩ activity,FⅩ∶C)及FⅦ抗原(FⅦantigen,FⅦ∶Ag)、FⅩ抗原(FⅩ antigen,FⅩ∶Ag)；用DNA直接测序法分析先证者F7、F10基因的全部外显子、侧翼、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实所发生的突变.结果 先证者PT(76.4s)和APTT(60.2s)明显延长,FⅦ∶C(4％)、FⅦ∶Ag(6％)和FⅩ∶C(6％)、FⅩ∶Ag(33％)明显降低；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿的PT(分别为16.4s、15.8s、16.9s、16.5s)和APTT(分别为44.0s、42.1s、41.1s、43.5s)稍延长,FⅦ∶C(分别为34％、39％、31％、40％)、FⅩ∶C(分别为50％、58％、47％、42％)和FⅩ∶Ag(分别为51％、54％、58％、47％)稍降低,其FⅦ∶Ag及弟弟的凝血表型指标均在正常参考范围.测序结果显示先证者F7基因第8外显子发生了g.11267C＞T纯合突变,导致Arg277Cys,F10基因第8外显子存在g.28139G＞T纯合突变,导致Val384Phe；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿均存在F7基因第8外显子g.11267C＞T和F10基因第8外显子g.28139G＞T杂合突变；先证者弟弟F7与F10基因为正常野生型.结论 该遗传性凝血因子Ⅶ与Ⅹ联合缺陷症家系先证者的F7和F10基因分别存在g.11267C＞T(Arg277Cys)、g.28139G＞T(Va1384Phe)纯合突变,且遗传自近亲结婚的父母.F7基因g.11267C＞T(Arg277Cys)和F10基因g.28139G＞T(Val384Phe)与该遗传性凝血因子Ⅶ与Ⅹ联合缺陷症家系的FⅦ和FⅩ水平降低有关.
作者：金艳慧；王明山；王莹宇；杨小丽；杨丽红；谢耀盛；谢海啸；朱丽青；余方友 刊期： 2014年第01期
目的 鉴定1例人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)新等位基因.方法 应用双链及单链测序法进行基于序列的分型(sequence based typing,SBT),通过群体调查了解该等位基因的群体分布频率.结果 该等位基因HLA-A* 33:44,与A*33:03:01第4外显子相差1个核苷酸,使第866位碱基由G变为A,第265个密码子由GGT变为GAT,相应氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸.与IMGT/HLA数据库中的HLA-A等位基因的序列进行对比,该突变为新的单核苷酸多态性位点.结论 该新HLA等位基因在中国汉族人群中的分布频率小于0.0003,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会命名为HLA-A* 33:44(序列注册号为HQ873871).研究新等位基因的序列可为HLA基因相关研究和应用提供信息.
作者：丁浩强；叶欣；黄颖烽；邵媛；陈扬凯；夏文杰；熊白玉 刊期： 2014年第01期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
