学术投稿

联合转染tPA基因和PCNA反义寡核苷酸抑制兔自体移植动脉再狭窄研究

吴忠均;李昱;时德;郑树森

关键词:组织型纤溶酶原激活物, 增殖细胞核抗原, 反义寡核苷酸, 联合转染, 再狭窄
摘要:目的研究血管局部联合转染组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因和增殖细胞核抗原反义寡核苷酸(PCNA-ASODN)对自体移植动脉血管再狭窄的防治作用.方法 120只新西兰雄性白兔,按数字表法随机均分为4组(对照组、PCNA-ASODN组、tPA组、tPA+PCNA-ASODN组).将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0 cm长)对换移植,移植血管及吻合口缝线分别用pBudCE4.1/tPA和PCNA-ASODN液浸泡.于术后3、7、14、28及56 d取移植血管制片,显微镜下观察内膜增生情况,计算机图像分析测量其内膜面积和移植血管狭窄率,扫描电镜观察移植血管壁血栓形成情况,并分别用RT-PCR和免疫组织化学染色法检测tPA基因的mRNA表达率与PCNA阳性细胞百分率.结果术后3、7、14和28 d时,tPA组与tPA+PCNA-ASODN组的tPA基因mRNA表达率明显高于另2组(P<0.01),PCNA-ASODN组、tPA组和tPA+PCNA-ASODN组PCNA阳性细胞百分率均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01). tPA+PCNA-ASODN组和PCNA-ASODN组、tPA组各时相血管壁内膜增生比对照组明显减轻,内膜面积和管腔狭窄程度显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),且tPA+PCNA-ASODN组又明显低于另2组(P<0.05).扫描电镜观察显示,tPA组和tPA+PCNA-ASODN组血管壁只见少量血小板附着,未见血栓形成,而对照组血管壁可见大量血小板附着,且有血栓形成.结论血管局部联合转染tPA基因和PCNA-ASODN能有效抑制VSMC增殖和血栓形成,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄.
中国普外基础与临床杂志相关文献
  • 重症急性胰腺炎手术指征及疗效分析

    目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)的手术时机和疗效.方法回顾性分析我院1997年5月至2004年7月期间收治的152例SAP患者的治疗效果.结果总治愈率为94.74%(144/152),其中非手术综合治疗组为 97.73%(86/88),手术组为90.63%(58/64); 并发症发生率非手术综合治疗组为7.95%(7/88),手术组为25.00%(16/64); 总死亡率为5.26%(8/152), 其中非手术综合治疗组为2.27%(2/88),手术组为9.38%(6/64).结论当SAP继发明显感染、胆道梗阻或出现暴发性胰腺炎时应及时手术治疗.

    作者:李德宇 刊期: 2005年第05期

  • 联合转染tPA基因和PCNA反义寡核苷酸抑制兔自体移植动脉再狭窄研究

    目的研究血管局部联合转染组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因和增殖细胞核抗原反义寡核苷酸(PCNA-ASODN)对自体移植动脉血管再狭窄的防治作用.方法 120只新西兰雄性白兔,按数字表法随机均分为4组(对照组、PCNA-ASODN组、tPA组、tPA+PCNA-ASODN组).将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0 cm长)对换移植,移植血管及吻合口缝线分别用pBudCE4.1/tPA和PCNA-ASODN液浸泡.于术后3、7、14、28及56 d取移植血管制片,显微镜下观察内膜增生情况,计算机图像分析测量其内膜面积和移植血管狭窄率,扫描电镜观察移植血管壁血栓形成情况,并分别用RT-PCR和免疫组织化学染色法检测tPA基因的mRNA表达率与PCNA阳性细胞百分率.结果术后3、7、14和28 d时,tPA组与tPA+PCNA-ASODN组的tPA基因mRNA表达率明显高于另2组(P<0.01),PCNA-ASODN组、tPA组和tPA+PCNA-ASODN组PCNA阳性细胞百分率均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01). tPA+PCNA-ASODN组和PCNA-ASODN组、tPA组各时相血管壁内膜增生比对照组明显减轻,内膜面积和管腔狭窄程度显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),且tPA+PCNA-ASODN组又明显低于另2组(P<0.05).扫描电镜观察显示,tPA组和tPA+PCNA-ASODN组血管壁只见少量血小板附着,未见血栓形成,而对照组血管壁可见大量血小板附着,且有血栓形成.结论血管局部联合转染tPA基因和PCNA-ASODN能有效抑制VSMC增殖和血栓形成,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄.

    作者:吴忠均;李昱;时德;郑树森 刊期: 2005年第05期

  • 原位背驮式同种异体肝移植供肝修整并发症分析

    目的总结分析原位背驮式肝移植手术后并发症与供肝修整的关系.方法回顾性分析我院12例行原位背驮式同种异体肝移植患者的资料.结果本组12例肝移植围手术期无死亡; 手术成功率为100%.12例中行动脉血管变异整形2例,门静脉搭桥吻合1例; 各韧带修剪后缝合7例,未缝合5例.手术后发生腹腔内出血3例,其中2例与供肝修整有关,即修肝时各韧带未仔细缝合及结扎而导致细小血管出血,另1例系凝血功能障碍所致; 在供肝修整中注意了血管的变异整形及胆管的血供,术后无动脉及门静脉血管并发症和胆道并发症发生.结论修肝质量的好坏,直接关系到术中植肝时手术操作的难度、术后供肝的存活质量、并发症的发生和患者的康复.

    作者:朱秀芳;莫一我;刘玉明;孙志为 刊期: 2005年第05期

  • 原位肝移植术后胆管结石治疗探讨

    目的探讨纤维胆道镜(简称纤胆镜)在肝移植术后胆管结石治疗中的应用价值.方法对5例肝移植术后出现反复胆系感染、梗阻性黄疸的患者经T管窦道进行纤胆镜治疗,采取等离子碎石技术、网篮取石、异物钳取石.结果在纤胆镜直视下,可以清楚地观察到胆管的愈合及胆管血运情况,同时应用网篮、异物钳及等离子碎石技术可以清除胆管结石.结论纤胆镜可准确地诊断原位肝移植术后胆管结石,T管和纤胆镜对治疗肝移植术后胆管结石具有同样重要的诊治价值.

    作者:杨玉龙;付维利;刘小北;谭文翔;冯秋实;张宝善 刊期: 2005年第05期

  • 胃Dieulafoy病致上消化道大出血2例报告

    病例1 男,46岁.因反复呕血、黑便2年,再次大量呕血2 d入院.查体: P 96次/分,BP 90/62 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),贫血貌,腹平,无腹壁静脉怒张,全腹无压痛,移动性浊音阴性.查Hb 49 g/L,大便隐血试验阳性.胃镜检查提示胃体溃疡,食管下段及胃底静脉无曲张.经内科治疗3 d无效转入外科行急诊手术.术中探查胃壁未发现溃疡瘢痕,纵行切开胃前壁,见胃腔内有凝血块320 g及鲜血250 ml,清除积血后未发现明确出血灶,遂将胃黏膜展平,见胃体前壁的黏膜皱襞内有一直径1.2 mm裸露动脉血管呈搏动性出血,行包括出血动脉在内的胃楔形切除术.术中输血800 ml.痊愈出院.病理诊断: 胃Dieulafoy病.随访5年未再出血.

    作者:伍崇俊 刊期: 2005年第05期

  • 肝囊腺癌1例报告

    患者,女,57岁.因发现上腹肿块1个月,突发上腹痛6 h入院.B超示肝左内叶和右前叶有一11 cm×12 cm大低密度混合性占位,外形不规则,边界清楚,内部以低回声为主,并可探及1.0~3.0 cm的不规则无回声区,左、右肝静脉受压呈弧形改变,中肝静脉显示不清,腹腔、盆腔积液.CT示肝左内叶和右前叶一较大低密度影,边界清楚,其内密度均匀,可见分隔,约13.0 cm×15.8 cm大,平均CT值13~36 HU,增强后未见强化,病变主要位于左叶,胆囊和胰头可见受压; 胆囊内未见确切异常密度灶,肝内、外胆管未见明显扩张.

    作者:唐勇;李宁;王全军;严志勇;阮颖彦 刊期: 2005年第05期

  • 早期手术在暴发性急性胰腺炎治疗中的作用

    目的探讨早期手术在暴发性急性胰腺炎(FAP)治疗中的作用.方法回顾性分析我院2003年9月至2004年12月收治的8例FAP患者的治疗情况.结果 8例患者于入院及治疗过程中发生功能障碍的器官人均个数为3.非手术治疗1例死亡.手术治疗7例,1例死于腹腔室隔综合征合并肾功能衰竭,1例合并32周妊娠者术前胎儿死亡,其母亲存活; 另5例术后并发腹腔脓肿经再手术治愈.结论早期手术能防治FAP患者MODS的继续发展,为其后续治疗创造机会,提高生存率.

    作者:吴诚义 刊期: 2005年第05期

  • 人工肝支持系统在肝衰竭和肝脏移植中的临床应用研究

    目的评价人工肝支持系统(ALSS)在肝衰竭和肝脏移植中的作用.方法对44例肝衰竭患者(包括12例行肝移植者)进行分子吸附循环系统(MARS)或血浆置换治疗,检测治疗前、后各种有毒物质及细胞因子等的改变并进行比较.结果 44例肝衰竭患者,经ALSS治疗后临床症状及体征明显改善; 血总胆红素、总胆汁酸、谷丙转氨酶、肌酐、尿素氮、血氨及内毒素水平明显降低(P<0.05); 血清NO和TNF-α、IL-4、IL-6水平亦明显降低(P<0.05); 治疗前、后红细胞、白细胞、血小板无明显变化(P>0.05).30例重型乙肝肝衰竭患者存活18例,存活率为60.0%; 6例肝脏移植术前急性肝衰竭患者均成功接受肝脏移植; 6例肝脏移植术后急性肝衰竭患者存活2例; 2例胰十二指肠切除术后急性肝衰竭者,死亡1例.结论 ALSS通过全面清除肝衰竭患者体内毒素、NO和细胞因子,对肝衰竭有肯定的治疗作用; 并对等待肝脏移植的肝衰竭患者发挥过渡性桥梁作用.

    作者:阿永俊;李立;李晓延;唐继红;魏晓平;陈刚;朱洪 刊期: 2005年第05期

  • 酒精对体外肝细胞极性的影响

    目的观察酒精对培养肝细胞极性的影响.方法利用三明治构型培养成鼠肝细胞并观察酒精干预下其形态、膜区域蛋白特异性分布以及P450-b和白蛋白mRNA表达的变化,以确定酒精对肝细胞极性的影响.结果酒精干预后,肝细胞变扁平、多核、胞浆稀薄,肝板样结构消失; 免疫组织化学染色证明肝细胞膜区域蛋白失去特异性分布; 原位杂交显示加入酒精后只有较弱的P450-b和白蛋白mRNA阳性表达.结论酒精可导致肝细胞极性破坏,从而造成肝细胞损伤,本研究为在细胞水平研究酒精性肝病的发病机理提供了一个体外模型,具有较重要的临床意义.

    作者:张先杰;孙家邦;宋茂民;袁辉生;段钟平;卢实春 刊期: 2005年第05期

  • 切应力对大鼠肝窦内皮细胞分泌功能的影响

    目的了解不同切应力下肝窦内皮细胞分泌肝细胞生长因子(HGF)、白细胞介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)及一氧化氮合成酶(NOS)的分泌量,探讨切应力对原代培养的大鼠肝窦内皮细胞分泌功能的影响.方法构建血流动力学模型,实验分为对照组(切应力为0 dyn/cm2)和实验组2组,实验组又按切应力不同分为12、24和 48 dyn/cm2 3个亚组.每组分别在4、8、12及24 h抽取1 ml培养基,利用试剂盒检测培养基中HGF、IL-6、NO和NOS浓度.结果在不同切应力下,肝窦内皮细胞分泌HGF、IL-6、NO和NOS各不相同,在同一时相随着切应力的升高,HGF、IL-6、NO和NOS的分泌量也升高,实验组明显高于对照组(P<0.01),且48 dyn/cm2组明显高于另两个亚组(P<0.01); 实验组作用8、12、24 h时,HGF、IL-6、No及NOS分泌量明显高于作用4 h时.结论体外实验证实,切应力升高时肝窦内皮细胞分泌HGF、IL-6、NO和NOS的量明显增加,提示部分肝切除术后门静脉压力急剧升高能促使肝窦内皮细胞活化,分泌大量促肝细胞再生的细胞因子和介质.

    作者:丁纪明;陈平;张林;朱瑾;熊燕;段世刚;李颖 刊期: 2005年第05期

  • 胰腺癌的低磁场MRI表现

    目的探讨低磁场MRI诊断胰腺癌的价值.方法回顾性分析我院78例经手术和病理证实的胰腺癌的MRI表现.结果肿瘤的低磁场MRI主要表现为胰腺出现局部软组织肿块或全部肿大,轮廓、信号异常,T1加权像呈等或低信号,信号不均匀,T2加权像信号不均匀增高; 肝内外胆管、胰管扩张,邻近组织及器官受累.结论低磁场MRI能较好地显示胰腺癌的大小、形态和继发的胆、胰管梗阻、扩张以及肿瘤转移、侵袭范围,有利于肿瘤的诊断.

    作者:江同祥;林琦远 刊期: 2005年第05期

  • 急性非结石性胆囊炎的诊治(附79例分析)

    目的探讨急性非结石性胆囊炎的临床特点、发病机理及诊治.方法对我院1996年1月至2003年1月期间收治的79例急性非结石性胆囊炎患者的临床资料进行回顾性分析.结果本组病例中,行非手术治疗13例,手术治疗66例; 术后病理检查证实急性化脓性胆囊炎23例,坏疽性胆囊炎43例,其中伴胆囊穿孔18例.痊愈76例,死亡3例.结论对该病保持警惕性,动态观察病情变化, 必要时积极进行手术治疗是改善其预后的有效方法.

    作者:李敏;程南生;彭其芳;熊先泽 刊期: 2005年第05期

  • 原发性肝癌合并脾功能亢进患者肝脾联合切除对疗效的影响

    目的探讨原发性肝癌合并脾功能亢进肝脾联合切除对疗效的影响.方法回顾分析23例原发性肝癌合并脾功能亢进的患者行肝癌切除联合脾切除(切脾组,n=10)和肝癌切除联合脾动脉结扎(非切脾组,n=13)手术前、后外周血中CD4、CD8、CD16、CD4/CD8、WBC及PLT的变化,并比较2组的生存率.结果术前2组患者的CD4、CD8、CD16、CD4/CD8、WBC及PLT差异无统计学意义; 2组术中出血量和术后并发症发生率的差异亦无统计学意义的; 术后3个月,切脾组CD4、CD16、CD4/CD8、WBC及PLT指标比术前显著升高(P<0.01),且明显高于非切脾组(P<0.01); 非切脾组术后上述各项指标无明显改变.2组生存率比较差异无统计学意义.切脾组中无一例因白细胞改变而影响术后辅助化疗,而非切脾组有7例因白细胞过低而被迫终止了化疗.结论肝癌切除联合脾切除有利于肝癌合并脾功能亢进患者术后免疫功能的恢复及术后化疗.

    作者:吉鸿;黎一鸣;徐心;曹罡;杨文彬 刊期: 2005年第05期

  • 吉西他滨与胰腺癌化疗耐药

    目的探讨胰腺癌对吉西他滨化疗产生耐药性的相关机理.方法复习近年国、内外相关文献,对介导胰腺癌吉西他滨耐药性的主要基因及信号通路加以综述. 结果癌基因c-Src与bcl-XL、NF-κB炎症信号通路、细胞因子IL-1β及NO等与介导胰腺癌对吉西他滨的耐药性密切相关; 多药耐药基因MDR1/P-gP与胰腺癌吉西他滨耐药的相关性仍有待研究. 结论癌基因c-Src与bcl-XL、NF-κB炎症信号通路等可能成为新的治疗靶点以增加胰腺癌的化疗敏感性; 介导胰腺癌化疗耐药的关键基因与中心信号通路尚有待阐明.

    作者:潘博;郭俊超;廖泉;赵玉沛 刊期: 2005年第05期

  • 肝移植术后肝动脉血栓的防治(附2例报告)

    目的探讨肝移植术后肝动脉血栓的防治方法,以降低其发生率.方法对52例(53例次)肝移植手术后发生肝动脉血栓的2例患者的临床资料进行回顾性总结.结果该2例患者均为乙肝肝硬变合并巨块型肝癌,术中发现受体肝动脉内膜及外膜管壁硬化,血管弹性差,内外膜间隙较大,供、受体肝动脉直径稍有差距,致血管内膜对合不好,造成吻合口扭曲、皱折等,从而导致术后肝动脉血栓形成,2例患者术后均经彩超检查确诊.结论对肝移植术后肝动脉血栓的形成应以预防为主,肝移植术后应常规用彩超监测肝动脉血流,一旦发现肝动脉血栓,应立即行肝动脉溶栓、取栓和重新吻合术.

    作者:李汛;李玉民;石斌;周文策;陈昊;张磊;孟文勃;曹农;沈中阳;朱志军;郑虹 刊期: 2005年第05期

  • TGF-β1诱导人肝癌细胞系凋亡信号转导机理的研究

    目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝癌细胞系凋亡及其与p53基因及Smad 4的关系.方法选用3种含有不同p53基因状态的人肝癌细胞系,均分为TGF-β1诱导组(实验组)和对照组; 应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)对TGF-β1诱导的肝癌细胞的凋亡进行定量检测; 另外,应用Lipofectamine 2000把含有Smad 4结合元件和荧光素酶基因的TGF-β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行转染,再经TGF-β1作用,分别检测其相对荧光素酶活性. 结果在应用TUNEL检测的3个细胞系中,TGF-β1能诱导HepG2细胞(野生型p53)凋亡,其细胞凋亡率实验组明显高于对照组 (P<0.05); 而Huh-7(突变型p53)和Hep3B细胞(缺失型p53)凋亡细胞较少,其细胞凋亡率实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05).荧光素酶检测提示,HepG2细胞的Smad 4表达活性实验组明显高于对照组 (P<0.05); 而Huh-7和Hep3B细胞的Smad 4表达较低,实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 HepG2细胞系比Huh-7和Hep3B细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡,Smad 4是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一.

    作者:王春雷;黄志强;万远廉;Kevin Behrns 刊期: 2005年第05期

  • 肝细胞癌术后MRI表现

    目的研究肝细胞癌术后肝脏切缘单纯术后改变与复发的MRI表现特征.方法手术后病理证实为肝细胞癌、术后定期复查或临床怀疑复发采用MRI检查的病例共20例.MRI包括: T1WI横断面平扫和横断面、冠状面增强扫描,VIBE序列扫描,T2WI横断面平扫,冠状面TrueFisp序列扫描.结果肝脏切缘单纯术后改变13例、复发6例、可疑复发1例; 残肝内复发12例,其中侵犯左、右肝管及肝总管3例; 肝门、门腔间隙及腹膜后淋巴结肿大3例,腹膜、肠系膜广泛种植2例.结论 MRI能鉴别肝脏切缘单纯术后改变和复发,早期发现肝内、外复发灶.

    作者:陈卫霞;闵鹏秋;宋彬;吕粟;陈晓荣 刊期: 2005年第05期

  • 内镜在胆源性急性胰腺炎治疗中的应用

    在临床上胆源性急性胰腺炎(acute biliary pancreatitis, ABP)的表现是胆道外科疾患问题和继发急性胰腺炎的总和.原发性胆道问题和继发性胰腺炎,在病情的严重程度上是不一样的,因此在处理上应有先后与主次之分.在判定ABP治疗方案之前,应特别注意区分胆道有无梗阻,同时还要区分是以胆道问题为主,还是以胰腺炎为主,选择合理的治疗方案.在急性胰腺炎中,由结石引起者约占50%; 实际上约占20%~30%特发性胰腺炎中大约50%~70%可能由微小结石、胆泥、胆固醇结晶等引起,同样属ABP.酒精性胰腺炎约占20%~30%.其他还有少见原因的胰腺炎,如胆道蛔虫、高脂血症等[1].急性胰腺炎的治疗方式包括内科治疗、外科手术和微创技术.其中微创技术包括腹腔镜手术、十二指肠镜技术及导管介入技术[2].现就十二指肠镜技术在ABP治疗中的应用作一介绍.

    作者:陈训如 刊期: 2005年第05期

  • 非转流小型猪原位肝移植模型的建立及评价

    目的建立标准化程度高、重复性和稳定性好的小型猪原位肝移植模型.方法选巴马小型猪为实验动物,在非体外静脉转流条件下行同种异体原位肝移植术,观察动物存活率及术中血流动力学、血气和生化指标的改变.结果在非体外静脉转流条件下行同种异体原位肝移植20例,平均手术时间为(181±25.8) min,平均无肝期(28.4±3.2) min.在无肝期,血流动力学和代谢发生急剧变化: 平均动脉压(MAP)从无肝前期的(14.59±1.68) kPa(1 cm H2O=0.098 kPa)降至(5.87±0.91) kPa,中心静脉压(CVP)从(0.66±0.11 ) kPa降至(0.27±0.10) kPa; 体温、pH、剩余碱(BE)及HCO3ˉ显著降低,心率及血清K+显著升高(P<0.05); 随着门静脉和下腔静脉血流的开放,血流动力学及代谢紊乱即逐渐恢复正常.动物1周存活率为90%,16头动物存活2周以上.肝功结果: 术后第1天ALT、AST和TBIL显著升高并达到峰值,第2天开始下降,第7天降至麻醉后水平.结论非转流条件下的小型猪同种异体原位肝移植模型具有标准化程度及手术成功率高、重复性和稳定性好的优点,是大型动物肝移植系列研究的理想动物模型.

    作者:郑树国;冯晓彬;董家鸿;冷建军;李昆;郑平;熊燕;张玉君 刊期: 2005年第05期

  • 角蛋白家族特性及其与恶性肿瘤的关系

    目的探讨角蛋白家族的特性及其基因的突变和异常表达与恶性肿瘤关系研究的新进展.方法采用文献回顾的方法, 对目前国内、外有关角蛋白家族的研究状况进行分析与综述. 结果角蛋白家族是3种细胞支架蛋白 (中间纤维蛋白、微管蛋白和微纤维蛋白)之一的中间纤维蛋白, 具有维持细胞力学完整性及调节细胞周期作用.角蛋白mRNA基因的突变或角蛋白家族蛋白的过度表达,可使细胞周期紊乱或细胞力学完整性被破坏,从而发生相应疾病或恶性肿瘤.结论通过对角蛋白家族突变基因及角蛋白家族蛋白的异常表达的检测,可对一些恶性肿瘤或疾病进行诊断、分期和预后判断.

    作者:韩黔峰;周总光;陈尧 刊期: 2005年第05期

中国普外基础与临床杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:四川大学华西医院