蔡锦方
目的 总结膝关节前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤手术治疗的效果,提高治疗水平.方法 2001年6月~2005年6月收治23例膝ACL损伤,男17例,女6例;年龄15~77岁.左膝14例,右膝9例.损伤原因:膝关节扭伤1例,砸伤7例,交通伤13例,其他伤2例;均为急性损伤;伤后2 h~15 d手术.手术分别采用修补髌腱替代、髂胫束替代治疗.结果 术后23例获随访6~39个月,根据Lysholm评分标准,膝关节恢复良好,获优16例(69.7%),良5例(21.7%),差2例(8.6%),优良率91.4%.结论 ACL损伤手术效果好,膝关节功能恢复满意.
作者:石英杰;李士春 刊期: 2007年第04期
目的 探索在动物实验条件下一种兔肌腱的石蜡制片方法.方法 经手术分别获取新西兰大白兔1 cm长左右侧后爪2~3趾的趾深屈肌腱.左侧后肢为正常组,切取后立即投入改良的4%多聚甲醛中室温固定1 d;右侧后肢为实验组,暴露后爪趾深屈肌腱后,注射10μl腺病毒载体,术后第3天于注射点切取,并立即投入改良4%多聚甲醛,室温固定1 d.流水冲洗过夜后用酒精正丁醇混合液进行梯度脱水,二甲苯透明,浸蜡、包埋并切片.烤片后常规脱蜡至水,HE染色.结果 光镜下,正常组肌腱的胶原纤维束平行而整齐紧密地排列,束间有沿其长轴成行平行排列的肌腱细胞,肌腱外膜可见成排的腱细胞.实验组肌腱外膜有炎性反应性增生,组织结构完整,染色鲜艳.结论 为肌腱形态学方面的实验研究提供了一条新的便捷途径.
作者:鄂群;朱蓓;王东林 刊期: 2007年第04期
目的 探讨改良前方入路治疗颈胸段椎体病变的手术方法.方法 2000年9月~2005年1月,对23例C7~T3椎体病变患者均采用标准颈椎右前方入路联合胸骨柄正中劈开显露病变椎体,行病椎次全切除、植骨融合、内固定术.其中男15例,女8例;年龄24~62岁.颈胸段骨折3例,骨折合并脱位7例,结核6例,肿瘤7例;病变部位:C6-T1、C6-T2节段各2例;C7-T1、T3节段各3例;T1节段8例;T2节段5例;病程3 d~2年.术前Frankel分级:A级2例,B级4例,C级7例,D级4例,E级6例.术后佩戴头颈胸支具3~6个月.结果 术后23例均获随访10~42个月,全部患者椎间植骨3~6个月均获骨性愈合,无内固定失败,脊柱稳定性好.术后Frankel分级:A级1例,B级0例,C级2例,D级10例,E级10例.Frankel分级平均提高1.3级.术后10个月1例肺癌全身转移死亡.余6例肿瘤患者随访时仍生存.结论 采用改良前方入路暴露颈胸段病灶充分、安全,适用于颈胸段椎体病变的手术治疗.
作者:谢肇;许建中;周强;谭祖键 刊期: 2007年第04期
目的 探讨吻合血管股前外侧筋膜瓣修复前臂及手部创面的临床应用.方法 2000年9月~2003年12月收治前臂及手部软组织缺损13例,男8例,女5例;年龄19~43岁.机器碾压伤3例,皮带绞伤4例,重物压伤6例.软组织缺损部位:前臂掌侧6例,手背部6例,食指桡、背侧1例.缺损范围17.5 cm×7.7 cm~4.6 cm×3.4 cm,其中4例合并前臂、手部骨折,9例合并前臂、手部伸肌腱损伤.患者均急诊行清创、骨折复位内固定,修复损伤的神经、肌腱及血管,术后抗感染治疗3~5 d后,采用吻合血管的股前外侧筋膜瓣联合中厚皮片植皮修复软组织缺损.结果 术后患者均无血管危象发生.1例第4、5指蹼处约2.0 cm×1.0 cm植皮坏死,经换药及再次取全厚皮植皮后成活,余患者筋膜瓣及植皮均成活.全部获3~12个月随访,修复后的创面外形均良好,无皮肤挛缩.按中华医学会手外科学会上肢部分功能评定标准:优9例,良2例,可1例,差1例,优良率85%.结论 吻合血管股前外侧筋膜瓣联合植皮修复前臂及手部创面外形好,不需再次手术整形,远期无皮肤瘢痕挛缩发生,供区处理简单,创伤小.
作者:张文正;伍辉国;章烽火;林立国;章友棣;张功林 刊期: 2007年第04期
目的 探讨应用腓肠神经营养血管远端蒂肌皮瓣治疗慢性跟骨骨髓炎的方法.方法 2002年1月~2005年10月治疗7例跟骨骨折所致慢性跟骨骨髓炎,其中男4例,女3例;年龄15~68岁.均为跟骨开放性骨折或跟骨闭合性骨折切开复位内固定或植骨致切口感染、跟骨外露,骨髓炎发生,病程3~12个月.手术彻底清创后采用腓肠神经营养血管远端蒂肌皮瓣移位治疗,肌皮瓣范围为8 cm×4 cm~12 cm×7 cm,其中肌瓣范围为4 cm×3 cm~6 cm×5 cm.供区直接缝合5例,植皮覆盖2例.结果 术后移位肌皮瓣完全成活,切口Ⅰ期愈合.7例均获2~6个月随访,皮瓣质地,外形良好.骨髓炎未见复发,无并发症发生,所有患者均恢复正常行走.结论 腓肠神经营养血管远端蒂肌皮瓣治疗慢性跟骨骨髓炎是完全可行的,给跟骨骨髓炎的治疗带来了一种新方法.
作者:沈余明;向东;王浩;陈辉;黎明;张国安 刊期: 2007年第04期
目的 观察富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对体外培养的中国青山羊骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和成骨分化的影响,探讨PRP促进骨修复的细胞学机制.方法 将体外培养第3代中国青山羊MSCs,分为对照组(单纯血清培养组)和PRP组(加入10%PRP复合培养),通过相差显微镜观察细胞生长情况,于2、4、6、8 d采用MTT法检测细胞增殖活性.将体外培养的第3代细胞分为对照组、地塞米松组(dexamethasone,DEX)组、PRP组,于培养第7天行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、第18天行矿化结节染色检测细胞成骨分化活性.结果 相差显微镜下见PRP组细胞先达到汇合,MTT法显示PRP组2、4、6、8 d的平均吸光度(A)值分别为0.252±0.026、0.747±0.042、1.173±0.067、1.242±0.056明显高于对照组(A值分别为:0.137±0.019、0.436±0.052、0.939±0.036、1.105±0.070)(P<0.01).与对照组比较,PRP组ALP阳性细胞数增多,矿盐沉积减少;DEX组ALP阳性细胞数减少,矿化结节形成明显增多.结论 PRP能明显促进中国青山羊MSCs增殖,抑制MSCs向成骨细胞分化.
作者:程文俊;金丹;赵艳;曾宪利;徐凯;江汕;裴国献 刊期: 2007年第04期
目的 探讨游离组织瓣和带蒂组织瓣移植一期修复局部晚期头颈癌术后缺损的适应证和技巧.方法 2005年3月~12月采用自体组织移植一期修复头颈癌术后缺损25例,年龄14~78岁;其中舌癌7例(T3N1M0、T3N2M0、T3N0M0各2例,T4N2M01例);颊黏膜癌4例(T3N2M01例,T4N0M02例,放疗后未控1例);下牙龈癌3例(T4N1M0 2例,术后复发侵犯皮肤1例);口底癌2例(T4N3M0,T4N0M0各1例);硬腭癌1例(T4N0M0);硬腭癌术后复发1例;软腭癌放疗后未控1例;下咽放疗后未控2例;鼻咽癌放疗后颈淋巴结复发侵犯皮肤2例;颞部皮肤癌1例;喉癌术后复发1例.采用游离组织瓣12例,其中桡侧前臂皮瓣8例,空肠瓣2例,髂骨瓣1例,股前外侧皮瓣1例;带蒂组织瓣13例,其中胸大肌肌皮瓣4例,斜方肌肌皮瓣2例,舌骨下肌肌皮瓣7例.术后观察组织瓣成活率、并发症和近期疗效.结果 术后1例空肠瓣坏死,1例舌骨下肌肌皮瓣部分坏死,其余组织瓣全部成活,伤口Ⅰ期愈合.全部患者随访2~10个月,原发灶未控或复发5例,其中3例死亡;2例带瘤生存,颈淋巴结复发1例,挽救手术后生存至今;无瘤生存20例.外形满意20例,基本满意4例,不满意1例.吞咽功能满意22例,基本满意2例,不能吞咽1例.22例术后发音满意,3例喉全切术不能发音.结论 组织瓣移植扩大手术适应证,为局部晚期或者放疗后复发/未控的头颈癌患者治疗提供机会;游离组织瓣和带蒂组织瓣移植具有较高成功率,应根据患者一般情况和缺损类型选择合适的修复方法;保证血供和静脉回流是组织移植成功的关键.
作者:杨熙鸿;彭汉伟;郭海鹏;吴俊东;陈伟正;林建英;徐敏 刊期: 2007年第04期
目的 探讨肝移植术中大血管重建方法的改进,提高吻合速度,缩短无肝期时间,减少其对机体的损害.方法 选用杂种犬32只,随机分为供、受体两组,每组16只,再将受体组按血管重建方式不同随机分为两组:A组10只(磁环吻合非转流组,使用不同口径的氧化钛涂层磁环),B组6只(手工吻合被动静脉转流).对术中各组的手术时间、血液动力学、血管吻合情况及术后存活情况分别进行观察.结果 ①手术时间:A组手术时间为3.24±0.49 h,无肝期为5.89±2.27 min,肝下下腔静脉吻合时间为3.89±0.73 min;B组手术时间为4.12±0.51 h,无肝期为28.33±6.04 min,肝下下腔静脉吻合时间12.16±3.72 min;两组比较有统计学差异(P<0.01).②血流动力学:A组血流动力学稳定,不用升压药,补液730.56±150.56 ml;B组无肝期血压偏低,持续时间长,肝脏复流后需要大量升压药维持血压,补液量2 241.67±390.78 ml.③血管吻合口情况:A组吻合口均无渗血,少数扭曲吻合口通过轻度旋转磁环予以纠正,术后无血栓形成;B组有4只因肝素化导致吻合口持续渗血,其中1只门静脉血栓,1只门静脉扭曲.④术后存活情况:A组存活7 d以上3只,3~6 d 6只,12 h 1只;B组存活3~6 d 2只,1~2 d 3只,12 h 1只. 结论使用磁环进行犬肝移植大血管重建,吻合过程简便,无肝期明显缩短.但磁环需要留置腹腔内,有待进一步改进.
作者:史源;蒋安;张勇;李泉源;李建辉;张吉成;孟珂伟;刘昌;吕毅 刊期: 2007年第04期
目的 制备胶原-透明质酸支架,评价其与兔髁状突软骨细胞的生物相容性,探讨其应用于关节软骨组织工程的可行性.方法 冷冻干燥法制备胶原-透明质酸复合多孔海绵支架材料,将其与碳化二亚胺[1-ethyl-3-(3-dimethyl aminopropyl)carbodiimide,EDC]进行化学交联.分别采用体积法和体外酶解实验测定支架材料孔隙率和降解率,扫描电镜观察交联前后支架材料的形态变化.取3周龄新西兰兔髁状突软骨细胞,体外培养5 d后,甲苯胺蓝染色,倒置相差显微镜下观察行细胞鉴定.取消化后第2代软骨细胞接种至支架材料复合培养,倒置相差显微镜下观察细胞生长情况.复合培养1、3、5、7和10 d后,PBS液清洗3次,置入24孔板并以0.25%胰酶和0.1%EDTA消化细胞,采集细胞进行细胞计数并绘制细胞生长曲线.另取部分样本继续培养5 d,行组织学和扫描电镜观察.结果 胶原-透明质酸支架材料经化学交联后,具有合适的三维多孔结构,孔隙率为83.7%,孔径100~120 μm;交联后抗酶解能力显著增加.髁状突软骨细胞在其表面和内部贴附良好,形成细胞-材料复合体,细胞增殖实验显示,复合培养1 d,材料中细胞数为3.7×104/支架,10 d后增至8.2×104/支架.电镜观察见细胞周围有基质分泌.结论 EDC交联后的胶原-透明质酸支架具有良好空间结构和生物相容性,可作为支架材料用于髁状突软骨组织工程的研究.
作者:吴炜;毛天球;封兴华;陈富林;岳进 刊期: 2007年第04期
目的 研究纤维粘连蛋白(fibronection,FN)与碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)单独或联合应用时对成骨细胞在生物衍生骨支架上黏附的影响,并探索其潜在机制.方法 取第3代成骨细胞,以bFGF(0.1、1、10和100 ng/ml)刺激,接种于FN(0.1、1、10和100 μg/ml)或多聚赖氨酸(Po1ylysine)修饰的生物衍生骨支架上,MTT法检测组间细胞黏附效率差异,电镜观察细胞密度与形态.GRGDS肽封闭后再次重复上述步骤.结果 单独应用FN与bFGF均可增加成骨细胞在生物衍生骨支架上的黏附效率(P<0.05),联合应用时,产生的效应显著增强,两者存在交互作用(P<0.01).而Polylysine与bFGF无此交互作用(P>0.05).电镜观察发现,两者联合应用时细胞密度、铺展效果均优于单独应用.应用GRGDS肽后,FN联合bFGF产生的黏附促进作用被显著阻断.结论 bFGF与FN对成骨细胞在生物衍生骨三维支架上的黏附存在协同刺激作用,细胞黏附产生这一效应的机制很可能是由RGD-整合素α5β1途径来介导的,需深入研究探讨.
作者:冯立;曹晓建;任永信 刊期: 2007年第04期
目的 观察采用骨软骨镶嵌成形术(Mosaicplasty)修复膝关节中等和大面积骨软骨复合缺损的效果,为临床应用提供理论依据.方法 24只成年山羊随机分成3组(n=8).中等面积缺损组在股骨内髁制造直径6 mm缺损,植入直径2 mm骨软骨柱修复;大面积缺损组于股骨内髁制造9 mm直径缺损,以直径3 mm骨软骨柱修复;对照组于股骨内髁制造直径6 mm缺损后不修复.自股骨髁间窝和滑车沟两侧非负重区用自制Mosaicplasty器械钻取骨软骨柱,推出器嵌入缺损处镶嵌填满.术后4、8、16及24周处死动物,取修复骨软骨组织行大体观察、HE及甲苯胺蓝染色.术后24周,取大面积缺损组和对照组膝关节摄X线片,观察骨软骨缺损修复情况,并分别取修复组织及正常软骨组织行蛋白聚糖(glycosaminogly cans,GAG)含量测定.结果 中等面积缺损组术后4周,移植的骨软骨柱与基底部骨床结合牢固;8~24周软骨层之间以及与正常软骨间界限仍清晰.大面积缺损组术后4周,移植的骨软骨柱与基底骨床结合牢固,部分骨软骨柱被压入骨床内;8~24周压陷程度加重,与股骨髁相对关节面的部分软骨被磨损.对照组24周缺损仍无明显修复迹象,与股骨髁相对关节面的软骨磨损剥脱.组织学观察结果类似大体观察,术后24周中等及大面积缺损组软骨柱间均有缝隙存在,大面积缺损组毗邻软骨细胞稀疏肥大.术后24周,X线片可见大面积缺损组软骨下骨愈合良好,而对照组仍可见骨质缺损,与股骨髁相对关节面的软骨局部骨质硬化;软骨GAG含量测定显示正常软骨和大面积缺损组修复组织间差异无统计学意义(P>0.05);前两者与对照组修复组织比较,差异均有统计学差异(P<0.05).结论 Mosaicplasty可修复中等面积骨软骨复合缺损,但无法有效修复大面积缺损,效果有待改进.
作者:张海宁;冷萍;王英振;吕成昱;刘金钊;王湘达;王昌耀 刊期: 2007年第04期
目的 为足背部皮肤及软组织缺损修复探讨一种新型供血来源的皮瓣.方法 2003年11月~2005年12月,设计以胫前动脉踝上穿支为供血的皮瓣修复足背皮肤软组织缺损7例,其中男5例,女2例;年龄8~56岁.车祸伤2例,砸伤后慢性溃疡2例,电击伤、浓硫酸烧伤、热钢筋洞穿伤各1例.均合并软组织缺损、肌腱骨质外露,缺损范围:4.5 cm×3.0 cm~10.0 cm×9.0 cm.病程1 h~12个月.术中切取皮瓣6 cm×5 cm~10 cm×10 cm,穿支皮瓣蒂长 1.5~2.7 cm;皮瓣血管蒂位于踝上6~12 cm.结果 术后7例皮瓣全部成活,无淤血、坏死及张力性水泡发生.随访6~18个月,皮瓣外形及功能恢复满意,术后1年感觉恢复良好,两点辨别觉为6~12 mm.结论 以胫前动脉踝上穿支为供血的皮瓣修复足背软组织缺损,手术操作简便,安全可靠,是一种较理想的皮瓣供区.
作者:陈誉华 刊期: 2007年第04期
目的 对自体富血小板凝胶(autologous platelet-rich gel,APG)在难治性糖尿病皮肤溃疡中的应用进行综述.方法 广泛查阅文献,对APG促进糖尿病皮肤溃疡愈合的作用机制和疗效进行综合分析.结果 APG具有促进溃疡愈合的作用,特别是在难治性糖尿病皮肤溃疡方面有较好的效果.其主要作用机制可能与APG中含有高浓度的各种生长因子有关.结论 APG具有促进难治性糖尿病皮肤溃疡愈合的作用,有良好的应用前景,可以作为一种新的辅助治疗手段应用于临床.
作者:袁南兵;冉兴无 刊期: 2007年第04期
目的 探讨胸锁乳突肌胸骨头单蒂肌皮瓣修复颌面部软组织缺损畸形的方法及效果.方法 2004年5月~2006年9月,应用胸锁乳突肌胸骨头单蒂肌皮瓣修复颌面部软组织瘢痕及缺损5例,均为男性,年龄23~34岁.分别为胎儿时母亲宫腔内注射药物、婴幼儿期面颊部感染、电击伤后遗留瘢痕或凹陷畸形.需要修复范围为5 cm×3 cm~9 cm×6 cm.结果 术后5例移位胸骨头肌皮瓣均成活,但因静脉回流障碍均发生小面积的表皮坏死,2~3周自行愈合,皮瓣周围有少许瘢痕形成.1例术后患侧发生肩部上抬无力,6个月后基本恢复.术后均获随访1~6个月,修复后的颌面1例蒂部略显臃肿;1例瘢痕明显,但患者满意;余3例外观满意.结论 胸锁乳突肌胸骨头单蒂肌皮瓣较全胸锁乳突肌皮瓣设计更灵活,且能提供足够的组织量,是修复颌面部皮肤软组织缺损的一种理想材料.
作者:于蓉;段伟强;刘勇;岑瑛 刊期: 2007年第04期
目的 探讨有限内固定结合外固定架治疗胫腓骨开放、粉碎性骨折的优越性及并发症的防治.方法 2001年1月~2004年6月利用有限内固定结合外固定架治疗胫腓骨开放粉碎骨折60例,其中男42例,女18例;年龄18~66岁.骨折部位:胫骨上段14例,中段30例,下段16例,均为开放、粉碎性骨折;合并休克8例,颅脑损伤12例,胸腹部损伤8例,其他部位骨折10例,血管损伤2例,小腿皮肤脱套伤6例,均未合并神经损伤.结果 术后均获随访8个月~4年,平均23个月,均达骨性愈合,骨折愈合时间3~14个月;无断钉、松动及移位发生,膝踝关节功能均较好.结论 应用有限内固定结合外固定架治疗胫腓骨开放、粉碎性骨折手术创伤小,操作简便,符合固定原则,可早期进行功能锻炼,避免邻近关节功能障碍,利于骨折愈合和肢体功能康复.
作者:方广文;吕守正 刊期: 2007年第04期
目的 探讨大鼠心脏移植过程中,重组腺病毒介导的外源基因转移至供心的可行性及安全性.方法 取健康雄性Wistar大鼠140只,10周龄左右,体重200~250 g.平均分为供、受体各70只,受体大鼠又随机分为重组腺病毒载体(recombinant adenoviral vector encodingtheβ-galactosidase gene.Ad-LacZ)基因转移组35只,对照组35只.手术制备建立同系大鼠腹腔异位心脏移植模型,在取出供心后,经供心冠脉循环系统于低温下(4℃)将Ad-LacZ 800μl灌注入供心,30 min后进行异位心脏移植;对照组则灌注等量生理盐水.分别在移植术后3、5、7、14及28 d取供心,经X-gal染色检测Ad-LacZ基因的表达情况和规律.术后第28天同时取受体移植心、肝、肾、肺和自体心脏组织进行组织学观察,并以腺病毒E1A区引物行组织RT-PCR检测,验证腺病毒是否具有复制可能性.结果 在Ad-LacZ基因转移组移植心脏内检测到Ad-LacZ基因的表达,对照组未检测到Ad-LacZ基因的表达;Ad-LacZ基因转移组基因表达的高峰时间为术后3、5及7 d(平均LacZ阳性染色细胞数/切片分别为66.4±23.1,91.3±32.4,68.7±22.7)组间比较,无统计学意义(P>0.05);14 d(32.1±13.9)后逐渐下降,与3、5、7 d时比较有统计学意义(P<0.05);28 d(3.9±3.4)仅有极少表达,与3、5、7及14 d时比较有统计学意义(P<0.05).术后28 d各组受体重要脏器及自体心脏组织学检查无明显变化,RT-PCR扩增未见腺病毒E1A区mRNA产物.结论 在心脏移植中,经供心冠状动脉系统以重组腺病毒为载体进行基因转移可以将目的 基因有效且安全地转入供心内.
作者:王丽平;刘越;尹新华;贾智博;徐晶 刊期: 2007年第04期
目的 综述电纺丝技术在纳米高分子支架中的近期应用研究进展.方法 查阅国内外近年有关文献,对纳米材料高分子支架的特点、电位行技术制备纳米高分子支架的优点及研究进展,进行综合分析.结果 组织工程支架材料表面的微观、亚微观和空间拓扑结构,尤其是表面的织态结构对细胞形态的黏附、铺展、定向生长及生物活性有很重要的影响;电纺支架能够仿生细胞外基质的结构特点,有望成为理想的组织工程支架;阐述电纺支架在软骨、骨、血管、心脏、神经等组织工程领域的应用.结论 纳米高分子支架材料有利于细胞黏附、定位、增殖和分化,使其在组织工程领域具有诱人的应用前景.
作者:陈登龙;李敏;房乾 刊期: 2007年第04期
目的 研究主干蒂与穿支蒂穿支皮瓣血流动力学的差异.方法 选成年小型猪4只,雌雄各2只,体重23.0±2.0 kg.设计自身对照的以两侧腹壁上动脉主干血管或其穿支为蒂的腹部横行皮瓣,一组为逆行解剖血管蒂至腹壁上动脉主干的穿支皮瓣;一组为腹壁上血管腹直肌穿支为蒂的穿支皮瓣.于术后2 h,1、2和3周分别以激光多普勒血流仪测量皮瓣皮肤的血流灌注量,以彩色多普勒超声测定腹壁上动脉的血流速度.术后1周计算皮瓣成活面积.3周时处死动物行氧化铅凝胶动脉灌注皮瓣造影.结果 术后2 h、1周时主干蒂穿支皮瓣较穿支蒂穿支皮瓣水肿严重;两组皮瓣的皮肤血流灌注量有统计学差异(P<0.05),术后2、3周两组皮瓣皮肤的血液灌注量、皮瓣的坏死面积(主干蒂穿支皮瓣组:19.73%±3.21%;穿支蒂穿支皮瓣组:19.81%±3.33%)无统计学差异(P>0.05).术后2 h、1周时主干蒂穿支皮瓣组的腹壁上动脉平均流速减慢,与另一组比较有统计学差异(P<0.05);术后2、3周时两组接近.3周时皮瓣造影显示主干蒂穿支皮瓣组的腹壁上血管有新生血管.结论 ①主干为血管蒂的穿支皮瓣血流动力学表现在术后1周皮瓣皮肤血流灌注量下降,但不影响皮瓣的成活面积;②血管主干至其他组织的或受区血管的分支结扎不能对皮瓣起到超灌注的作用.
作者:刘育凤;归来;张智勇;牛峰;黄绿萍;张继;李慧超 刊期: 2007年第04期
目的 寻找一种体外快速构建复合型组织工程皮肤的方法,为大面积烧伤、创伤创面的覆盖提供足够的自体皮源.方法 取人的包皮,进行表皮细胞及成纤维细胞的分离鉴定及体外培养扩增,对表皮细胞群行广谱角蛋白抗体-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)、角蛋白19(cytokeratin19,K19)-FITC免疫荧光染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白-FITC免疫荧光鉴定.将表皮细胞接种于异体脱细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)乳头面,于气-液平面培养构建表皮层,实验分两组进行,实验组培养基中添加25 ng/ml角化细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF),对照组不添加.6 d后,接种成纤维细胞于两组ADM的另一面,继续培养24 h.收集构建的组织工程皮肤,切片行苏木素-伊红染色,观察所构建皮肤的镜下结构,并对比添加KGF对其影响.结果 免疫荧光染色培养扩增的表皮细胞群广谱角蛋白抗体-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其中K19阳性表达的细胞接近17%.成纤维细胞体外培养7 d可扩增超过100倍,波形蛋白-FITC免疫荧光染色呈阳性.经过7 d的体外培养构建,可以得到复合型皮肤,经苏木素-伊红染色镜下观察显示,实验组表皮层连续,形成细胞层数2~3层的复层结构,真皮中含有成纤维细胞;对照组表皮层不连续,细胞层数少,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法进行种子细胞的分离,应用添加KGF的条件培养基,采用分步接种构建的方法,可在7 d内构建出复合型组织工程皮肤.
作者:杨斌;洪清琦;丘日升;张琳;董月桐 刊期: 2007年第04期
目的 探讨血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)在脱细胞真皮移植部位的表达变化和意义.方法 取近交系小型香猪15只建立猪实验模型,分别于每只猪脊背两侧制作6 cm×6 cm各3处6个创面.随机分为三组,每组5只.A组为对照组,猪刃厚自体皮移植;B组异体脱细胞真皮与猪刃厚自体皮复合移植;C组J-1型(人)脱细胞真皮与猪刃厚皮复合移植.分别于移植术后3、9、21及30 d观察移植皮片成活情况和面积,于移植后3、6、9、12、21及30 d各时间点取移植组织标本,流式细胞仪检测VCAM-1的表达变化.结果 移植术后3 d各组移植皮片基底分离;9 d A组皮片转红润基底粘连较紧密,揭开皮片可见渗血,B、C组皮片颜色次之,基底粘连不紧密;21 d,A、B、C组移植皮片成活面积分别为94%±12%、92%±9%和91%±11%;术后30 d各组移植皮片均愈合良好.各组VCAM-1表达,移植术后3 d无明显差别;6 d A组表达明显高于B、C组有统计学意义(P<0.05);9、12 d B、C组明显高于A组有统计学意义(P<0.05);30 d,各组VCAM-1表达均低于3 d有统计学意义(P<0.01).结论 同种和异种真皮基质移植部位VCAM-1表达高峰迟滞于自体皮移植;提示VCAM-1表达可能与脱细胞真皮活化、血管再生有关.同种和异种真皮移植物VCAM-1表达无差别.
作者:潘云川;徐家钦;陈思环;粱尊鸿;吴多能;陈彦堃;钟琼梅 刊期: 2007年第04期