田云虎；刘亚；刘焕彩；王学文；刘儒森
目的 总结手术治疗移位性肩胛颈骨折的临床效果. 方法 2002年1月～2006年1月,收治12例移位性肩胛颈骨折.男8例,女4例;年龄22～57岁.X线片及CT检查:盂极角均＜20°,提示肩胛盂有明显旋转移位.采用重建钢板及拉力螺钉内固定9例,重建钢板内固定2例,拉力螺钉内固定1例. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.12例获随访14周～3年,平均14.5个月.X线片示盂极角均＞20°.根据Rowe疗效评价标准,优7例,良3例,可1例,差1例,优良率83.3%.肩袖损伤漏诊致肩关节不稳1例;1例因恐惧疼痛未有效锻炼,肩外展50°,三角肌肌力3级. 结论 移位性肩胛颈骨折均应修复,同时应根据盂极角进行观察,纠正肩胛盂的旋转移位,重建肩关节稳定性,减少并发症.
作者：李子恢；曹力 刊期： 2007年第09期
目的 探讨枕大神经松解术治疗顽固性枕大神经痛的疗效. 方法 1998年3月～2005年8月,收治26例保守治疗无效的顽固性枕大神经痛患者.男12例,女14例;年龄38～63岁,平均52岁.病程3～7年.16例有长期低头工作史,5例有外伤史,余无明显诱因.视觉模拟评分法(visual analogue scales, VAS)评分6.0～9.5分,平均8.6分.7例全麻下行头下斜肌切断松解枕大神经,19例局麻下行枕大神经松解.术中10例切除肿物并行病理检查. 结果 26例术后疼痛明显缓解或消失,切口均Ⅰ期愈合.病理检查:淋巴结3例,神经鞘瘤2例,瘢痕压迫5例.术后3 d VAS评分为0～5分,平均2分.23例获随访1～3年.术后1个月VAS评分为0～4.5分,平均1.9分.其中2例复发,症状较术前减轻,未再行手术探查;6例劳累后疼痛略加重,口服消炎镇痛类药物或理疗后可缓解;余患者无复发. 结论 对枕大神经行彻底松解,包括头下斜肌的切断、斜方肌与头半棘肌间松解、浅出斜方肌与骨纤维管处松解,使其走行过程中无任何压迫,是治疗顽固性枕大神经痛的关键.
作者：田云虎；刘亚；刘焕彩；王学文；刘儒森 刊期： 2007年第09期
目的 评价应用闭合复位带锁髓内钉固定治疗股骨干粉碎性骨折的临床疗效. 方法 1999年8月～2005年4月,采用闭合复位顺行带锁髓内钉固定技术治疗股骨干粉碎性骨折70例.男54例,女16例;年龄17～58岁.骨折均位于股骨转子下2 cm至股骨髁上5 cm.按AO分型: B型17例,C型53例.受伤至手术时间为1～12 d,平均5.8 d. 结果 B型骨折患者手术时间为90～250 min,C型骨折患者60～180 min.70例失血量50～450 ml,平均230 ml.术中3例发生骨劈裂,1例C型骨折远端1枚锁钉锁入失误,7例肢体短缩1.0～1.5 cm.68例获随访10～60个月,平均19个月.63例于术后3～10个月骨折愈合,5例于术后3～4个月行远端锁钉取出动力化后4～10个月骨折愈合.60例髋、膝关节功能活动优良, 余8例髋或/和膝关节功能受限. 结论 闭合复位带锁髓内钉固定是治疗股骨干粉碎性骨折有效方法之一,具有损伤小、失血少、骨折愈合率高、功能恢复好的优点.
作者：汪金平；向生健；钟凤林；赵晨阳；杨小奇；兰玉平；殷光义 刊期： 2007年第09期
目的 通过经大鼠腹腔注射还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH),观察其对大鼠随意皮瓣成活的影响,并初步探讨GSH影响皮瓣成活的作用机制. 方法 选择健康200～250 g SD大鼠20只,于背部双侧肩胛下角连线设计制备面积为8 cm×2 cm随意皮瓣,原位回植.随机分成两组(n＝10),实验组于皮瓣术后即刻及1、2 d,腹腔注射GSH (250 mg/kg),对照组腹腔注射等量生理盐水.术后7 d测定皮瓣成活率,取大鼠皮瓣中轴距蒂部3 cm处组织,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malonyldialdehyde, MDA)含量,对皮瓣远、中及近段进行组织学观察. 结果 术后7 d,实验组皮瓣成活率为56.77%±10.67%,高于对照组的40.16%±7.12%,差异有统计学意义(P《0.05).实验组SOD含量为306.06±84.87 U/mgprot,高于对照组的224.79±27.12 U/mgprot;而MDA含量为3.835±0.457 nmol/mgprot,低于对照组的6.127±0.837 nmol/mgprot,差异均有统计学意义(P《0.05) .组织学观察:实验组近、中及远段中性粒细胞浸润较对照组明显减轻,其血管、成纤维细胞、毛囊及附属腺体增生均明显优于对照组.结论腹腔注射GSH对大鼠随意皮瓣成活有明显促进作用,作用机制可能与清除自由基、降低脂质过氧化反应及减轻中性粒细胞浸润有关.
作者：井万里；岑瑛；张艳阁；向小燕 刊期： 2007年第09期
目的 探讨采用光子脱毛联合较大体积扩张器法行外耳再造术治疗小耳畸形的临床效果. 方法 2000年1月～2006年1月,收治先天性单侧小耳畸形患者73例.32例采用光子脱毛联合较大体积扩张器扩张方法(新方法组).其中男12例,女20例;年龄6～45岁.小耳畸形Ⅰ度6例,Ⅱ度20例,Ⅲ度6例.切取皮瓣范围9 cm×5 cm～11 cm×6 cm,筋膜瓣范围7 cm×5 cm～9 cm×6 cm.余41例采用常规扩张法进行外耳再造(传统组).其中男13例,女28例;年龄6～42岁.小耳畸形Ⅰ度8例,Ⅱ度27例,Ⅲ度6例.切取皮瓣范围8 cm×5 cm～10 cm×6 cm,筋膜瓣范围7 cm×5 cm～9 cm×6 cm.对两组术中切取皮肤、术后供区瘢痕面积进行测定,比较患者及家属满意率及并发症发生率. 结果 患者均在二期术后6～12个月行三期再造耳修整时随访.新方法组:术后皮瓣及移植皮片均成活,切口Ⅰ期愈合;再造耳耳轮脚及耳轮清晰,耳轮缘无毛发生长.传统组:1例术后皮瓣远端部分坏死导致支架外露,经对症处理后愈合;余患者皮瓣及移植皮片均成活,切口Ⅰ期愈合;再造耳耳轮清晰,耳甲及耳舟可见,35例再造耳廓耳轮上部边缘有部分毛发.新方法组切取皮肤、瘢痕面积及患者满意率分别为18.3±1.5 cm2、8.1±0.8 cm2及86%,与传统组(34.2±2.6 cm2、14.4±1.2 cm2及71%)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).新方法组并发症的发生率为3.1%,与传统组4.6%比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 光子脱毛联合较大体积扩张器法行外耳再造在未增加并发症的基础上,实现较大体积的皮肤扩张,二期再造时切取的皮肤面积小,术后瘢痕轻,再造耳无毛发,外观佳.
作者：刘嘉锋；孙家明；张一鸣；李小丹 刊期： 2007年第09期
目的 研究兔屈趾肌腱Ⅱ区伤口愈合过程中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)基因表达的变化. 方法 取成年新西兰大白兔60只,体重4.0～4.5 kg,将左前中趾屈趾深肌腱切断并采用标准Kessler缝合法修复作为实验组,分别于术后1、7、14、21、28及56 d获取肌腱及腱鞘进行观察,每个时间点取10只;同一动物的右前肢正常肌腱及腱鞘作为对照组.采用原位杂交和免疫组织化学染色分析TGF-β1的表达情况. 结果 原位杂交结果示:实验组TGF-β1 mRNA在术后1 d开始上调,14～21 d达高峰,56 d保持较高水平;对照组存在TGF-β1 mRNA的表达,但表达水平较低;实验组各时间点TGF-β1 mRNA表达与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学染色:实验组术后1 d,TGF-β1蛋白信号的表达增加,14～21 d达高峰,56 d仍保持一定水平;对照组术后各时间点存在TGF-β1蛋白信号表达,但表达水平较低. 结论 正常无损伤的肌腱和腱鞘能产生TGF-β1,当肌腱损伤后,细胞因子被激活,增加的细胞因子主要由肌腱细胞与腱鞘细胞产生,与肌腱的内、外源性愈合机制是一致的.
作者：夏长所；洪光祥；张才龙；杨选影 刊期： 2007年第09期
目的 探讨采用同侧比目鱼肌肌瓣逆行移位修复Pilon骨折术后软组织缺损的临床效果. 方法 2002年5月～2006年6月,采用同侧比目鱼肌肌瓣逆行移位修复14例软组织缺损患者.男11例,女3例;年龄20～50岁.软组织缺损范围7.0 cm×3.5 cm～10.0 cm×6.0 cm.9例为Pilon骨折钢板内固定术后,5例为开放性Pilon骨折软组织缺损外固定术后.肌瓣切取范围为8.5 cm×5.5 cm～12.5 cm×7.5 cm. 结果 患者术后伤口均Ⅰ期愈合,植皮均成活.2例肌瓣轻度感染,经换药后愈合;余肌瓣均成活.术后11例获随访3～26个月,平均15个月.植皮无破溃,外形无明显臃肿.踝关节活动范围背屈10～25°,跖屈15～40°,步态正常. 结论 逆行比目鱼肌肌瓣手术时不需显露血管蒂,解剖恒定,且比目鱼肌肌腹大,移位方便, 旋转弧度可达180°,且很少发生血管危象,促进创面愈合及骨痂生长,有利于降低伤口感染率.
作者：艾克拜尔·尤努斯；艾合麦提·玉素甫；陈刚；阿里木江·阿不来提 刊期： 2007年第09期
目的 探讨胫骨Pilon骨折后石膏托外固定或局麻下行跟骨骨钉牵引治疗后,行切开复位内固定术治疗的临床疗效. 方法 1996年8月～2005年1月,收治Pilon骨折患者22例.男16例,女6例.年龄17～55岁,平均35.5岁.采用Ruedi-Allgower分型:Ⅰ型3例, Ⅱ型15例,Ⅲ型4例.伤后予以石膏托外固定或在局麻下行跟骨骨钉牵引治疗7～14 d后,采用切开复位内固定术治疗. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.患者均获随访1年5个月～3年,平均2.4年.X线片示术后10～32周骨折愈合,平均15周.根据Mazur踝关节症状和功能评分系统评定:优12例,良5例,可3例,差2例,优良率为77.2%.术后并发慢性骨髓炎1例,踝内翻1例,创伤性关节炎改变15例. 结论 术前评估软组织损伤情况,选择合适治疗时机,根据胫骨Pilon骨折类型选择适当的内固定方式可获得良好复位,减少并发症的发生.
作者：王大风 刊期： 2007年第09期
目的 观察组织工程皮肤的种子细胞角质形成细胞体外培养后的免疫原性变化情况. 方法 取自愿捐献的健康儿童、青少年包皮,采用分离酶、胰蛋白酶两步消化法进行体外培养并传代至5代,行苔盼蓝计数细胞活性.SP法标记各代角质形成细胞中的朗格汉斯细胞和黑色素细胞,计算其占总细胞数的百分比.各代角质形成细胞与从外周血中分离培养淋巴细胞进行混合培养,观察淋巴细胞增殖情况,闪烁仪计数cpm值. 结果 培养的细胞生长良好,原代及传代后的细胞融合后呈铺路石样生长.细胞冻存后复苏,苔盼蓝染色细胞活力》80%.原代中朗格汉斯细胞占5.8%,黑色素细胞占8.1%;1代中朗格汉斯细胞占2.1%,黑色素细胞占2.8%;2代后二者均消失.cpm值原代482.13±46.61,1代362.50±35.12,2代228.38±51.46,3代171.86±34.63,4代143.63±15.95,5代123.25±14.39,与对照组53.67±8.61比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).原代、1代与其他各代比较,2代与4、5代比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);2代与3代间,3、4代及5代间,差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 异体角质形成细胞经体外培养后不断传代,细胞免疫原性逐渐下降.
作者：毕建军；伍津津；朱堂友；鲁元刚；杨亚东；吴国选 刊期： 2007年第09期
目的 探讨趾端骨、软组织矫形术治疗顽固性嵌甲的临床效果. 方法 1997年10月～2006年5月,收治顽固性(口)/(止) 母趾嵌甲患者31例38趾,采用自行设计的趾端骨、软组织矫形术治疗.男23例27趾,女8例11趾.年龄12～28岁,平均17.5岁.病程2年1个月～14年,平均31.6个月.均经5～9次拔甲治疗.合并甲沟炎急性期14例18趾,甲沟炎慢性期17例20趾.选取同期收治足部疾病但(口)/(止) 母趾完整38例患者作对照.测量患者甲沟深度及摄X线片,测量爪粗隆上翘比例r值. 结果 患者甲沟深度及r值分别为2.87±0.31 mm及0.149±0.013,与对照组1.06±0.10 mm及0.060±0.019比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).术后30例37趾伤口Ⅰ期愈合,1例1趾伤口延迟愈合.29例36趾获随访8～29个月,平均21个月.趾端外形良好,无复发或再次手术. 结论 (口)/(止) 母趾末节趾骨爪粗隆上翘、甲沟肥大变深是(口)/(止) 母趾嵌甲重要的解剖学病因,采用趾端骨软组织矫形术是根治顽固性嵌甲的一种有效手术方法.
作者：李进；洪光祥；陈振兵；翁雨雄；王发斌 刊期： 2007年第09期
目的 探讨采用足背动脉皮瓣修复小腿软组织缺损的临床效果. 方法 2002年8月～2005年7月, 采用足背动脉皮瓣移位术治疗创伤后小腿软组织缺损及瘢痕10例.男6例,女4例.年龄18～48岁.软组织缺损部位:小腿中下1/3 1例,小腿下1/3 5例,外踝4例.缺损范围4 cm×3 cm～10 cm×8 cm,皮瓣切取范围6 cm×5 cm～12 cm×10 cm. 结果 术后9例伤口Ⅰ期愈合,皮瓣均成活;1例因压迫血管蒂部导致皮瓣缺血,经对症处理后皮瓣血运恢复,伤口Ⅱ期愈合.供区均Ⅰ期愈合.10例均获随访6～30个月,平均18个月.皮瓣外观满意,血运、弹性均良好,感觉恢复.1例(口)/(止) 母趾背伸功能稍差, 余患者踝部功能良好. 结论 足背动脉皮瓣有良好血液供应,解剖位置恒定, 方法 可靠, 疗程短, 是修复小腿软组织缺损的一种理想皮瓣.
作者：邱南海；李建华；苗戍燕；阚世廉 刊期： 2007年第09期
目的 探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)诱导皮肤瘢痕成纤维细胞凋亡的作用及机制. 方法 取自愿捐献的人耳垂增生性瘢痕,采用组织块贴壁法进行细胞培养.经免疫组织化学染色鉴定后,取第3～5代成纤维细胞,采用含60、120和240 mg/L Art培养液各5 ml培养作为实验组,仅加入等量的培养液作为对照组.于倒置显微镜及透射电镜观察,采用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期.另取第3～5代成纤维细胞,实验组采用30、60和120 mg/L Art培养液,对照组仅加入等量的培养液,观察细胞内钙离子的变化. 结果 原代成纤维细胞呈典型的梭形贴壁生长,免疫组织化学鉴定细胞波形蛋白呈阳性表达;倒置显微镜下观察Art在60～240 mg/L浓度范围内抑制成纤维细胞生长且呈剂量及时间依赖性,细胞出现凋亡征象;透射电镜观察,各实验组出现染色质浓缩,沿着核膜排列,甚至核碎裂现象.细胞周期分析显示各实验组与对照组比较,凋亡细胞比例、处于G0～G1、S、G2～M期细胞数差异均有统计学意义(P＜0.05),实验组均出现典型的凋亡峰,且随药物浓度增加,峰值越大.Art在30～120 mg/L作用成纤维细胞 24 h可引起细胞内钙离子浓度持续增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Art通过作用于成纤维细胞周期诱导细胞凋亡,细胞内钙离子浓度升高可能是其诱导成纤维细胞凋亡的机制之一.
作者：孔恒；余清声；朱柳；袁牧；王肃生；冀航；张志华；梁刚；黄宗海 刊期： 2007年第09期
目的 探讨手部深度烧伤后早期整形修复的治疗方法及临床效果. 方法 1994年12月～2004年12月,收治手部深度烧伤156例(198手)患者.男119例155手,女37例43手.年龄21～52岁.深Ⅱ度105例121手,Ⅲ度51例77手.伤后24 h内手术29例36手,1周内手术94例117手,3周内手术33例45手.患者均采用中厚皮片、全厚皮片植皮或皮瓣修复,术后进行早期功能锻炼. 结果 术后无并发症发生,创面Ⅰ期愈合,皮瓣及植皮均成活.供区Ⅰ期愈合.145手获随访6个月～5年.参考王澍寰(2002)手功能评价标准:优109手(75.2%),良18手(12.4%),中11手(7.6%),差7手(4.8%). 结论 手部深度烧伤后宜早期行整形修复手术,可有效预防手部瘢痕形成,功能得到良好恢复.
作者：薛文君；马红蕊；黄国宝 刊期： 2007年第09期
目的 介绍microRNA (miRNA) 起源、功能及其与干细胞的关系的研究进展. 方法 查阅近年有关文献,并对miRNA和干细胞进行综合分析. 结果 miRNA是一类非编码蛋白并且参与转录后调节的单链小分子RNA(20～25个碱基),对基因表达具有重要调控作用.近年来发现存在着一个庞大的miRNA家族,参与调控生物体生长发育等许多复杂的生命过程,并且与干细胞的自我更新和多向分化存在着紧密关联. 结论 miRNA作为一种新的调控基因表达的小分子RNA,可以成为干细胞研究的新途径.
作者：高杰；杨彤涛；裘秀春；范清宇；马保安 刊期： 2007年第09期
目的 了解并掌握组织工程再生医学进入产业化的新动态,以指导现实工作. 方法 通过查阅新文献、查看相关网站并结合自身工作经验以求全面了解. 结果 从组织工程四方面的汇总资料中得到启示,鸟瞰再生医学产业化的发展前景. 结论 抓住机遇,努力工作以迎合再生医学产业化的发展趋势.
作者：顾其胜；张雪雁；蒋丽霞 刊期： 2007年第09期
目的 探讨采用带血管筋膜瓣移植悬吊盆底与修复直肠阴道隔治疗直肠前突(rectocele, RC)的临床效果. 方法 2004年8月～2006年8月,收治12例RC患者,采用带血管筋膜瓣移植悬吊盆底与修复直肠阴道隔的方法进行治疗.均为女性,年龄49～73岁.病程5～30年,平均5.6年.主要表现均为排便困难.X线排便造影示:均为重度RC(≥ 30 mm),伴会阴下降(≥ 40 mm)综合征、直肠黏膜内脱垂3例及肛管狭窄9例.切取筋膜瓣范围15 cm×3 cm～18 cm×5 cm.术后每2个月定期随访. 结果 2例患者术中出血约800 ml,余约500 ml.术后筋膜瓣均成活.11例伤口Ⅰ期愈合,1例由于过早下床活动伤口裂开延迟愈合;供区Ⅱ期愈合.术后4～6 d均正常排便.2例供区皮下积液,1例尿潴留合并尿道感染,均经对症治疗后痊愈.11例患者获随访6～12个月.直肠肛门检查直肠前壁凹陷消失,表面光滑平整,指压弹性良好,接近正常直肠前壁.X线及CT排便造影检查示RC凹陷消失. 结论 带血管筋膜瓣移植悬吊盆底与修复直肠阴道隔可有效恢复直肠阴道隔解剖结构,恢复其功能,是治疗RC的有效方法之一.
作者：王江宁；赵莲茹；林琳；王娜；张立彬；王寿宇；唐一源 刊期： 2007年第09期
目的 了解皮瓣修复的新进展之一,即穿支皮瓣修复技术. 方法 广泛查阅近年来国内外有关各种穿支皮瓣的文献,并对其研究成果进行回顾与综合分析. 结果 穿支皮瓣是对传统肌皮瓣的技术改良,其优点是保留了供区的肌肉、筋膜和神经,从而将供区并发症发生率降到低,已在临床广泛应用. 结论 穿支皮瓣是新的修复组织缺损的可靠技术, 有可能成为缺损修复的首选皮瓣.
作者：张彬 刊期： 2007年第09期
目的 探讨髂骨皮瓣移植修复胫骨创伤后骨髓炎骨皮缺损的方法和疗效. 方法 2001年6月～2006年2月,对28例胫骨创伤后骨髓炎骨皮缺损患者采用髂骨皮瓣移植一期修复.男18例,女10例;年龄18～68岁,平均32.5岁.致伤原因:交通伤11例,砸伤6例,爆炸伤5例,机器伤4例,坠落伤2例.伤后均行2～6次手术.受伤至该次手术时间为1～6个月.损伤部位:小腿中上段13例,小腿下段15例.术中取髂骨0.5～6.0 cm,皮瓣范围4.5 cm×3.5 cm～28.0 cm×16.0 cm.固定方式为外固定架18例,钢板固定10例.供区直接缝合. 结果 术后皮瓣均成活.伤口26例Ⅰ期愈合,2例Ⅱ期愈合.供区伤口均Ⅰ期愈合.28例患者获随访6～56个月,平均30个月.皮瓣外形无明显臃肿,色泽与受区相近.X线片检查,移植髂骨于术后2～14个月愈合,平均4.6个月.术前20例骨折未愈合的患者于术后2～6个月愈合,平均3.2个月. 2例术后12个月骨髓炎复发,经2次病灶清除后愈合. 结论 带血运髂骨皮瓣移植治疗胫骨创伤后骨髓炎骨皮缺损,一次性修复组织缺损,增强控制感染能力,是一种可行、有效的治疗方法.
作者：刘雪涛；张成进；李忠；周祥吉；范启申；王成琪 刊期： 2007年第09期
目的 探讨人胚胎嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植治疗肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)患者的近期安全性和有效性. 方法 回顾性分析2003年2月～2006年4月,采用OECs移植手术治疗的327例ALS患者的临床资料.男241例,女86例.年龄20～84岁(51.6±11.1岁).病程4.8个月～13年(2.9±2.0年).根据细胞植入部位分为3组:A组29例,细胞植入脊髓内;B组(6例),细胞分别植入脊髓及双额叶放射冠;C组292例,细胞植入双额叶放射冠.脊髓移植方法,病变处分两点共注入50 μl OECs悬液,细胞数约1×106个.脑部移植方法,双侧大脑放射冠处各注射50 μl OECs悬液,细胞数约2×106个. 结果 随访4周,比较术前和随访肌萎缩侧索硬化症功能量表分数变化.A组17.2±8.6增至20.1±9.7(P＜0.05),B组24.2±6.8增至25.7±6.6(P＞0.05),C组20.3±8.6增至22.0±9.4(P＜0.001),3组间改善程度差异无统计学意义(P＞0.05).4周神经功能总改善252例(77.1%).术后4周行肌电图检查的患者261例(79.8%)显示术后自发电位减少或消失,收缩时肌电波幅较术前明显降低,电位密度明显增加.16例(4.9%)术后出现不良反应,包括头痛、短期发热、癫痫大发作、中枢神经系统感染、肺炎、呼吸衰竭、泌尿系感染、心力衰竭及肺栓塞,其中4例(1.2%)死亡. 结论 OECs移植术后4周能阻止或逆转ALS的病情恶化.
作者：陈琳；黄红云；张健；张峰；刘彦铖；郗海涛；王洪美；顾征；宋英伦；李荧；谭可 刊期： 2007年第09期
目的 探讨体外定向诱导胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向内皮细胞分化的条件,为组织工程血管提供种子细胞. 方法 取怀孕12.5 d的昆明小白鼠1只,断颈处死,取其胚胎,培养制备小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF).常规复苏ESC后进行体外培养,采用悬滴-悬浮法制备拟胚体(embryoid body,EB).将EB分两组:实验组加入含有3 ng/ml转化生长因子β1、50 ng/ml血管内皮细胞生长因子及1 μmol/L 激活素受体样激酶选择性抑制剂的EB培养基;对照组只加入EB培养基.倒置显微镜下观察细胞生长情况.采用RT-PCR及免疫组织化学染色检测诱导细胞vWF和CD34的表达,验证细胞性质. 结果 原代MEF生长迅速,第3天细胞融合达90%左右,细胞呈长梭形,有少量侧支,细胞核饱满,有2～3个核仁,细胞排列紧密.传至3～5代,细胞呈多角形,胞浆饱满,有3～4个核仁,细胞表面分泌较多细胞颗粒.ESC在饲养层上保持未分化状态,细胞团形态呈鸟巢样,边缘平整,单个细胞体积小,折光性强,核质比高,增长速度快.悬滴培养3 d的EB肉眼可见,再经悬浮培养3 d后,形成较大的透亮EB;EB贴壁后第2天,球体略摊开.实验组第4～7天,EB周围有许多圆形细胞产生,第10～14天,可见由大量圆形细胞组成的血管样结构自EB周围生长;对照组EB周围未见血管样结构生长.免疫组织化学染色见EB周围大量vWF染色阳性细胞,RT-PCR检测到vWF和CD34的表达. 结论 ESC在特定的条件下可以分化为内皮细胞,有可能为组织工程血管提供大量的种子细胞.
作者：熊吉信；刘兆轩；刘小春；杨春江 刊期： 2007年第09期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
