学术投稿

人眼视神经星形胶质细胞的体外培养及鉴定

郑健樑;张洁;郭彦;文峰;罗燕

关键词:视神经, 星形细胞, 细胞培养
摘要:目的探索人眼视神经星形胶质细胞体外培养方法,建立细胞系,为进一步研究视神经损伤后的修复提供充足的细胞来源.方法用组织块培养法、0.25%胰蛋白酶和0.06%EDTA混合消化液取材培养法,对婴儿眼视神经星形胶质细胞进行培养,观察细胞形态和生长特性,并进行免疫组织化学鉴定.结果采用组织块培养的细胞,生长较缓慢.用混合消化液培养的细胞,贴壁早、生长快,约7 d细胞基本融合.培养的细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP、S-100蛋白及Vimentin染色阳性,CD34染色阴性.结论用混合消化液培养法可成功培养出人眼视神经星形胶质细胞.
中华眼底病杂志相关文献
  • 前部缺血性视神经病变的吲哚青绿和荧光素眼底血管造影

    目的观察前部缺血性视神经病变(anterior ischemic optic neuropathy , AION)的吲哚青绿和荧光素眼底血管造影(indocyanine green angiography and fundus fluorescein angiography ,ICGA&FFA)特征,探讨AION的病因和发病机制,以及ICGA和FFA在AION诊断和研究方面的价值.方法对比分析AION患者31例32只眼和非AION眼底病患者38例38只眼ICGA&FFA同步检查的图像以及AION患者的视野检查资料.结果 AION组中视盘全部或部分位于脉络膜血液供应分水带内的眼数显著多于非AION(P<0.005);所有接受检查眼通过视盘的分水带都为垂直状,视盘两侧脉络膜血管充盈较上下方为快.AION患者的分水带分型与视盘缺血部位存在明确的对应关系.ICGA早期视盘无荧光,晚期视盘缺血区均无荧光,非缺血区主要表现为不均匀荧光.结论 AION的发病与盘周脉络膜血液供应状态有关.ICGA在对AION的诊断和研究方面比FFA具有更大的价值.

    作者:王建民;马景学;王长龄;李素芬;史丰;杨爱琴;孔祥端;蔡素贞 刊期: 2001年第02期

  • 正常眼黄斑无血管区的共焦激光扫描眼底血管造影测量

    黄斑中心凹无血管区(foveal avascular zone,FAZ)是与中心视力关系密切的结构.用荧光素眼底血管造影(fundus flourescein angiography, FFA)并借助投影放大或计算机的图像处理进行生理、病理的FAZ测量,国内外已有不少的报道[1-4].

    作者:刘晓玲;林冰;瞿佳;陈世豪;夏伟丹 刊期: 2001年第02期

  • 蓝/黄视野检查法对原发性开角型青光眼的早期诊断价值

    目的探讨蓝/黄视野检查法(blue-on-yellow perimetry,B/Y PM)对青光眼的早期诊断价值.方法利用OCTOPUS 101全自动视野计G2程序分别对16例(32只眼)正常人,25例(35只眼)白/白视野检查(white-on-white perimetry,W/W PM)异常的原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma, POAG),15例(15只眼)W/W视野检查正常的早期POAG及11例(22只眼)可疑POAG进行B/Y视野检查.结果正常人、可疑POAG、早期、中期及晚期POAG B/Y视野检查视网膜平均敏感度分别为(23.24±1.22)dB、(20.97±3.42)dB、(18.44±3.57)dB、(11.04±1.85)dB及(8.55±2.29)dB.B/Y视野检查法对检测青光眼视野损害的敏感性高于常规W/W视野检查法,敏感性为92%,特异性为90.62%.早期和中期POAG中,B/Y视野检测出视野缺损点数明显多于W/W视野检测出的缺损点数.结论B/Y视野检查法是检测POAG早期视野损害的敏感方法之一.

    作者:钟一声;俞方知;叶纹;王康孙 刊期: 2001年第02期

  • 眼底有色素和无色素沉积患者并存的视网膜色素变性一家系

    视网膜色素变性(retinitis pigmentosa, RP)是常见的致盲性遗传眼病,在分类上有典型性RP,特殊类型的RP,后者包括单侧性RP、象限状RP、中心性或旁中心性RP、无色素性RP、色素性静脉周围视网膜脉络膜萎缩[1,2].

    作者:王乐今;于宁;王黎明 刊期: 2001年第02期

  • 急性视网膜坏死综合征的临床特征及诊断

    回顾分析急性视网膜坏死综合征(acute retinal necrosis syndrome,ARNS)临床及基础研究的文献资料,综述其临床发展规律及诊断方法.典型的ARNS临床过程分为4期,其分期对该病的治疗及视网膜脱离的预防具有重要的意义.根据典型临床表现可做出临床诊断,聚合酶链反应及抗体免疫测定可确定病因诊断.及时准确的诊断及早期治疗,才能保存有效的视力.

    作者:黄力;苏明山 刊期: 2001年第02期

  • 血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸在缺血性视网膜病变中的作用

    目的研究血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡聚脱氧核苷酸在缺血性视网膜病变中的作用.方法以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜缺血性病变动物模型,应用血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸不同浓度进行球后注射,计数并比较正常和实验条件下以及不同浓度药物注射后视网膜新生血管芽细胞核数.结果高浓度氧诱导的小鼠视网膜发生较多的新生血管芽,而球后注射VEGF反义寡聚脱氧核苷酸后视网膜新生血管芽的细胞核数明显减少,特别是大剂量注射后减少达59.3%(P<0.01).结论 VEGF反义寡聚脱氧核苷酸能有效抑制缺血性视网膜病变新生血管的增生.

    作者:王惕;韩丽荣 刊期: 2001年第02期

  • 切除基底部玻璃体的临床意义

    近年来,玻璃体视网膜手术已在我国城镇蓬勃发展,许多小城市的县级医院也购置了昂贵的玻璃体切割机,开展了简单或复杂的玻璃体手术.这一方面给广大患者就医带来了方便;另一方面,因玻璃体手术的复杂性,在临床上见到的手术并发症也随之增加.除常见的并发症外,因玻璃体基底部在术前和术中检查和处理困难,与之相关的并发症和后遗症已显得突出而严重.现就与玻璃体基底部相关的一些常见而严重的并发症的发生原理、以及预防和处理方法做一简要的介绍.

    作者:刘文 刊期: 2001年第02期

  • BaX过表达诱导培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡观察

    目的研究外源性促凋亡基因bax过表达对培养人的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium ,RPE)细胞凋亡的影响.方法通过脂质体Lipofectin介导法用含入全长bax基因片段的真核表达载体PMDNA3-hbax质粒转化体外培养的RPE细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化,提取实验组细胞DNA进行DNA梯度电泳. 结果 Zn2+可诱导PMDNA3-hbax转化组RPE细胞出现明显的凋亡峰,凋亡峰位于单倍体和二倍体之间,凋亡率为36%,DNA电泳可见DNA梯状条带,PMDNA3空载体组及未转染组RPE细胞未见亚二倍峰和DNA梯状条带出现.结论外源性促凋亡基因bax过表达可诱导RPE细胞凋亡.

    作者:刘少山;惠延年;王雨生 刊期: 2001年第02期

  • 临床视网膜移植

    视网膜下腔存在有限度的免疫赦免,针对接种抗原可诱导抗原特异性体液和细胞免疫反应的抑制.同种异体视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium, RPE)具有一定的免疫原性.在未实施免疫抑制剂的情况下,大部分接受视网膜下腔RPE移植治疗老年相关性黄斑变性(age-related macular degeneration, AMD)的患者发生了移植排斥反应.这些移植细胞是否能改善渗出型AMD的视力预后还需进一步的研究.其手术并发症有:囊样黄斑水肿、黄斑皱褶和孔源性视网膜脱离.与此相反,在接受神经视网膜组织移植的晚期视网膜变性患者在术后长期观察期间未发现显著的排斥反应征象及其严重的并发症.但是,移植的神经组织能否重建视网膜内神经网络及其治疗效果还有待进一步研究.综述文献

    作者:李志杰;彭广华 刊期: 2001年第02期

  • 红斑狼疮伴视网膜中央动脉阻塞一例

    患者女,44岁.因右眼视力下降约1 d到我院门诊就诊.以前无类似发病史.患红斑狼疮多年,一直用糖皮质激素治疗,本次发作前每天口服泼尼松5 mg维持.

    作者:黄时洲;吴德正;文峰;罗苔青;马娟妹 刊期: 2001年第02期

  • 白细胞介素-1 α诱导玻璃体视网膜新生血管形成及血管内皮细胞生长因子表达

    目的观察白细胞介素-1α (interleukin-1α, IL-1α)诱导SD大鼠玻璃体视网膜新生血管形成以及对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelium growth factor,VEGF)表达的影响.方法 8只SD大鼠,左眼为实验处理组,玻璃体内各注射IL-1α 2.0 ng,右眼为对照组,同样方法玻璃体内注射等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution, PBS ).术后每天用直接检眼镜观察眼底,第7 d摘取眼球,眼后段作常规病理切片,采用免疫组织化学方法检测VEGF的表达情况.结果实验处理组视网膜前有大量新生血管和增生膜形成,在视网膜神经节细胞层、新生血管管壁及视网膜前增生膜中有VEGF的阳性表达,而对照组则无新生血管形成,仅在感光细胞外节段层有VEGF的弱表达.结论 IL-1α能促进SD大鼠玻璃体视网膜新生血管形成和VEGF表达升高.

    作者:胡洁;唐仕波;郑湖玲;林少芬;罗燕 刊期: 2001年第02期

  • 玻璃体视网膜病临床发展趋势-第22届Club Jules Gonin会议纪要

    第22届Club Jules Gonin会议于2000年9月2~6日在意大利西西里岛的陶尔米纳召开.与会的有包括Machemer等知名专家在内的会员以及候补会员和客人等3百多名.会议分为15个专题,报告论文121篇,展牌论文及讨论64篇,录像8部.

    作者:惠延年 刊期: 2001年第02期

  • 荧光素眼底血管造影后血管内溶血一例

    患者女,47岁.因左眼视力突然下降1 d于2000年5月22日来我院就诊.检查:视力右眼1.2,左眼0.06,不能矫正.眼压正常.双眼前节未见异常,左眼眼底见视盘边界稍模糊,后极视网膜水肿,反光增强,视盘旁颞侧偏下方有一边界不清的黄白色病灶,黄斑中心凹反光消失.

    作者:卢岚;翁景宁;杨长春;林素清 刊期: 2001年第02期

  • 糖尿病视网膜病变与视网膜静脉阻塞的异同

    50年代罗宗贤教授曾写过一本<糖尿病视网膜病变>的小册子,书中提及糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)与高血压视网膜病变的主要不同点在于糖尿病引起的视网膜病变以静脉改变为主,而高血压引起的视网膜病变则以动脉改变为主.当时未能深刻理解大师的真知灼见.以后经过多年的临床实践,才逐渐体会到罗老的这一论断是多么的精辟.

    作者:廖菊生 刊期: 2001年第02期

  • 视网膜脱离手术后的视盘形态和视网膜神经纤维层改变

    玻璃体视网膜手术(vitreoretinal surgery, VRS)和单纯巩膜扣带术(scleral buckling surgery,SBS)是视网膜脱离(detachment of retina,RD)复位的有效方法,但术后继发性青光眼和高眼压是常见的并发症,是视功能损害的重要因素[1,2].

    作者:陈松;韩梅;张树丽;魏景文 刊期: 2001年第02期

  • 纤维连接蛋白及其整合素受体在视网膜前膜中的表达

    目的研究增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)的视网膜前膜(epiretinal membranes ,ERM)中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)与整合素β1(β1integrin,β1)的表达. 方法用免疫组织化学的方法对20例PVR患者行玻璃体切割术时剥离的ERM进行观察. 结果 FN与β1分别在18例及16例ERM中过度表达.结论 ERM中有FN及β1的表达,提示二者在PVR的发生发展中有一定作用.

    作者:王秋;王桂云;张晓光 刊期: 2001年第02期

  • 视细胞移植术后RCS鼠视网膜γ-氨基丁酸的分布观察

    目的通过纯视细胞移植,观察重建视网膜神经传导通路中抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric Acid,GABA)的分布和变化.方法取同龄Wistar/皇家外科学院鼠(royal college of surgeon rat ,RCS) 为供/受体,准分子激光切削法制备视细胞层,外路途径移入RCS鼠的视网膜下腔,术后2周取RCS鼠手术眼,手术对照眼,RCS鼠对照眼,Wistar鼠眼.分别做冰冻切片,免疫组织化学染色法染色,普通光学显微镜下观察.测量内丛状层(inner plexiform layer, IPL)和节细胞层(ganglion cell layer ,GCL) 的光密度,计数无长突细胞的数量,方差分析组间差异,配对t检验RCS鼠手术眼组内差异.结果在视细胞移植术后2周,移植视细胞存活,外丛状层重建,与手术对照眼,RCS对照眼相比,受体RCS鼠重建视网膜中内丛状层GABA免疫反应阳性的神经纤维光密度测量值差异有显著性的意义P<0.001,而与Wistar鼠眼比较无明显区别.和手术对照眼,RCS对照眼,Wistar鼠组比,GABA能无长突细胞(amacrine cell)明显增多(P<0.05).节细胞层GABA阳性免疫反应光密度测量值和上述几组比变化不明显(P>0.05).接受移植的RCS鼠各部位的无长突细胞在移植部二侧和对侧赤道,后极部之间的差异无显著性的意义(P=0.3436).结论视细胞移植不仅可以使RCS鼠视网膜重建正常的解剖结构,而且在移植后的视网膜中观察到抑制性神经递质GABA的分布接近正常,无长突细胞反应性增生.

    作者:潘峰;王薇;沈丽;杨磊 刊期: 2001年第02期

  • 眼钝挫伤的吲哚青绿血管造影

    目的观察眼挫伤后脉络膜、视网膜循环改变在影像学检查中的特征和临床意义.方法对30例眼挫伤患者的30只伤眼进行荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA)和吲哚青绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)同步检查.结果 19只眼FFA表现为视盘象限性或全部弱荧光(视盘缺血性改变),占63.3%,视盘象限性弱荧光区和脉络膜延迟灌注区相连.26只跟出现局部脉络膜灌注不良,占86.7%.其中16只眼为局限性充盈迟缓,脉络膜荧光完全充盈时间:短1 min 50 s,长5 min 43 s;10只眼为局限性充盈缺损.视网膜脉络膜充盈时间倒置6只眼,占20.0%;脉络膜及视网膜中央血管系统充盈均延迟者5只眼,占16.6%.在脉络膜局部灌注不良的部位均出现了视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)的损害.结论 ICGA可清楚地显示眼挫伤后脉络膜循环的改变,结合FFA同步检查,可对眼底损害作出更加全面的评价.

    作者:阎宏;易长贤;文峰;胡兆科;欧杰雄;刘顺英;麦桂英 刊期: 2001年第02期

  • 中心性浆液性脉络膜视网膜病变吲哚青绿血管造影图像特征

    中心性浆液性脉络膜视网膜病变(central serous chorioretinopathy, CSC)的荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography, FFA)特征已较为熟悉.

    作者:王兰惠;陈松;韩梅;张树丽;杨佩茹 刊期: 2001年第02期

  • 人眼视神经星形胶质细胞的体外培养及鉴定

    目的探索人眼视神经星形胶质细胞体外培养方法,建立细胞系,为进一步研究视神经损伤后的修复提供充足的细胞来源.方法用组织块培养法、0.25%胰蛋白酶和0.06%EDTA混合消化液取材培养法,对婴儿眼视神经星形胶质细胞进行培养,观察细胞形态和生长特性,并进行免疫组织化学鉴定.结果采用组织块培养的细胞,生长较缓慢.用混合消化液培养的细胞,贴壁早、生长快,约7 d细胞基本融合.培养的细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP、S-100蛋白及Vimentin染色阳性,CD34染色阴性.结论用混合消化液培养法可成功培养出人眼视神经星形胶质细胞.

    作者:郑健樑;张洁;郭彦;文峰;罗燕 刊期: 2001年第02期

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