徐宏瑛
目的从新鲜培养的解脲支原体(URA)Ⅰ型培养液获得其MB抗原主蛋白N端1/3保守区的基因,并体外表达,获得具有抗原活性的原核表达蛋白,为研制广谱、低廉及方便准确的URA感染的诊断及治疗方法提供物质基础.方法从新鲜培养的URA标准株Ⅰ型培养液提取DNA模板,采用特异引物及聚合酶链方法获得其MB抗原主蛋白N端1/3保守区的基因,经克隆入测序载体验证DNA大小及序列后,将MB抗原主蛋白N端1/3保守区的基因克隆入高效原核表达载体,并在大肠杆菌中表达,初步以Western-blot测定表达产物的抗原性即与感染者阳性血清的反应活性.结果以笔者设计的特异引物,能得到预期大小的PCR产物,并能插入预定的克隆载体中测序,所得基因的序列符合目的基因的序列,其插入原核表达载体能获得表达,且表达产物具有抗原活性,能与感染患者的血清发生抗原抗体反应.结论所得到的MB抗原主蛋白N端1/3保守区片段的基因,与GENE BANK检索序列一致.在大肠杆菌中表达此片段所获得的表达产物,有抗原活性,有望用于URA抗体检测及疫苗研制.
作者:张菊;阎小君;郭晏海;李丁;段杰;苏成芝 刊期: 2002年第03期
1 概述临床微生物实验室正面临着准确地检测一些苛养菌产生新兴耐药的严峻挑战.苛养菌(Fastidious Organisms)的培养及药敏试验对培养基和生长环境有较高的要求.因此,增大了实验室药敏试验的技术难度.临床微生物实验室不可能依靠一种药敏试验方法或商业化产品检测所有细菌的耐药.要达到此目的,需综合运用肉汤稀释或琼脂稀释试验、特定药物浓度筛选试验以及修正药敏试验解释标准等[1].
作者:张银旺 刊期: 2002年第03期
输血的安全性日渐引起人们的关注,但人们往往比较注重输血引起的传染病,而对于因输血引起的免疫反应则较少予以重视.事实上后者引起的频率比前者更高,有的甚至危及生命.为了真正做到安全输血,把好血液进入人体的后一道关,我们医院采用了目前较先进的柱凝集技术(CAT)交叉配血.
作者:王显荣 刊期: 2002年第03期
目的研究计算方法在COBAS COREⅡ免疫分析仪测定TSH中的应用.方法用对比随机抽样的方法作t检验,研究测得值与计算值之间的差异.结果条件式自动稀释法测得值与计算值之间的t检验,P>0.05,无显著性差异.结论在TSH≥5 mIU/L,A<3.5时,可用计算方法代替自动稀释方法.
作者:芮乔安;胡进彩 刊期: 2002年第03期
用金标法和酶免法检测胃病变患者血清中的幽门螺杆菌IgG,所得结果相比较,P>0.005,两者阳性检出率略同.金标法的特异性为94.7%,灵敏度为94.1%;酶免法的特异性为89.5%,灵敏度为97.05%.
作者:曾立军;雷均平;薛晓英 刊期: 2002年第03期
目前,临床急诊生化检验中多使用干化学方法,相对于全自动生化分析仪的透射比色方法,干化学法多采用测定反射光强度,这就为通过加入清除层去除干扰物,如:胆红素、脂浊以及血红蛋白,提供了方便.但是在一些情况下,测定结果仍然不同程度受到包括血红蛋白等干扰物质在内的多种因素的干扰.笔者利用美国生产的VITROS-250全自动干化学生化分析仪检测不同血红蛋白浓度的标本中的ALT的浓度来探讨标本溶血对ALT结果的影响.
作者:郑军 刊期: 2002年第03期
目的高同型半胱氨酸血症是周围血、脑、冠状血管阻塞性病变的独立危险因素,同型半胱氨酸测定对预测心血管病具有重要意义.方法用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中同型半胱氨酸.结果该法线性范围为0~40 μmol/L,相关系数r=0.998(Y=0.02+0.006X),批内变异系数为4.7%,批间变异系数为6.4%.正常值为5.98~15 μmol/L.结论方法简单、灵敏、准确、精密度较高,无干扰峰影响,是一种理想的测定方法.
作者:郝万鹏;王忠;夏晓利;路航;田飞 刊期: 2002年第03期
目的探讨检测血清CA125对结核诊断的价值.方法采用电化学发光方法检测血清中CA125.结果结核患者血清CA125水平明显高于正常对照组(P<0.01),治疗后结核患者血清CA125明显下降(P<0.01).结论动态检测CA125是诊断结核和观察疗效的重要指标.
作者:刘冬妍;张玉英;王艳玲 刊期: 2002年第03期
血气分析与酸碱平衡诊断试验是临床抢救和监护危重病人的一组重要生化指标,它可反映病人体内急性和潜在的酸碱平衡和气体交换的内环境状态的变化.AVL990分析仪是用两个准确已知并且精确的值对一个相对测量系统来定标,标定时通过调整放大器的斜率和零点使总的定标直线趋于理想的定标直线,仪器所测标本结果的精确度不仅取决于操作者正确的操作和当时仪器的功能状态,更多的还是制造者所能控制的范围之外的各种外部因素的影响,标本收集与保存处理不当所引起的误差远远大于仪器分析过程中所产生的误差,所以正确的标本采集与保存尤为重要.
作者:王帆;张莉;何明逊 刊期: 2002年第03期
血小板具有复杂的抗原结构,由于输血、妊娠、异体器官移植等因素,免疫产生血小板抗体的几率很高.尤其是反复大量输注血小板的患者约50%以上产生血小板同种抗体,相当于红细胞同种抗体产生频率的几十倍[1].随着机采血小板使用的不断普及,随机血小板输注无效的事例时有发生.输注前采用血小板交叉配合试验选择合适的献血者,对提高输注疗效是必要的.下面将我们为两例患者采用微柱凝胶技术进行血小板交叉配型,取得较好效果的情况报道如下.
作者:刘孟黎;徐华;李凤琴;张建耕;邢荷香;刘晟;颜永强 刊期: 2002年第03期
目的探讨Beckman CX5和日立7170S全自动生化分析仪五项酶测定结果一致性的方法.方法分别使用定标液、质控品和病人的新鲜混合血清为材料,通过增加校正因子,共同校正Beckman CX5和日立7170S两系统测定结果.结果实验表明,Beckman CX5和日立7170S两系统经过校正,对比测定病人的混合血清,再增加校正因子,使两系统五项酶类测定结果保持高度一致性.结论由于条件所限,不能实现仪器、试剂、定标质控三统一的情况下,可以通过增加校正因子实现Beckman CX5和日立7170S两系统五项酶测定结果的一致性,能满足临床的需要.
作者:齐发梅;王兴润;司玉春 刊期: 2002年第03期
采用PCR法检测血清中HCV-RNA是诊断丙型肝炎和观察抗病毒疗效的重要指标.但常规PCR仍存在产物污染和需使用有毒化合物溴化乙啶等缺点.我们近采用抗污染PCR与ELISA检测相结合的新方法进行了初步临床应用,现将结果报告如下.
作者:韩亚萍;刘婷;李军;张永祥;周雄伟;邓志龙;黄祖瑚 刊期: 2002年第03期
红细胞沉降率(以下简称ESR)多年来均采用魏氏法,由于手工操作干扰因素多,用血量大,等候时间长,给检验工作及患者带来诸多不便.全自动电脑血沉仪操作简便,测量快速,用血量少,干扰因素少,既可测出ESR数据,又可打印出ESR动态曲线图,为疾病的诊断提供了新的依据.
作者:白慧霞;刘小玲;孟小红 刊期: 2002年第03期
目的探讨活化的部分凝血活酶时间(APTT)与血浆肝素含量之间的关系,及其在体外循环中的应用.方法用APTT法检测血浆中不同浓度的肝素含量,建立工作曲线,并用基质血浆与患者血浆进行倍比稀释测定.结果发现血浆肝素含量在一定范围内与凝固时间的对数值呈良好的线性关系(直线回归,r=0.99),批内变异系数为2.3%~3.2%,批间变异系数为2.7%~4.9%.结论 APTT较为准确地反映血浆中肝素含量,通过倍比稀释,扩大了检测范围,可适用于大剂量肝素抗凝体外循环的监测,为实行剂量个体化给药提供了基础.
作者:张明金 刊期: 2002年第03期
目的探讨ADA(美国糖尿病学会1997年)糖尿病诊断新标准是否优于WHO(世界卫生组织1985年)诊断标准.方法口服75 g葡萄糖进行糖耐量试验(OGTT),测空腹血糖和糖负荷后2 h血糖值.结果 ADA糖尿病诊断标准比WHO空腹血糖(FPG)诊断标准,可提高敏感性10.1%;按ADA标准诊断的75例糖尿病患者中有15例(20%)按WHO标准诊断为糖耐量低减(IGT),而且漏诊了餐后高血糖、糖尿病患者36例(32.4%).ADA标准诊断,诊断空腹血糖异常(IFG)人群中按WHO标准有42例(37.8%)诊断为糖尿病,有60例(42.6%)诊断为IGT.结论 ADA诊断标准比WHO标准(FPG)虽可提高FPG诊断敏感性10.1%,但并不优于WHO诊断标准OGTT试验2 h血糖(2 h PG)值的敏感性.因此,认为WHO标准OGTT试验2 h PG值有高敏感性和特异性,作为临床必要的诊断手段在临床工作中应该保留,临床医生要重视2 h PG值.
作者:马芝金;魏咏梅 刊期: 2002年第03期
CX9ALX是美国产的全自动生化分析仪,由CX3和CX4组成外加TP电极法和升级预接口,可进行常规生化、电解质、肾功、糖、免疫学、血药浓度检测.该仪器操作简便,试剂用量少,精密度高,准确度好,速度快,并能使用部分国产试剂和自配试剂(自编参数).我们在使用过程中遇到一些故障,现将我们的分析处理以及电极保养的简便方法介绍如下,供同道们参考.
作者:陈秀珍;袁平宗;李传达 刊期: 2002年第03期
我们参考王德田等[1]的方法,采用石蜡包埋,普通轮转式切片机制成肠肿瘤大切片.切片一般长约10~12 cm,长者达15 cm,并对其进行HE染色及特殊染色,得到较好效果.
作者:王彦芳;王宪智;王金柱 刊期: 2002年第03期
血型是人类的一种遗传性状,它遵循孟德尔遗传学定律,常表现为简单的显性或隐性遗传.在一个家庭中,孩子的血型基因必定来自父母.因此,血型可以作为一种遗传标记用于亲子鉴定[1].据文献报道,中国汉族人群利用ABO、MN、P、Rh和HLA 5种血型系统进行亲子鉴定是可行的[2].笔者在1999年5月~2001年12月间,采用ABO、MN、P、Rh和HLA 5 种血型系统对深圳市(主要是宝安、南山二区)112例亲子鉴定案例进行了分析,现报告如下.
作者:杨玉发;刘永梅;饶美琼 刊期: 2002年第03期
目的探讨前S1抗原与乙型肝炎病毒的存在关系.方法采用ELISA检测420例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原.结果在148例HBeAg阳性标本中前S1抗原阳性的115例,阳性率77.7%;199例HBeAg阴性而Anti-HBe阳性的标本中前S1抗原阳性的101例,阳性率50.8%;80例HBeAg和Anti-HBe均阴性的血清中前S1抗原阳性的仅19例,阳性率23.8%.前S1抗原在血清学表达上与HBeAg的阳性符合率高达77.7%.结论血清前S1抗原是HBV在体内复制的可靠标志,与乙型肝炎病毒的存在关系密切.
作者:朱佐民;高志戎;张鹏;杨忠华 刊期: 2002年第03期
Coulter JT-IR血细胞计数仪,长时间使用后,不免会有不同程度的故障发生.在近年中,我院这台仪器曾出现过三次故障,现将故障原因和处理方法介绍如下.1 反冲杯不能伸出接纳残液原因:因仪器吸样量需100 μl,而进入分血片的样本量为29.6 μl,多余血样通过反冲杯接纳被排去.若反冲杯通道不畅,反冲杯动作时会使反冲杯残液溢出,时间长了,残留液形成结晶,会使带动反冲杯的轴卡住,导致杯伸出不完全或完全伸不出.
作者:徐宏瑛 刊期: 2002年第03期