学术投稿

ELISA检测乙肝病毒核心抗原的方法建立及应用

王厚照;田丰丰;陆金霞;马莉;周友泉

关键词:乙肝核心抗原, 酶联免疫吸附试验
摘要:目的 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),建立乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的定性检测方法,用于临床标本HBcAg的检测.方法 用ELSIA法检测临床血样标本乙肝表面抗原(HBsAg)阳性208例,阴性健康对照30例,与HBV DNA结果进行比较.结果 208例HBsAg阳性样本,HBcAg与HBV DNA共同阳性率为58.7%,HBcAg阳性率为74.0%,HBV DNA阳性率为64.4%,二者结果显著相关.结论 ELISA法可用于临床标本HBcAg的检测.
现代检验医学杂志相关文献
  • 细菌微量快速生化鉴定方法学研究

    目的 建立细菌微量快速生化鉴定系统,用于临床实验室细菌学的快速诊断.方法 应用所研制的27种微量快速生化反应试剂与传统试管方法检测208株临床分离菌及8种质控菌株生化反应符合率,依据杭州24 h的JYZ-15E及JYZ-11E肠杆菌生化编码鉴定管的项目要求组合了该法的肠杆菌15种(RE15n)及肠杆菌11种(RE11n)生化鉴定试验条,用208株临床分离菌及8种质控菌菌株进行鉴定试验.结果 27种细菌微量快速生化反应试剂与传统试管法生化反应总符合率为93.5%~100%.对208株临床分离菌及8株质控菌的菌种鉴定,其完全符合率15种(RE15n)为99.9%,11种(RE11n)为100%.8种质控菌株鉴定完全正确.结论 用细菌微量快速生化反应系统鉴定细菌,具有简单、快速的特点,无需特殊设备,成本低廉,所得结果准确、可靠,能够满足临床需要.

    作者:赵院利;任健康;闫福堂 刊期: 2006年第04期

  • 化学比色法测定血清碳酸氢根的研究

    目的 建立一种新的血清碳酸氢根(HCO3-)测定方法.方法 应用自配试剂建立两步终点测定法,可满足全自动和手工半自动测定,并对该方法进行方法学评价.结果 该法比色液吸收峰556~558 nm,线性范围1~50 mmol/L,批内CV2.56%,批同CV3.55%,回收率96%~103%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=0.48+0.989X,r=0.982(n=40),脂血、溶血、黄疸标本对结果无影响,健康人静脉HCO3-浓度x±s=25.76±2.26 mmol/L.结论 该法操作简便,结果准确,试剂稳定,成本低廉,适合各级医院常规和急诊使用.

    作者:刘瑞锁;张本文;王克强;郝学梅;赵辉;晁储璋 刊期: 2006年第04期

  • 麻疹的实验室诊断和鉴别诊断

    目的 了解单份血清标本检测麻疹-IgM抗体在麻疹的实验室诊断中的作用和意义.方法 研究对象为该院2005年1~6月间门诊诊断的疑似麻疹病例共705例,男390例,女315例,其中<8 mo 298例,8 mo~3 y 210例,3~6 y 115例,>6 y 82例.采用酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中的抗麻疹病毒特异性IgM抗体.对抗麻疹病毒特异性IgM抗体阴性的标本,同时检测抗风疹病毒、人类疱疹病毒6型、柯萨奇病毒和埃克病毒特异性IgM抗体.结果 705例疑似麻疹病人中,抗麻疹病毒IgM抗体阳性547例(阳性率77.6%,547/705),其中<8mo248例(45.4%,248/547),8 mo~3 y143例(26.1%,143/547),3~6 y 93例(17.0%,93/547),>6 y 63例(11.5%,63/547);麻疹-IgM阴性共158例,占总病例数的22.4%(158/705).该158例麻疹可疑病例中,45.6%(72/158)的病例通过检测风疹病毒、柯萨奇病毒、艾柯病毒、人类疱疹病毒6型-IgM而确诊.结论 6 y以下儿童为麻疹的高发人群,其中8 mo以下婴儿患病率高,提示母传抗体的保护作用不足.单份血清在麻疹实验室确诊中存在缺陷,对于麻疹IgM阴性的临床麻疹疑似病例,不能除外麻疹,应查恢复期血清以明确诊断;另外临床麻疹疑似病例需要与风疹、肠道病毒感染和人类疱疹病毒6型等其它病毒感染所致的发热出疹性疾病相鉴别.

    作者:刘亚谊;闫静;王燕;张辉;买颖;刘春艳;谢正德 刊期: 2006年第04期

  • 生化自动分析仪的参数设置与质量保证

    实验室开展的每项化验项目都有其操作规程,有的简写成操作卡放在实验台上,便于随时查看.操作规程和操作卡的建立则体现在实现全自动生化分析的实验室根据试剂盒说明书和仪器的性能原理而设置的实验参数中.全自动生化分析仪的实验参数大多可分为三个方面:①通用参数,又称鉴别参数,包括项目编号、实验名称、计算实验、双项同测实验选择、实验项目组合等.②具体的实验参数,有的称为化学参数,包括的项目有:样品体积分数、波长的选择、方法的类型、反应方向、反应温度、信号的拾取时间、试剂空白核对、样品空白、反应线核对等.③其它一些参数,包括校正参数、质控参数、参考值范围设置、比色杯使用参数等.只有对每一参数的含义、用途和影响因素有全面清晰的了解,并结合对试剂盒和仪器说明书的全面深入的掌握,才能正确设置实验参数.下面就几方面具体的实验参数设置讨论如下.

    作者:尹秀华;李立和 刊期: 2006年第04期

  • 临床化学方法验证与表格化管理

    目的 建立一套简便实用的临床化学方法验证操作流程和表格化管理系统.方法 采用可溯源多水平线性校准物测定的方法进行校准验证;采用连续5 d每天测定4次高低两水平血清的方法检测精密度;采用连续5 d依次测定高值和三个低值血清的方法检测样品探针携带污染;采用连续5 d每天测定8例病人血清的方法进行两方法之间的比对;选择50例健康人验证项目的参考范围.结果 以血清清蛋白(ALB)为例,校准验证各测定点与靶值的偏差均在±5%以内,r=1.000;定量检测下限为0.4 g/L;高、低水平批内变异分别为0.74%和0.77%,总变异分别为0.90%和0.85%;样本携带污染为-0.1%;两台仪器比对,r=0.995,斜率为1.027,截距0.130,平均百分偏差为-5.10%,对方法参数进行调整后,r=0.997,斜率1.015,截距0.043,平均百分偏差为2.41%.50例健康人ALB测定的参考范围为35.0~54.6g/L.结论 该操作程序可以基本上满足临床化学实验室方法验证的需求,通过表格化管理可以规范实验流程,方便结果分析,有利于提高实验室管理的工作水平.

    作者:邱玲;程歆琦;鄢盛恺;沈瑛;刘茜;刘荔;刘福成;葛增梅 刊期: 2006年第04期

  • 酶双循环法测定血清中NOS的活性

    一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸、NADPH+H+和O2,生成胍氨酸、NADP+、NO.以往NOS活性测定的方法主要是测定胍氨酸和NO的含量,由于方法学的弊病使其应用范围受限.Wang[1]建立了生物组织中测定NOS的酶双循环方法,其放大倍数为1000~4000.目前尚未见用酶双循环法测定血清NOS活性的方法报道,为此,我们将Wang法与酶双循环法[2]联合用于测定血清中NOS的活性,以期应用于临床.

    作者:钱坤;邹光楣 刊期: 2006年第04期

  • 红细胞分析质控分析软件的设计与系统维护

    1现行红细胞分析质控分析软件设计的基本理念和存在缺陷 现行质控分析软件是按照某检测系统对某质控物的某一测定项目进行多次测定,其测定值的误差大小呈正态分布的理论而设计的.质控物的各个测定值质控之间以及测定值质控与其换算值质控之间各自独立成章,互不影响.软件系统只对某一单个指标做表面的在控与否统计评价分析,并未进行有关指标之间质控关系的进一步探讨,这样的质控软件系统运行一段时间后,有可能造成红细胞测定值与红细胞换算值之间质控关系不协调、不明确的局面出现.

    作者:袁应选;王飙 刊期: 2006年第04期

  • 低浓度DMSO冰冻保存血小板的初步研究

    目的 了解2%(v/v)DMSO结合第二信使效应剂冰冻保存浓缩血小板的可行性.方法 通过在含2%(v/v)DM-SO的浓缩血小板中加入不同浓度的第二信使效应剂,经-80℃冰冻保存1 w,然后分别测定PLT、MPV、Leakage of LDH及血小板表面CD62的表达.结果 硝普钠(SNP)达25 μmol/L时能显著降低CD62分子的表达(P<0.05).结论 SNP对血小板在2%(v/v)DMSO条件下-80℃冰冻保存的效果有所改善,但氨氯吡脒(A7410)的效果不明显.

    作者:洪俊;袁爱莲;徐洪卫;姚锦炎;王浦南 刊期: 2006年第04期

  • 采用统计学简捷法做t检验的报告

    目的 通过实际演算了解两个大样本均数比较的显著性测验的简易法.方法 对100例健康成人静脉血Hb资料采用简捷法t检验.结果 健康成人60例,男性Hbx±s=15.5±1.240 2 g/dl;40例女性Hbx±s=14.09±1.221 5 g/dl.t=5.622,P<0.001,男女之间Hb平均值有非常显著性差异.结论 t检验简捷法优越,计算速度快、准确、可靠,不复杂.可以普及采用,特别适用于基层.

    作者:吴金锁;方根;樊利和 刊期: 2006年第04期

  • 全自动干式生化分析仪测定胆碱酯酶的实验研究

    目的 通过胆碱酯酶在全自动干式生化分析仪上测定的实验观察,从而建立一种临床上可靠的简单易行的胆碱酯酶测定方法.方法 利用全自动干式生化分析仪来测定胆碱酯酶并进行方法学评价.结果 高值与低值的批内批间的变异系数(CV)分别为3.8%,3.9%,3.2%,3.3%,与全自动生化分析仪测定结果相比,相关性好(r=0.962).一定范围的胆红素、血红蛋白、抗坏血酸干扰小,但要避免溶血,试剂稳定,通过临床病例观察实验,在有机磷中毒的诊断中,其阳性结果预示值(PV+)和诊断灵敏度以及诊断特异性都达到94%,阳性似然比(PLR)为15.7,阴性似然比(NLR)为0.063.结论 独特的测定原理和试剂片独立的包装,使该实验方法更可靠,有更好的临床实用价值,加上该实验方法操作简单、测定快速,更适于临床有机磷中毒急救中推广应用.

    作者:陈丽峰;马增煌;吴琴 刊期: 2006年第04期

  • 健康成年人血浆肌酐生物参考区间调查

    目的 通过测定广州市健康成年人群的肝素锂抗凝血浆肌酐值,建立该实验室血浆肌酐的生物参考区间.方法 采用碱性苦味酸速率法对959例健康成年人(年龄>18 y,其中男442例,女517例)进行血浆肌酐的测定,并按性别和年龄组分别比较.结果 血浆肌酐结果呈对数正态分布,成年人肌酐值男女间差异有统计学意义(P<0.01),成年健康男性年龄组肌酐值差异无显著性(P>0.05),其95%可信限的生物参考区间为57.3~111.3 μmol/L;女性61 y以上的年龄组与其他成年女性年龄组之间肌酐值差异有显著性(P<0.05),年龄18~60 y健康女性95%可信限的参考区间为43.8~83μ mol/L,年龄61 y以上健康女性95%可信限的参考区间为45~97 μmol/L.结论 生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义,应依据标本类型、检测方法和检测人群制定适合各实验室的生物参考区间.

    作者:卢燕君;石汉振;林莲英;王美兰;冯妙芙;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期

  • 乙型肝炎病毒前S1抗原的检测及临床意义探讨

    目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物和HBV-DNA的相关性及临床意义.方法 ①HBV血清标志物检测采用ELISA法;②HBV-DNA检测采用PCR法;③前S1抗原检测采用ELISA法.结果 1 369例HBsAg阳性者中,前S1抗原阳性者1 061例,阳性率为77.5%;HBeAg阳性者578例中,前S1抗原阳性者530例,阳性率为91.7%.另HBsAg阳性110例并HBeAg阳性者29例,其前S1抗原阳性27例,阳性率为93.1%,HBV-DNA阳性24例,阳性率为82.8%.结论 前S1抗原与HBeAg和HBV-DNA高度相关,提示前S1抗原能够较好地反映病毒复制状况,有可能作为体内病毒复制存在的实验指标.

    作者:郑彦;李芳芹 刊期: 2006年第04期

  • 我国不同肝炎患者及献血员中SENV-D/H感染流行病学调查

    目的 了解SEN病毒(SENV)D亚型和H亚型在我国不同肝炎患者和献血员中的感染情况.方法 采用巢式聚合酶链反应对收集的270例健康献血者和484例各型肝炎患者(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲非戊型肝炎患者)进行SENV-D亚型和H亚型DNA检测.结果 无偿献血者中SENV-D的感染率为25.9%,SENV-H为24.4%;急性甲肝患者中SENV-D的感染率为14.5%,SENV-H为32.7%;慢性乙肝患者中SENV-D的感染率为46%,SENV-H为45.2%;在丙肝患者中SENV-D和SENV-H感染率均为65%;在非甲-非戊型肝炎患者中SENV-D的感染率为51.2%,SENV-H为43.9%.结论 SENV可能与HCV和HBV具有一样的传播方式,但并不是肝病发生的原因.

    作者:穆士杰;陈蕤;李丁;张献清 刊期: 2006年第04期

  • 雅培AEROSET型全自动生化分析仪故障排除

    美国雅培AEROSET型全自动生化分析仪是日本东芝生产的仪器,在20世纪90年代末进入中国地区,该仪器具有检测速度快(高达2000测试/小时),反应杯自动清洗,不需分离标本血清,自动加样,加样针液面自动探测系统及荧光屏可触摸,操作方便,测定准确可靠、重复性好、低故障率等优点,得到了用户的好评.我院自2000年购入该仪器,经过近五年的使用,现将其工作中常见故障及排除方法介绍如下:

    作者:史清海;路西春;伏建峰 刊期: 2006年第04期

  • 不同生化检测系统测定同种项目的结果比对与临床可接受性评价

    目的 通过对同一检验科不同生化检测系统进行方法比对和偏差评估,探讨不同检测系统间对同种检测项目的测定结果是否具有可比性,以及结果是否能被临床所接受.方法 参考NCCLS的EP9-A文件,以雅培ARCHITECTci8200生化分析仪、雅培原装试剂、c.f.a.s校准品和Roche质控品组成的检测系统为比较方法,其它不同检测系统为实验方法,检测病人新鲜血清中GLU、AST、BUN、Cr、CK、CK-MB,用配对t检验和回归统计法分析实验方法(Y)和比较方法(X)测定结果均值处的相对偏差或医学决定水平处的系统误差,以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的临床可接受性.结果 除检测系统2的Cr结果,检测系统1、2的GLU结果与比较方法的系统误差或均值处的相对偏差不能被接受外,其余项目测定结果的偏差临床均可以接受.结论 当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性.

    作者:张东玲;朱广博;高越 刊期: 2006年第04期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞培养上清液Th1/Th2细胞因子检测与临床意义

    目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液Th1/Th2类细胞因子(IFN-γ/IL-4)表达,探明Th1/Th2类细胞因子在慢性乙型肝炎发病机制中的作用.方法 分离64例慢性乙型肝炎患者及20例正常人群外周血单个核细胞(PBMC),分别于PHA和HBcAg/HBeAg体外培养48 h,双抗体夹心ELISA法检测PBMC培养上清液IFN-γ/IL-4水平.结果 在PHA诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平低于正常对照组,IL-4水平高于正常对照组,谷丙转氨酶(ALT)异常组和ALT正常组相比较,IFN-γ水平异常组大于正常组.HBcAg诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平高于正常人群,IL-4水平两组间无差异,HBeAg诱导下,IFN-γ水平无显著性差异,而IL-4水平明显高于正常对照组.结论 Th1/Th2类细胞平衡失调与HBV感染慢性化有关;Th1类细胞因子优势表达引起肝脏炎症反应,HBcAg倾向诱导Th1类细胞因子表达,HBeAg倾向诱导Th2类细胞因子表达.

    作者:张宝华 刊期: 2006年第04期

  • 胆红素概念及其检测存在的问题

    胆红素是临床肝功能实验室检查的必查项目之一,但目前在对其认识和检验过程中却存在着一些需要澄清和亟待解决的几个问题.1在对其认识方面存在的问题 对多种胆红素概念模糊,甚至认为直接胆红素就是结合胆红素.针对这个问题,我们可从以下几点得到澄清.

    作者:席在辉 刊期: 2006年第04期

  • 外周血细胞染色体分析在闭经患者诊断中的意义

    目的 探讨原发性或继发性闭经患者外周血细胞染色体异常及其临床意义.方法 按常规外周血淋巴细胞培养方法制备染色体,G显带,显微镜下核型分析.结果 在46例闭经患者中共检出染色体异常21例,总异常率占45.6%,其中31例原发性闭经患者染色体异常18例[46,XY 6例、46,XXinv9 3例、45,XO 2例、45,XO/46,XX 3例、45,XO/45,XO+mar 2例、46,XX t(3;X)(q 21;q 22)和47,XXX各1例],异常率占58.1%;15例继发性闭经患者中染色体异常3例(45,XO、45,XO/46,XX和46,XO del X q22各1例),异常率占20.0%,包括染色体数目异常、缺失、倒位及嵌合.结论 染色体异常是导致原发性或继发性闭经的主要原因,对闭经患者外周血细胞中进行染色体核型检查分析,特别是对13岁以上第二性征不发育、体矮、智力发育较差的女性应早期诊断.对研究闭经的病因、治疗和估计患者预后具有十分重要的意义.

    作者:周萍;王翔;陈葳;杨玉琮;程小丽 刊期: 2006年第04期

  • 艾滋病检测中的实验室管理

    艾滋病于1981年发现以来,广泛流行于世界各地.我国于1985年发现首例经输血制品传染的病例,从流行率上看我国已经存在HIV感染发生和流行的条件.艾滋病病毒的检测有一定的严格要求,需要有独立的实验室和专用设备和器械,污染区、清洁区分开.实验人员必须接受专门培养并经考核获合格证书,且要熟悉生物安全操作知识和消毒技术,防止职业感染.搞好质量控制,健全各种登记,阳性标本即时送确认实验室确认.

    作者:王清泉;张莹杰 刊期: 2006年第04期

  • 动态分析铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性

    目的 探讨铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性.方法 用法国生物梅里埃全自动微生物鉴定/药敏VITEK32系统对PA的实验资料进行分析,统计分析其耐药性.结果 多重耐药性PA分离率逐年上升,其耐药率也逐年上升;从2004年1月开始出现泛耐药的PA,至2005年12月已出现泛耐药PA43株,其MIC值均有明显增加.结论 PA多重耐药十分严重.

    作者:庞雪云;田碧文;蓝锴;孙蕾;黄宪章;李强 刊期: 2006年第04期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院