学术投稿

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞培养上清液Th1/Th2细胞因子检测与临床意义

张宝华

关键词:乙型肝炎, 外周血单个核细胞, Th1/Th2
摘要:目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液Th1/Th2类细胞因子(IFN-γ/IL-4)表达,探明Th1/Th2类细胞因子在慢性乙型肝炎发病机制中的作用.方法 分离64例慢性乙型肝炎患者及20例正常人群外周血单个核细胞(PBMC),分别于PHA和HBcAg/HBeAg体外培养48 h,双抗体夹心ELISA法检测PBMC培养上清液IFN-γ/IL-4水平.结果 在PHA诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平低于正常对照组,IL-4水平高于正常对照组,谷丙转氨酶(ALT)异常组和ALT正常组相比较,IFN-γ水平异常组大于正常组.HBcAg诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平高于正常人群,IL-4水平两组间无差异,HBeAg诱导下,IFN-γ水平无显著性差异,而IL-4水平明显高于正常对照组.结论 Th1/Th2类细胞平衡失调与HBV感染慢性化有关;Th1类细胞因子优势表达引起肝脏炎症反应,HBcAg倾向诱导Th1类细胞因子表达,HBeAg倾向诱导Th2类细胞因子表达.
现代检验医学杂志相关文献
  • 大量输血的相关问题及处理方法

    在临床上,输血是常见的一种治疗手段,但也可引起一系列不良反应.而大量输血更可引起诸如凝血功能下降、酸碱代谢紊乱等严重的副反应.该文就近年来有关大量输血的相关问题和处理方案作一综述.

    作者:戴鹏;张献清 刊期: 2006年第04期

  • 麻疹的实验室诊断和鉴别诊断

    目的 了解单份血清标本检测麻疹-IgM抗体在麻疹的实验室诊断中的作用和意义.方法 研究对象为该院2005年1~6月间门诊诊断的疑似麻疹病例共705例,男390例,女315例,其中<8 mo 298例,8 mo~3 y 210例,3~6 y 115例,>6 y 82例.采用酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中的抗麻疹病毒特异性IgM抗体.对抗麻疹病毒特异性IgM抗体阴性的标本,同时检测抗风疹病毒、人类疱疹病毒6型、柯萨奇病毒和埃克病毒特异性IgM抗体.结果 705例疑似麻疹病人中,抗麻疹病毒IgM抗体阳性547例(阳性率77.6%,547/705),其中<8mo248例(45.4%,248/547),8 mo~3 y143例(26.1%,143/547),3~6 y 93例(17.0%,93/547),>6 y 63例(11.5%,63/547);麻疹-IgM阴性共158例,占总病例数的22.4%(158/705).该158例麻疹可疑病例中,45.6%(72/158)的病例通过检测风疹病毒、柯萨奇病毒、艾柯病毒、人类疱疹病毒6型-IgM而确诊.结论 6 y以下儿童为麻疹的高发人群,其中8 mo以下婴儿患病率高,提示母传抗体的保护作用不足.单份血清在麻疹实验室确诊中存在缺陷,对于麻疹IgM阴性的临床麻疹疑似病例,不能除外麻疹,应查恢复期血清以明确诊断;另外临床麻疹疑似病例需要与风疹、肠道病毒感染和人类疱疹病毒6型等其它病毒感染所致的发热出疹性疾病相鉴别.

    作者:刘亚谊;闫静;王燕;张辉;买颖;刘春艳;谢正德 刊期: 2006年第04期

  • 雅培AEROSET型全自动生化分析仪故障排除

    美国雅培AEROSET型全自动生化分析仪是日本东芝生产的仪器,在20世纪90年代末进入中国地区,该仪器具有检测速度快(高达2000测试/小时),反应杯自动清洗,不需分离标本血清,自动加样,加样针液面自动探测系统及荧光屏可触摸,操作方便,测定准确可靠、重复性好、低故障率等优点,得到了用户的好评.我院自2000年购入该仪器,经过近五年的使用,现将其工作中常见故障及排除方法介绍如下:

    作者:史清海;路西春;伏建峰 刊期: 2006年第04期

  • 两次土源性线虫基线调查检验结果比较

    旬阳县位于陕西省东南部,地理环境适宜于土源性线虫的感染,属肠道寄生虫的高发区.为了全面掌握肠道寄生虫在人群中的传染分布情况,国家将我县作为调查地区分别于1991年和2002年进行了两次基线调查.首次调查采用两特征分层整群随机抽样的方法,确定调查采样点,共整群抽样了3个乡的3个村.2002年第二次全国人体寄生虫调查,同样的乡和村为调查采样点.采样对象是调查点的所有自然人群.

    作者:刘启祥;王万成 刊期: 2006年第04期

  • 胆红素概念及其检测存在的问题

    胆红素是临床肝功能实验室检查的必查项目之一,但目前在对其认识和检验过程中却存在着一些需要澄清和亟待解决的几个问题.1在对其认识方面存在的问题 对多种胆红素概念模糊,甚至认为直接胆红素就是结合胆红素.针对这个问题,我们可从以下几点得到澄清.

    作者:席在辉 刊期: 2006年第04期

  • 健康成年人血浆肌酐生物参考区间调查

    目的 通过测定广州市健康成年人群的肝素锂抗凝血浆肌酐值,建立该实验室血浆肌酐的生物参考区间.方法 采用碱性苦味酸速率法对959例健康成年人(年龄>18 y,其中男442例,女517例)进行血浆肌酐的测定,并按性别和年龄组分别比较.结果 血浆肌酐结果呈对数正态分布,成年人肌酐值男女间差异有统计学意义(P<0.01),成年健康男性年龄组肌酐值差异无显著性(P>0.05),其95%可信限的生物参考区间为57.3~111.3 μmol/L;女性61 y以上的年龄组与其他成年女性年龄组之间肌酐值差异有显著性(P<0.05),年龄18~60 y健康女性95%可信限的参考区间为43.8~83μ mol/L,年龄61 y以上健康女性95%可信限的参考区间为45~97 μmol/L.结论 生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义,应依据标本类型、检测方法和检测人群制定适合各实验室的生物参考区间.

    作者:卢燕君;石汉振;林莲英;王美兰;冯妙芙;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期

  • 实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-αmRNA基因表达

    目的 建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达.方法 用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-α mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较.结果 实时荧光定量RT-PCR检测肿瘤患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常人,且半定量RT-PCR结果显示TNF-α出现类似的变化趋势.结论 所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测TNF-α mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确.

    作者:陈晓;王宇学 刊期: 2006年第04期

  • 动态分析铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性

    目的 探讨铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性.方法 用法国生物梅里埃全自动微生物鉴定/药敏VITEK32系统对PA的实验资料进行分析,统计分析其耐药性.结果 多重耐药性PA分离率逐年上升,其耐药率也逐年上升;从2004年1月开始出现泛耐药的PA,至2005年12月已出现泛耐药PA43株,其MIC值均有明显增加.结论 PA多重耐药十分严重.

    作者:庞雪云;田碧文;蓝锴;孙蕾;黄宪章;李强 刊期: 2006年第04期

  • 生化自动分析仪的参数设置与质量保证

    实验室开展的每项化验项目都有其操作规程,有的简写成操作卡放在实验台上,便于随时查看.操作规程和操作卡的建立则体现在实现全自动生化分析的实验室根据试剂盒说明书和仪器的性能原理而设置的实验参数中.全自动生化分析仪的实验参数大多可分为三个方面:①通用参数,又称鉴别参数,包括项目编号、实验名称、计算实验、双项同测实验选择、实验项目组合等.②具体的实验参数,有的称为化学参数,包括的项目有:样品体积分数、波长的选择、方法的类型、反应方向、反应温度、信号的拾取时间、试剂空白核对、样品空白、反应线核对等.③其它一些参数,包括校正参数、质控参数、参考值范围设置、比色杯使用参数等.只有对每一参数的含义、用途和影响因素有全面清晰的了解,并结合对试剂盒和仪器说明书的全面深入的掌握,才能正确设置实验参数.下面就几方面具体的实验参数设置讨论如下.

    作者:尹秀华;李立和 刊期: 2006年第04期

  • 酶双循环法测定血清中NOS的活性

    一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸、NADPH+H+和O2,生成胍氨酸、NADP+、NO.以往NOS活性测定的方法主要是测定胍氨酸和NO的含量,由于方法学的弊病使其应用范围受限.Wang[1]建立了生物组织中测定NOS的酶双循环方法,其放大倍数为1000~4000.目前尚未见用酶双循环法测定血清NOS活性的方法报道,为此,我们将Wang法与酶双循环法[2]联合用于测定血清中NOS的活性,以期应用于临床.

    作者:钱坤;邹光楣 刊期: 2006年第04期

  • ELISA检测乙肝病毒核心抗原的方法建立及应用

    目的 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),建立乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的定性检测方法,用于临床标本HBcAg的检测.方法 用ELSIA法检测临床血样标本乙肝表面抗原(HBsAg)阳性208例,阴性健康对照30例,与HBV DNA结果进行比较.结果 208例HBsAg阳性样本,HBcAg与HBV DNA共同阳性率为58.7%,HBcAg阳性率为74.0%,HBV DNA阳性率为64.4%,二者结果显著相关.结论 ELISA法可用于临床标本HBcAg的检测.

    作者:王厚照;田丰丰;陆金霞;马莉;周友泉 刊期: 2006年第04期

  • 乙型肝炎病毒前S1抗原的检测及临床意义探讨

    目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物和HBV-DNA的相关性及临床意义.方法 ①HBV血清标志物检测采用ELISA法;②HBV-DNA检测采用PCR法;③前S1抗原检测采用ELISA法.结果 1 369例HBsAg阳性者中,前S1抗原阳性者1 061例,阳性率为77.5%;HBeAg阳性者578例中,前S1抗原阳性者530例,阳性率为91.7%.另HBsAg阳性110例并HBeAg阳性者29例,其前S1抗原阳性27例,阳性率为93.1%,HBV-DNA阳性24例,阳性率为82.8%.结论 前S1抗原与HBeAg和HBV-DNA高度相关,提示前S1抗原能够较好地反映病毒复制状况,有可能作为体内病毒复制存在的实验指标.

    作者:郑彦;李芳芹 刊期: 2006年第04期

  • SDS-琼脂糖凝胶电泳分析蛋白尿来源的临床意义

    目的 分析尿蛋白成分来鉴别蛋白尿来源.方法 应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析49例蛋白尿患者的尿蛋白成分.结果 在肾后性蛋白尿中往往可以检测到巨球蛋白等一类大分子蛋白,而在肾性则往往缺乏.并且以巨球蛋白作为鉴别蛋白尿的标准,其敏感性和特异性均达到95.8%.结论 该方法客观性强,诊断符合率高,重复性好,简便快速,值得临床应用.

    作者:周铁成;秦庆;杨小云;徐焰;程晓东;肖鹏涛;张路;郝晓柯 刊期: 2006年第04期

  • 化学比色法测定血清碳酸氢根的研究

    目的 建立一种新的血清碳酸氢根(HCO3-)测定方法.方法 应用自配试剂建立两步终点测定法,可满足全自动和手工半自动测定,并对该方法进行方法学评价.结果 该法比色液吸收峰556~558 nm,线性范围1~50 mmol/L,批内CV2.56%,批同CV3.55%,回收率96%~103%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=0.48+0.989X,r=0.982(n=40),脂血、溶血、黄疸标本对结果无影响,健康人静脉HCO3-浓度x±s=25.76±2.26 mmol/L.结论 该法操作简便,结果准确,试剂稳定,成本低廉,适合各级医院常规和急诊使用.

    作者:刘瑞锁;张本文;王克强;郝学梅;赵辉;晁储璋 刊期: 2006年第04期

  • 采用统计学简捷法做t检验的报告

    目的 通过实际演算了解两个大样本均数比较的显著性测验的简易法.方法 对100例健康成人静脉血Hb资料采用简捷法t检验.结果 健康成人60例,男性Hbx±s=15.5±1.240 2 g/dl;40例女性Hbx±s=14.09±1.221 5 g/dl.t=5.622,P<0.001,男女之间Hb平均值有非常显著性差异.结论 t检验简捷法优越,计算速度快、准确、可靠,不复杂.可以普及采用,特别适用于基层.

    作者:吴金锁;方根;樊利和 刊期: 2006年第04期

  • F-820血细胞分析仪废液收集瓶的改制

    日本希森美康株式会社生产的F-820血细胞分析仪因该仪器具有的技术优势--如15项检测参数和3个细胞分布直方图,高稀释倍率,碳精浮球绝对定量加时间的双重定量技术,自动浮动界标功能;且为我国卫生部临床检验中心进行室间质评定标仪器;再加之仪器的价格性能比,优质的售后服务,使其在国内占较大的市场分额.我科于1999年购置该仪器,因该仪器所带的废液收集瓶容量小,加之我们工作量较大;每天要开启废液瓶1~2次,给工作带来较多不便,因经常开启,瓶口磨损,密封不紧,在2001年底仪器不能进行标本检测处理;购置新废液瓶需花费一定的资金且要等6~8 d时间,为了不影响日常标本的检测工作,我们与医院设备科维修室同志一道,用20 L龙口瓶代替仪器所带废液瓶,恢复仪器工作可以达到每周倒一次废液的效果,经过3年多的实际应用,现报道如下,供同道参考.

    作者:张薇;杨兴江;李竣玲;曾玉琼;许强 刊期: 2006年第04期

  • Beckman-coulter SYNCHRON LX-20全自动生化分析仪七种常见故障原因分析及处理

    Beckman-coulter SYNCHRON LX-20全自动生化分析仪是由美国贝克曼库尔特公司生产的新型的生化检验仪器,该仪器使用界面、操作流程简单,测量结果准确、稳定、快速、精密度高,测试项目包括急诊生化、常规生化、特殊生化及药物检测等,是一种较理想的生化仪器.该仪器模块化的设计思路在应用和维护方面极大的方便了我们日常的工作.笔者现将该仪器使用中七种常见故障原因分析及其处理方法总结如下,供同行们参考.

    作者:涂学亮;薛燕平;李玲 刊期: 2006年第04期

  • Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪常见故障分析及排除

    日本东亚公司推出的全自动五分类血液分析仪Sysmex XE-2100是目前世界上测试速度快的血细胞分析仪,每小时可检测150个标本,它具有灵活的七种检测模式和真正随机进样分析,满足临床不同标本检测要求,并节约试剂成本,真正随机进样分析功能可实现完全无人化的操作.Sysmex XE-2100除了采用传统的电阻抗法和射频法外还应用了半导体流式细胞检测技术,同时结合特殊的细胞化学试剂及荧光染料对外周血白细胞进行分类,并可分析原始细胞、幼稚细胞和有核红细胞.XE-2100不仅能够满足检测大批量样品的需求,还可以为临床提供包括有核红细胞(NRBC)、光学法血小板(PLT-O(#)、幼稚型网织红细胞IRF(%)、造血祖细胞(HPC)等新参数的检测信息.因此,临床应用一年来,通过医生反馈的信息和科室的统计分析,证实了此仪器的以上优点.但是要保持仪器处于良好的状态,让它用得好、做得准,在保养维护方面就要下功夫,一些常见的故障就要排除,以下是常见的故障以及排除方法和使用心得.

    作者:方伟祯;陈梅;鲍蕴文 刊期: 2006年第04期

  • 微柱凝胶法在抗体筛查中的应用及其影响因素探讨

    目的 了解微柱凝胶法筛查受血者不规则抗体的可行性及其影响因素.方法 应用微柱凝胶法(MGT)对受血者血清进行不规则抗体筛查,对筛查阳性的标本做间接抗人球蛋白试验,进行对照比较,对确证仍为阳性的标本再进行抗体特异性鉴定.结果 在5 310例受血者中筛查出不规则抗体15例,包括其中单特异性抗D 4例,抗E 3例,抗C 2例,抗M2例,复合性抗EC 2例,抗Cc 1例,抗CE 1例;Rh血型系统的不规则抗体13例;MNSs血型系统的不规则抗体2例,非特异性的假凝集即假阳性反应18例.结论 应用微柱凝胶法对受血者血清进行不规则抗体筛查,能够将操作标准化、自动化,灵敏度高,结果准确可靠.如果血清(浆)中含有纤维蛋白、球蛋白增高及冷凝集素综合征等可引起假阳性,采取将血标本置37℃水浴30 min,离心去除纤维蛋白,4℃吸收冷凝集素等措施,一般可消除假凝集现象,保证试验结果的准确性.

    作者:杨世明;崔颖;张勇萍 刊期: 2006年第04期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞培养上清液Th1/Th2细胞因子检测与临床意义

    目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液Th1/Th2类细胞因子(IFN-γ/IL-4)表达,探明Th1/Th2类细胞因子在慢性乙型肝炎发病机制中的作用.方法 分离64例慢性乙型肝炎患者及20例正常人群外周血单个核细胞(PBMC),分别于PHA和HBcAg/HBeAg体外培养48 h,双抗体夹心ELISA法检测PBMC培养上清液IFN-γ/IL-4水平.结果 在PHA诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平低于正常对照组,IL-4水平高于正常对照组,谷丙转氨酶(ALT)异常组和ALT正常组相比较,IFN-γ水平异常组大于正常组.HBcAg诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平高于正常人群,IL-4水平两组间无差异,HBeAg诱导下,IFN-γ水平无显著性差异,而IL-4水平明显高于正常对照组.结论 Th1/Th2类细胞平衡失调与HBV感染慢性化有关;Th1类细胞因子优势表达引起肝脏炎症反应,HBcAg倾向诱导Th1类细胞因子表达,HBeAg倾向诱导Th2类细胞因子表达.

    作者:张宝华 刊期: 2006年第04期

现代检验医学杂志

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