周萍;王翔;陈葳;杨玉琮;程小丽
目的 建立一套简便实用的临床化学方法验证操作流程和表格化管理系统.方法 采用可溯源多水平线性校准物测定的方法进行校准验证;采用连续5 d每天测定4次高低两水平血清的方法检测精密度;采用连续5 d依次测定高值和三个低值血清的方法检测样品探针携带污染;采用连续5 d每天测定8例病人血清的方法进行两方法之间的比对;选择50例健康人验证项目的参考范围.结果 以血清清蛋白(ALB)为例,校准验证各测定点与靶值的偏差均在±5%以内,r=1.000;定量检测下限为0.4 g/L;高、低水平批内变异分别为0.74%和0.77%,总变异分别为0.90%和0.85%;样本携带污染为-0.1%;两台仪器比对,r=0.995,斜率为1.027,截距0.130,平均百分偏差为-5.10%,对方法参数进行调整后,r=0.997,斜率1.015,截距0.043,平均百分偏差为2.41%.50例健康人ALB测定的参考范围为35.0~54.6g/L.结论 该操作程序可以基本上满足临床化学实验室方法验证的需求,通过表格化管理可以规范实验流程,方便结果分析,有利于提高实验室管理的工作水平.
作者:邱玲;程歆琦;鄢盛恺;沈瑛;刘茜;刘荔;刘福成;葛增梅 刊期: 2006年第04期
目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液Th1/Th2类细胞因子(IFN-γ/IL-4)表达,探明Th1/Th2类细胞因子在慢性乙型肝炎发病机制中的作用.方法 分离64例慢性乙型肝炎患者及20例正常人群外周血单个核细胞(PBMC),分别于PHA和HBcAg/HBeAg体外培养48 h,双抗体夹心ELISA法检测PBMC培养上清液IFN-γ/IL-4水平.结果 在PHA诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平低于正常对照组,IL-4水平高于正常对照组,谷丙转氨酶(ALT)异常组和ALT正常组相比较,IFN-γ水平异常组大于正常组.HBcAg诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平高于正常人群,IL-4水平两组间无差异,HBeAg诱导下,IFN-γ水平无显著性差异,而IL-4水平明显高于正常对照组.结论 Th1/Th2类细胞平衡失调与HBV感染慢性化有关;Th1类细胞因子优势表达引起肝脏炎症反应,HBcAg倾向诱导Th1类细胞因子表达,HBeAg倾向诱导Th2类细胞因子表达.
作者:张宝华 刊期: 2006年第04期
目的 了解2%(v/v)DMSO结合第二信使效应剂冰冻保存浓缩血小板的可行性.方法 通过在含2%(v/v)DM-SO的浓缩血小板中加入不同浓度的第二信使效应剂,经-80℃冰冻保存1 w,然后分别测定PLT、MPV、Leakage of LDH及血小板表面CD62的表达.结果 硝普钠(SNP)达25 μmol/L时能显著降低CD62分子的表达(P<0.05).结论 SNP对血小板在2%(v/v)DMSO条件下-80℃冰冻保存的效果有所改善,但氨氯吡脒(A7410)的效果不明显.
作者:洪俊;袁爱莲;徐洪卫;姚锦炎;王浦南 刊期: 2006年第04期
1结果偏低现象 本科室2004去年8月同时使用二台LX-20生化分析仪以来,平时均按照日常的保养程序执行操作,质控及测定结果均较为满意.但近段时间以来其中一台生化仪经常出现总蛋白测定结果偏低的现象,具体情况是这样的:质控标本中总蛋白首次测定结果常出现在-2s附近,但重新测定后结果升至靶值附近,前后二次数值相差较大.若重做几次总蛋白测定后,发现重复性很好,且均在靶值附近,结果又很理想.按照日常思维,认为第一次总蛋白测定结果可能系偶然误差引起,因此并不太在意.但连续几天均有此现象,而且病人标本也有此现象发生,而又不是每个标本均如此.总体现象是:单做肝功的标本总蛋白第一次结果与复查结果均差别不大,结果在靶值附近,且均在士1s范围内,但做生化全套的病人就有第一次结果与复查结果差别很大的现象出现.
作者:陈学民;黄清流;吴一波;林鸿钊 刊期: 2006年第04期
美国雅培AEROSET型全自动生化分析仪是日本东芝生产的仪器,在20世纪90年代末进入中国地区,该仪器具有检测速度快(高达2000测试/小时),反应杯自动清洗,不需分离标本血清,自动加样,加样针液面自动探测系统及荧光屏可触摸,操作方便,测定准确可靠、重复性好、低故障率等优点,得到了用户的好评.我院自2000年购入该仪器,经过近五年的使用,现将其工作中常见故障及排除方法介绍如下:
作者:史清海;路西春;伏建峰 刊期: 2006年第04期
一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸、NADPH+H+和O2,生成胍氨酸、NADP+、NO.以往NOS活性测定的方法主要是测定胍氨酸和NO的含量,由于方法学的弊病使其应用范围受限.Wang[1]建立了生物组织中测定NOS的酶双循环方法,其放大倍数为1000~4000.目前尚未见用酶双循环法测定血清NOS活性的方法报道,为此,我们将Wang法与酶双循环法[2]联合用于测定血清中NOS的活性,以期应用于临床.
作者:钱坤;邹光楣 刊期: 2006年第04期
目的 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),建立乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的定性检测方法,用于临床标本HBcAg的检测.方法 用ELSIA法检测临床血样标本乙肝表面抗原(HBsAg)阳性208例,阴性健康对照30例,与HBV DNA结果进行比较.结果 208例HBsAg阳性样本,HBcAg与HBV DNA共同阳性率为58.7%,HBcAg阳性率为74.0%,HBV DNA阳性率为64.4%,二者结果显著相关.结论 ELISA法可用于临床标本HBcAg的检测.
作者:王厚照;田丰丰;陆金霞;马莉;周友泉 刊期: 2006年第04期
目的 了解SEN病毒(SENV)D亚型和H亚型在我国不同肝炎患者和献血员中的感染情况.方法 采用巢式聚合酶链反应对收集的270例健康献血者和484例各型肝炎患者(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲非戊型肝炎患者)进行SENV-D亚型和H亚型DNA检测.结果 无偿献血者中SENV-D的感染率为25.9%,SENV-H为24.4%;急性甲肝患者中SENV-D的感染率为14.5%,SENV-H为32.7%;慢性乙肝患者中SENV-D的感染率为46%,SENV-H为45.2%;在丙肝患者中SENV-D和SENV-H感染率均为65%;在非甲-非戊型肝炎患者中SENV-D的感染率为51.2%,SENV-H为43.9%.结论 SENV可能与HCV和HBV具有一样的传播方式,但并不是肝病发生的原因.
作者:穆士杰;陈蕤;李丁;张献清 刊期: 2006年第04期
色谱法已成为世界许多科学领域中普及的分离分析手段,色谱仪也呈多样化、高精化、自动化、联用技术化等方向发展.高效液相色谱仪具有柱效高、分析速度快、流动相和被测组分的体积流量小等特点,广泛应用于临床工作.日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪主要包括LC-10AD输液泵、TOC-10A柱箱、检测器、C-R6A积分仪几部分,其中检测器分SPD-10A紫外检测器、FLD-6A荧光检测器及L-ECD-6A电化学检测器,现将我们在使用过程中的保养体会及常见故障排除方法介绍如下,以供同行参考.
作者:张润香 刊期: 2006年第04期
目的 分析尿蛋白成分来鉴别蛋白尿来源.方法 应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析49例蛋白尿患者的尿蛋白成分.结果 在肾后性蛋白尿中往往可以检测到巨球蛋白等一类大分子蛋白,而在肾性则往往缺乏.并且以巨球蛋白作为鉴别蛋白尿的标准,其敏感性和特异性均达到95.8%.结论 该方法客观性强,诊断符合率高,重复性好,简便快速,值得临床应用.
作者:周铁成;秦庆;杨小云;徐焰;程晓东;肖鹏涛;张路;郝晓柯 刊期: 2006年第04期
日本希森美康株式会社生产的F-820血细胞分析仪因该仪器具有的技术优势--如15项检测参数和3个细胞分布直方图,高稀释倍率,碳精浮球绝对定量加时间的双重定量技术,自动浮动界标功能;且为我国卫生部临床检验中心进行室间质评定标仪器;再加之仪器的价格性能比,优质的售后服务,使其在国内占较大的市场分额.我科于1999年购置该仪器,因该仪器所带的废液收集瓶容量小,加之我们工作量较大;每天要开启废液瓶1~2次,给工作带来较多不便,因经常开启,瓶口磨损,密封不紧,在2001年底仪器不能进行标本检测处理;购置新废液瓶需花费一定的资金且要等6~8 d时间,为了不影响日常标本的检测工作,我们与医院设备科维修室同志一道,用20 L龙口瓶代替仪器所带废液瓶,恢复仪器工作可以达到每周倒一次废液的效果,经过3年多的实际应用,现报道如下,供同道参考.
作者:张薇;杨兴江;李竣玲;曾玉琼;许强 刊期: 2006年第04期
NK细胞是重要的天然免疫细胞,具有广泛的生物学功能,其特征是表型为CD3-,CD16+(FcγR Ⅲ A),CD56+(N-CAM),不需要预先刺激即可直接杀伤肿瘤和被病毒感染的靶细胞[1],也可分泌细胞因子调节其他免疫细胞的功能,在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中起重要作用.NK细胞表面的受体目前已发现数十种,按功能可分为活化性受体和抑制性受体两大类.以NK细胞受体基因定位可分为KIR家族、ILT/LIR家族、CD94/NKG2家族、NCR家族、Ly49家族和NKP-P1家族等[2].
作者:沈亚娟;李春悦;宋晓斐;张建 刊期: 2006年第04期
目的 通过实际演算了解两个大样本均数比较的显著性测验的简易法.方法 对100例健康成人静脉血Hb资料采用简捷法t检验.结果 健康成人60例,男性Hbx±s=15.5±1.240 2 g/dl;40例女性Hbx±s=14.09±1.221 5 g/dl.t=5.622,P<0.001,男女之间Hb平均值有非常显著性差异.结论 t检验简捷法优越,计算速度快、准确、可靠,不复杂.可以普及采用,特别适用于基层.
作者:吴金锁;方根;樊利和 刊期: 2006年第04期
1现行红细胞分析质控分析软件设计的基本理念和存在缺陷 现行质控分析软件是按照某检测系统对某质控物的某一测定项目进行多次测定,其测定值的误差大小呈正态分布的理论而设计的.质控物的各个测定值质控之间以及测定值质控与其换算值质控之间各自独立成章,互不影响.软件系统只对某一单个指标做表面的在控与否统计评价分析,并未进行有关指标之间质控关系的进一步探讨,这样的质控软件系统运行一段时间后,有可能造成红细胞测定值与红细胞换算值之间质控关系不协调、不明确的局面出现.
作者:袁应选;王飙 刊期: 2006年第04期
目的 通过测定广州市健康成年人群的肝素锂抗凝血浆肌酐值,建立该实验室血浆肌酐的生物参考区间.方法 采用碱性苦味酸速率法对959例健康成年人(年龄>18 y,其中男442例,女517例)进行血浆肌酐的测定,并按性别和年龄组分别比较.结果 血浆肌酐结果呈对数正态分布,成年人肌酐值男女间差异有统计学意义(P<0.01),成年健康男性年龄组肌酐值差异无显著性(P>0.05),其95%可信限的生物参考区间为57.3~111.3 μmol/L;女性61 y以上的年龄组与其他成年女性年龄组之间肌酐值差异有显著性(P<0.05),年龄18~60 y健康女性95%可信限的参考区间为43.8~83μ mol/L,年龄61 y以上健康女性95%可信限的参考区间为45~97 μmol/L.结论 生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义,应依据标本类型、检测方法和检测人群制定适合各实验室的生物参考区间.
作者:卢燕君;石汉振;林莲英;王美兰;冯妙芙;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期
目的 探讨以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差和实际标准差在生化室内质控的应用价值.方法 以该院检验科生化室2005年8月份的正常值质控物数据为研究材料,用2~7月份累计的实际标准差和以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差的质控结果进行比较.结果 以实际标准差比以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差的质控结果失控项目和失控数据明显增多(P<0.05).结论 以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差范围太宽,造成一些真失控不能检出.建议临床生化检验以累计的实际标准差进行室内质控.
作者:林莲英;李强;王美兰;庞雪云;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期
目的 以变性高效液相色谱(DHPLC)技术分析检测线粒体肌病患者线粒体基因突变,以明确诊断.方法 收集4例临床诊断为线粒体肌病的患者,以50例健康体检者作为对照,提取患者肌肉组织及对照组外周血细胞DNA,用聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR)扩增线粒体22个tRNA基因,利用变性高效液相色谱分析技术(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)对PCR产物进行突变筛选,出现异常峰型的tRNA基因进行核苷酸序列测定,明确突变位点.结果 4例线粒体肌病患者均检测出线粒体基因突变,突变分别为:例1tRNA-Val基因发生A1625G纯合突变,例2 tRNA-Val基因发生A1625G/A杂合突变,例3 RNA-Arg基因发生A10411C/A杂合突变,例4 RNA-Trp基因发生T5553C纯合突变.结论 DHPLC能有效地用于线粒体基因突变的检测,该方法简便,结果稳定,可作为大样本筛查突变位点的一种便捷可靠手段.
作者:张炳峰;牛琦;陈晓婷 刊期: 2006年第04期
目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物和HBV-DNA的相关性及临床意义.方法 ①HBV血清标志物检测采用ELISA法;②HBV-DNA检测采用PCR法;③前S1抗原检测采用ELISA法.结果 1 369例HBsAg阳性者中,前S1抗原阳性者1 061例,阳性率为77.5%;HBeAg阳性者578例中,前S1抗原阳性者530例,阳性率为91.7%.另HBsAg阳性110例并HBeAg阳性者29例,其前S1抗原阳性27例,阳性率为93.1%,HBV-DNA阳性24例,阳性率为82.8%.结论 前S1抗原与HBeAg和HBV-DNA高度相关,提示前S1抗原能够较好地反映病毒复制状况,有可能作为体内病毒复制存在的实验指标.
作者:郑彦;李芳芹 刊期: 2006年第04期
在临床上,输血是常见的一种治疗手段,但也可引起一系列不良反应.而大量输血更可引起诸如凝血功能下降、酸碱代谢紊乱等严重的副反应.该文就近年来有关大量输血的相关问题和处理方案作一综述.
作者:戴鹏;张献清 刊期: 2006年第04期
目的 了解嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)及有关细胞因子在哮喘患者发作期和缓解期的浓度变化,以探讨其与哮喘发病的作用.方法 观察哮喘发作期患者55名,缓解期患者70名,测定血清中ECP,白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子a(TNFa)浓度,并与40名健康者比较.结果 哮喘发作期和缓解期患者血清中3项指标均明显升高,而缓解期患者的ECP浓度与健康组无明显差异,其它2项仍升高.结论 哮喘患者的发病与ECP,IL-4,TNFa有明显相关,ECP可作为急性发作、疗效判定及预后指标,而IL-4和TNFα可能与复发有关.
作者:靳宝英 刊期: 2006年第04期