学术投稿

细菌微量快速生化鉴定方法学研究

赵院利;任健康;闫福堂

关键词:微量, 快速, 细菌生化反应, 方法研究
摘要:目的 建立细菌微量快速生化鉴定系统,用于临床实验室细菌学的快速诊断.方法 应用所研制的27种微量快速生化反应试剂与传统试管方法检测208株临床分离菌及8种质控菌株生化反应符合率,依据杭州24 h的JYZ-15E及JYZ-11E肠杆菌生化编码鉴定管的项目要求组合了该法的肠杆菌15种(RE15n)及肠杆菌11种(RE11n)生化鉴定试验条,用208株临床分离菌及8种质控菌菌株进行鉴定试验.结果 27种细菌微量快速生化反应试剂与传统试管法生化反应总符合率为93.5%~100%.对208株临床分离菌及8株质控菌的菌种鉴定,其完全符合率15种(RE15n)为99.9%,11种(RE11n)为100%.8种质控菌株鉴定完全正确.结论 用细菌微量快速生化反应系统鉴定细菌,具有简单、快速的特点,无需特殊设备,成本低廉,所得结果准确、可靠,能够满足临床需要.
现代检验医学杂志相关文献
  • Beckman-coulter SYNCHRON LX-20全自动生化分析仪七种常见故障原因分析及处理

    Beckman-coulter SYNCHRON LX-20全自动生化分析仪是由美国贝克曼库尔特公司生产的新型的生化检验仪器,该仪器使用界面、操作流程简单,测量结果准确、稳定、快速、精密度高,测试项目包括急诊生化、常规生化、特殊生化及药物检测等,是一种较理想的生化仪器.该仪器模块化的设计思路在应用和维护方面极大的方便了我们日常的工作.笔者现将该仪器使用中七种常见故障原因分析及其处理方法总结如下,供同行们参考.

    作者:涂学亮;薛燕平;李玲 刊期: 2006年第04期

  • 雅培AEROSET型全自动生化分析仪故障排除

    美国雅培AEROSET型全自动生化分析仪是日本东芝生产的仪器,在20世纪90年代末进入中国地区,该仪器具有检测速度快(高达2000测试/小时),反应杯自动清洗,不需分离标本血清,自动加样,加样针液面自动探测系统及荧光屏可触摸,操作方便,测定准确可靠、重复性好、低故障率等优点,得到了用户的好评.我院自2000年购入该仪器,经过近五年的使用,现将其工作中常见故障及排除方法介绍如下:

    作者:史清海;路西春;伏建峰 刊期: 2006年第04期

  • LC-10AD高效液相色谱仪保养与常见故障排除

    色谱法已成为世界许多科学领域中普及的分离分析手段,色谱仪也呈多样化、高精化、自动化、联用技术化等方向发展.高效液相色谱仪具有柱效高、分析速度快、流动相和被测组分的体积流量小等特点,广泛应用于临床工作.日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪主要包括LC-10AD输液泵、TOC-10A柱箱、检测器、C-R6A积分仪几部分,其中检测器分SPD-10A紫外检测器、FLD-6A荧光检测器及L-ECD-6A电化学检测器,现将我们在使用过程中的保养体会及常见故障排除方法介绍如下,以供同行参考.

    作者:张润香 刊期: 2006年第04期

  • 肺炎衣原体抗体酶免疫诊断试剂盒的研制及应用

    目的 建立酶免(同接)法检测人血清中肺炎衣原体抗体.方法 用HEP-2细胞培养肺炎衣原体AR-39株,获得肺炎衣原体抗原后,利用该抗原与人血清中特异性抗体发生反应及辣根过氧化物酶标记的抗抗体催化TMB显色来指示人血清中抗肺炎衣原体抗体的存在.结果 抗原稀释度1 μg/ml,血清稀释度为1∶50,目测效果较好.门诊随机血清阳性检出率高达8.78%,此法特异性94.70%,灵敏度90.50%,试剂盒批内差CV=8.87%,批间差CV=6.92%.结论 该方法简便快捷,特异性、灵敏度、准确度较好,可以在医院大力推广.

    作者:薛晓英;何素华;陈锡枚;刘士德 刊期: 2006年第04期

  • 引起LX-20生化分析仪总蛋白测定结果偏低的原因探讨

    1结果偏低现象 本科室2004去年8月同时使用二台LX-20生化分析仪以来,平时均按照日常的保养程序执行操作,质控及测定结果均较为满意.但近段时间以来其中一台生化仪经常出现总蛋白测定结果偏低的现象,具体情况是这样的:质控标本中总蛋白首次测定结果常出现在-2s附近,但重新测定后结果升至靶值附近,前后二次数值相差较大.若重做几次总蛋白测定后,发现重复性很好,且均在靶值附近,结果又很理想.按照日常思维,认为第一次总蛋白测定结果可能系偶然误差引起,因此并不太在意.但连续几天均有此现象,而且病人标本也有此现象发生,而又不是每个标本均如此.总体现象是:单做肝功的标本总蛋白第一次结果与复查结果均差别不大,结果在靶值附近,且均在士1s范围内,但做生化全套的病人就有第一次结果与复查结果差别很大的现象出现.

    作者:陈学民;黄清流;吴一波;林鸿钊 刊期: 2006年第04期

  • 大量输血的相关问题及处理方法

    在临床上,输血是常见的一种治疗手段,但也可引起一系列不良反应.而大量输血更可引起诸如凝血功能下降、酸碱代谢紊乱等严重的副反应.该文就近年来有关大量输血的相关问题和处理方案作一综述.

    作者:戴鹏;张献清 刊期: 2006年第04期

  • 丙基硫氧嘧啶导致抗中性粒细胞胞浆抗体阳性的小血管炎相关分析

    目的 研究丙基硫氧嘧啶(PTU)引起的抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性小血管炎的临床表现,提高临床对该疾病的认识.方法 对2例PTU引起的ANCA阳性的小血管炎患者进行临床分析.采用ELISA法检测患者血清的靶抗原及抗体滴度.结果 2例病人均为女性,平均年龄28 y,服PTU时间为29与36 mo.2例均有肾外表现,且为P-ANCA阳性,患者血清均识别MPO和PR3.而服PTU无小血管炎临床表现的甲状腺功能亢进(甲亢)病人的10份血清仅有1例ANCA阳性.2例患者均停用PTU,1例应用激素,1例无特殊处理,2例小血管炎的临床症状均得以缓解,停药和治疗后各种抗体滴度均有所下降.结论 PTU可引起ANCA阳性小血管炎,及时停用PTU或进行相应治疗,预后较好.

    作者:崔丽艳;张捷 刊期: 2006年第04期

  • 采用统计学简捷法做t检验的报告

    目的 通过实际演算了解两个大样本均数比较的显著性测验的简易法.方法 对100例健康成人静脉血Hb资料采用简捷法t检验.结果 健康成人60例,男性Hbx±s=15.5±1.240 2 g/dl;40例女性Hbx±s=14.09±1.221 5 g/dl.t=5.622,P<0.001,男女之间Hb平均值有非常显著性差异.结论 t检验简捷法优越,计算速度快、准确、可靠,不复杂.可以普及采用,特别适用于基层.

    作者:吴金锁;方根;樊利和 刊期: 2006年第04期

  • CD 94/NKG2家族及其配体研究进展

    NK细胞是重要的天然免疫细胞,具有广泛的生物学功能,其特征是表型为CD3-,CD16+(FcγR Ⅲ A),CD56+(N-CAM),不需要预先刺激即可直接杀伤肿瘤和被病毒感染的靶细胞[1],也可分泌细胞因子调节其他免疫细胞的功能,在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中起重要作用.NK细胞表面的受体目前已发现数十种,按功能可分为活化性受体和抑制性受体两大类.以NK细胞受体基因定位可分为KIR家族、ILT/LIR家族、CD94/NKG2家族、NCR家族、Ly49家族和NKP-P1家族等[2].

    作者:沈亚娟;李春悦;宋晓斐;张建 刊期: 2006年第04期

  • 血液质控物在临床实验室中应用探讨

    目的 观察不同类型血液质控物在不同状态下的使用情况,做到合理应用.方法 分别选择单一控制品、全血质控物及新鲜全血分别在山东省临床血液学检验室间质量评价、同一实验室内不同仪器上测定并进行统计观察.结果 单一控制品用于全省临床血液学检验室间质评时给定值与未分组统计值差异较小;将全血控制品按仪器分组在全省临床血液学检验的室间质评中取得较好的结果,全血质控物应在开瓶一周内使用;应用定值的新鲜全血可以减小不同仪器间的差异.结论 全血质控物应用于临床血液学检验室间质评应根据仪器分组,而单一控质品不需要分组,定值的新鲜血可以用于不同仪器间的比对.

    作者:崔相法;卢志明;武焕玲 刊期: 2006年第04期

  • 动态分析铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性

    目的 探讨铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性.方法 用法国生物梅里埃全自动微生物鉴定/药敏VITEK32系统对PA的实验资料进行分析,统计分析其耐药性.结果 多重耐药性PA分离率逐年上升,其耐药率也逐年上升;从2004年1月开始出现泛耐药的PA,至2005年12月已出现泛耐药PA43株,其MIC值均有明显增加.结论 PA多重耐药十分严重.

    作者:庞雪云;田碧文;蓝锴;孙蕾;黄宪章;李强 刊期: 2006年第04期

  • 实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-αmRNA基因表达

    目的 建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达.方法 用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-α mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较.结果 实时荧光定量RT-PCR检测肿瘤患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常人,且半定量RT-PCR结果显示TNF-α出现类似的变化趋势.结论 所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测TNF-α mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确.

    作者:陈晓;王宇学 刊期: 2006年第04期

  • 麻疹的实验室诊断和鉴别诊断

    目的 了解单份血清标本检测麻疹-IgM抗体在麻疹的实验室诊断中的作用和意义.方法 研究对象为该院2005年1~6月间门诊诊断的疑似麻疹病例共705例,男390例,女315例,其中<8 mo 298例,8 mo~3 y 210例,3~6 y 115例,>6 y 82例.采用酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中的抗麻疹病毒特异性IgM抗体.对抗麻疹病毒特异性IgM抗体阴性的标本,同时检测抗风疹病毒、人类疱疹病毒6型、柯萨奇病毒和埃克病毒特异性IgM抗体.结果 705例疑似麻疹病人中,抗麻疹病毒IgM抗体阳性547例(阳性率77.6%,547/705),其中<8mo248例(45.4%,248/547),8 mo~3 y143例(26.1%,143/547),3~6 y 93例(17.0%,93/547),>6 y 63例(11.5%,63/547);麻疹-IgM阴性共158例,占总病例数的22.4%(158/705).该158例麻疹可疑病例中,45.6%(72/158)的病例通过检测风疹病毒、柯萨奇病毒、艾柯病毒、人类疱疹病毒6型-IgM而确诊.结论 6 y以下儿童为麻疹的高发人群,其中8 mo以下婴儿患病率高,提示母传抗体的保护作用不足.单份血清在麻疹实验室确诊中存在缺陷,对于麻疹IgM阴性的临床麻疹疑似病例,不能除外麻疹,应查恢复期血清以明确诊断;另外临床麻疹疑似病例需要与风疹、肠道病毒感染和人类疱疹病毒6型等其它病毒感染所致的发热出疹性疾病相鉴别.

    作者:刘亚谊;闫静;王燕;张辉;买颖;刘春艳;谢正德 刊期: 2006年第04期

  • F-820血细胞分析仪废液收集瓶的改制

    日本希森美康株式会社生产的F-820血细胞分析仪因该仪器具有的技术优势--如15项检测参数和3个细胞分布直方图,高稀释倍率,碳精浮球绝对定量加时间的双重定量技术,自动浮动界标功能;且为我国卫生部临床检验中心进行室间质评定标仪器;再加之仪器的价格性能比,优质的售后服务,使其在国内占较大的市场分额.我科于1999年购置该仪器,因该仪器所带的废液收集瓶容量小,加之我们工作量较大;每天要开启废液瓶1~2次,给工作带来较多不便,因经常开启,瓶口磨损,密封不紧,在2001年底仪器不能进行标本检测处理;购置新废液瓶需花费一定的资金且要等6~8 d时间,为了不影响日常标本的检测工作,我们与医院设备科维修室同志一道,用20 L龙口瓶代替仪器所带废液瓶,恢复仪器工作可以达到每周倒一次废液的效果,经过3年多的实际应用,现报道如下,供同道参考.

    作者:张薇;杨兴江;李竣玲;曾玉琼;许强 刊期: 2006年第04期

  • 临床化学方法验证与表格化管理

    目的 建立一套简便实用的临床化学方法验证操作流程和表格化管理系统.方法 采用可溯源多水平线性校准物测定的方法进行校准验证;采用连续5 d每天测定4次高低两水平血清的方法检测精密度;采用连续5 d依次测定高值和三个低值血清的方法检测样品探针携带污染;采用连续5 d每天测定8例病人血清的方法进行两方法之间的比对;选择50例健康人验证项目的参考范围.结果 以血清清蛋白(ALB)为例,校准验证各测定点与靶值的偏差均在±5%以内,r=1.000;定量检测下限为0.4 g/L;高、低水平批内变异分别为0.74%和0.77%,总变异分别为0.90%和0.85%;样本携带污染为-0.1%;两台仪器比对,r=0.995,斜率为1.027,截距0.130,平均百分偏差为-5.10%,对方法参数进行调整后,r=0.997,斜率1.015,截距0.043,平均百分偏差为2.41%.50例健康人ALB测定的参考范围为35.0~54.6g/L.结论 该操作程序可以基本上满足临床化学实验室方法验证的需求,通过表格化管理可以规范实验流程,方便结果分析,有利于提高实验室管理的工作水平.

    作者:邱玲;程歆琦;鄢盛恺;沈瑛;刘茜;刘荔;刘福成;葛增梅 刊期: 2006年第04期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞培养上清液Th1/Th2细胞因子检测与临床意义

    目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液Th1/Th2类细胞因子(IFN-γ/IL-4)表达,探明Th1/Th2类细胞因子在慢性乙型肝炎发病机制中的作用.方法 分离64例慢性乙型肝炎患者及20例正常人群外周血单个核细胞(PBMC),分别于PHA和HBcAg/HBeAg体外培养48 h,双抗体夹心ELISA法检测PBMC培养上清液IFN-γ/IL-4水平.结果 在PHA诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平低于正常对照组,IL-4水平高于正常对照组,谷丙转氨酶(ALT)异常组和ALT正常组相比较,IFN-γ水平异常组大于正常组.HBcAg诱导下,HBV慢性感染者PBMC产生IFN-γ水平高于正常人群,IL-4水平两组间无差异,HBeAg诱导下,IFN-γ水平无显著性差异,而IL-4水平明显高于正常对照组.结论 Th1/Th2类细胞平衡失调与HBV感染慢性化有关;Th1类细胞因子优势表达引起肝脏炎症反应,HBcAg倾向诱导Th1类细胞因子表达,HBeAg倾向诱导Th2类细胞因子表达.

    作者:张宝华 刊期: 2006年第04期

  • 2型糖尿病患者血Fbg、HCRP及脂类水平的测定与意义

    糖尿病是由多种原因引起的代谢紊乱综合征.90%以上的糖尿病患者有并发动脉粥样硬化的危险,从而引起心脑血管病变,是导致糖尿病患者致死、致残的主要因素.有报道认为2型糖尿病(non-insulin dependent diabetes mellitus,NIDDM)是一种免疫性疾病,炎症反应是动脉粥样硬化的应答反应,炎症在糖尿病的发病机制起媒介作用[1].本试验通过对NIDDM患者血Fbg、HCRP及脂类进行检测,旨在探讨这些指标在NIDDM并发动脉粥样硬化过程中的临床价值.

    作者:张小平;崔曦沁 刊期: 2006年第04期

  • KX-21血细胞分析仪空白错误的故障排除

    KX-21三分类血细胞分析仪具有简便、快速、准确性高等特点,我科于2000年使用以来,工作性能良好,各项指标正常.由于时间的延长,出现故障在所难免,现将近期发生的空白错误故障的排除作一介绍,供同行们商榷.

    作者:高传祥 刊期: 2006年第04期

  • 流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群培养方案的研究

    目的 改进流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的刺激培养方案.方法 外周全血经RPMI1640培养液和终浓度为25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培养2 h后,用流式细胞仪分别检测CD4、CD69阳性细胞及CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.同时检测培养前CD4阳性细胞及培养4 h后CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.结果 淋巴细胞门中CD4+细胞与CD4-细胞能明显区分,培养前与培养2 h后CD4+细胞比例差异无显著性(P>0.05);T淋巴细胞中90%以上表达CD69;刺激培养2 h和4 h后CD3+细胞表达IFN-γ和IL-4的比例差异无显著性(P>0.05).结论 该实验确定的培养方案能满足流式细胞术CD4、IFN-γ、IL-4三色法检测Th细胞亚群的培养要求.

    作者:叶卫东;张循善;翟志敏 刊期: 2006年第04期

  • 红细胞分析质控分析软件的设计与系统维护

    1现行红细胞分析质控分析软件设计的基本理念和存在缺陷 现行质控分析软件是按照某检测系统对某质控物的某一测定项目进行多次测定,其测定值的误差大小呈正态分布的理论而设计的.质控物的各个测定值质控之间以及测定值质控与其换算值质控之间各自独立成章,互不影响.软件系统只对某一单个指标做表面的在控与否统计评价分析,并未进行有关指标之间质控关系的进一步探讨,这样的质控软件系统运行一段时间后,有可能造成红细胞测定值与红细胞换算值之间质控关系不协调、不明确的局面出现.

    作者:袁应选;王飙 刊期: 2006年第04期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院