学术投稿

流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群培养方案的研究

叶卫东;张循善;翟志敏

关键词:培养方案, 流式细胞仪, 三色法, T辅助细胞亚群
摘要:目的 改进流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的刺激培养方案.方法 外周全血经RPMI1640培养液和终浓度为25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培养2 h后,用流式细胞仪分别检测CD4、CD69阳性细胞及CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.同时检测培养前CD4阳性细胞及培养4 h后CD3阳性细胞表达IFN-γ和IL-4的比例.结果 淋巴细胞门中CD4+细胞与CD4-细胞能明显区分,培养前与培养2 h后CD4+细胞比例差异无显著性(P>0.05);T淋巴细胞中90%以上表达CD69;刺激培养2 h和4 h后CD3+细胞表达IFN-γ和IL-4的比例差异无显著性(P>0.05).结论 该实验确定的培养方案能满足流式细胞术CD4、IFN-γ、IL-4三色法检测Th细胞亚群的培养要求.
现代检验医学杂志相关文献
  • Beckman LX20全自动生化分析仪急诊部分日常保养及常见故障排除

    美国Beckman Coulter公司生产的LX-20全自动生化分析仪,自动化程度高,结果准确稳定可靠,操作简便.我院自2001年购进使用至今,对于日常工作中的仪器保养维护和常见的故障排除基本都能自己解决,也积累了一定的经验,现介绍如下:

    作者:卢德国;朱爱菊;杨爱;诸葛宝忠 刊期: 2006年第04期

  • 艾滋病检测中的实验室管理

    艾滋病于1981年发现以来,广泛流行于世界各地.我国于1985年发现首例经输血制品传染的病例,从流行率上看我国已经存在HIV感染发生和流行的条件.艾滋病病毒的检测有一定的严格要求,需要有独立的实验室和专用设备和器械,污染区、清洁区分开.实验人员必须接受专门培养并经考核获合格证书,且要熟悉生物安全操作知识和消毒技术,防止职业感染.搞好质量控制,健全各种登记,阳性标本即时送确认实验室确认.

    作者:王清泉;张莹杰 刊期: 2006年第04期

  • 细菌微量快速生化鉴定方法学研究

    目的 建立细菌微量快速生化鉴定系统,用于临床实验室细菌学的快速诊断.方法 应用所研制的27种微量快速生化反应试剂与传统试管方法检测208株临床分离菌及8种质控菌株生化反应符合率,依据杭州24 h的JYZ-15E及JYZ-11E肠杆菌生化编码鉴定管的项目要求组合了该法的肠杆菌15种(RE15n)及肠杆菌11种(RE11n)生化鉴定试验条,用208株临床分离菌及8种质控菌菌株进行鉴定试验.结果 27种细菌微量快速生化反应试剂与传统试管法生化反应总符合率为93.5%~100%.对208株临床分离菌及8株质控菌的菌种鉴定,其完全符合率15种(RE15n)为99.9%,11种(RE11n)为100%.8种质控菌株鉴定完全正确.结论 用细菌微量快速生化反应系统鉴定细菌,具有简单、快速的特点,无需特殊设备,成本低廉,所得结果准确、可靠,能够满足临床需要.

    作者:赵院利;任健康;闫福堂 刊期: 2006年第04期

  • 乙型肝炎病毒前S1抗原的检测及临床意义探讨

    目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物和HBV-DNA的相关性及临床意义.方法 ①HBV血清标志物检测采用ELISA法;②HBV-DNA检测采用PCR法;③前S1抗原检测采用ELISA法.结果 1 369例HBsAg阳性者中,前S1抗原阳性者1 061例,阳性率为77.5%;HBeAg阳性者578例中,前S1抗原阳性者530例,阳性率为91.7%.另HBsAg阳性110例并HBeAg阳性者29例,其前S1抗原阳性27例,阳性率为93.1%,HBV-DNA阳性24例,阳性率为82.8%.结论 前S1抗原与HBeAg和HBV-DNA高度相关,提示前S1抗原能够较好地反映病毒复制状况,有可能作为体内病毒复制存在的实验指标.

    作者:郑彦;李芳芹 刊期: 2006年第04期

  • 大量输血的相关问题及处理方法

    在临床上,输血是常见的一种治疗手段,但也可引起一系列不良反应.而大量输血更可引起诸如凝血功能下降、酸碱代谢紊乱等严重的副反应.该文就近年来有关大量输血的相关问题和处理方案作一综述.

    作者:戴鹏;张献清 刊期: 2006年第04期

  • 两种方法设置标准差的室内质控结果分析

    目的 探讨以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差和实际标准差在生化室内质控的应用价值.方法 以该院检验科生化室2005年8月份的正常值质控物数据为研究材料,用2~7月份累计的实际标准差和以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差的质控结果进行比较.结果 以实际标准差比以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差的质控结果失控项目和失控数据明显增多(P<0.05).结论 以CLIA'88允许误差的三分之一推导出的标准差范围太宽,造成一些真失控不能检出.建议临床生化检验以累计的实际标准差进行室内质控.

    作者:林莲英;李强;王美兰;庞雪云;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期

  • 变性高效液相色谱技术在线粒体基因突变检测中的应用

    目的 以变性高效液相色谱(DHPLC)技术分析检测线粒体肌病患者线粒体基因突变,以明确诊断.方法 收集4例临床诊断为线粒体肌病的患者,以50例健康体检者作为对照,提取患者肌肉组织及对照组外周血细胞DNA,用聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR)扩增线粒体22个tRNA基因,利用变性高效液相色谱分析技术(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)对PCR产物进行突变筛选,出现异常峰型的tRNA基因进行核苷酸序列测定,明确突变位点.结果 4例线粒体肌病患者均检测出线粒体基因突变,突变分别为:例1tRNA-Val基因发生A1625G纯合突变,例2 tRNA-Val基因发生A1625G/A杂合突变,例3 RNA-Arg基因发生A10411C/A杂合突变,例4 RNA-Trp基因发生T5553C纯合突变.结论 DHPLC能有效地用于线粒体基因突变的检测,该方法简便,结果稳定,可作为大样本筛查突变位点的一种便捷可靠手段.

    作者:张炳峰;牛琦;陈晓婷 刊期: 2006年第04期

  • 西部地区小型血站采供血现状及对策

    金昌市地处甘肃河西走廊,辖区人口46.3万,63所医疗单位,其中三级医院1所,二级医院5所,一级医院3所,其他医疗机构54所,年输血量3 300 U左右.由于临床用血机构的无计划性和随意性,造成血站和医院在采供血层面上出现了差异性,常常出现血液偏型现象,为此将本站2000~2004年采供血情况统计分析如下:

    作者:王菊梅;赵肃民;王芳 刊期: 2006年第04期

  • 健康成年人血浆肌酐生物参考区间调查

    目的 通过测定广州市健康成年人群的肝素锂抗凝血浆肌酐值,建立该实验室血浆肌酐的生物参考区间.方法 采用碱性苦味酸速率法对959例健康成年人(年龄>18 y,其中男442例,女517例)进行血浆肌酐的测定,并按性别和年龄组分别比较.结果 血浆肌酐结果呈对数正态分布,成年人肌酐值男女间差异有统计学意义(P<0.01),成年健康男性年龄组肌酐值差异无显著性(P>0.05),其95%可信限的生物参考区间为57.3~111.3 μmol/L;女性61 y以上的年龄组与其他成年女性年龄组之间肌酐值差异有显著性(P<0.05),年龄18~60 y健康女性95%可信限的参考区间为43.8~83μ mol/L,年龄61 y以上健康女性95%可信限的参考区间为45~97 μmol/L.结论 生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义,应依据标本类型、检测方法和检测人群制定适合各实验室的生物参考区间.

    作者:卢燕君;石汉振;林莲英;王美兰;冯妙芙;黄宪章;庄俊华 刊期: 2006年第04期

  • 丙基硫氧嘧啶导致抗中性粒细胞胞浆抗体阳性的小血管炎相关分析

    目的 研究丙基硫氧嘧啶(PTU)引起的抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性小血管炎的临床表现,提高临床对该疾病的认识.方法 对2例PTU引起的ANCA阳性的小血管炎患者进行临床分析.采用ELISA法检测患者血清的靶抗原及抗体滴度.结果 2例病人均为女性,平均年龄28 y,服PTU时间为29与36 mo.2例均有肾外表现,且为P-ANCA阳性,患者血清均识别MPO和PR3.而服PTU无小血管炎临床表现的甲状腺功能亢进(甲亢)病人的10份血清仅有1例ANCA阳性.2例患者均停用PTU,1例应用激素,1例无特殊处理,2例小血管炎的临床症状均得以缓解,停药和治疗后各种抗体滴度均有所下降.结论 PTU可引起ANCA阳性小血管炎,及时停用PTU或进行相应治疗,预后较好.

    作者:崔丽艳;张捷 刊期: 2006年第04期

  • 采用统计学简捷法做t检验的报告

    目的 通过实际演算了解两个大样本均数比较的显著性测验的简易法.方法 对100例健康成人静脉血Hb资料采用简捷法t检验.结果 健康成人60例,男性Hbx±s=15.5±1.240 2 g/dl;40例女性Hbx±s=14.09±1.221 5 g/dl.t=5.622,P<0.001,男女之间Hb平均值有非常显著性差异.结论 t检验简捷法优越,计算速度快、准确、可靠,不复杂.可以普及采用,特别适用于基层.

    作者:吴金锁;方根;樊利和 刊期: 2006年第04期

  • 血液质控物在临床实验室中应用探讨

    目的 观察不同类型血液质控物在不同状态下的使用情况,做到合理应用.方法 分别选择单一控制品、全血质控物及新鲜全血分别在山东省临床血液学检验室间质量评价、同一实验室内不同仪器上测定并进行统计观察.结果 单一控制品用于全省临床血液学检验室间质评时给定值与未分组统计值差异较小;将全血控制品按仪器分组在全省临床血液学检验的室间质评中取得较好的结果,全血质控物应在开瓶一周内使用;应用定值的新鲜全血可以减小不同仪器间的差异.结论 全血质控物应用于临床血液学检验室间质评应根据仪器分组,而单一控质品不需要分组,定值的新鲜血可以用于不同仪器间的比对.

    作者:崔相法;卢志明;武焕玲 刊期: 2006年第04期

  • F-820血细胞分析仪废液收集瓶的改制

    日本希森美康株式会社生产的F-820血细胞分析仪因该仪器具有的技术优势--如15项检测参数和3个细胞分布直方图,高稀释倍率,碳精浮球绝对定量加时间的双重定量技术,自动浮动界标功能;且为我国卫生部临床检验中心进行室间质评定标仪器;再加之仪器的价格性能比,优质的售后服务,使其在国内占较大的市场分额.我科于1999年购置该仪器,因该仪器所带的废液收集瓶容量小,加之我们工作量较大;每天要开启废液瓶1~2次,给工作带来较多不便,因经常开启,瓶口磨损,密封不紧,在2001年底仪器不能进行标本检测处理;购置新废液瓶需花费一定的资金且要等6~8 d时间,为了不影响日常标本的检测工作,我们与医院设备科维修室同志一道,用20 L龙口瓶代替仪器所带废液瓶,恢复仪器工作可以达到每周倒一次废液的效果,经过3年多的实际应用,现报道如下,供同道参考.

    作者:张薇;杨兴江;李竣玲;曾玉琼;许强 刊期: 2006年第04期

  • KX-21血细胞分析仪空白错误的故障排除

    KX-21三分类血细胞分析仪具有简便、快速、准确性高等特点,我科于2000年使用以来,工作性能良好,各项指标正常.由于时间的延长,出现故障在所难免,现将近期发生的空白错误故障的排除作一介绍,供同行们商榷.

    作者:高传祥 刊期: 2006年第04期

  • ELISA检测乙肝病毒核心抗原的方法建立及应用

    目的 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),建立乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的定性检测方法,用于临床标本HBcAg的检测.方法 用ELSIA法检测临床血样标本乙肝表面抗原(HBsAg)阳性208例,阴性健康对照30例,与HBV DNA结果进行比较.结果 208例HBsAg阳性样本,HBcAg与HBV DNA共同阳性率为58.7%,HBcAg阳性率为74.0%,HBV DNA阳性率为64.4%,二者结果显著相关.结论 ELISA法可用于临床标本HBcAg的检测.

    作者:王厚照;田丰丰;陆金霞;马莉;周友泉 刊期: 2006年第04期

  • 临床化学方法验证与表格化管理

    目的 建立一套简便实用的临床化学方法验证操作流程和表格化管理系统.方法 采用可溯源多水平线性校准物测定的方法进行校准验证;采用连续5 d每天测定4次高低两水平血清的方法检测精密度;采用连续5 d依次测定高值和三个低值血清的方法检测样品探针携带污染;采用连续5 d每天测定8例病人血清的方法进行两方法之间的比对;选择50例健康人验证项目的参考范围.结果 以血清清蛋白(ALB)为例,校准验证各测定点与靶值的偏差均在±5%以内,r=1.000;定量检测下限为0.4 g/L;高、低水平批内变异分别为0.74%和0.77%,总变异分别为0.90%和0.85%;样本携带污染为-0.1%;两台仪器比对,r=0.995,斜率为1.027,截距0.130,平均百分偏差为-5.10%,对方法参数进行调整后,r=0.997,斜率1.015,截距0.043,平均百分偏差为2.41%.50例健康人ALB测定的参考范围为35.0~54.6g/L.结论 该操作程序可以基本上满足临床化学实验室方法验证的需求,通过表格化管理可以规范实验流程,方便结果分析,有利于提高实验室管理的工作水平.

    作者:邱玲;程歆琦;鄢盛恺;沈瑛;刘茜;刘荔;刘福成;葛增梅 刊期: 2006年第04期

  • 观测外周血血小板、白细胞数量及平均血小板体积对脑梗死的意义

    目地研究外周血白细胞、血小板数量及平均血小板体积与脑梗死的关系.方法 用全自动血细胞分析仪测定100例脑梗死患者急性期和恢复期白细胞、血小板数量及平均血小板体积.对照组为50例健康查体者.结果 脑梗死急性期白细胞计数显著升高;血小板计数显著降低;平均血小板体积显著性增大,脑梗死恢复期则均无统计学差别.结论 观察白细胞数量、血小板数量及平均血小板体积对脑梗死的预防、治疗有一定的临床意义.

    作者:晋兴;曹义战;安良 刊期: 2006年第04期

  • 不同生化检测系统测定同种项目的结果比对与临床可接受性评价

    目的 通过对同一检验科不同生化检测系统进行方法比对和偏差评估,探讨不同检测系统间对同种检测项目的测定结果是否具有可比性,以及结果是否能被临床所接受.方法 参考NCCLS的EP9-A文件,以雅培ARCHITECTci8200生化分析仪、雅培原装试剂、c.f.a.s校准品和Roche质控品组成的检测系统为比较方法,其它不同检测系统为实验方法,检测病人新鲜血清中GLU、AST、BUN、Cr、CK、CK-MB,用配对t检验和回归统计法分析实验方法(Y)和比较方法(X)测定结果均值处的相对偏差或医学决定水平处的系统误差,以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的临床可接受性.结果 除检测系统2的Cr结果,检测系统1、2的GLU结果与比较方法的系统误差或均值处的相对偏差不能被接受外,其余项目测定结果的偏差临床均可以接受.结论 当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性.

    作者:张东玲;朱广博;高越 刊期: 2006年第04期

  • 引起LX-20生化分析仪总蛋白测定结果偏低的原因探讨

    1结果偏低现象 本科室2004去年8月同时使用二台LX-20生化分析仪以来,平时均按照日常的保养程序执行操作,质控及测定结果均较为满意.但近段时间以来其中一台生化仪经常出现总蛋白测定结果偏低的现象,具体情况是这样的:质控标本中总蛋白首次测定结果常出现在-2s附近,但重新测定后结果升至靶值附近,前后二次数值相差较大.若重做几次总蛋白测定后,发现重复性很好,且均在靶值附近,结果又很理想.按照日常思维,认为第一次总蛋白测定结果可能系偶然误差引起,因此并不太在意.但连续几天均有此现象,而且病人标本也有此现象发生,而又不是每个标本均如此.总体现象是:单做肝功的标本总蛋白第一次结果与复查结果均差别不大,结果在靶值附近,且均在士1s范围内,但做生化全套的病人就有第一次结果与复查结果差别很大的现象出现.

    作者:陈学民;黄清流;吴一波;林鸿钊 刊期: 2006年第04期

  • 康仁-560生化分析仪故障一例处理

    康仁-560生化分析仪具有价格低廉,检测结果准确,重复性好,操作方便,故障率低等优点,我们使用了六年后仪器出现故障一例并于以排除,现介绍如下,供同行参考.

    作者:胡荣武 刊期: 2006年第04期

现代检验医学杂志

现代检验医学杂志

主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院