张弘;仲建新;魏群;邓艳;史锦云
目的建立实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值.方法在HBV S基因高保守区设计了特异性的引物和探针,利用TaqMan探针的基本原理,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中HBV-DNA的准确含量.结果 220例临床样本的检测结果显示,乙肝大三阳患者HBV-DNA阳性率(98.8%)显著高于其它各组(P<0.01),病毒平均含量为7.52±0.43 copies/ml;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P<0.01),但平均病毒含量与大三阳组无差异(P>0.05),高达7.41±0.26 copies/ml;单独HBsAg阳性和单独HBsAb阳性组HBV-DNA阳性率分别为56.4%,19.2%,平均病毒含量分别为5.35±0.32 copies/ml,4.02±0.31 copies/ml;80例献血员血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其它各组.结论 RFQ-PCR检测HBV-DNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后意义重大.
作者:王旭东;张冬雷;李立人;施健;崔之础;王惠民 刊期: 2006年第03期
目的探讨白细胞精子症不育精液中白细胞(WBC)密度、一氧化氮(NO)和尿酸(UA)之间的关系.方法依据WHO诊断标准,选择白细胞精子症不育者40例,非白细胞精子症不育者35例,生育者30例,采用过氧化物酶染色法进行精液WBC密度计数;采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO-3);UA含量测定采用尿酸酶-过氧化物酶偶联法.结果白细胞精子症组精液NO 106.95±4.13 μmol/L,WBC(1.985±0.696)×109/L显著增高,而UA含量166.9±68.1 μmol/L降低;生育组NO 41.31±3.67 μmol/L,WBC(0.038±0.024)×109/L和UA含量398.6±52.3 μmol/L(P<0.01).UA与NO及WBC均呈显著性负相关(r=-0.795,P<0.01;r=-0.857,P<0.01).结论白细胞精子症患者精液NO产生增多致UA含量下降,使精子中毒受损.提示临床在治疗时应加用抗氧化药物,可提高疗效.
作者:杨麦贵;杨阳;黄萍;张竹映;樊爱琳;郑善銮;韦晓明;郝晓柯 刊期: 2006年第03期
Alisei全自动酶免分析仪是由意大利SEAC公司生产,具有功能强,操作简便,检测速度快,先进的中文智能系统等优点,实现了ELISA酶免分析的自动化、标准化、网络化.在三年多的使用中我们总结了一些常见故障的处理方法及使用体会,希望能对使用同类仪器的用户有所帮助,以共同交流.
作者:李筱莉;肖振洲;徐锋 刊期: 2006年第03期
近年来的研究发现,溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)在缺血性脑血管病的发生中起着重要作用,它可以作为一个分子标志物,标示血小板的活化,预警血栓形成的危险性[1].我们对80例缺血性脑血管病患者和45例神经内科其他疾病患者,与50例健康无偿献血员进行了LPA的对比分析,发现LPA对于缺血性脑血管病的早期预报有着非常积极的作用.
作者:任更朴;刘淑会;张树仁;张德 刊期: 2006年第03期
R80A血液黏度仪是北京中勤世帝科学仪器公司开发研制的单孔血流变仪,它以良好的准确性和重复性外加独特的锥板式设计,在同类产品中一枝独秀而备受广大用户欢迎.我院于1996年购进一台单孔血液黏度仪R80A,使用至今出现的故障也陆续不断.下面针对该机器在我院的使用情况和近年来笔者的维修体会分析如下:
作者:杨寻柱;何勇 刊期: 2006年第03期
近年来,随着血液分析仪的普及,明显提高了血细胞分析检验的质量和效率,然而,这类仪器在鉴别血细胞的形态和结构等方面还不能等同于显微镜检查,目前仅可作为全血细胞分析的一种过筛手段.但是由于缺乏统一的镜检筛选标准,工作人员往往凭主观经验决定是否复查以致造成漏检、漏诊及误诊的现象屡有发生.而每例血细胞分析都经显微镜镜检又会给工作人员带来很大的工作量,因此制定合适的镜检筛选条件对保证血细胞分析结果的准确性和减少不必要的工作量具有重要意义,为此我们选取1 200例标本用规定的镜检筛选条件进行筛选并对全部标本用显微镜检查复核,以探讨镜检标本筛选的条件.
作者:尹杰;权志博;贾平选;陈永刚;肇玉博;张娇洁;苏彦娥 刊期: 2006年第03期
目的探讨匀相法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)值与Planella公式(P公式)、Prledewald公式(简称F公式)计算结果.方法收集1 862份标本,在日立7600-020全自动生化分析仪上直接测定;TC、TG、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),同时运用P公式与F公式计算每份标本对应LDL-C值,进行统计学处理.结果①TG≤4.52 mmol/L时P公式法、F公式法与均相法的相关性(r=0.909,r=0.841)好于TG>4.52 mmol/L时(r=0.807,r=0.787).②总胆固醇(TC)水平对LDL-C结果也有影响;TG≤4.52 mmol/L时,TC<6.21 mmol/L组相关性好于TC>6.21 mmol/L组;而当TG>4.52 mmol/L时,TC<6.21 mmol/L组差异大.结论在确保TC、TG、HDL-C结果准确可靠的情况下,可以用P公式法、F公式法计算LDL-C值作为参考.
作者:祝文彩;丛辉;王旭东;苏建友;王跃国;沈荣春;鞠少卿 刊期: 2006年第03期
目的探讨细胞角化蛋白7(CK7)mRNA对卵巢上皮癌的诊断价值.方法用RT-PCR法检测了39例卵巢上皮癌组织中CK7 mRNA的表达,同时检测了26例良性卵巢上皮性肿瘤及16例正常卵巢组织作对照.结果卵巢上皮癌组织中CK7 mRNA的阳性表达率为100%;良性卵巢上皮性肿瘤组织中CKmRNA的阳性率为34.62%;正常卵巢组织中无CK7mRNA的表达.结论 CK7是卵巢上皮癌特异的一个肿瘤标志物;CK7 mRNA的检测是卵巢上皮癌诊断的有效方法.
作者:张弘;仲建新;魏群;邓艳;史锦云 刊期: 2006年第03期
目的通过检测观察冠心病患者血浆中脑钠肽(BNP)水平的改变,并与其肌钙蛋白I(cTnI)水平和高敏感性C反应蛋白(hs CRP)水平变化相比较,初步探讨将BNP作为冠心病临床诊断和治疗的标志物的可靠性.方法 2004年3~11月,以分层随机抽样法获取西安地区健康人群血浆样本195份(男性132名,女性63名),西京医院住院患者血浆279份(包括129名冠心病、60名糖尿病、62名肺病疾患、28名单纯眼部疾患),利用微粒子酶免分析法和动态定时散射比浊法分别检测上述血浆BNP浓度、cTnI浓度及hs CRP浓度;将以上数据进行统计学分析,比较冠心病组与非冠心病组的差异显著性.结果统计学分析证实 :冠心病组与正常组在BNP水平、cTnI水平及hs CRP水平上均存在非常显著性差异(P<0.01),而其中又以BNP水平差异显著性大(P=0.001);糖尿病组、肺病组以及眼科阴性对照组的BNP浓度结果与正常组比较则显示无统计学意义(P>0.05).结论血浆BNP浓度在冠心病患者中显著升高,进一步显示了其在心脏疾患中潜在的临床价值.
作者:徐焰;彭道荣;陈灿磊;张小宁;余妍;孙怡群;郝晓柯 刊期: 2006年第03期
目的对SF-3000血液分析仪测定的嗜碱细胞增多的32例标本,同时进行人工显微镜分类,观察二者差异.方法用Sysmex SF-3000血液分析仪测定;并将仪器测得嗜碱细胞超过2%的32份标本各推2张血涂片,经瑞氏染色后,每片分类200个白细胞.结果 32例SF-3000测得结果嗜碱细胞超过2%的32份标本中,嗜碱细胞的测定范围3%~25%.镜下人工分类真阳性率为12.5%,假阳性率为87.5%.结论 Sysmex SF-3000血液分析仪将异型淋巴细胞误分辨为嗜碱细胞,建议除了对带星号提示的结果实施手工镜检外,对不带星号的嗜碱细胞增高的标本,也要应用手工显微镜复检,以提高检验的准确性.
作者:陈艳华;何萍 刊期: 2006年第03期
白细胞(leukocyte,white blood cell)和白细胞流变学(leukocyte Yheology)是血液流变学研究领域里一项重要内容.过去认为白细胞数量少且结构复杂,在研究方法上也存在许多困难,国内外学者对此重视不够,故资料较少.现在随着血流变学由宏观水平向微观水平研究的延伸和临床医学研究的进展,白细胞流变学及特性对疾病的影响及意义在预防和治疗方面十分重要、有不可低估的作用和价值,白细胞理化、形态及流变特性逐渐被广大学者所重视并在多层次、多方面进行了研究.现将白细胞对以下几种疾病的影响作一综述.
作者:牛晓静;贾冬青;陈艳秋;刘素华 刊期: 2006年第03期
我们采用酶联免疫吸附法(SLISA)检测了71例肝硬化患者血清血小板生成素(thrombopoietin.TPO)水平,以探讨肝硬化患者血小板下降与血清血小板生成素之间的关系.
作者:严喜章;孟博文 刊期: 2006年第03期
目的解决浆膜腔积液中疑难病例的确诊、分型,探讨免疫细胞化学在积液中鉴别诊断的价值,找出适于这项诊断的佳抗体.方法选用6种单克隆抗体[上皮细胞膜抗原(EMA)、癌胚抗原(CEA)、钙视网膜素(CAL)、细胞角蛋白(CK17)、细胞角蛋白(CK18)、波形蛋白(vimentin)]对58例积液标本进行诊断.结果在58例积液中,免疫细胞化学鉴别出恶性积液38例,反应性积液20例.结论 CAL、EMA、CEA、vimentin联合应用可从正反两个方面同时证明癌细胞的存在,是积液中免疫细胞化学的佳抗体组合.CK17、CK18对鉴别积液中鳞癌、腺癌有参考价值.在细胞学检查中应普遍推广免疫细胞化学.
作者:樊丽华;李立新;魏玉婵 刊期: 2006年第03期
目的建立从无限增殖化人类B淋巴细胞提取基因组DNA的方法,并评价提取DNA的质量和产量.方法用DNA提取试剂盒提取基因组DNA;用紫外分光光度法测定DNA样本的纯度和产量;用琼脂糖电泳法测定DNA样本的完整性.结果 (1~2)×107个B淋巴细胞提取基因组DNA的平均浓度为174±61.3 ng/μl,DNA的纯度平均为1.73±0.047(A260nm/A280nm),琼脂糖电泳测得DNA分子量约为21 kb,且无污染.结论该方法可以从无限增殖化人类B淋巴细胞提取高质量高浓度的基因组DNA.
作者:唐斯;李桢;王大明 刊期: 2006年第03期
目的探讨斑点金免疫渗滤试验(DIFGA 商品名:迪比多)检测结核分枝杆菌抗体对肺结核的诊断价值.方法采用迪比多试剂盒对包括104例肺结核患者、144例非结核性肺病患者和65例正常人共313例血清进行结核分枝杆菌抗体检测,同时用涂片法、培养法和聚合酶链法(PCR)检测痰液进行方法学比较.结果迪比多检测肺结核患者阳性率80.77%,非结核性肺病患者阳性率7.64%,正常人阳性率3.08%.结论迪比多敏感性高,特异性好,对肺结核诊断有参考价值;操作简便、快速,与涂片法、培养法和PCR相比有明显优势,适合基层医院推广使用.
作者:邱森灵;林开生;贺惠娴;曾海英;廖荫明;刘建彬;何林辉 刊期: 2006年第03期
尿Survivin蛋白是一种新发现的肿瘤标志物,用于检测膀胱移行细胞癌才刚开始[1].我们对48例膀胱癌患者同时行尿Survivin蛋白表达和尿脱落细胞学检测,分析比较其在诊断膀胱癌中的敏感性、特异性,探讨其对诊断膀胱癌的价值,现报道如下:
作者:凌杰;叶黎红 刊期: 2006年第03期
目的为减少岛津CL8000全自动生化分析仪在日常运行中杯间差异及样本间交叉污染,保证仪器运行状态的良好,在保证检测质量的前提下研制碱性清洗液替代产品,降低试剂成本.方法根据岛津CL8000系列全自动生化分析仪清洗原理,并结合原装碱性清洗液的特点,配制了一种碱性清洗液.结果经比对试验、精密度实验、稳定性测试及日常病人标本应用测试证实,该自配碱性清洗液可达到原装碱性清洗液的清洗效果.结论自配碱性清洗液配制方法简单,成分稳定,可较好地满足日常工作的需要,同时又大大降低了成本.
作者:陈光辉;陈慧;梁映亮;唐从国 刊期: 2006年第03期
目的设计日立7020生化仪血清无机磷紫外光度法自动双通道测定程序.方法建立无机磷样本空白测试通道,特征分析参数包括测光点、双波长、样本/试剂量、K值等分别与无机磷项目测试通道相同,同时在补偿项目菜单设置补偿公式.结果批内CV为1.5%~3.0%,批间CV为3.0%~4.8%,平均回收率为99.5%.外观正常血清样本(n=81)双通道测定消除样本空白误差(均值±标准差)为0.9%±1.7%,脂浊(n=38)、黄胆(n=32)、溶血样本(n=35)分别为12.6%±15.4%,-5.7%±4.7%,-18.3%±14.7%.结论双通道测试程序简单,结果准确可靠,不失为一种有效的样本空白补偿方法.
作者:王元彬;叶昌斌;董玲 刊期: 2006年第03期
日立7060生化分析仪是日本日立公司20世纪九十年代投向中国市场的全自动生化分析仪,该机器具有操作简单,性能稳定,结果准确,故障率低,自动化程度高而深受用户欢迎.我们在使用该机的过程中,仪器虽然有专人管理,且严格执行维护保养(SOP文件)程序,但有时也会出现一些故障,影响仪器的正常运行.笔者使用该仪器已有五年,经过观察和探索,总结了一些故障分析及解决办法,以供同行参考.
作者:马尚柱;郝万鹏;邓朝晖 刊期: 2006年第03期
目的利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术和设备解决沙门菌鉴定困难的难题,探究简便、快速、准确的鉴定方法,确立积极有效检测鉴定手段和监控措施,防止食物中毒及传染病的暴发流行.方法根据测试菌不同,探讨PFGE技术实验条件,沙门菌的PFGE鉴定方法.结果经反复试验证实所建方法灵敏快速、准确可靠、分辨率高,实用性强.在没有图像分析仪的情况下,肉眼即可进行判断,可替代传统的血清学鉴定方法.结论脉冲场凝胶电泳基因分型及同源性鉴定方法分辨率高,应用性强,技术先进.
作者:曹春红;刘维华 刊期: 2006年第03期