学术投稿

端粒酶检测方法的改进

陈明;付文金;巢时斌;罗建新;彭剑雄

关键词:端粒酶, 裂解, TRAP
摘要:TRAP-PCR法是端粒酶检测的经典方法,在此基础上,对细胞裂解液成分、PCR等作了进一步的改进,改进后细胞裂解效率更高,而端粒酶的活性并没有受到影响,同时电泳条带更为清晰.
现代检验医学杂志相关文献
  • 不同方法制备冷沉淀的质量评估

    目的通过对pool法和水浴虹吸法制备冷沉淀的质量评估,选择合适的制备冷沉淀的方法.方法利用血凝仪检测冷沉淀中FⅧ和Fg的含量,并计算FⅧ和Fg的合格率和冷沉淀的容量.结果 pool法和水浴虹吸法的FⅧ含量(IU/袋)分别为:54.47士25.65,96.50士27.63,FⅧ合格率分别为:26.25%,83.75%,两者均有显著性差异(P<0.001);Fg的含量无显著性差异(P>0.05),Fg合格率均为100%;pool法制备的冷沉淀的容量明显高于水浴虹吸法(P<0.001).结论水浴虹吸法无论在方法学上和制备冷沉淀的质量上均明显优于pool法.

    作者:李雪梅;鲍自谦;伍秀英;邬旭群 刊期: 2006年第02期

  • 胰岛素样生长因子-1在胎儿生长中的重要作用

    目的检测孕产妇、新生儿胰岛素样生长因子-1(Insulin-1ike growth factor-Ⅰ,IGF-1),探讨小于胎龄儿及宫内发育迟缓儿的发病机制.方法采用放射免疫法检测血清中IGF-1.比较小于胎龄儿与足月胎龄儿,早产孕妇和正常足月孕妇IGF-1含量,了解不同体重、不同胎龄、不同胎盘成熟胎儿及其孕妇母体的IGF-1水平差异.结果 IGF-1随胎龄、胎重的增加而增高.表明IGF-1在胎儿生长发育中的重要调节作用.早期改善母体营养,达到改善胎儿宫内营养状况.结论在孕早、中期及时检测IGF-1含量,预防胎儿宫内发育迟缓,产前提高胎儿整体健康水平.

    作者:张一华;张志萍 刊期: 2006年第02期

  • 流式细胞术检测类风湿关节炎滑液对中性粒细胞凋亡的影响

    目的观察骨关节炎(OA)和类风湿关节炎(RA)患者滑液对中性粒细胞凋亡的影响.方法通过流式细胞仪及荧光显微镜检查19例RA和11例OA患者对体外培养粒细胞凋亡的影响.结果流式细胞仪及荧光显微镜检测的体外培养粒细胞自发凋亡发生率分别为43.6%和37.4%,加RA滑液组分别为18.3%和13.7%(P<0.01),加OA滑液组则分别为40.3%和31.2%(P>0.05).结论 RA滑液可显著降低粒细胞凋亡发生率,流式细胞仪检测凋亡较荧光显微镜检查更具敏感性.

    作者:杨明辉;袁国华;魏锦;郭晓兰 刊期: 2006年第02期

  • Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学分析仪的故障处理及应用体会

    我科2004年4月购进美国Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析仪,该设备运用先进的方法学,高质量的且具有专利的包装试剂,全英文操作界面,操作流程合理,检测速度快,结果具有高灵敏、高准确性、高特异性、重复性好等特点,运行一年来得到临床科室的认可.现将使用过程中常见的故障及处理、一些应用经验总结如下,以供同行参考.

    作者:丁小红 刊期: 2006年第02期

  • Beckman CX9全自动生化分析仪CX4故障排除体会

    Beckman全自动生化分析仪以其简便的操作,测定快速、准确和重复性好等特点,广泛用于临床,我院自1998年配备其Beckman CX9以来,至今已有7个年头,在使用过程中,仪器也曾经出现一些故障,在处理过程中,发现很好的利用仪器自带的诊断系统可以分析和解决一些问题,现将点滴体会总结如下,仅供同行参考.

    作者:石坚;兰时安 刊期: 2006年第02期

  • 7600-020全自动生化分析仪杯空白报警的故障分析与排除

    日立7600-020全自动生化分析仪由日本日立株式会社生产,它具有自动化程度高、灵敏度高、稳定性好、操作简便等优点,是大中型医院较为理想的一种常规生化分析仪器.笔者在长期的使用和维护过程中,对杯空白报警的故障分析及排除有几点体会,现报道如下,仅供同道参考.

    作者:信朝霞 刊期: 2006年第02期

  • 深圳市汉族人白细胞介素-6基因-174G/C多态性的调查研究

    目的调查研究深圳市中国南方汉族人白细胞介素6基因-174G/C多态性的分布与血脂等指标的相关关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法及测序法测定了138例中国南方汉族人白细胞介素-6基因-174G/C多态性,并结合血压、血糖、血脂、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子等相关指标进行横断面研究.结果中国南方汉族人白细胞介素-6基因-174G/C多态性以G/G纯合子基因型为主,分布频率为136/138(98.55%),G/C杂合子基因型分布频率为2/138(1.45%),C/C突变基因型未发现,各基因型与总胆固醇、甘油三酯、血压、低密度脂蛋白等关系不明显,与高密度脂蛋白有一定的关联(P=0.035).结论中国南方汉族人白细胞介素-6基因-174G/C多态性不明显,是否为代谢综合征的易感基因之一有待进一步研究.

    作者:罗国辉;杨冀衡;陆泽元;许香广;胡雪松;黄建平;陆学东 刊期: 2006年第02期

  • 临床生物化学室内质控探讨

    室内质控是实验室质量保证体系中的重要组成部分,其目的是为了保证每个患者样本测定结果的可靠性,测定结果的可靠性包括两方面的含义:一是精密度高,即测定结果的重复性好,实验室每天测定的结果变化很小,主要是消除或减少随机误差造成的影响,这主要靠健全的室内质控体系来保障;另一方面是准确度,即测定结果正确,接近真值,主要是消除或减少系统误差的影响,这可以通过选用好的测定方法,进行正确校准及参加室间质控活动来保证.以上两点并不是孤立的,精密是准确的基础,没有高精密度的测定结果,就无从谈准确度,因此实验室要想获得可靠的结果,建立一套健全的室内质控系统是一切质量工作的基础.

    作者:王象勇;纪冰 刊期: 2006年第02期

  • 应用PCR-SSCP方法检测非小细胞肺癌患者血浆p53基因突变

    目的探讨应用聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性分析(SSCP)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性,研究NSCLC患者血浆p53基因突变对NSCLC发生、发展和预后估计的意义.方法应用PCR扩增p53基因外显子5~8,并用SSCP分析产物突变情况,再与各生物参数进行相关研究.结果 10例健康人血浆循环核酸p53基因突变检测结果均为阴性,60例NSCLC患者血浆中p53基因5~8外显子突变测定的结果显示有28例出现突变,占47%(28/60).p53基因突变率与术后肿瘤残留、对治疗的反应显著相关(P<0.05),与临床分期、年龄、性别、病理分型无关(P>0.05).结论血浆循环核酸p53基因突变对NSCLC的早期诊断、病情监测、预后评估都具有指导意义.PCR-SSCP分析简便、可靠,可作为检测大量标本的突变的可行性方法.

    作者:于正洪;林勍;林勇;刘畅 刊期: 2006年第02期

  • 手持式全血乳酸分析仪的临床评价

    目的对H-1型国产手持式全血乳酸分析仪进行临床评价.方法采用标准电阻条、标准乳酸锂溶液与新鲜静脉抗凝全血/指血系统评价仪器的准确度、精密度、可报告范围,并与常规生化分析仪的酶法进行方法学比较试验以及确定参考范围.结果标准电阻测量结果的偏差均小于5%;高、中、低3个水平的乳酸回收率为88.5%~90.5%;精密度试验:低、高两个乳酸水平的变异系数分别为7.0%,5.4%;检测系统可报告范围为0.5~17.5 mmol/L;三个批号试条的批间差为6.6%;该法与传统的酶法之间结果具有良好的相关性(相关系数r=0.996 4);该系统测试健康人群末梢全血乳酸参考范围为0.44~21.6 mmol、L.结论 H-1型国产手持式乳酸分析仪进行全血乳酸检测具有简便、快速、准确、重复性好等特点,与自动生化分析仪的酶法测定结果具有良好的相关性,各项性能指标均达到临床应用要求.

    作者:夏良裕;鄢盛恺;宋耀虹;李元光;葛增梅;李君;庞新;何伟 刊期: 2006年第02期

  • 自身抗体在肝病患者诊断中的意义

    目的探讨肝病患者血清中是否出现自身抗体及该抗体与疾病的关系.方法收集肝病患者血清,以HEP-2细胞、鼠肝和猴肝组织切片和可溶性肝抗原为抗原基质,用间接免疫荧光法、蛋白质印迹法检测肝病患者血清中的自身抗体.结果①间接免疫荧光法检测自身抗体显示:慢性肝炎、肝硬化、肝癌三组阳性率分别为22.3%(29/130),30.9%(30/97),34.1%(14/41),它们之间无显著性差异(P>0.05),但三组阳性率与急性肝炎(7.0%)、正常对照组(1.5%)比较有显著性差异(P<0.01).②蛋白质印迹法检测肝特异性自身抗体靶抗原时发现慢性肝炎、肝硬化患者约66.0%,的抗原相对分子质量多集中在47kD及52kD上,两组抗原条带分布相似,有30.0%的肝硬化、肝癌患者在20kD及32kD分子质量之间的阳性条带上、下处多出现1~2条无对应条带.结论慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中自身抗体的阳性率明显高于急性肝炎和正常对照组.患者血清中存在抗肝组织自身抗体,其相对应的靶抗原有多种,如能进一步鉴定靶抗原有望成为诊断肝脏疾病的免疫学标志物.

    作者:张利方;付丽萍;徐娟;叶斌 刊期: 2006年第02期

  • 临床实验室分析前质量控制的探讨

    近年来,各种现代化的先进仪器在医院检验科得到广泛应用,检验人员的素质普遍提高,检验科的科学化管理体系正在建立和完善.管理体系建立的目的是规范工作流程,保证检验质量.合理的工作流程是全面质量控制的前提,将质量控制的具体措施落实到工作的每个环节是全面质量控制的根本保证.目前对实验过程中的质量控制都比较重视,但对实验室分析前的质量控制由于涉及环节多,还有许多影响因素未被重视.国际标准化组织颁布的ISO/IEC15189文件<医学实验室质量和能力专用要求>有详细的规定和要求,为了探索符合我院工作实际的质量管理流程和质量保证措施,我们对实验室分析前质量控制的规范化管理进行探讨.

    作者:郭瑞林 刊期: 2006年第02期

  • 临床基础检验学实验教学的实践

    临床基础检验学实验教学通过优化实验教学内容,改革实验教学模式,加强实验报告的书写和严格实验考核制度等几方面的实践,培养了学生动脑动手能力,理论联系实际的能力和初步的科研思维能力.

    作者:孙宝清;李琴;许子华 刊期: 2006年第02期

  • 磷试剂对酶法测定尿酸有携带污染

    生化分析仪在长期使用过程中其冲洗能力下降,比色皿老化后吸附功力增加,检测项目次序安排不当等因素的影响,均可造成试剂间的交叉污染而致测定结果偏高或偏低.我科新购一批磷试剂,在仪器上把磷的测定设置在紧靠尿酸测定的前面,结果发现尿酸测定结果明显偏低.当在仪器上改变测定顺序后(中间间隔3个其它项目)结果恢复正常.经排查是磷试剂的交叉污染所致,现报道如下:

    作者:罗书久;唐中 刊期: 2006年第02期

  • 原子荧光法同时测定化妆品中砷汞含量的方法分析

    化妆品中砷、汞元素是必检的有害元素(砷不得超过10 mg/kg,汞不得超过1 mg/kg[1]).目前样品预处理多采用湿式消解、干灰化法和微波消解法消解样品,其检验方法无论是冷原子吸收法、分光光度法、原子荧光法等都是分别用两种不同的方法分别测定化妆品中砷、汞含量,本文研究了阶段微波消解化妆品,原子荧光法同时测定化妆品中砷、汞含量的分析方法.

    作者:王红琴 刊期: 2006年第02期

  • 1400例糖尿病患者血清胰岛相关抗体检测的临床意义

    目的观察胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素自身抗体(IAA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)在1型、2型糖尿病(DM)和正常人群中阳性检出率,并探讨其临床意义.方法用ELISA法检测血清ICA、IAA、GAD-Ab.结果 1、2型DM患者和正常人群血清中,ICA阳性率分别为39.0%,12.6%,3.8%;IAA阳性率分别为31.9%,16.3%,2.9%;GAD-Ab阳性率分别为55.5%,16.8%,0.4%.结论结果提示ICA、IAA、GAD-Ab与1型DM的发病高度相关;这些抗体的出现预示β细胞功能受损,有助于从2型DM中及早发现成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA),以利临床早期应用胰岛素治疗,从而延缓胰岛β细胞功能的衰竭.

    作者:胡兰萍;顾萍;赵明 刊期: 2006年第02期

  • 金标试纸条对测定生化指标的影响

    金标试纸条应用于免疫学检验,使许多原来操作复杂、耗时长、要求特殊仪器、结果重现性差的免疫定性项目变得快速简便,可为实验室节约大量的人力物力,也为病人及时诊疗提供便利.但是,为方便病人,一般实验室金标试纸条测定的项目与生化项目使用同一份标本,金标试纸条本身含有复杂的化学成分,当它作外源性物质浸入血清后难免会有部分物质溶入血清,那么这些物质会不会对生化项目的测定带来干扰呢?为此笔者对临床实验室常用的5种免疫试纸条对常用的25项生化测试项目的影响进行了实验观察,报道如下.

    作者:刘景梅;刘兆军 刊期: 2006年第02期

  • 类风湿关节炎早期诊断研究概况

    类风湿关节炎是以慢性多关节炎为主要症状的自身免疫性疾病.随着国内外学者对类风湿性关节炎的深入研究,新的早期诊断方法不断应用于临床,提高了对类风湿性关节炎早期诊断的特异性和灵敏度.该文重点阐述了类风湿性关节炎的早期诊断方法的进展,并对类风湿性关节炎的发病机制进行了概述.

    作者:陈保锋;曾军英;冯群芳;刘娟;张杰 刊期: 2006年第02期

  • 库尔特ACT.diffTM血细胞分析仪常见故障的查处

    库尔特ACT.diffTM是美国贝克曼公司生产的可用于检测18项参数的血细胞分析仪,其检测准确性高、重复性好.我院使用该仪器已有两年余,随着就诊量的增加以及使用频繁,仪器也出现了一些故障.本文对常见故障的处理及有关经验总结分析报道如下.

    作者:金晓娟;李早荣 刊期: 2006年第02期

  • 依诊疗的需要重组生化检测项目

    对实验室检查项目进行重新分类组合,更符合临床诊疗需要,又减少病人的医疗费用,使社会与医院双重受益.

    作者:于德军 刊期: 2006年第02期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院