张健；李卫宁；林华
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1).方法 从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的 蛋白,Western-Blot结果 显示纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 成功表达和纯化了HMGB1基因.
作者：姜南艳；张伟；任君萍；顾炳权；沈建军；张惠中 刊期： 2007年第03期
目的 分析经日立-罗氏检测系统(A系统)量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性.方法 先用日立-罗氏检测系统将c.f.a.s的酶的量值传递给新鲜混合血清作临时酶校准品,然后用A系统、Roehe Modular P分析仪与科华-东菱试剂(B系统)、Dade Dimension RxL分析仪与配套试剂(C系统)、Dade Dimension RxL分析仪与科华-东菱试剂(D系统)、Beckman CX9分析仪与配套试剂(E系统)、Hitachi 7170A分析仪与Randox试剂(F系统)、Olympus 640分析仪与北京中生试剂(G系统)测定50份新鲜血清和临时酶校准品的ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT活性,后用临时酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正50份新鲜血清的测定结果,并进行校正前后的结果 比较和临时酶校准品互通性分析.结果 校正前各检测系统测定结果 间有较大的差异(CV4.99%～13.98%),校正后差异变小(CV1.30%～10.34%),其中B,C,E,F系统中ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT和D,G系统中ALT,AST,CK与A系统结果偏差明显变小,并且仪器与试剂配套的C,E系统间为备检测系统间小;但D,G系统中LDH,ALP,γ-GT差异改变不明显.结论 采用新鲜混合血清作临时酶校准品有一定的应用价值,但使用前必须进行酶校准品互通性检验,才能保证每项酶的测定结果 的准确和可靠.
作者：顾国龙；谢智光；梁景云；唐芳玫；徐文丽；冯玉清；李颖；黄冬梅 刊期： 2007年第03期
目的 分析麻疹病毒(measles virus,MV)主要多肽抗原成分,筛选可用于麻疹病毒特异性抗体诊断的抗原成分.方法 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹技术(immunoblots,IB)对比分析细胞抗原与麻疹病毒抗原,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原免疫原性的强弱.结果 SDS-PAGE和多克隆抗体免疫印迹结果表明,麻疹病毒分子量为60 kD和55 kD抗原的免疫原性强,72 kD抗原性较弱,200kD抗原性弱.结论 针对麻疹病毒60 kD和55 kD抗原成分的抗体检测可以作为麻疹病毒感染的早期诊断指标.
作者：张银辉；杨来智；张小艳；陆学东 刊期： 2007年第03期
目的 研究国产鞘液的自主配方及其在SE-9000全自动血液分析仪上的应用.方法 优选国产鞘液的配方组成;以国产鞘液与进口原装鞘液对进口配套的全血质控物、新鲜血液标本作系统的比对实验.结果 国产鞘液与进口原装鞘液的各项检测结果 基本一致,无显著性差异,P＞0.05;两者间的相关系数均大于0.983,相关性良好;各检测项目的 回归方程中,斜率均大于0.981,且截距非常小.结论 国产鞘液实验结果 准确、重复性良好、质量稳定,能替代进口原装鞘液用于SE-9000全自动血液分析仪的配套使用.
作者：刘更夫；龚永启；饶平妹；骆明波 刊期： 2007年第03期
滥用抗生素的四种原因:不习惯应用微生物检查或嫌麻烦不愿做;对抗生素的使用指征及细菌的耐药性认识不足;用药模式不当;对广谱性抗生素的合理性使用认识不足.滥用抗生素的严重性:引起细菌耐药以及产生各种不良反应、引起医疗纠纷等:①尽管新型抗菌药物不断出现,但常见感染菌的耐药性也随之增加,如:耐万古霉素的肠球菌,耐甲氧西林的葡萄球菌和具有超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)的肠杆菌科菌的检出率也在增多,这说明我国面临着细菌耐药率增多的威胁,这些现象与抗生素的滥用有着很大的关系;②滥用耳毒性抗生素(如:庆大霉素、丁胺卡那霉素、新霉素)对耳蜗神经造成伤害,产生听力下降;③随着《医疗事故处理条例》的颁布和实施以及人们自我保护意识的增加,医疗事故和纠纷会涉及到医疗系统的各个领域,而如此滥用抗生素有可能被控告为误诊或不合理使用抗生素.微生物检查及药物监测的目的 :提供病原菌的诊断、指导临床医生合理使用抗生素及时控制感染.合理使用抗生素基本的三个要素:①明确感染菌;②根据体外药敏试验选择抗生素;③合理选药.
作者：覃琼英；赖极隆；李健玲 刊期： 2007年第03期
日本东亚希森美康公司生产的SE-9000全自动五分类血液分析仪在临床应用已久,每小时可检测120个标本,它具有自动、手工和预稀释三种检测模式,能满足临床不同标本检测要求.SE-9000采用了流式细胞技术和直流电阻法与射频法相结合的检测技术,具有多通道检测和试剂系统,可以专门检测幼稚细胞(IMI)、末梢血干细胞(HPC),可以设置不同年龄段参考范围,数据动态连续观察,还具有全自动网织红细胞检测系统.我院使用6年来,该仪器一直处于良好状态,但近半年来由于该仪器已老化,故障较多,笔者在这里讨论的是较常见的故障及排除方法.
作者：郝婉莹 刊期： 2007年第03期
目的 提高实验室内部生化项目的 可比性.方法 用cfas校准的日常检测系统对新鲜混合人血清定值,将该血清作为急诊系统的校准品对病人标本测定.结果 校准后的两个系统间尿素检测结果 的允许误差EA=0.31 mmol/L,小于美国CLIA88尿素系统误差标准允许限值SE=0.50 mmol/L.结论 用赋值的新鲜混合人血清校准的急诊生化系统与日常生化系统两者间的生化结果 具有可比性.
作者：李鑫；王德梅 刊期： 2007年第03期
血气分析对于临床诊断、治疗、预后起着重要作用,尤其被广泛用于急慢性呼吸功能衰竭的诊断、治疗、心肺复苏、外科手术和监护等方面.但血气分析易受诸多因素的影响,尤其是分析前的因素可直接影响到血气分析结果的准确性、可靠性,因此做好血气分析前的质量控制,是为临床提供准确可靠结果的前提.现就有关做好血气分析前的质量控制作一探讨.
作者：段宝生；曹贤；段宇宏 刊期： 2007年第03期
目的 确定性别和年龄因素对C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平有无影响.方法 采用胶乳增强免疫透射比浊法对1 270例门诊健康体检者进行血清CRP浓度的检测.结果 健康人群CRP水平呈偏态分布,中位数男性为1.92mg/L,女性为2.97 mg/L,女性高于男性,差异具有显著性(P＜0.05),50 y以上年龄组CRP水平明显高于其他年龄组(P＜0.05).结论 健康人群CRP浓度受年龄和性别因素影响,应根据不同人群特征建立参考值范围;并需要进行进一步研究以确定CRP水平的性别和年龄差异是否影响用于心血管病风险评价的临界值.
作者：鞠晓红；方德洋；马爱新；方芳 刊期： 2007年第03期
目的 探讨血样品低温(2～8 ℃)保存1 w对血细胞8个参数测定结果 的影响.方法 采集31例健康人静脉血在7d内每日测定一次血细胞的参数.结果 白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)在1 w内结果 无显著性改变(P＞0.05).结论 全血样品低温放置1 w仍然可为临床提供有参考价值的血细胞参数.
作者：龚永启；毕红琳；刘更夫；左芳 刊期： 2007年第03期
目的 探讨哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平变化及其与哮喘发病机制的关系.方法 每例患儿及正常对照组均取空腹静脉血并即时分离血清1 ml,用ELISA法检测血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平,并对检测结果 进行医学统计学分析处理.结果 哮喘急性发作组、哮喘缓解组的患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的测定结果与正常对照组相比较经统计学分析均存在极其显著的差异(P＜0.05).其中患儿哮喘急性发作组、哮喘缓解组血清中sIL-2R,IL-4,IL-13的测定结果 要明显高于正常对照组,而IL-2则明显低于正常对照组.此外,哮喘急性发作组与哮喘缓解组血清中IL-2,IL-4,IL-13的测定结果 相比较经统计学分析均存在显著的差异(P＜0.05),而sIL-2R则无显著差异.结论 哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平均存在显著的变化,说明它们在哮喘的发病机制中起着重要的作用.
作者：张国祥；许文龙 刊期： 2007年第03期
目的 确定实验室每个分析项目的 质量要求和性能特征,制定系统化的质量控制总策略,对每个分析项目选择有效的质控方案.方法 依据NCCLS C24-A2和CLIA'88建立统计质量控制和非统计质量控制方案,步骤:①根据实验室的不精密度(S)和不准确度(bias),利用功效函数图和操作过程规范图设计室内质量控制方法 ,评估误差检出率(Ped)和假失控率(Prf);②根据误差检出率的大小将分析项目分为三个组:高误差检出率(Ped＞90%)、中等误差检出率(Ped=50%～90%)和低误差检出率(Ped＜50%);③对高误差检出率(Ped＞90%)的分析项目重点应用统计质量控制,进行少的非统计质量控制的管理工作;中等误差检出率(Ped=50%～90%)的分析项目,统计质量控制和非统计质量控制的工作都要同等重视;低误差检出率(Ped＜50%)的分析项目,统计质量控制不是质量控制的重点,须重点加强的是非统计质量控制.结论 性能良好的分析方法 要求较少的质控规则和非统计质量控制的管理工作,性能差的分析方法 要求较多的质控规则和更多的非统计质量管理工作.
作者：黄亨建；李萍；宋昊岚；彭志英 刊期： 2007年第03期
我科在对日立7020全自动生化分析仪几年的使用过程中,不断摸索和探讨,积累了一些故障排除及应用方面的经验,在此介绍如下.
作者：阴志琦 刊期： 2007年第03期
目的 构建表达藤黄微球菌RPF基因蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达获得基因重组蛋白.方法 提取藤黄微球菌基因组DNA,以PCR扩增RPF基因,克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),在30℃用IPTG诱导3 h后进行SDS-PAGE分析.结果 测序结果 证实获得了藤黄微球菌RPF基因,其序列与GenBank中报道完全一致;SDS-PAGE分析表明,RPF基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达了重组蛋白,表达的蛋白量约占菌体蛋白的33.8%.结论 成功克隆了藤黄微球菌RPF基因,并在大肠埃希菌中获得了高效表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性及其功能奠定基础.
作者：苏明权；岳乔红；杨柳；王薇；刘家云；郝晓柯 刊期： 2007年第03期
目的 评价缺血修饰清蛋白(IMA)对急性冠脉综合征(ACS)具有早期辅助诊断的意义.疾病类型不同其诊断意义亦不同.方法 选择急性胸痛入院患者120例,其中急性心梗44例,心绞痛46例,非心源性胸痛30例.在胸痛发作5 h内采血做IMA实验,测定结果 用ACB值(清蛋白钴结合能力,单位:U/ml)表示,观察IMA对各组疾病的诊断价值.另选30例急性心梗入院需溶栓治疗的患者,分别于溶栓前、溶栓开始后2,4,6,8,10,16,24 h采血做IMA实验,测定血清ACB值观察IMA对溶栓监测的意义.结果 急性心梗组、心绞痛组患者血清IMA实验ACB值与正常对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),且心梗组患者血清IMA实验ACB值与心绞痛组比较差异有显著性(P＜0.05).在溶栓监测中各时间段的IMA实验ACB值比较差异无显著性(P＞0.05).结论 IMA是诊断心肌缺血的早期指标,可用于ACS的早期诊断,且可明显提高对心绞痛早期诊断的灵敏性,但用于溶栓监测意义不大.
作者：张东玲；朱广博；郭禹；刘蕊 刊期： 2007年第03期
目的 研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果 的影响.方法 使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法 对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定.结果 使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法 拟合定标曲线后测定结果 表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果 具有显著性差异.结论 免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线.
作者：朱铭 刊期： 2007年第03期
目的 探讨汉族人白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区-592位点单核苷酸多态性与乙型肝炎病毒(HBV)感染、转归的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法 ,检测231例HBV感染者,165例HBV感染康复者和135例正常对照者IL-10基因启动子区-592A/C位点基因型.结果 IL-10基因启动子区-592A/C位点基因型和等位基因在HBV感染组、HBV感染康复组和正常对照组之间的分布频率比较差异无显著性(P＞0.05),在血清HBV-DHA＜1×103 copies/ml的HBV感染者组和HBV-DHA≥1×103 copies/ml组之间的分布频率比较差异亦无显著性(P＞0.05);但IL-10基因启动子区-592A/C位点AA基因型和A等位基因在慢性乙型肝炎组出现的频率明显高于HBV无症状携带组,两组之间分布比较差异有显著性(P＜0.05).结论 汉族人IL-10基因启动子区-592A/C位点多态性可能与人群对HBV易感性及感染后的病毒血症水平无显著相关性,但该位点基因多态性与HBV感染后的肝脏炎症反应有关.
作者：张健；李卫宁；林华 刊期： 2007年第03期
目的 探讨UF-100尿液有形成分分析仪精子细胞参数的准确性及其影响因素.方法 对6 340份尿液标本同时用UF-100和离心镜检法进行精子细胞检测;正常人尿上清液中加入不同浓度的精子用仪器检测.结果 UF-100对精子细胞检测的准确率为98.6%,阳性预测值为59.8%,非晶形盐类结晶、真菌、红细胞、细菌、黏液丝等可造成精子细胞假阳性,同样高浓度的精子细胞使得UF-100检测红细胞、白细胞、上皮细胞及管型计数结果 假性增高.结论 UF-100检测精子细胞结果 不能作为确定性报告,应通过镜检复审,以免发生误报.
作者：陈立松；马骏龙 刊期： 2007年第03期
输血作为一种替代疗法,其临床意义不可低估,但是血液安全性问题愈来愈受到关注,血液成分的病毒灭活是提高输血安全的重要手段.该文就近几年这方面的研究进展及其效果作一综述.
作者：姚自同；张献清 刊期： 2007年第03期
目的 分析临床分离结核分枝杆菌的耐药特点.方法 用改良罗氏培养基间接药敏实验绝对浓度法检测结核菌的耐药情况.结果 210株临床分离株中对6种药物全部敏感仅有1株;两种以上药物耐药的有148株,耐药率70.48%;同时耐INH和RFP的菌株有90株,耐药率42.86%.结论 耐药及耐多药结核菌感染是临床治疗结核病的一个严重问题;临床分离的结核杆菌耐药率和耐多药率高;分析临床分离株的耐药特点,对控制结核病传染及指导临床合理用药具有重要意义.
作者：段艳；崔晓利；张增贤；冯群岭；阎折 刊期： 2007年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
