贾志凌;张宏艳;刘畅;于忠和
目的 研究全血样本在反复冻融后对DNA工作站抽提基因组DNA含量和纯度的影响.方法 研究随机抽取100份样本,相隔一天连续进行反复冻融四次,将每次融化的样本运用DNA工作站抽提基因组DNA,并用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度及琼脂糖电泳检测DNA完整性.结果 全血样本反复冻融组间比较抽提基因组DNA的含量和纯度,含量(μg)方面,第一次为2.220±1.004,第二次为2.956±0.768,第三次为2.540±0.817,第四次为2.760±0.881;纯度(A260nm/A280nm)方面,第一次为1.748±0.076,第二次为1.780±0.069,第三次为1.855±0.058,第四次为1.750±0.071.检测结果提示差异均无统计学意义(P>0.05),检测DNA长度大于15 kb.结论 反复冻融次数对DNA工作站抽提全血样本基因组DNA的含量和纯度均无影响,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景.
作者:王大明;邹红岩;李桢;邓志辉 刊期: 2009年第03期
目的 探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响.方法 采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞24,48,72 h,进行MTT实验,计算肝癌细胞的生长抑制率;采用流式细胞仪检测GCDCA对SMMC7721细胞凋亡的影响.结果 不同浓度的GCDCA对肝癌细胞SMMC7721均有一定程度的生长抑制作用,高浓度的GCDCA(300 μmol/L)处理组对SMMC7721细胞有较强的毒性损伤.低浓度的GCDCA(200 μmol/L)处理组能明显诱导细胞凋亡,凋亡率随处理时间的延长而增加.结论 GCDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用并能诱导SMMC7721细胞凋亡.
作者:陈江;谢明均;逯心敏;代琼;郭渝;李光富 刊期: 2009年第03期
目的 了解临床分离的葡萄球菌mecA基因及耐消毒剂基因qacA/B的存在状况.方法 临床分离的40株葡萄球菌,分别用头孢西丁(30 μg)筛查法和聚合酶链反应(PCR)法检测mecA基因,同时采用PCR法检测其耐消毒剂基因qacA/B.结果 40株葡萄球菌中36株mecA基因阳性,占90.0%(36/40);11株检出qacA/B基因者均为mecA阳性葡萄球菌,其中10株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),1株为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),qacA/B阳性率为27.5%(11/40).结论 含qacA/B基因的葡萄球菌全部为mecA基因阳性,提示对临床常用消毒剂耐药的金黄色葡萄球菌同时也对甲氧西林耐药.因此检测葡萄球菌耐消毒剂基因,对合理选用消毒剂,控制葡萄球菌感染传播具有临床意义.
作者:袁应华;李永明;张雯雁 刊期: 2009年第03期
目的 利用聚合酶链反应(PCR)技术和基因序列测定技术,了解深圳地区产CTX-M大肠埃希菌基因型分布情况,并分析产CTX-M酶大肠埃希菌的耐药性.方法 应用3组PCR引物分别扩增产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌株质粒DNA的CTX-M基因,并对所有阳性的PCR产物进行DNA测序.应用琼脂稀释法检测所有产CTX-M大肠埃希菌株的低抑菌浓度(MIC).结果 121株产ESBLs大肠埃希菌共检出CTX-M基因阳性株87株,总阳性率为71.9%,测序结果显示6株为CTX-M-3型,10株为CTX-M-15型,58株为CTX-M-14型,9株为CTX-M-9型,4株为CTX-M-13型.检出的87株CTX-M型大肠埃希菌株对头孢噻肟的耐药为突出,对头孢他啶、氨曲南和头孢吡肟的耐药率较低.结论 产CTX-M大肠埃希菌基因型主要为CTX-M-14基因型.产CTX-M酶大肠埃希菌对亚胺培南活性高,其次为哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星和阿莫西林/克拉维酸等.临床上可依据药敏报告加以选用.
作者:武学成;张阮章;卢月梅 刊期: 2009年第03期
目的 探讨过敏性儿童白细胞介素4(IL-4)受体Q576R与血清总IgE的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和垂直电泳方法,检测80例患过敏性疾病的儿童和20例正常对照儿童IL-4R是否存在Q576R突变位点,并用测序进行确认.采用日本HITACHI的CLA-1过敏原分析仪检测80例患过敏性疾病的儿童和20例正常对照组儿童血清总IgE水平,然后进行χ2检验及成组t检验.结果 IL-4受体Q576R突变位点和血清总IgE在过敏组与对照组相比差异有统计学显著性意义(均P<0.05).结论 过敏性儿童IL-4受体Q576R与血清总IgE有相关性.
作者:周君纯;吴兆勇;吴建锋;龙亚银;王东生 刊期: 2009年第03期
美国雅培AXSYM化学发光仪是目前应用较为广泛的免疫分析仪之一,性能稳定可靠.其标准曲线校标方式分为Master Cal(主校标或称两点校标)和Standard Cal(标准校标或称六点校标)方式,较标比较容易通过.
作者:黄忠团;杨琦;曹春晓;尹红 刊期: 2009年第03期
目的 探讨中国健康人群与精神分裂症患者细胞色素P450 2C9(CYP2C9)遗传多态性的相关性.方法 应用PCR与DNA测序相结合的方法对91例精神分裂症患者(男52例,女39例,平均年龄50.87±9.38岁)与164例健康志愿者(男88例,女76例,平均年龄47.37±14.82岁)进行了CYP2C9的基因多态性分析,根据CYP2C9将精神分裂症患者和健康志愿者基因型分组.结果 在对CYP2C9的检测中,没有发现CYP2C9*2基因型个体,正常对照组CYP2C9*3(A1075C)的等位基因频率为4%,精神分裂症患者组CYP2C9*3(A1075C)等位基因频率为5.5%,精神分裂症患者和健康志愿者组间的基因型和等位基因频率差异无统计学意义(χ2=0.669,P>0.05;χ2=0.637,P>0.05).结论 CYP2C9 *3(A1075C)可能不是中国精神分裂症患者的一个易感因素.
作者:周健;姚尚武;康熙雄 刊期: 2009年第03期
目的 探讨运动疗法对糖耐量减低(IGT)患者胰岛素抵抗的影响.方法 将60例糖耐量减低患者随机分为两组,一组常规给予饮食控制治疗作为对照组,另一组在此基础上同时强化运动疗法,各组患者观察治疗,并随访至24 w末.在治疗前及治疗后第12 w,24 w末进行血糖(BG)、血浆胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(HbA1c) 、血脂(TG、TC)及体质量指数(BMI)的检测.结果 将两组患者治疗前血糖、血浆胰岛素、糖化血红蛋白、血脂及体质量指数分别进行t检验,差异无统计学显著性意义(P>0.05);治疗后12 w,24 w治疗组与对照组以上各种测评数值比较,经t检验差异有统计学意义(P<0.05).结论 糖耐量减低患者在饮食控制基础上结合持续运动疗法能有效改善患者胰岛素抵抗状态.
作者:齐彬;任刚;张维 刊期: 2009年第03期
目的 了解开菲尔来源乳杆菌抑制肠道病原菌黏附的效果以及对肠道正常菌群大肠埃希菌的影响.方法 分离纯化乳杆菌,待人结肠腺癌细胞株(Caco-2)培养至单层细胞后,将乳杆菌及其代谢产物分别与伤寒沙门菌、大肠埃希菌混合培养进行黏附和黏附抑制试验,记数50个Caco-2细胞黏附的细菌数目,取平均值,计算黏附抑制率,组内、组间相比较,对结果进行统计学分析.结果 与普通乳杆菌混合培养的伤寒沙门菌数相比,经开菲尔来源乳杆菌RG1,RG2混合培养的伤寒沙门菌数下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05);经普通乳杆菌混合培养的大肠埃希菌数与RG1,RG2混合培养的大肠埃希菌数相比差异无统计学意义(P>0.05),另外它们各自代谢产物在酸、中性环境下的抑制效果也有相同趋势.结论 RG1,RG2能抑制伤寒沙门菌的黏附,且抑制能力明显较普通乳杆菌强;另外其代谢产物也能抑制伤寒沙门菌的黏附;而RG1,RG2及其代谢产物对大肠埃希菌均无明显抑制效果.
作者:徐晓平;徐冰海;蔡琴;倪景;程东庆 刊期: 2009年第03期
目的 探讨超敏C反应蛋白(hsCRP)在日立7170A生化分析仪和贝克曼DXC800生化分析仪上的定标方式与检验结果的关系,以实现两台仪器检验报告的一致性.方法 在日立7170A生化分析仪上分别采用Spline和Exponential的定标方式定标,在贝克曼DXC800生化分析仪上采用Math Model 1和Math Model 3的定标方式定标,分别测定各浓度水平的hsCRP标准品3次和50份血清标本.结果 测定hsCRP标准品时,除零点以外,Math Model 1定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异有统计学意义(P<0.05),而其他三种定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异无统计学意义(P>0.05).测定hsCRP血清标本时,采用Math Model 3定标方式与Exponential定标方式的测定结果之间的差异有统计学意义(t=2.731,P<0.01),与Spline定标方式的测定结果之间的差异无统计学意义(t=0.946,P=0.349).结论 测定hsCRP时日立7170A采用Spline定标方式与贝克曼DXC800采用Math Model 3定标方式时的结果具有可比性,且能够满足临床诊断的需要.
作者:杨丽媛;顾晓琼;万根平 刊期: 2009年第03期
HIV耐药性的产生可能是病毒自发突变和药物压力选择的结果,但已成为维持高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral therapy,HAART)长期疗效的主要障碍.耐药病毒的出现促进了耐药检测方法的发展,而耐药检测的目的 在于帮助医师根据患者的个体状况选择合适的有效治疗方法.目前,中国HIV-1流行毒株的耐药产生现状不容乐观.
作者:钟敏;杨绍敏 刊期: 2009年第03期
目的 探讨缺血修饰清蛋白(ischemia modified albumin,IMA)检测在急性冠脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)早期诊断中的应用价值.方法 57例确诊ACS患者在发病后的入院即刻,2,4,6,12h采集静脉血分别检测血清中IMA、肌红蛋白(MYO)、肌酸激酶同工酶MB质量(CK-MB mass) 、肌钙蛋白I(cTnI)的浓度,另选35例健康体检者做正常对照组,将测得的结果进行比较,以评价IMA对ACS诊断的临床价值.结果 ACS患者中IMA水平于胸痛发作后入院即刻略有升高,但与对照组比较差异无统计学显著性意义(P>0.1),2 h已经明显升高,4 h仍持续增高,且均明显高于正常对照组(P<0.05) ,6 h开始下降并逐渐回到基线水平,而MYO在发病后2 h开始升高,CK-MB mass,cTnI水平则在胸痛发作4~6 h开始升高.结论 IMA对ACS的早期诊断具有较高的敏感度,是一种较理想的ACS早期诊断指标.
作者:肖路延;王萌;唐志毅;郭健 刊期: 2009年第03期
目的 探讨口腔扁平苔癣(OLP)患者焦虑和唾液皮质醇之间的关系.方法 使用化学发光法检测OLP患者和对照组唾液皮质醇水平,使用Spielberger焦虑量表评定两组人群的焦虑状态和焦虑特性.结果 56例OLP患者唾液皮质醇平均浓度为1.32 μg/dl,60例对照组为0.97 μg/dl(P<0.001);OLP组平均焦虑状态评分和平均焦虑特性评分分别为46.78和49.89,对照组分别为39.98和39.21(均P=0.001).唾液皮质醇水平、焦虑状态和特性评分显著高于对照组.唾液皮质醇水平、焦虑状态和特性水平与OLP显著相关(P值分别为0.02,0.04,0.03).结论 OLP发病与精神紧张密切相关,OLP患者存在明显心理异常,因此,对OLP患者进行传统治疗的同时要进行心理治疗.
作者:耿玉兰;姚绍敏;赵帅;王国欣;李增宁 刊期: 2009年第03期
目的 探讨一次成浆与二次成浆法对制备出来的血浆中凝血因子Ⅷ活性含量的影响.方法 对新鲜采集的全血离心分离血浆并在8 h内冻结成块,然后在37℃水浴中复溶后测定两种方法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量.结果 一次成浆法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量为0.70±0.16 IU/ml,二次成浆法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量为0.84±0.16 IU/ml.结论 两种方法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量差异有统计学意义(P<0.05),二次成浆法比一次成浆法制备出来的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的活性含量要高,值得推广使用.
作者:叶柱江;刘赴平 刊期: 2009年第03期
目的 介绍精子凋亡的形态分类特征,进行分子生物学机制分析,探讨男性不育症的病因.方法 以精液标本进行TUNEL法和瑞-姬染色法,在油镜下观察凋亡精子拍摄图像,确认凋亡精子和介绍两法染色凋亡精子特征.结果 TUNEL法和瑞-姬染色法图像48幅,分别进行形态描述.并进行分子生物学机制探讨.提供凋亡精子的参考范围.结论 睾丸细胞凋亡可发生在支持细胞、生精上皮中的生精细胞,也可以发生在精子的幼稚期和成熟期.为此,在精液中进行精子形态学分类,应检测凋亡精子的比率,对男性不育症鉴别和判断有临床意义.
作者:曹兴午;曹育爱;邱高辉;石孝民;郭建强 刊期: 2009年第03期
促纤维组织增生性小圆细胞肿瘤(desmop lasticsmall round cell tumor,DSRCT) 是一种罕见、高度侵袭性、预后差的恶性肿瘤.自1989年Gerald等[1]首次报道1例以来国外报道约200例,国内报道约50例.
作者:沈迪 刊期: 2009年第03期
化学发光免疫分析是以化学发光物质为示踪物,具有灵敏度高、速度快等特点.主要试剂包括氧化剂、发光剂和催化剂等,测试中不使用有害的试剂,因此成为非放射性免疫分析法中有前途的方法之一.i2000SR具备实现完全自动化和不污染环境等优点,特别是能在较短的时间内得到实验结果,而对该仪器的维护、保养及故障排除尤为重要.
作者:刘检;邓海峰;陆明洋;李敏;徐斌;郑晓;蒋敬庭 刊期: 2009年第03期
目的 调查分析近亲与随机婚配的两个家系成员个体间的类孟买型分布状态,了解类孟买表现型在该两家系中的遗传特点.方法 以血型血清学试验作为检测基础,用PCR-SSP法进行ABO基因分型,扩增FUT1,FUT2基因,对PCR扩增产物进行直接测序或分子克隆测序后,分别鉴定两家系成员的类孟买表现型.结果 近亲婚配的家系1中,先证者与其兄、弟均从父母中得到了FUT1基因的547~548位两碱基AG缺失(h1),880~881位两个T碱基缺失的突变点(h2),表现为h1,h2类孟买型;父亲为h2基因携带者;母亲与先证者的女儿均为h1基因携带者.随机婚配的家系2中先证者与兄弟姐妹共4人,只有先证者本人的两条单倍体均遗传了父、母亲的FUT1基因的547~548位两碱基AG缺失(h1),表现为h1h1类孟买型;其他兄弟姐妹与父亲、母亲、先证者的儿子均为h1基因携带者,血型为正常的表现型.两家系成员的FUT2位点均为正常的野生型.近亲婚配家系Ⅰ中hh纯合子遗传发生率为100%;随机婚配家系Ⅱ中hh纯合子遗传发生率为25%.结论 该两个家系调查发现,类孟买表现型的遗传方式符合常染色体隐性遗传规律,近亲婚配比随机婚配可大大增加类孟买表现型的遗传概率.
作者:梁延连;苏宇清;喻琼;李大成 刊期: 2009年第03期
目的 研究性激素对MRL/lpr狼疮模型鼠Th1/Th2类细胞因子表达的影响,探讨其对Th1/Th2平衡的调节作用.方法 将狼疮模型鼠去势后随机分为空白对照组、雌二醇(E2)生理水平组、雌二醇(E2)妊娠水平组、睾酮(T)组.利用RT-PCR方法检测模型动物血液单个核细胞中Th1类细胞因子(IFN-γ,IL-2)、Th2类细胞因子(IL-4,IL-6)的基因转录状态.结果 雌二醇生理水平组和妊娠水平组IL-2 mRNA的水平低于空白对照组(P<0.05),雌二醇妊娠水平组IL-4和IL-6的mRNA水平高于空白对照组(P<0.05).睾酮组IL-6 mRNA水平低于空白对照组(P<0.05).结论 性激素可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平,妊娠剂量的雌激素使狼疮模型鼠的细胞因子向Th2偏移,而雄激素则抑制Th2偏移.
作者:邵松;刘义庆;许丽;张炳昌;崔相法;陈国建;卢志明 刊期: 2009年第03期
目的 探讨CAP-IRC,EP6-A和改良的Doumas等三种线性评价方法的区别和适用性及在生化检验中的应用.方法 采用CAP-IRC,EP6-A,改良的Doumas等三种方法对33个临床化学检验项目进行线性评价,比较评价结果的异同.结果 在33个临床化学检验项目中,EP6-A方法有22个可直接判断为线性,7个为临床可接受线性,4个为非线性;CAP-IRC方法有14个为直接线性,18个为可接受线性,1个为非线性;改良的Doumas方法有18个为线性,15个为非线性.结论 EP6-A方法客观,更适用于临床,是目前较理想的线性评价方法.
作者:吴新忠;庄俊华;林莉;潘婉仪;黄宪章 刊期: 2009年第03期