周健；姚尚武；康熙雄
目的 评价血清胆固醇常规方法对常见胆固醇参考物质的基质效应和常规方法的校准偏差.方法 用高效液相色谱测定血清总胆固醇的方法为对比方法,用胆固醇氧化酶法的6种常规测定系统为待评方法,测定30个新鲜冰冻人血清和37种制备物的总胆固醇.将两法测定新鲜人血清的结果作直线回归,求得Y预测值双侧95%的允许区间,评价制备物的基质效应.通过分析新鲜冰冻人血清样品常规方法和对比方法结果的差异,评价测定系统的校准偏差.结果 胆固醇制备物的基质效应依品种而异,冰冻血清几乎没有基质效应,冻干血清表现为负基质效应,乙醇基质校准液呈正基质效应.所有系统新鲜冰冻血清测定值同对比方法测定结果均呈较好的直线相关.A,B,E系统显负偏差,C,D,F系统显正偏差,但偏差大多处于临床可接受的范围内,可满足临床需求,个别测定系统需进行改进.结论 在我国血清胆固醇测定系统上,制备物的基质效应普遍存在,部分常规系统存在校准偏差.为实现检验结果的准确性和实验室间的可比性,临床标准化工作势在必行.
作者：赵海建；周伟燕；张传宝；马嵘；陈忠余；张天娇；谢洁红；张江涛；胡翠华；王冬环；汪静；闫颖；曾洁；崔瑞芳；陈文祥；申子瑜 刊期： 2009年第03期
目的 检测Siglec-1(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素,CD169)在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血单核细胞上的蛋白及mRNA表达水平,并探讨其在原发性胆汁性肝硬化发生发展中的作用.方法 流式细胞术检测45例PBC患者及36例健康对照者、40例肝炎后肝硬化对照者外周血CD14,CD169双阳性细胞的表达率;实时荧光相对定量RT-PCR方法检测入选对象单核细胞中Siglec-1mRNA的含量;生化常规测定所有入选者血清生化指标水平.结果 流式细胞术检测结果显示:PBC组单核细胞CD14,CD169双阳性率为13.0%±2.5%,显著高于健康对照组(1.0%±0.2%,P<0.01)及肝炎后肝硬化对照组(4.1%±0.5%,P<0.01).PBC组Siglec-1mRNA的相对表达量为健康对照组的3.42倍,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 PBC患者单核细胞表面siglec-1蛋白表达显著增高,mRNA含量显著增加,说明PBC患者外周血单核细胞已经发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在PBC发生发展过程中起重要作用.
作者：周晔；奚伟强；蒋廷旺；陈燕；姚定康；邓安梅；仲人前 刊期： 2009年第03期
目的 通过受试者工作特征曲线(riceiver operating characteristic curve,ROC)对Beckman-Coulter LH 750血液分析仪VCS数值进行分析和临床诊断试验评价,建立佳报警阈值.方法 经显微镜检查确认为异型淋巴细胞超过20%,但仪器未有报警提示样本30例;同时收集对照样本30例,进行LH750自动上样测定及显微镜检查,评价VCS两组间差异,并通过ROC曲线计算VCS诊断价值.结果 异型淋巴细胞组VCS值与正常淋巴细胞组VCS值比较,体积较大、电导升高并散射增强,差别具有显著性;体积值AUC为0.412;电导AUC为0.849,cutoff值为122,特异度为86.3%,敏感度为80.0%;光散射AUC为0.765,cutoff值为53,特异度为92.2%,敏感度为66.7%.结论 VCS数值可在无白细胞分类异常情况下提示异型淋巴细胞存在.
作者：王小林；苑腾；胡晓舟 刊期： 2009年第03期
目的 研究血液分离胶采血试管是否适用于多种临床检验.方法 比对血液分离胶采血试管与干燥管的分离效果、检测结果、采血试管直接上机检测结果、标本保存效果并进行统计学分析.结果 分离胶采血试管分离效果好;检测组分离的血清与对照组分离的血清在临床检验分析中无显著性差异;分离胶采血试管原管之间无显著性差异,干燥管原管中有13%的样本在临床化学、酶免学检验的一些项目中有显著性差异;24 h后分离胶血清和即时分离胶血清在免疫、分子生物学和绝大部分生化指标的测定结果无显著性差异,有较好的符合性,有一小部分的生化指标有显著性差异.结论 血液分离胶试管适用于工作量大、自动化程度高、要求检测结果准确的多种临床检验.
作者：莫凡；赵洁；王琼；钟小强；陆学东 刊期： 2009年第03期
HIV耐药性的产生可能是病毒自发突变和药物压力选择的结果,但已成为维持高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral therapy,HAART)长期疗效的主要障碍.耐药病毒的出现促进了耐药检测方法的发展,而耐药检测的目的 在于帮助医师根据患者的个体状况选择合适的有效治疗方法.目前,中国HIV-1流行毒株的耐药产生现状不容乐观.
作者：钟敏；杨绍敏 刊期： 2009年第03期
目的 探讨中国健康人群与精神分裂症患者细胞色素P450 2C9(CYP2C9)遗传多态性的相关性.方法 应用PCR与DNA测序相结合的方法对91例精神分裂症患者(男52例,女39例,平均年龄50.87±9.38岁)与164例健康志愿者(男88例,女76例,平均年龄47.37±14.82岁)进行了CYP2C9的基因多态性分析,根据CYP2C9将精神分裂症患者和健康志愿者基因型分组.结果 在对CYP2C9的检测中,没有发现CYP2C9*2基因型个体,正常对照组CYP2C9*3(A1075C)的等位基因频率为4%,精神分裂症患者组CYP2C9*3(A1075C)等位基因频率为5.5%,精神分裂症患者和健康志愿者组间的基因型和等位基因频率差异无统计学意义(χ2＝0.669,P>0.05;χ2=0.637,P>0.05).结论 CYP2C9 *3(A1075C)可能不是中国精神分裂症患者的一个易感因素.
作者：周健；姚尚武；康熙雄 刊期： 2009年第03期
目的 研制用于常规ABO血型反定型的简便试剂红细胞.方法 利用Coulter STKS,CD1700和Bayer2120三种血细胞分析仪的稀释液制备5 ml/dl的试剂红细胞,4±2℃冰箱保存,每三天对红细胞的抗原、红细胞数量和质量、上清液游离血红蛋白以及细菌生长情况等进行观察,观察用三种稀释液制备5 ml/dl的试剂红细胞的有效期限.结果 用coulter STKS稀释液配制的试剂红细胞有效期可达20 d,用CD1700稀释液配制的试剂红细胞有效期可达18 d,用Bayer2120稀释液配制的试剂红细胞有效期可达15 d.在＜2 w有效期内,试剂红细胞在ABO反定型试验中敏感度高、抗原特异度强,细菌污染程度低,可保证常规ABO血型反定型的准确度.结论 用血细胞分析仪稀释液可制备简便的ABO反定型试剂红细胞,有效期可达2 w.
作者：周华友；陈少彬；于艳涛；杨贺才；王美兰；陈林 刊期： 2009年第03期
目的 建立人类T淋巴细胞白血病病毒I(HTLV-I)前病毒的核酸检测方法,对HTLV-I相关高危标本进行检测,初步了解上海地区HTLV-1在相关疾病和高危人群中的流行特点,探讨核酸检测法在HTLV-I高危人群中的检测意义.方法 实验收集了69例淋巴瘤/白血病患者,72例有多次输血史的其他血液病患者以及1例HTLV-I相关脊髓病(HAM)/热带痉挛性下肢瘫痪(TSP)疑诊患者血液标本.采用荧光定量PCR筛查HTLV-1前病毒tax基因,酶联免疫法检测血清HTLV-I/II抗体,对上述2种检测中出现任一阳性结果的标本进一步采用nest-PCR检测HTLV-1前病毒env基因以确定HTLV-I的感染.结果 仅HAM/TSP疑诊患者tax基因扩增出现阳性曲线;ELISA检测标本血清HTLV-I/II抗体均为阴性;nest-PCR扩增env基因未见特异性条带.结论 上海地区小样本HTLV-I相关高危人群中未检出HTLV-I感染;建立的核酸检测方法能对HTLV-I病毒感染进行有效的筛查和确认.
作者：伍晓菲；王华；梁辉；刘晓颖；郑岚；王迅 刊期： 2009年第03期
目的 建立多重RT-PCR技术检测儿科呼吸道标本中常见病毒的方法.方法 参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索NCBI数据库初步验证其特异性,以实验室阳性株验证引物特异性,优化多重RT-PCR反应条件.并对2008年61份儿童呼吸道标本进行检测,阳性片段测序验证扩增片段特异性.结果 采用多重RT-PCR引物对流感病毒A型(IVA)、流感病毒B型(IVB)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒3型(PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)和鼻病毒(RHV)等6种病毒进行扩增,均无非特异性扩增条带,分别获得171,489,307,585,155,501 bp片段,与设计相符;对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果,61份儿童呼吸道标本多重RT-PCR扩增,阳性率为50.82%(31/61),核酸序列与经NCBI数据库Blast比对同源性高.结论 实验证明,所建立的多重RT-PCR技术检测儿童呼吸道标本中常见病毒的方法,敏感度、特异度和可重复性均较好,为常见呼吸道病毒检测提供了一种方便易行的方法.
作者：曾凡胜；陆学东；王琼；罗小芳；黄烈；吴润香 刊期： 2009年第03期
促纤维组织增生性小圆细胞肿瘤(desmop lasticsmall round cell tumor,DSRCT) 是一种罕见、高度侵袭性、预后差的恶性肿瘤.自1989年Gerald等[1]首次报道1例以来国外报道约200例,国内报道约50例.
作者：沈迪 刊期： 2009年第03期
目的 研究不同种类保存袋对手工浓缩血小板的保存过程中血小板活性及凋亡情况的变化.方法 手工浓缩血小板无菌加入到3种保存袋中22℃保存,于保存0,1,3,5,7 d分别取血样检测血小板pH值、CD62P(血小板α颗粒膜糖蛋白)阳性表达率、Annexin (PS阳性表达率).结果 血小板计数三种血袋5 d保存,pH值测定结果差异无统计学意义;CD62P阳性表达率荷兰保存袋结果好;Annexin (PS阳性表达率)上海血小板专用袋结果好.结论 同为聚氯乙稀材质的保存袋因为原料及添加剂不同对血小板活性及凋亡情况影响也不同.
作者：高波；张磊；韩颖 刊期： 2009年第03期
目的 探索表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)二维内标校准方法,解决SELDI-TOF-MS的准确度和重复性较差的技术瓶颈.方法 采用人工合成纯化的多肽分子促肾上腺皮质激素(ACTH,MW:2 465.75Da)作为内标物质,加入待测样品中进行SELDI-TOF-MS检测,通过内标物质在质谱图中横坐标(质荷比)和纵坐标(丰度)响应值校准,消除因操作条件的波动对分析结果产生的影响,以提高结果的准确度和重复性.结果 加入终浓度为4.055 μmol/L的ACTH对血清蛋白质谱图无明显影响;加入内标物浓度和其质谱峰丰度呈直线关系(R=0.976 3); 分子量检测变异系数平均降低5.36倍(P<0.001);质谱峰丰度检测平均变异系数降低5.19倍(P<0.001).结论 二维内标法显著提高了SELDI-TOF-MS测定蛋白分子量和丰度的准确度和重复性,是该技术进行质量控制和标准化的有效措施.
作者：丁银环；胡琼英；姜伟；郭建红；周明术；梁双花；严莉；王开正 刊期： 2009年第03期
目的 探讨血清肿瘤标志物细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原72-4(CA72-4)对肺癌的诊断价值.方法 应用化学发光及电化学发光技术测定经病理确诊的肺癌患者(145例)、肺良性疾病患者(43例)及健康对照者(45例)血清CYFRA21-1,CEA,SCC,NSE,CA72-4水平,并计算阳性率、敏感度、特异度及准确度,采用方差分析及χ2检验的方法进行统计学分析.结果 肺癌组血清五种肿瘤标志物水平显著高于肺良性疾病对照组及健康对照组(P<0.01).CYFRA21-1在肺鳞癌、CEA在肺腺癌、 NSE在小细胞肺癌、SCC在肺鳞癌中水平高,与其它组相比具有统计学意义(P<0.01);CA72-4在肺鳞癌、肺腺癌的水平显著高于小细胞肺癌(P<0.05).五项指标联合检测后灵敏度、准确度均显著提高(P<0.01).结论 五种肿瘤标志物对于肺癌的辅助诊断均具有实用价值,且联合检测有助于肺癌的早期诊断和治疗.
作者：黄震英；张淑琴 刊期： 2009年第03期
目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群与疾病活动性、肾脏损伤及血清抗ds-DNA抗体产生的关系.方法 选定SLE疾病组51例、疾病对照组30例(类风湿关节炎、舍格伦综合征患者各15例)和正常对照组30例,采用流式细胞术检测上述指标.结果 ①SLE患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群比例均显著低于正常对照组(P<0.01),而疾病对照组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).②疾病活动期SLE患者外周血树突状细胞CD123+亚群比例显著高于稳定期患者(P<0.01),而两者CD11c+亚群比例之间差异无统计学意义(P>0.05).③SLE肾病组外周血树突状细胞CD123+亚群比例显著高于非肾病组患者(P<0.01),两者CD11c+亚群比例之间差异无统计学意义(P>0.05);ds-DNA+组SLE患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群比例均显著低于ds-DNA-组(P<0.05).结论 树突状细胞CD11c+,CD123+亚群的变化可能是SLE发病机制中的关键环节之一.
作者：刘定华；李永哲；胡朝军；佟大伟；张蜀澜 刊期： 2009年第03期
目的 研究血站无偿献血者血液筛查开展HBcAb检测的必要性.方法 对114份HBsAg灰区可疑样本(0.8≤S/CO<1)及1 000份HBsAg阴性初次献血者样本(S/CO<0.8,无溶血、脂血等外观异常)做HBV-M五项(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb)检测,对HBcAb阳性样本做荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA,对HBV-DNA阳性样本再做HBcAb滴度测定.结果 114份HBsAg灰区可疑样本,HBcAb阳性37例;37例HBcAb阳性样本中HBV-DNA阳性21例;21例HBV-DNA阳性样本HBcAb滴度测定2例为1∶64,其余19例均≥1∶128.1 000份HBsAg阴性初次献血者样本中,HBcAb阳性51例;51例HBcAb阳性样本中HBV-DNA阳性2例;2例HBV-DNA阳性样本HBcAb滴度测定1例为1∶64,1例≥1∶128.结论 血站HBsAg检测应加设灰区(0.8≤S/CO<1),去除灰区可疑样本;再对HBsAg检测阴性样本进行HBcAb筛查,淘汰HBcAb阳性高滴度样本,才能确保输血安全.
作者：蔡红军；袁克宇；任红红；杨恬；黄劲华 刊期： 2009年第03期
目的 将方法学相同的Roche试剂与Leadman试剂进行方法学比对,旨在观察二者检测血清或血浆中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在临床上的相符程度.方法 以Roche HDL-C与Leadman HDL-C同时检测139例病人血清.然后用EP evaluator软件中的Method Comparison模块对检测结果进行定性方法学比对(QMC)及定量方法学比对(AMC)比较分析.结果 AMC分析表明Leadman HDL-C与Roche HDL-C的相关性良好,其Deming回归方程为:Y＝0.977X+0.026,相关系数r＝0.975 3(>0.975).QMC分析表明Leadman HDL-C与Roche HDL-C的相符程度较好,符合度为89.9%,Cohen's Kappa＝82.8%(>75%),二者测值亦较为接近.结论 Leadman HDL-C与Roche HDL-C试剂检测结果基本相符,相关性良好.二者均可用于血清或血浆HDL-C检验,可为临床诊治提供可靠的客观依据.
作者：陈慧娟；赵红梅；周绘 刊期： 2009年第03期
众所周知,在血液细胞分析中,血小板(PLT)计数受到的影响因素较其它参数多,质量控制较难,建立一套完善、规范的复查机制,是值得我们探讨的问题,现就我室建立的血小板复查标准介绍如下.
作者：郭曼英；曾素根；朱新勤；庄利芳；孙玉明；韩秀华 刊期： 2009年第03期
目的 改进磁分离酶联免疫法(MEIA).方法 采取预加微量标本、将磁铁置于微孔侧壁和扣除上清液A值法,改进MEIA建立了差异磁分离酶联免疫法(DMEIA).求DMEIA回归方程、线性范围、变异系数(CV),比较DMEIA和全自动电化学发光法(ECLIA)配对检测100份血清AFP结果差异.结果 DMEIA检测AFP的回归方程Y=3.94X+16.45,r=0.992,线性范围5～500 ng/ml,批内CV=7.7%,批间CV=8.5%;DMEIA和ECLIA测定血清AFP值差异无统计学意义(t检验,P>0.05);检测原倍高浓度AFP时(21 460～501 690 ng/ml)两法均未出现hook效应.结论 DMEIA可基本克服hook效应,可用普通微孔板和酶标仪比色,可省去洗涤,检测AFP结果接近ECLIA,但线性范围小于ECLIA.
作者：徐兵；陈纯美；徐如梅；张建钫；伍严安 刊期： 2009年第03期
随着即时/床旁检验(POCT)在临床的广泛应用,因其环境和操作人员越来越复杂,除了分析前后的质量难于控制外,分析中的质量控制也面临极大的困难,甚至很多POCT分析仪未进行室内质控就用于测定临床标本.很多POCT检测项目是临床急诊或重症监护项目,其检测结果的快捷、准确直接影响病人的救治.因此,如何保证方便、快捷、准确的检测报告质量,进行分析中的智能化管理是佳的解决方案.IL公司的GEM Primer 3000血气分析仪融入了智能化的管理模式(Intelligent quality management,IQM),实现了分析过程的全自动监控、质量控制和常规故障排除.这种新的质量管理模式给临床提供了质量保证,进行着强制的质量控制,也给非专业的操作者减轻了负担,避免了POCT中许多常见的质量问题,适应了POCT发展的需要.
作者：贺勇；李萍 刊期： 2009年第03期
目的 利用聚合酶链反应(PCR)技术和基因序列测定技术,了解深圳地区产CTX-M大肠埃希菌基因型分布情况,并分析产CTX-M酶大肠埃希菌的耐药性.方法 应用3组PCR引物分别扩增产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌株质粒DNA的CTX-M基因,并对所有阳性的PCR产物进行DNA测序.应用琼脂稀释法检测所有产CTX-M大肠埃希菌株的低抑菌浓度(MIC).结果 121株产ESBLs大肠埃希菌共检出CTX-M基因阳性株87株,总阳性率为71.9%,测序结果显示6株为CTX-M-3型,10株为CTX-M-15型,58株为CTX-M-14型,9株为CTX-M-9型,4株为CTX-M-13型.检出的87株CTX-M型大肠埃希菌株对头孢噻肟的耐药为突出,对头孢他啶、氨曲南和头孢吡肟的耐药率较低.结论 产CTX-M大肠埃希菌基因型主要为CTX-M-14基因型.产CTX-M酶大肠埃希菌对亚胺培南活性高,其次为哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星和阿莫西林/克拉维酸等.临床上可依据药敏报告加以选用.
作者：武学成；张阮章；卢月梅 刊期： 2009年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
