徐传华
目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
作者：王一；连小云；张玎；王晖；王岐山 刊期： 2011年第05期
目的 探讨维持性血液透析患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD25+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测23例血液透析患者(透析组)和25例健康志愿者(健康对照组)外周血中CD4+T细胞比例及Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 透析组的CD4+T细胞的比例为(43.89±7.72)%,明显高于对照组(31.14±4.89)%(P<0.01);透析组的Th17/CD4+T细胞的比例为(1.23±0.84)%,明显低于对照组(1.99±1.22)%(P<0.05);透析组的Treg/CD4+T细胞的比例为(4.79±1.39)%,明显低于对照组(8.90±2.30)%(P<0.01);透析组的Th17/Treg细胞的比值为(0.29±0.22)%,明显高于对照组(0.21±0.10)%(P<0.05).结论 维持性血液透析患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致透析患者的并发症发生和发展.
作者：眭维国；李凤艳；车文体；陈洁晶；黄河；戴勇 刊期： 2011年第05期
目的 根据现有的检测方法的实际性能,应用Westgard质控选择表格设计工具,设计常见特定蛋白检测项目佳的室内质量控制方法.方法 依据生物学变异的允许总误差Tea确定作为临床允许总误差(Tea),以该科2010年室内质控的变异系数(CV)反映方法的不精密度,以该科参加卫生部临床检验中心2010年免疫特定蛋白项目室间质评的偏倚(Bias)反映方法的不准确度.以误差发生率(f)反映检测方法的稳定性,使用Westgard质控选择表格选择候选方法,以功效函数图确认质控方法的性能,选定合适的质控规则和控制测定值个数(N),确定终的质控方案.结果 不同的测试项目,每批测定值个数(N)不相同,同时使用的控制规则也不同.CRP,IgA和IgM可使用13s,N=1;13s/(41sW);N=2的控制方法,RF和C4可使用12s,N=2;13s/22s/R4s/(41sW),N=2的控制方法;C3和IgG没有满足质量要求的控制方法,需进行质量改进,或者使用其他的允许总误差重新设计质控方法.结论 实验室应使用质控方案设计工具,选择适合本实验室的质控方案,满足临床质量要求,查找并解决存在的问题.
作者：李翠；周迎春 刊期： 2011年第05期
目的 探讨水蛭素对DIC模型的大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的干预作用.方法 通过鼠尾静脉滴注脂多糖制作DIC模型,将大鼠分为三组即对照组、DIC组和水蛭素组,选取4个时间点(4,6,8,12 h)测定血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D水平的变化;同时用免疫印迹杂交法检测大鼠脑组织水通道蛋白4的表达.结果 与对照组相比,DIC组及水蛭素组血小板计数,PT,APTT,纤维蛋白原和D-D差异具有统计学意义(P＜0.05);水蛭素组上述指标变化明显低于DIC组(P＜0.05);AQP4表达在水蛭素组明显低于DIC组(P＜0.05).结论 DIC时产生的凝血酶可能通过上调AQP4蛋白的表达,参与脑水肿形成和发展;水蛭素通过抑制凝血酶的形成,减轻脑水肿.
作者：玉光哲；金英玉；刘倩；刘琰；张艳芬；辛晓敏；张亚男；彭鹏 刊期： 2011年第05期
目的 探讨抗Ro-52 kDa自身抗体与抗SSA抗体的关系及其在中国人群中SLE和SS等自身免疫病的诊断价值.方法 收集自身免疫病患者血清,其中SLE 50例,SS 50例,其他自身免疫病30例,50例健康者血清作为对照,用免疫印迹法检测所有标本中抗Ro-52与抗SSA抗体,同时用间接免疫荧光法检测所有标本ANA核型.结果 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性率在SLE患者中分别为60%和64%,在SS中分别为72%和82%,在其他自身免疫病患者中分别为30%和23.33%,均高于健康对照组(6%),经χ2检验,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抗Ro-52和抗SSA抗体阳性对诊断SLE和SS有一定的临床价值,二者的确切关系还需进一步探讨.
作者：金燕萍；林贵高；阎超；鄢盛恺 刊期： 2011年第05期
目的 了解巨核细胞免疫组化染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法在各类血液病鉴别诊断中的意义.方法 各类血液病患者均列为研究对象.用APAAP法染色患者骨髓涂片,显微镜下计数巨核细胞并进行分类.结果 多(双)核巨核、单圆核小巨核、多(双)圆核小巨核均可不同程度见于白血病[如急性髓系白血病(AML),急、慢性淋巴细胞白血病(A/CLL),慢性粒细胞白血病急变等],骨髓增生异常综合症(MDS),特发性血小板减少性紫癜(ITP),骨髓增殖性疾病MPD[包括原发性血小板增多症(ET)、骨髓纤维化(MF)、真性红细胞增多症(PV)],淋巴瘤,多发性骨髓瘤(MM),各种原因引起的贫血等病人骨髓涂片中,再生障碍性贫血(AA)未见巨核细胞.淋巴样小巨核仅见于MDS.结论 用APAAP法检查各类血液病骨髓涂片中的巨核细胞,有助于各类血液病的鉴别诊断.
作者：马巍娜；沈建良；黄友章；宫立众；岑坚；向丹 刊期： 2011年第05期
目的 探讨肾移植术后患者抗主要组织相容性复合物I类相关链A基因(MICA)抗体与移植肾慢性失功的关系.方法 选择了1986年～2005年间在北京友谊医院接受肾移植的38例患者,男性32例,女性6例,年龄24～68岁,血肌酐和尿素氮水平高于正常值.采用MICA抗体流式筛查技术,于2009年7月检测MICA抗体和PRA抗体,38例肾移植患者PRA抗体均为阴性,而后观察一年后的肾功能变化.结果 38例肾移植术后群体反应性抗体阴性但血肌酐和尿素氮高于正常值的患者中有9例MICA抗体阳性,阳性率达23.68%.9例MICA抗体阳性患者均呈现MICA抗体多特异性.29例MICA抗体阴性患者,经过一年的治疗,7例患者肾功能基本恢复,2例患者恢复透析,20例患者肾功能基本未变.MICA抗体阳性的9例患者中有4例患者恢复透析,其MICA抗体均为强阳性;另5例患者肾功能基本未变,其MICA抗体4例为弱阳性,1例为阳性.MICA抗体阳性和MICA抗体阴性患者之间恢复透析的患者间差异有统计学意义(χ2=4.73,P<0.025).结论 高滴度MICA抗体是引起移植肾慢性失功的重要因素之一.
作者：贾保祥；田野 刊期： 2011年第05期
目的 检测胃肠道肿瘤患者门静脉血中CEA mRNA和CK-20 mRNA的表达.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测胃肠道肿瘤患者手术前后门静脉血中循环肿瘤细胞标志物CEAm RNA和CK20 mRNA的表达情况,并对上述指标在外周血中的含量进行检测;同时以非肿瘤手术患者作为对照组.结果 胃肠道肿瘤患者手术后门静脉血CK20 mRNA (79.7%)和CEA mRNA(84.4%)的阳性表达率与手术前(62.5%,67.2%)比较差异具有统计学意义(P<0.05);手术前后门静脉血CK20 mRNA和CEA mRNA的阳性表达率与外周血(43.8%,51.6%)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).胃肠道肿瘤患者术后门静脉血中CK20 mRNA(mean=3.00)和CEA mRNA(mean=3.56)表达量与手术前(mean=2.34,2.58)和外周血(mean=1.16,1.93)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 门静脉血中CK-20 mRNA,CEA mRNA的表达明显高于外周血.
作者：李强；黄建武；钱定良 刊期： 2011年第05期
该综述介绍了对子痫前期有希望的生物标志物,内容包括可溶性血管内皮生长因子受体1、可溶性内皮蛋白、血管内皮生长因子,胎盘生长因子和胎盘蛋白13等,讨论了它们可能的临床价值.
作者：王继贵 刊期： 2011年第05期
目的 了解湖北荆门地区无偿献血者中RhD阴性表型分布情况.方法 常规血清学方法初筛RhD阴性标本,用间接抗球蛋白试验确认弱D,用吸收放散试验检测Del,RhC,c,E和e抗原使用血清学方法进行检测.结果 38 921名无偿献血者中初筛为RhD阴性124例;用抗人球蛋白试验确认弱D 11例;除11例弱D和10例假阴性后,103例确认为Rh阴性标本中共检出Del型25例;103例确认为Rh阴性的标本,血清学表型分布为dccee 63例,dCcee 28例,dCCee 6例,dccEe 4例,dccEE 1例,dCcEe 1例.结论 湖北荆门地区RhD阴性献血者中存在相当比例人群携带弱D表达抗原,为确保临床用血的安全,应加强弱D或Del型的确认.
作者：柯丽 刊期： 2011年第05期
为适应细胞遗传学领域的快速发展,人类细胞遗传学命名国际体制标准委员会对人类细胞遗传学命名国际体制进行了多次的修订和完善.2009年再次修订并出版了人类细胞遗传学命名国际体制.该文主要比较了2009版与前一版即2005版人类细胞遗传学命名国际体制的差异,这有助于国内细胞遗传学工作者用新的命名法描述染色体的畸变.
作者：王卫萍；张静；崔英霞 刊期： 2011年第05期
目的 了解医院耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)流行状况及其耐药性相关分析.方法 收集西安医学院附属医院临床标本中分离的132株金黄色葡萄球菌(SA)和100株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)与同期医院环境及医务人员手中分离的5株SA和40株CNS,用苯唑西林和头孢西丁(K-B法)筛选MRS,再用PBP2a胶乳凝集法检测mecA基因,MIC法检测MRS对19种抗生素的耐药性;资料用NDST统计软件Fisher确切概率法进行组间分析.结果 137株SA中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)83株,占60.58%(83/137),140株CNS中凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌(MRCNS)74株,占52.86%(74/140);其中临床分离株和环境分离株MRSA检出率分别为62.12%(82/132)和20.00%(1/5),MRCNS检出率分别为70.00%(70/100),10.00%(4/40),并对157株MRS耐药菌株检测mecA基因,阳性率96.82%(152/157),对19种抗生素耐药性检测结果显示,MRS对利奈唑胺、万古霉素和新内吉耐药性0.00%,MRS对其他抗菌药物呈多重耐药.结论 MRS在医院内有较高的流行性,应引起医院预防感染部门的重视.
作者：李敬梅；井发红 刊期： 2011年第05期
目的 探讨斑点免疫胶体金渗滤法与ELISA法检测包虫抗体的相关性及免疫诊断价值.方法 用四种抗原联合检测的DIGFA法分别检测感染包虫病患者、健康人群、疑为包虫病感染者血清中的特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较.结果 DIGFA法检测包虫病患者血清中特异性抗体的敏感度为96.1% (74/77)、特异度为100%(20/20),与ELISA 法检测结果符合率为93.7%;不同虫荷数感染者间抗体水平差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 用四联抗原检测感染包囊虫患者血清中特异性抗体具有较好的敏感度和特异度,组间差异无显著性.DIGFA法与ELISA法相比,前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合基层寄生虫病的临床检验和流行病学调查.若能进一步纯化检测用抗原,囊型抗原和泡型抗原间的特异性,则更具有非常大的潜在应用价值.
作者：欧仕颖；余长芳 刊期： 2011年第05期
目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪(简称P-800)上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP).评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数(CV)均<5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致(P>0.05),相关性较好(r>0.975,b在1.0±0.05之间).结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.
作者：耿红莲；王淇泓；竺蓓；盛凤英；施巍宇；邓燕；王爱华；仲人前 刊期： 2011年第05期
目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.
作者：吴燕；周爱华；孙万邦；任思坡；李振江；黄俊琼 刊期： 2011年第05期
目的 探讨影响骨髓血CD34+细胞纯化的因素.方法 45例进行性肌营养不良患者的骨髓血标本,在去或不去RBC和PLT的状况下,经Clini MACS免疫磁珠分选技术纯化CD34+细胞并计数其数量.结果 RBC和PLT的多少对CD34+细胞的纯化有显著的影响,差异具有统计学意义.结论 在进行Clini MACS免疫磁珠分选技术对骨髓血CD34+细胞纯化时,去除RBC及其碎片和PLT,可以提高CD34+细胞纯化的数量.
作者：白雯；张聪；王黎明；周建军；白槟；李铭；钟占强 刊期： 2011年第05期
目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.
作者：姜昌丽；马洁；滕毅；杜凌琳；瞿良；朱光旭；张悦；谭德勇；王惠萱 刊期： 2011年第05期
目的 比较不同的方法检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗CCP抗体)的诊断有效性和临床适用性.方法 用电化学发光法(Roche公司提供)和酶联免疫吸附法(德国欧蒙医学实验诊断股份公司和上海富莼科芯生物技术公司提供)试剂盒同时检测58例RA患者和31例非RA患者血清中的抗CCP的IgG抗体.分析比较结果的相关性,对其进行临床诊断试验评价;并观察各方法的检验结果回报时间.结果 ①各方法组检测的RA组抗CCP抗体浓度显著高于非RA组(P均<0.01);②各方法组检测结果之间有相关性(r均>0.9,P<0.01);③各方法组ROC曲线下面积均＞0.9(P>0.05);ECLIA法的灵敏度和特异度分别为91.4%和100%,两种ELISA试剂盒的灵敏度和特异度分别为93.1%,96.8%和89.7%,100%(P均>0.05);④ECLIA的回报时间(turn around time,TAT)(45 min)明显短于ELISA(160 min).结论 抗CCP对RA具有较高的诊断价值.ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体对RA的诊断有效性差异无统计学意义.选用ECLIA使检测会更快更及时,能更好地满足患者需要.
作者：王艳娇；李琳芸；董莉；彭长华；王昌富 刊期： 2011年第05期
活组织检测和细胞分析法监控器官移植患者的免疫反应已有多年历史,活组织检测受限于它的损伤性,细胞分析法的预测值、灵敏度和特异度尚有待考证.此外尚无体外测定方法能够可靠地预测操纵耐受性.随着致耐受性等策略在临床应用,寻找充分相关的能够预测或辨别耐受性和急性排斥反应先兆的生物学标记已成为移植领域的重中之重,该文综述了近年来的研究进展.
作者：祁晓平；黎介寿 刊期： 2011年第05期
目的 了解江苏常州地区妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染的分布情况,为该地区宫颈疾病防治及疫苗的投入使用提供一定的依据.方法 采用导流杂交基因芯片技术对1 016例有性生活史妇女宫颈脱落细胞进行21种HPV基因型检测.结果 在被调查的1 016例妇女中共有20种HPV亚型被检测出来.HPV感染总阳性率为27.8%,高危型检出率为25.6%,低危型为3.4%,混合型感染为6.2%.HPV感染阳性排在前5位的亚型从高到低依次为HPV16,58,52,31和68.随着宫颈疾病病变级别升高,HPV感染率呈正向增加趋势.结论 常州地区HPV亚型感染分布以高危型HPV16,58,52,31,68为主,早期筛查和控制HPV感染能有效降低宫颈癌的发病率.
作者：戚传平；许联红；蒋立新；王永仿 刊期： 2011年第05期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
