李响;石明;李虹;杜海鸣;魏强;杨宇如
目的观察新生儿口腔微生物的早期定植情况,确定健康新生儿口腔正常微生物群的组成以及新生儿口腔中的优势细菌.方法对22名健康新生儿口腔进行棉拭子取样,在需氧、兼性厌氧、厌氧条件下培养,培养均采用成品培养基和培养盒,培养结果作微生物的形态学及生化鉴定.结果 90.9%的刚出生健康新生儿口腔中无菌;45.5%的新生儿出生第2天即可检出Streptococcus salivarius (S.salivarius),27.3%可检出Streptococcus mitis (S.mitis),到出生后第28天这两种菌的检出率分别达86.4%和81.8%;Candida albicans (C.albicans)在1月龄新生儿口腔中检出率为22.7%;母乳喂养与人工喂养的新生儿口腔正常微生物群之间无明显差异(P>0.05).结论在早期定植于健康新生儿口腔生态区的正常微生物中,S. salivarius和S. mitis为其优势细菌,C. albicans为优势真菌.不同喂养方式对新生儿口腔优势菌群的组成和数量无明显影响.
作者:邹静;周学东;肖晓蓉 刊期: 2002年第04期
目的观察胚鼠皮质神经元遭受缺氧刺激时脑源性神经营养因子(BDNF)对其的保护作用,并探讨该过程中酪氨酸激酶B信使核糖核酸(TrkBmRNA)表达的变化.方法对胚鼠皮质神经元进行体外培养,用流式细胞术检测不同缺氧时点实验组(加入BDNF)与对照组(不加入BDNF)的细胞活性差别;同时用原位杂交法检测BDNF受体TrkBmRNA表达的改变.结果 BDNF对缺氧神经元有确切保护作用,加入BDNF可引起TrkBmRNA表达的上调.结论 BDNF可减轻神经元所遭受的缺氧损害,而TrkBmRNA表达上调可能是BDNF发挥其对缺氧神经元保护作用的机理之一.
作者:周晖;毛萌;刘卫平;李胜富;王华 刊期: 2002年第04期
目的检测细胞周期调节蛋白P16、CDK4和P53在成人和儿童髓母细胞瘤中的表达,并探讨其与预后的关系.方法应用免疫组化ABC法对21例成人和14例儿童髓母细胞瘤石蜡切片进行免疫组化检测,并结合随访资料进行生存曲线分析.结果在全部35例标本中,P16阳性率为62.9%,CDK4阳性率为100%,P53阳性率为28.6%,其中P16蛋白在成人中的表达(16/21)要高于在儿童中的表达(6/14),P53蛋白在成人中的表达(3/21)要低于在儿童中的表达(7/14),但上述3种蛋白的表达均与预后无关.结论 P16蛋白的表达缺失和P53蛋白的异常表达可能与髓母细胞瘤的发生有关,但对预后无意义.儿童髓母细胞瘤的遗传学异常现象高于成人.
作者:刘艳辉;程永忠;毛伯镛;吴浩强;陈越;高立达 刊期: 2002年第04期
目的总结外科手术后并发严重呼吸衰竭,长期机械通气支持治疗的经验.方法外科术后并发呼吸衰竭患者10例.在积极治疗原发疾病的同时,给予了长时间适当的机械通气(通气30~60天,平均46.6天),以及有效的抗生素治疗和营养支持.结果 10例治愈出院,经随访生活质量良好.结论外科手术后并发严重呼吸衰竭,应在维持适当通气的条件下,积极治疗原发疾病、采用有效的抗生素和切实可行的营养支持.
作者:张庆基;徐建勋 刊期: 2002年第04期
目的建立肥大细胞激活及组织胺测量的实验研究系统.方法将手术切除的人类肺、皮肤、扁桃体及关节滑膜组织剪碎后,在37℃条件下用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶进行消化.经洗净及肥大细胞计数后,悬浮的细胞被均匀地加入含刺激剂、抑制剂或缓冲液的试管中,并在37℃条件下培养15分钟,用冷HBSS缓冲液及离心方法终止上述反应,取上清液置-37℃下保存.用与组织胺特异结合的玻璃纤维为基础的荧光显色法测量组织胺.结果肺、皮肤、扁桃体和关节滑膜组织的肥大细胞分别占相应组织悬浮细胞总数的4%、5%、0.5%和4%左右.各组织中肥大细胞自发性组织胺释放量均占其组织胺总量的9% 以内.绵羊抗人IgE和钙离子载体的佳浓度分别是1% 和1 μmol/L,其分别能引起高达19% 和56% 的肥大细胞组织胺释放.肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂亮肽素(亮肽素)能抑制IgE依赖性肺及扁桃体肥大细胞的激活.结论酶消化法分离肥大细胞为肥大细胞激发试验提供了快速、重复性好的试验基础.以玻璃纤维特异性结合组织胺为基础的组织胺测量方法重复性好、样品用量小,节省人力及财力.绵羊抗人IgE和钙离子载体均为肥大细胞的有效激活剂.亮肽素能抑制IgE依赖性肥大细胞的激活.
作者:何韶衡;李萍 刊期: 2002年第04期
目的探讨恶性组织细胞病(MH)的临床、病理及细胞属性等特征.方法对12例MH患者临床及实验室有关指标进行分析;对其中6例尸检及活检病理标本采用单克隆抗体免疫组化染色、HE染色和EB病毒(EBV)原位杂交(EBER-ISH)等方法进行检测.结果 MH临床上具有起病急、进展快、高热、衰竭等特点.实验室显示全血细胞减少、血清酶学显著增高.尸检示恶性细胞侵袭广泛,呈多中心、不均匀散在分布.免疫表型分析(6例)示CD45RO和CD3ε阳性,CD20和CD68阴性,提示恶性细胞属T细胞来源,而非组织细胞来源.同时所作3例EBER-ISH均为阳性反应.结论 MH具有爆发性的临床过程.恶性细胞多数属于T细胞性淋巴瘤.EBV感染可能与MH发病有一定相关性.
作者:廖小梅;向兵;牛挺;黄杰;刘卫平;陈卉娇;邓承祺 刊期: 2002年第04期
目的研究乙型肝炎核酸疫苗NV-HB/s经肌肉注射、皮下注射、转化伤寒杆菌CVD908后再经口服等不同途径接种小鼠后,小鼠产生体液免疫应答的规律,以及磷酸钙在提高核酸疫苗免疫效能中的作用. 方法用自制的乙肝核酸疫苗、佐剂化乙肝核酸疫苗及口服疫苗,以不同接种途径免疫小鼠,分别检测小鼠外周血中的HBsAg及抗HBs;肌肉组织标本中的疫苗质粒以及C-myc mRNA. 结果肌注NV-HB/s 3天后,在接种部位检出了HBsAg;1月后外周血中检出了抗HBs.肌注与皮下注射对NV-HB/s的免疫效能无显著影响;口服接种所诱生的抗HBs阳转率及滴度低于肌肉注射与皮下注射.磷酸钙处理可降低核酸疫苗的用量,增加其安全性. 结论乙肝核酸疫苗NV-HB/s能有效地诱导小鼠产生抗HBs;在免疫后6个月内,质粒的注入未见癌基因的激活.
作者:秦山;赵连三;范红;何芳;雷学忠;刘丽 刊期: 2002年第04期
目的研究维生素A的致畸性和锌对维生素A致畸作用的影响.方法将不同剂量的维生素A(0、2.5、5、10、15 μg/ml)加入培养基中,或同时加入5 μg/ml 维生素A和不同剂量的锌(5、10、15 μg/ml),用计算机图像分析仪观测培养后肢体的发育和分化情况.结果随着维生素A剂量的增加(2.5~15.0 μg/ml),肢体中各软骨原基的发育和分化越差、面积越小,并对软骨原基的外形发育产生抑制.长骨和爪骨都受到严重影响,对骨组织的作用比对软组织大,后肢畸形比前肢严重.当同时加入的锌量增加时(5~15 μg/ml),肢体中各软骨原基的发育和分化越差、面积越小.结论过量维生素A具有较强的致畸性,而过量的锌不能改善过量维生素A的致畸作用,反而会加重其致畸性.
作者:李云;罗洁;王瑞淑 刊期: 2002年第04期
目的筛选钩体核酸疫苗的候选株,并从基因水平解释钩体血清型的特异性.方法通过PCR方法扩增赖型017株及七日热型56610株钩体的内鞭毛蛋白(flaB)基因;经T/A快速克隆法将PCR产物连接于PGEM-T Easy Vector载体.用α-互补法、PCR法及酶切分析鉴定重组质粒,获得了重组质粒pDHTF017和pDHTF610;双脱氧终止法对两个重组质粒中的克隆化flaB基因进行测序.结果两型flaB基因长852bp,编码283个氨基酸.两个基因的限制性内切酶位点相似,含多个常见酶切位点.基因编码的蛋白质预测相对分子质量为31.3×103.结论几个血清型的flaB基因同源性达90%~99%.
作者:何泼;戴保民;乔中东;游自立;方之茂 刊期: 2002年第04期
目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-1、-3(IGFBP-1,-3)在正常新生鼠身长增长及宫内发育迟滞新生鼠追赶生长中的作用.方法将14只健康SD孕鼠随机分为实验组和对照组,每组各7只.于孕14天时钳夹实验组孕鼠双侧子宫动、静脉20分钟,对照组仅同期进行开腹、关腹手术.待两组孕鼠自然分娩后,从每只孕鼠所生的新生鼠中挑选3只身长、体重接近于平均身长、体重者,而后将两组各21只新生鼠又随机分为出生时、出生后第3天及出生后第5天三个亚组,每组各7只.测量生长参数,并采集血清,以放射免疫法测定血清IGFBP-1,-3水平.结果出生后第3天和第5天,实验组新生鼠身长增长明显高于对照组(P<0.01),血清IGFBP-3的增长也有高于对照组的趋势,且身长的增长与IGFBP-3的增长呈正相关(r=0.311),而与血清IGFBP-1的降低无相关关系(r=0.0074).结论出生后血清IGFBP-3的增加是新生鼠身长及宫内发育迟滞新生鼠发生追赶生长的重要原因.
作者:李炜如;姚裕家;杨凡;曾懿;白波;陈永秀;熊英 刊期: 2002年第04期
目的通过对304例高脂血症患者饮食和运动状况的调查与分析,为进一步探讨该人群的非药物干预方法提供依据.方法对304名高脂血症患者采用自填式饮食问卷和运动记录表,进行饮食和运动状况的调查.结果该人群饮食的平均分为5.19±1.45分,肉类摄入以瘦肉为主,肉类、蛋类和谷类的摄入量偏高,食用油的摄入以植物油和动植物油兼用为主,但摄入量偏大,食用脱脂奶制品者不足6%.每周有5天以上规律体育活动者不足50%,低于人群的平均水平.高收入和教师人群规律运动者低于其他人群.结论应开展改变不合理的生活方式的健康教育,着重加强高收入人群、教师人群主动运动锻炼的教育和指导.
作者:陈进;李宁秀;王家良;章茂顺;符宗胤;张兰;尹国玲 刊期: 2002年第04期
目的探索酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein对肝脏星状细胞(HSC)激活的抑制作用.方法采用链霉蛋白酶、胶原酶原位灌注及Nycodenz一步密度梯度离心法分离大鼠HSC,并进行体外培养使之激活.用四唑盐比色法(MTT法)检测Genistein作用24、48和72小时对HSC增殖的抑制作用;用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察Genistein作用后HSC的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA,HSC激活的标志之一)表达的变化.结果 MTT检测显示,10-5~10-9 mol/L 浓度的Genistein作用24、48和72小时对HSC增殖有抑制作用,并以10-7 mol/L的Genistein作用48小时的抑制作用明显.LSCM观察显示,10-6和10-7 mol/L的 Genistein作用48小时可使α-SMA表达明显减弱.结论一定浓度的Genistein能明显抑制HSC的活化和增殖,有可能成为抑制肝纤维化的潜在药物.
作者:王琼;王一平;刘小菁;黄明惠 刊期: 2002年第04期
目的探讨上气道顺应性对气道阻力测值的影响及其临床意义.方法按常规测定110例慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺COPD)及肺心病患者的FVC、(·)/(V)75、(·)/(V)50、(·)/(V)25,同时用阻断法测定其气道阻力Raw.并对其中71例患者进行支撑颊部(降低上气道顺应性)和未支撑颊部时Rawc和Rawu的比较,计算Rawc/Rawu的比值.结果肺通气功能(·)/(V)75、(·)/(V)50、(·)/(V)25的实/预(%)为慢性支气管炎(慢支)组>肺气肿组>肺心病组;Raw测值则为慢支组<肺气肿组<肺心病组.Rawc/Rawu的比值,在慢支、肺气肿、肺心病分别为1.01~1.03(平均1.02)、1.22~1.25(平均1.24)、1.15~1.22(平均1.19).结论对COPD和肺心病患者,用支撑颊部以降低上气道的顺应性,可以改善用阻断法所测的Raw,从而能正确测定Raw值.
作者:黄桂芳;王爱茹;朱启上;陈芙君 刊期: 2002年第04期
目的探讨FHIT基因在宫颈癌发生中的作用及与宫颈癌的临床分期和组织分化程度间的关系.方法选择FHIT基因的2个微卫星多态标记对42例宫颈癌进行杂合性丢失(LOH)和微卫星不稳定性(MI)分析.结果在D3S1234和D3S1300座位上,LOH频率分别为52.5%(21/40)、70.8%(17/24),MI频率分别为22.5%(9/40)、20.83%(5/24).FHIT基因改变与宫颈癌的临床分期和组织分化程度无关.结论 FHIT基因参与了宫颈癌的发生.对于宫颈癌的诊断和筛查可能具有实用价值.
作者:刘辉;彭芝兰;刘珊玲;王和;唐茜萍;何斌 刊期: 2002年第04期
目的探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮(NO)产生中的调节作用.方法取原代培养的大鼠气道上皮细胞用IL-1β(10 ng/ml)或TNF-α(5 ng/ml)处理16小时, 而后用特异性引物RT-PCR研究iNOS mRNA 的表达,用特异性抗iNOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究iNOS 蛋白的表达.NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良Griess法.结果 RT-PCR显示,经IL-1β及TNF-α处理16小时的大鼠气道上皮细胞表达iNOS mRNA. 免疫组织化学提示,IL-1β及 TNF-α可诱导大鼠气道上皮细胞 iNOS蛋白的表达并刺激NO产生,其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高(P<0.01). 结论气道上皮细胞具有表达iNOS 的能力.细胞因子 IL-1β及 TNF-α可诱导大鼠气道上皮细胞 iNOS的表达及NO产生.
作者:李为民;陈文彬 刊期: 2002年第04期
目的研究细胞凋亡及其相关基因在寻常疣皮损中的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测了29例寻常疣皮损中 Bcl-2、Bax及M30 的表达. 结果 M30均阴性,9例(31%)表皮角质形成细胞Bax阳性表达,仅6例(21%) 基底细胞Bcl-2染色弱阳性.结论寻常疣的增殖性改变可能不是由于表皮角质形成细胞凋亡降低引起的.
作者:张谊之;张敏;王琳;李俸媛 刊期: 2002年第04期
目的了解神经生长因子(NGF)在挤压伤脊髓背角表达的变化.方法采用成年SD大鼠(T13-L1)脊髓挤压伤模型并设正常对照组,分别于术后24小时、7天、21天处死动物.取L3节段脊髓制作20 μm厚冰冻连续切片,用抗NGF抗体按ABC法行免疫组织化学染色,观察NGF阳性反应物在正常及挤压伤位点尾侧端(L3)背角的分布,记录其免疫反应强度,计数其免疫阳性神经元和胶质细胞数.结果 NGF阳性反应物主要分布于正常脊髓背角的神经元和胶质细胞.挤压伤后24小时至21天,背角中NGF的免疫阳性细胞数及免疫反应强度均进行性升高(P<0.01).结论脊髓挤压伤后早期,背角NGF的免疫阳性细胞数及免疫反应强度均进行性增加,提示NGF可能在脊髓挤压伤的早期修复中发挥作用.
作者:冯忠堂;朱兴宝;王廷华;马以骝;杨志敏;陈彦红;李明 刊期: 2002年第04期
目的了解人卵巢癌裸鼠移植瘤经CD基因联合5-FC治疗后的变化.方法 10只荷瘤裸鼠随机分为实验组(n=5)和对照组(n=5).实验组将整合有CD基因的复制缺陷的腺病毒0.1 ml[1×1010 pfu(菌斑形成单位)/ml]注入瘤体内,同时将5-FC按每次400 mg/kg注入裸鼠腹腔内.对照组以生理盐水代替病毒液及5-FC溶液,以同体积、同样方法注入裸鼠体内.结束治疗后24小时处死裸鼠.用流式细胞仪测定肿瘤中心及边缘部位细胞凋亡和细胞周期;用CA125标准试剂盒检测肿瘤组织及裸鼠血清CA125值;HE染色观察肿瘤组织及肿大淋巴结的病理表现.结果①治疗前实验组与对照组肿瘤重量分别为1293±342 mg和1267±312 mg,治疗后分别为2231±640 mg和2925±1195 mg,实验组瘤重量小于对照组.②肿瘤病理类型为低分化浆液性乳头状囊腺癌.与对照组相比,实验组肿瘤组织内有较多的炎性细胞浸润及明显的纤维化.另外,对照组裸鼠有2只(2/5)发生肿瘤淋巴结转移,而实验组裸鼠未发生肿瘤淋巴结转移.③实验组肿瘤细胞总的凋亡率为11.96±5.69%,高于对照组的凋亡率(7.65±5.21%)(P<0.05).④实验组与对照组G1期及S期细胞构成比均无统计学差异(P>0.05);实验组G2期细胞的构成比为4.79%,低于对照组的5.88%(P<0.05).⑤实验组与对照组肿瘤组织CA125值分别为2954±1318 U/g和3047±1579 U/g (P>0.05);血中CA125值分别为1092±801 U/ml和2297±802 U/ml(P<0.05).结论 CD基因联合5-FC对人卵巢癌裸鼠移植瘤有治疗作用.
作者:姚远;王和;彭芝兰;刘珊玲;李清丽;姚先莹 刊期: 2002年第04期
目的准确获取人体心电信号(ECG)中的QT间期值.方法利用小波变换多尺度多分辨的特点,将心电信号进行多尺度分解,把不同频带的信号显现在小波分解各个尺度上.特征尺度上准确定位QRS波及T波的起始点,从而获得QT间期的精确值.结果①在2mV的心电信号上引入峰峰值为1mV的误差信号,利用二进小波进行分解和重构得到相对精确的心电波形,测得QRS波、P波、T波的宽度大误差分别为5.75%,5.2%,3.8%.②用小波分析方法对MIT/BIH数据库中的ECG信号进行处理后,测量得到各间期的平均值及标准偏差,可以反映出QT间期及相应各间期的稳定性.结论人体心电信号随着检测状态及时间的变化具有明显的非平稳性及包含许多干扰的特点.利用小波变换将心电信号进行处理能够获得QT间期的精确值,为临床诊断提供了更加准确的依据.
作者:陈春晓;衡彤;刘建业 刊期: 2002年第04期
目的报告提高早期食管癌确诊率和远期生存率的体会.方法对该院1977年1月至2000年4月手术治疗的95例早期食管癌进行回顾性分析.结果本组病例的X线检查检出率为80.0%(76/95)、纤维食管镜检查的确诊率为91.9%(79/86)、食管拉网细胞学检查的确诊率为91.7%(11/12);术后5年、10年、15年及20年的生存率分别为91.4%(53/58)、66.7%(16/24)、60.0%(6/10)和40.0%(2/5).结论高度重视早期食管癌的症状,选择针对性检查方法,必要时采用多项检查方法和定期复查,并结合临床症状进行综合分析,可提高早期食管癌的确诊率.肿瘤的根治性切除是治疗早期食管癌首选方法.术后复发与转移是早期食管癌患者术后死亡的主要原因.对早期食管癌也应按肿瘤外科的原则行食管的次全切除术并常规清扫区域淋巴结.
作者:杨卫平;杨捷生;陈玉泉;陈于平;杨熙鸿;翁鸿锐 刊期: 2002年第04期