归巧娣;任健康;张利侠;赵院利;苍金荣
目的 研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PC-SSP)基因分型技术在ABO疑难血型鉴定中的应用.方法 收集8例来自广东省肇庆市无偿献血者的ABO疑难血型样本,采用正反定型实验、吸收放散试验等一系列血型血清学方法进行检测;提取基因组DNA,并用PCR-SSP基因分型技术,特异性扩增ABO基因片段,根据有无PCR产物以及产物长度,判断样本的基因型.结果 通过凝胶电泳检测PCR反应的特异性产物,判断样本1~6号ABO基因型为A/O型,样本7,8号为B/O型.8例疑难ABO基因分型结果与其血型的血清学分型结果吻合.结论 ABO疑难血型定型的解决是一个复杂的难题,而PCR-SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,对于解决ABO疑难血型鉴定非常有用.
作者:陈志忠;廖扬勋;陈尚良;余文潮;梁剑锋;车京霞 刊期: 2011年第04期
目的 探讨黄芩水提物治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的实验室抑菌作用及有效成分.方法 采用微量半固体琼脂稀释法检测黄芩水提物对119株MRSA的MIC值,同时采用高效液相色谱检测黄芩水提物中黄芩苷含量,制备相同含量的黄芩苷碱溶液并经高效液相色谱验证其黄芩苷含量.比较黄芩水提物及黄芩苷碱溶液对28株MRSA的黄芩苷MIC值差异.结果 黄芩水提物对119例MRSA的MIC90值为7.81 mg/ml,MIC50值为1.95 mg/ml;比较黄芩苷含量相同的黄芩水提物及黄芩苷碱溶液对28株MRSA的黄芩苷MIC值差异,黄芩水提物优于黄芩苷,具有统计学意义(P<0.05).结论 黄芩水提物对MRSA菌有抑菌作用,黄芩苷不是黄芩水提物抑制MRSA的主要有效成分.
作者:归巧娣;任健康;张利侠;赵院利;苍金荣 刊期: 2011年第04期
血栓弹力图(thromboelastograph,TEG)通过动态监测血小板聚集、凝血、纤溶等过程,全面地分析血液凝固及纤溶的全过程,该文旨在通过介绍TEG原理及结果分析,并结合一例经血栓弹力图仪检测发现阿司匹林/氯吡格雷抵抗的病例报道,强调其对临床诊断、治疗的重要指导作用.
作者:王克迪;孔玉华;康熙雄 刊期: 2011年第04期
目的 研制与临床样品基质相似的冰冻人血清HDL-C和LDL-C标准物质.方法 按国家标准物质技术规范,选择身体健康、年龄和性别适当、无传染病的志愿者采取空腹静脉血,离心分离血清,以不同胆固醇水平分成3组,分别混合、除菌过滤和分装.检验血清HDL-C和LDL-C的均匀性和稳定性.分别用DCM法和UC/HPLC法为HDL-C和LDL-C定值.评估不确定度.应用不同分析系统测定三种血清的HDL-C和LDL-C.结果 ①三种血清HDL-C和LDL-C均匀性检验方差分析P值均>0.05,说明均匀性良好.②稳定性研究结果显示血清HDL-C和LDL-C在-80℃保存至少可稳定1年.③三种血清HDL-C和LDL-C的定值±不确定度(mmol/L)分别为1.640±0.028,1.652±0.027,1.184±0.022和4.577±0.097,2.492±0.072,1.788±0.041.④16家临床实验室以各自分析系统测定3种冰冻血清与新鲜血清反应趋势基本一致,HDL-C和 LDL-C均值与定值偏差分别为3.24%,2.7%,4.63%和-2.64%,0.64%,1.08%.结论 3种冰冻人血清均匀、稳定,定值可靠,在常规分析系统中互通性良好,已被国家质量监督检验检疫总局批准为国家一级标准物质(GBW 09178,GBW 09179,GBW 09180).
作者:李红霞;国汉邦;周伟燕;赵海舰;张传宝;董军;王抒;闫颖;陈文祥;申子瑜 刊期: 2011年第04期
目的 建立一种串联质谱法对干血滤纸片中的酰基肉碱进行快速分析,以用于脂肪酸代谢障碍性疾病和有机酸血症诊断及治疗效果的监测.方法 取8种不同浓度的酰基肉碱的干血滤纸片(直径5 mm),用甲醇(含已知浓度的相应酰基肉碱同位素内标)对其进行萃取,不进行衍生化,萃取物过滤后直接进入ESI+-MS/MS上机分析测定;采用多反应监测模式(MRM),以标准品制作标准曲线,同位素内标法定量建立分析方法,进行回收试验、精密度试验、干扰试验及准确度试验.结果 各标准曲线相关系数r2>0.994.低浓度各种酰基肉碱回收率为85 %~103.5%,准确度在91.8%~110.0%;中浓度各种酰基肉碱回收率为85%~96%,准确度在87.6%~110.1%;高浓度酰基肉碱回收率为94%~100.1%,准确度在95.7%~110.1%.实测值与加入浓度之间的相关系数(r)为:0.997~1.000.各种酰基肉碱批内变异系数(CV)1%~10%和批间变异系数(CV)5%~13%.内标液保存1~21天的检测均值均在CDC提供的参考范围内,而批内CV%均<10%.263例0~6岁健康儿童血滤纸片中酰基肉碱浓度因受年龄因素影响,按不同年龄组划分各种肉碱参考范围.结论 非衍生化串联质谱法分析干血滤纸片中的酰基肉碱含量,样本前处理简单,能够达到较高的精确度和准确度,无常规串联质谱中的衍生化、氮吹和复溶等步骤,大大节省了的标本处理时间,是一项简便、快捷、准确的检测方法,可以用于脂肪酸代谢障碍性疾病和有机酸血症诊断及治疗效果监测.
作者:蔡燕娜;彭敏芝;赵小媛;吴冬燕;盛慧英;范莉萍;刘丽 刊期: 2011年第04期
目的 分析医院感染菌鲍曼不动杆菌(ABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生及其耐药特点.方法 应用纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感试验,用三维试验法检测不动杆菌属产生的AmpC酶和ESBLs.结果 69株鲍曼不动杆菌,产ESBLs 18株(26.1%),产AmpC酶17株(24.6%),同时产AmpC酶和ESBLs 4株(5.8%);产AmpC酶菌株对各种抗菌药物的耐药比产ESBLs菌株多.结论 鲍曼不动杆菌产AmpC酶和ESBLs的比例较高,临床应加强与微生物室的联系,科学用药,才能有效控制感染.
作者:乔亚峰;叶振东;张国雄;范晓怡 刊期: 2011年第04期
目的 探讨检测血清葡萄糖-6磷酸异构酶(GPI)在类风湿关节炎中的诊断价值.方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附试验ELISA法检测130例RA患者、79例其他自身免疫性疾病患者和54例健康对照者血清中的GPI浓度,并同时检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF),RA组还同时检测了C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)以及RA患者的手足X线片检查.结果 RA患者血清中GPI浓度显著高于其他风湿病组和健康对照组(P<0.05);GPI在类风湿关节炎患者中的阳性率为67.1%,特异度为94.7%;抗CCP抗体阳性率为71.5%,RF阳性率为75.4%.130例RA患者GPI阳性率与抗CCP抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),GPI阳性率与RF阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),GPI与疼痛关节数和关节肿胀有相关性.结论 GPI有可能成为检测RA的又一个独立而敏感的新指标,从而提高RA诊断的敏感性和可靠性,具有较好的临床研究及应用价值.
作者:卢春利;刘小玲;闻苗苗;白惠霞;安沛欣;赵婵媛;郑静芬 刊期: 2011年第04期
目的 设计马内菲青霉菌特异性引物,探讨马内菲青霉菌病早期诊断的方法及抗生素治疗的药物选择.方法 马内菲青霉菌按常规方法放在25℃和37℃进行真菌培养;参照NCCLS M27-A,M38-P对3株马内菲青霉菌的酵母相和菌丝相进行小抑菌浓度(MIC)测定;PCR的鉴定采用马内菲青霉菌18S rRNA的特征序列,设计内引物Pm1,Pm2和外引物FSF,FSR进行巢式-PCR扩增,并对产物进行产物鉴定.结果 马内菲青霉菌为双相性真菌,25℃为青霉相,在沙保弱琼脂平板上产生具有特征性的红色色素,37℃为酵母相,无色素产生;微量稀释法比较马内菲青霉菌在25℃菌丝相和37℃酵母相时的MIC值,结果显示伊曲康唑敏感性强,其次是酮康唑、5-氟胞嘧啶和氟康唑,弱的为二性霉素B;3株马内菲青霉菌经巢式-PCR扩增后大约有400 bp片段,其他真菌如白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、曲霉菌则没有.结论 巢式-PCR可以快速鉴定马内菲青霉菌,48 h培养的单个菌落、10 h可以鉴定出结果,而培养则需4~7 d,巢式-PCR对马内菲青霉菌病早期诊断有重要的临床指导意义.医生应结合临床症状及早应用抗真菌药物.
作者:周俊英;涂建成;郭清莲 刊期: 2011年第04期
目的 探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血清铁(Fe)、转铁蛋白(TRF)、铁蛋白(SF)和尿转铁蛋白(UTF)的变化与临床意义.方法 89例DN患者采用免疫化学发光法测定SF,TRF和UTF,免疫比浊法测定胱抑素C(CysC)和尿微量清蛋白(mAlb)及化学法测定血清Fe,并与42例2型糖尿病非肾病患者和55例健康体检者比较.结果 2型糖尿病伴肾病组血清Fe,SF,TRF,CysC,UTF和mAlb均显著高于非肾病组和健康对照组(P<0.01);DN患者组血清Fe,SF,TRF,UTF与CysC和mAlb呈正相关(P<0.01).结论 DN患者体内存在以血清Fe,TRF和SF增高为主的铁超负荷,血清Fe,SF,TRF和UTF可作为糖尿病肾损害的早期监测指标.
作者:毛达勇;喻飞;张吉才 刊期: 2011年第04期
目的 探讨HBV-LP(乙肝病毒大蛋白)阳性患者CD4+CD25+Treg细胞数量的变化规律及其意义.方法 将HBV感染者标本,采用ELISA方法检测HBV-LP,PCR方法检测HBV-DNA,按照HBV-LP阴、阳性患者及正常血清共170例,其中男87例,女83例,平均年龄43(23~61)岁.分成四个实验组,第一组为HBV-LP阳性46例,第二组为正常组(非HBV感染者)50例,第三组为HBV-LP阴性及HBV-DNA阴性HBV感染者43例,第四组为HBV-LP阴性而HBV-DNA阳性的HBV感染者31例.各组之间在性别、年龄上分布均衡,差异无统计学意义.各组分别采用淋巴细胞分离液梯度离心法分离研究对象外周血,FCM术检测CD3+T,CD4+T,CD8+T,CD4+CD25+Treg细胞数量,进行分析.结果 ①各实验组之间CD3+T,CD8+T细胞数量无显著性差异,各组CD3+T分别为(65.38±4.85)%,(67.07±5.04)%,(64.94±5.26)%,(63.58±4.81)%(P>0.05),CD8+T分别为(53.41±4.28)%,(54.71±5.05)%,(54.09±5.13)%,(52.59±4.88)%(P>0.05).②结果以CD4+CD25+Treg来评价:HBV-LP阳性组(5.22±1.81)%分别高于正常对照组(3.13±1.12)%,HBV-LP阴性及HBV-DNA阴性组(3.24±1.22)%,HBV-LP阴性而HBV-DNA阳性组(3.23±1.61)%(P<0.01),而HBV-LP阳性组CD4细胞数量(32.63±3.93)%却低于其他三个实验组(39.32±5.55%),(37.53±4.72)%,(34.03±5.71)%,差异有统计学意义(P<0.05),③值得注意的是,HBV-DNA阳性而HBV-LP阴性组的各项指标几乎与正常组十分接近,之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 HBV-LP阳性的HBV感染者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平明显增高,CD4+CD25+Treg细胞的过度表达在乙肝的发病机制及病程的转归中可能起着重要的作用.
作者:熊建辉;付汉维;王贵萍 刊期: 2011年第04期
目的 探讨甲型H1N1轻症患者心酶谱与正常人群、普通流感人群的变化以及中西医治疗后心酶谱是否存在差异,为指导临床用药与传染性防治提供科学依据.方法 采用426例随机对照试验(RCT)研究受试者使用荧光PCR进行甲型H1N1流感病毒核酸检测确证后的281例甲流病例,与40例体检正常人群作为健康对照组,在罗氏Modular生化分析仪上做血清酶学检查.结果 甲型H1N1流感轻症患者CK,AST,LD明显高于正常对照组(P<0.05),CK-MB与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);与其他流感患者心酶谱比较差异无统计学意义(P>0.05);纯中医治疗组与西医对症治疗组心酶谱差异无统计学意义(P>0.05).结论 甲型H1N1患者发病早期心酶谱的异常提示患者有一定的心脏损伤,应引起临床重视.
作者:石汉振;卢传坚;郑智明;黄宪章;庄俊华;邓华;温泽淮 刊期: 2011年第04期
目的 为了解广州地区健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌的带菌情况及耐药性.方法 用鼻咽拭子法采集1 052名3~5岁广州市幼儿园健康儿童鼻咽分泌物进行金黄色葡萄球菌分离培养,采用K-B法检测178株金黄色葡萄菌对替考拉宁、头孢西丁、阿米卡星、环丙沙星、头孢唑啉、氨苄/舒巴坦、青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素、头孢他啶、四环素、复方新诺明等13种抗菌药物的耐药性;用E-Test法检测178株金黄色葡萄菌对万古酶素的耐药性.结果 健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌带菌率为16.9%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为0%,对万古霉素、替考拉宁、头孢西丁、氨苄/舒巴坦、阿米卡星、头孢唑啉和复方新诺明的耐药率均为0%,对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢他啶、四环素、庆大霉素的耐药率分别为91.1%,74.3%,25.7%,25.7%,4.3%和2.9%.结论 健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌带菌率不高,其中MRSA比例及对14种药物的耐药性明显低于上呼吸道感染患儿所带金黄色葡萄球菌.
作者:李彩金;邓秋连;谢永强;黄勇;钟玉葵 刊期: 2011年第04期
目的 分析IFCC原始参考方法与临床常规方法测定血清肌酸激酶结果的相关性,并探讨血清CK测定结果的准确度与一致性.方法 依据IFCC的参考测量程序建立CK酶活性测定的参考方法,用参考方法测定ERMR-AD455CK参考品,验证方法的准确性,并对其精密度进行方法学评价.按照NCCLS EP9-A方案进行参考方法与临床常规方法CK检测结果的比较.分析两种方法间的相关系数和允许偏差.结果 参考方法与临床常规方法CK检测结果相关性良好,回归方程Y=0.967X-2.339 7,r2=0.998 7,系统误差(SE)在CLIA'88的误差允许范围内.结论 该室CK的参考方法已建立,临床常规方法与参考方法间比对,验证提高了临床血清CK测定结果的准确性和一致性.
作者:周铁成;张莹;童开;郝晓柯 刊期: 2011年第04期
目的 个性化建设适合实验室的实验室信息管理系统.方法 根据实验室布局、仪器分布,合理建设网络硬件系统,统筹配置工作站;根据实验室自身检验工作特点选择适合该实验室的软件,系统化建设LIS系统.结果 实验室LIS系统的建设,在满足临床检验工作需要的基础上,尽可能体现实验室自身特点,以方便、快捷、个性为宗旨.结论 建设实验室的个性化LIS系统要重软件轻硬件,重应用轻系统,选择合适的应用软件.
作者:刘波;李守霞;王蕾;赵志敏;张利宾;李海新 刊期: 2011年第04期
目的 建立流式细胞仪检测恶性肿瘤患者白细胞上CD35分子表达的实验方法.方法 选择36例恶性肿瘤患者及25例健康人血标本,流式细胞仪检测其粒细胞及淋巴细胞上CD35的表达.结果 恶性肿瘤患者粒细胞、B细胞及辅助T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显降低(P<0.01);而抑制T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显升高(P<0.01).结论 建立流式细胞仪检测恶性肿瘤患者白细胞上CD35分子表达的实验方法,为恶性肿瘤的诊断、疗效观察及判断预后提供科学而先进的检测手段.
作者:乔军;李如森;张洁 刊期: 2011年第04期
目的 探讨临床生化检测中交叉污染的原因与对策.方法 用全自动生化分析仪进行样品交叉污染和试剂交叉污染的分析.结果 临床生化检测中交叉污染对临床结果有较大的影响,必须采取一些预防措施.结论 综上所述,检验人员进行临床生化检测时,要想得到正确可靠的结果,不但要熟练掌握仪器操作,对仪器要精心维护和保养,也要了解各反应的原理,试剂组成等,更要注意试剂间、项目间的交叉污染,并根据不同仪器工作特点来制定相应的措施来消除交叉污染,从根本上保证实验数据的可靠性,为临床提供客观真实的诊疗依据.
作者:竺蓓 刊期: 2011年第04期
目的 通过检测唐氏综合征(DS)孕妇血浆中的游离胎儿DNA(fDNA)含量,探讨实时荧光定量PCR技术用于产前诊断唐氏综合征的可行性.方法 选择DS男胎孕妇6例、DS高危男胎孕妇31例、正常男胎孕妇32例,用QIAamp DNA Blood Kit提取孕妇血浆中fDNA,并用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain-reaction,FQ-PCR)方法对孕妇血浆中胎儿DNA的含量进行检测并比较,以Y染色体上的SRY基因作为男性fDNA的标记物.结果 DS孕妇组、DS高危孕妇组与正常孕妇组相比,孕妇血浆中DNA的含量拷贝数分别为140.82±50.47 copies/ml,82.08±25.47 copies/ml和56.34±15.52 copies/ml.组间两两比较,差异有统计学极显著性意义(t=2.815,P<0.01).结论 孕妇血浆中游离fDNA定量检测可以作为产前筛查DS的候选靶标.
作者:汤冬玲;李栋;邵华 刊期: 2011年第04期
C反应蛋白(CRP)是由肝脏合成的急性时相蛋白,具有多种生物活性,能识别并清除各种病原体或机体受伤坏死的细胞.在细菌感染、心血管疾病、恶性肿瘤等方面具有重要临床意义.儿童肺炎是小儿常见疾病,如何早期明确是否细菌感染、是否需要抗生素治疗显得尤为重要.该文就CRP在小儿肺炎诊断上的进展做一综述,并简要介绍CRP在临床其他方面的应用.
作者:蔺婧;焦富勇 刊期: 2011年第04期
目的 研究银屑病患者皮损中IL-6和MMP-9表达水平,阐明其在实验室检测中的意义.方法 采用免疫组化法对20例进行期银屑病皮损标本和20例对照组标本中IL-6和MMP-9的表达量检测并进行比较.结果 进行期银屑病皮损IL-6和MMP-9表达分布分别与对照组相比差异有统计学显著性意义(χ2=36.19,χ2=40.0,P<0.01) ;IL-6和MMP-9的表达与银屑病分级有关(P< 0.01);IL-6和MMP-9的表达之间呈正相关(r=0.984).结论 IL-6和MMP-9可作为进行期银屑病皮损的实验室诊断重要指标之一.
作者:刘雪峰;侯卫红;田刚 刊期: 2011年第04期
AUTOLAB-18全自动生化分析仪是由意大利医学分析仪器集团生产,仪器检测结果的准确性、重复性、稳定性等方面均很理想[1],因此在国内外用户很多.笔者在应用该仪器做淀粉酶测定的过程中,探索出一种节省试剂的方法,本文就此方法作一介绍,供使用该仪器的同行参考.
作者:孙志强 刊期: 2011年第04期