王华;苏宝凤;苍金荣
目的 分析两种不同原理的凝血仪检测PT和INR值的差异.方法 以Sysmex1500凝血仪为比对方法,Stago compact凝血仪为实验方法,检测50例体检健康者和患者新鲜血浆的PT和INR值,判断两个检测系统间测定结果的可比性.结果 两种不同原理的凝血仪PT值在11~16 s范围内,PT值的相对偏倚(SE%)分别为6.2%和7.3%,INR值在1.5处的相对偏倚为4.3%,<1/2允许误差;但在医学决定水平20 s处PT值的相对偏倚(SE%)为7.8%,INR值在3.0处的相对偏倚为14.4%,>1/2允许误差,偏倚不能接受.结论 实验室应定期对凝血仪的分析性能进行评估并建立不同原理凝血仪的参考值范围,好对来自临床不同科室的样本固定仪器检测,以免两仪器间的结果不同而误导临床诊断治疗.
作者:李芒会;李亚娥 刊期: 2012年第05期
目的 探讨多药耐药基因GST-πmRNA在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测53例新鲜胃癌组织标本(实验组)和15例正常胃黏膜组织(对照组)中GST-π基因的表达,并分析其表达与胃癌病理特征之间的关系.结果 ①53例胃癌组织中GST-πmRNA的表达(0.56±0.27)要高于15例正常胃黏膜组织的表达(0.18±0.13) (t=5.30,P<0.001).②GST-πmRNA的表达与胃癌的分化程度之间差异具有统计学意义(t=2.67,P=0.01),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间、是否淋巴结转移差异无统计学显著性意义.结论 ①GST-πmRNA的高表达可能是胃癌产生多药耐药的机制之一;②GST-π的检测对临床制定化疗方案有一定指导意义.
作者:胡秀学;刘跃;王鹏;何月;李鑫;高波;杜娟 刊期: 2012年第05期
目的 利用Urisys2400尿液干化学分析仪分析探讨亚硝酸盐项目在尿液干化学分析人工显微镜复检筛选规则中存在的意义.方法 ①对参加实验的两位检验师进行随机标本双盲法人工显微镜检查,评价两者一致性.②用Urisys2400尿液干化学分析仪和KOVA尿液专用计数板人工显微镜检查同时对每日随机尿液标本进行检查.③采用SPSS 13.0软件进行McNemar检验和Kappa检验评价两个检验师人工镜检一致率;用χ2检验进行三联组合(红细胞-ERY,白细胞-LEU,尿蛋白-PRO)和四联组合(红细胞-ERY,白细胞-LEU,尿蛋白-PRO,亚硝酸盐-NIT)的灵敏度、特异度、假阴性(漏检率)、假阳性(复检率)差异统计,差异有统计学显著性意义(P<0.05).结果 ①两位检验师显微镜检查结果差异无统计学显著性意义(P>0.05,κ>0.70).②Urisys2400尿液干化学分析仪的三联组合和四联组合筛选方法差异无统计学显著性意义(χ2=1.09,P>0.05).③检查结果中NIT和LEU同时阳性者230例(占NIT阳性总例数的74.2%);NIT和ERY同时阳性者95例(占30.6%);NIT和PRO同时阳性者90例(占29.0%);单NIT阳性者70例(占22.6%).结论 亚硝酸盐项目在尿液干化学分析人工显微镜复检筛选规则中存在的意义不大,选用四联规则与三联规则相比,灵敏度没有提高,特异度有所降低,复检率增高.
作者:任军伟;陈建魁;丛玉隆 刊期: 2012年第05期
目的 探讨富血小板血浆量、采血量与抗凝剂比例对血小板聚集检验结果的影响.方法 采集72例健康志愿者静脉血标本,枸橼酸钠抗凝(1∶9),离心分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP),2只血小板聚集杯分别加PRP 300 μl和500 μl,进行血小板聚集率检测;采集同量枸橼酸钠抗凝不同量静脉血(1∶10~1∶3)14例,离心分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP),采用血浆比浊法,进行血小板聚集率检测.所得数据分别采用单因素配对t检验和方差分析进行统计分析.结果 花生四烯酸(AA)诱导,PRP 300 μl和500 μl的血小板聚集率分别为(57.0±33.6)%和(58.3±35.3)%,二磷酸腺苷(ADP)诱导,PRP 300 μl和500 μl的血小板聚集率分别为(62.3±18.7)%和(59.6±18.7)%,均P>0.05;血浆Ca2+浓度在0.11~0.04 mmol/L时,AA和ADP诱导的血小板聚集率分别为(81.1±3.9)%~(26.4±27.01)%和(67.3±17.8)%~(8.6±11.1)%,血小板聚集率随Ca2+浓度的降低而降低,其中ADP诱导血小板聚集明显,在Ca2+浓度0.08 mmol/L时聚集率明显下降.结论 富血小板血浆用300 μl测血小板聚集率对血小板聚集检验结果影响不明显;Ca2+浓度对血小板聚集检验结果有明显影响,血小板聚集率随Ca2+浓度的降低而降低,常规血小板聚集实验血浆Ca2+浓度应在0.09~0.11 mmol/L之间.
作者:李祖兰;马长生;陈兴明;邹有丽;白洁;邓新立;李健;杨亮程;陈冠军;丛玉隆 刊期: 2012年第05期
目的 利用杆状病毒表达系统表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a(PBP2a).方法 用EcoR I和BamHⅠ双酶切pGEMT-mecA重组质粒DNA,回收目的 基因mecA,与pFastBac1质粒连接转化入含有穿梭载体bacmid的大肠埃希菌DH10Bac中,筛选重组穿梭载体Bacmid-mecA并转染Sf9细胞,获取完整的重组杆状病毒.用免疫荧光(IFA),Western blot法进行蛋白鉴定.结果 成功地获得含mecA基因的重组杆状病毒.杆状病毒感染Sf9细胞形态变化明显,能够表达出与PBP2a多克隆抗体相结合的蛋白.结论 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功地表达了PBP2a蛋白.
作者:邹玉涵;朱祖怀;闫佩毅;朱元;黄德魁;朱晴晖;金姝 刊期: 2012年第05期
目的 探讨需氧菌阴道炎(AV)联合测定试剂盒(AV法)对AV的诊断效能及临床价值.方法 用AV法和AV评分标准法对妇科门诊就诊1 150例患者的阴道分泌物进行测定,结果做对比分析.结果 以AV评分标准法作为金标准,AV法检测AV的敏感度为90.30%,特异度为97.93%,准确度为97.04%,阳性预测值为85.21%,阴性预测值为98.71%,经χ2检验,结果差异无统计学意义(χ2= 1.44,P>0.05),二种方法的检测结果一致性较高(Kappa值为0.86).结论 AV法简便、快速,其结果与AV标准法有很好的一致性,是一种值得推广的临床诊断AV的常规方法.
作者:唐燕 刊期: 2012年第05期
目的 建立一种简单、准确的血细胞分析仪性能评价方法.方法 依据CLIA'88规定的实验结果总允许误差(Tea%),用室间质量评价平均偏倚(Bias%)和室内质控变异系数(CV%),在Excel中用X,Y轴散点法作方法决定图(MD)、方法决定总图.结果 5个评价项目X,Y数据点分别为:红细胞(0.95%,2.05%)、血细胞比容(1.44%,0.63%)、血红蛋白(0.96%,3.63%)、白细胞(1.95%,0.19%)、血小板(5.45%,5.93%);方法决定总图5个数据点分别为:(15.83%,34.15%),(24.00%,10.47%),(137.10%,51.83%),(13.00%,1.24%),(21.80%,23.74%).结论 方法决定图评价仪器性能简单、准确,值得临床推广,迈瑞BC-5300血细胞分析仪性能良好.
作者:万延川;周雪宁;权志博 刊期: 2012年第05期
目的 了解各种轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女全血中Cu2+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Fe2+5种金属元素含量,为评价轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女营养状况及孕前合理补充金属元素提供依据.方法 对2010年6月~2012年3月经基因诊断的52例静止型、68例标准型α珠蛋白生成障碍性贫血、42例β珠蛋白生成障碍性贫血杂合子育龄妇女以及80例健康育龄妇女全血的Cu2+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Fe2+含量通过原子吸收光谱法进行检测和统计学分析.结果 各珠蛋白生成障碍性贫血组间全血Fe2+含量差异无统计学意义(P>0.05),但均明显低于健康对照组(P<0.05);全血Cu2+,Ca2+,Mg2+各组间含量差异无统计学意义(P>0.05);全血Zn2+含量除标准型α珠蛋白生成障碍性贫血和β珠蛋白生成障碍性贫血杂合子组明显低于健康对照组(P<0.05)外,其余各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女相比于正常妇女更容易缺铁和缺锌,应加强全血Fe2+和Zn2+的营养监测与干预.
作者:冯瑶;黄钰君;赵旦;伍绍国 刊期: 2012年第05期
目的 观察丙型肝炎患者HCV RNA载量与病毒学应答及转氨酶、胆红素含量的变化,探讨其相互关系及意义.方法 回顾性分析2011年1月~2012年3月间长海医院门诊就诊和住院的103例丙型肝炎患者资料,其中男64例,女39例,年龄18~70岁.应用实时荧光定量PCR检测治疗前、治疗后4,12,24和48周血清中HCV RNA水平,肝功能酶学和胆红素指标(ALT,AST及TBIL,DBIL).根据治疗前HCV RNA含量高低与病毒学应答与否分为高载量应答组、高载量无应答组和低载量应答组.结果 18例低HCV RNA载量的患者治疗后均有病毒学应答.高载量应答组ALT,AST治疗前显著高于其他两组(P<0.01),治疗后迅速下降,而后保持在正常水平;低载量应答组ALT,AST始终在正常范围内;而高载量无应答组ALT,AST治疗前后下降不明显,始终在高于正常范围波动.高载量无应答组治疗前DBIL显著高于有应答的两组(P<0.01),且治疗期间持续高于正常范围;TBIL虽也升高,但与高载量应答组比较差异有统计学显著性意义(P<0.01),与低载量应答组比较差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 高HCV RNA载量的患者,伴ALT,AST显著升高,病毒学应答较好;而ALT,AST轻微升高,且伴有DBIL显著升高者病毒学应答常常较差.低HCV RNA载量的患者均有病毒学应答,其病毒学应答与肝功能酶学和胆红素值无明确相关.
作者:方超萍;张薇薇;孙小波;张军;卫涛;秦琴;张倩;谷明莉;贾音;邓安梅 刊期: 2012年第05期
目的 检测IL-35在结核患者肺泡灌洗液中的表达.方法 80例诊断为进展期肺结核患者全部采用支气管镜检查,收集肺泡灌洗液和外周血,淋巴细胞分离液分离其中的单个核细胞,经50 μg灭活的结核杆菌提取物刺激36 h后,采用ELISA方法检测结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞分泌细胞因子IL-35的水平,实时荧光定量PCR方法检测IL-35的两个亚单位IL-12a和EBI3的mRNA水平,Western blot检测IL-35的亚单位EBI3的蛋白表达水平;多色流式细胞术检测细胞调节性T淋巴细胞水平.结果 进展期结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞培养上清中IL-35的水平是76.6±20.1 pg/ml,显著高于患者的外周血(t=23.07,P<0.01),Western blot能够检测到肺泡灌洗液单个核细胞培养上清中EBI3的条带,而外周血培养上清中未能检测到.IL-12a的mRNA水平较外周血增高约6倍(t=18.02,P<0.01),EBI3的水平较外周血增高约9倍(t=17.85,P<0.01).肺泡灌洗液中Treg细胞的比例(12.6%±3.3%)显著高于外周血(4.2%±1.8%),(t=12.24,P<0.01).肺泡灌洗液中Treg细胞表达EBI3的水平显著高于外周血Treg.结论 进展期肺结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞(主要是Treg)分泌表达IL-35,IL-35可能在结核患者的细胞免疫中起到调节作用.
作者:丁春梅;张军;胡成进 刊期: 2012年第05期
目的 使用地塞米松干预,动态观察出血性脑卒中患者白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化,探讨其在出血后继发性脑损伤中的作用.方法 采用ELISA法测定出血性脑卒中患者50例常规治疗组和50例常规治疗加地塞米松治疗组术后第1天、第3天、第7天、第10天血清中IL-6和TNF-α含量水平,并对两组患者预后生活质量进行比较.结果 两组患者术后第1天常规治疗组IL-6:134.73±29.64 μg/L,TNF-α:57.62±5.13 μg/L,地塞米松治疗组IL-6:136.65±31.56 μg/L,TNF-α:56.84±5.03 μg/L,二者相比差异无显著性意义(t=1.06,1.14,P>0.05);与正常对照组(IL-6:27.84±7.76 μg/L,TNF-α:40.27±4.85 μg/L)相比差异显著(t=5.29,4.41,P<0.001);术后第3天常规治疗组IL-6:120.51±30.75 μg/L,TNF-α:59.24±4.72 μg/L,地塞米松治疗组IL-6:108.47±26.73 μg/L,TNF-α:46.75±4.64 μg/L,二者相比差异显著(t=2.42,2.35,P<0.05);第7天常规治疗组IL-6:70.65±17.73 μg/L,TNF-α:50.62±5.11 μg/L,地塞米松治疗组IL-6:58.16±14.65 μg/L,TNF-α:41.64±5.01 μg/L,二者相比差异显著(t=2.81,2.76,P<0.05);第10天常规治疗组IL-6:34.52±8.92 μg/L,TNF-α:46.27±4.43 μg/L,地塞米松治疗组IL-6:28.17±7.45 μg/L,TNF-α:40.89±4.27 μg/L,二者相比差异显著(t=2.34,2.56,P<0.05).两组患者在入院时神经功能缺损评分(NDS常规治疗组37.12±4.56,地塞米松治疗组38.05±4.72)和日常生活质量评分(ADL)常规治疗组67.35±8.95,地塞米松治疗组69.02±7.74,差异无显著性(t=0.98,0.79,P>0.05),出院时两组患者NDS(常规治疗组26.13±3.89,地塞米松治疗组16.74±3.26)和ADL(常规治疗组45.43±6.77,地塞米松治疗组38.64±5.49)比较差异显著(t=3.54,2.96,P<0.01).结论 IL-6,TNF-α介导了出血性脑卒中患者的炎性反应,有效控制其含量,对于减少出血性脑卒中后继发性脑损伤和提高患者生存能力具有积极的意义.
作者:秋楠;党小军;刘晓斌;王继军;黄卫东;缪星宇;许彦钢;杨军;张越林 刊期: 2012年第05期
目的 研究汉中地区血清学方法检测表现RhD阴性个体的RHD基因多态性分布状况.方法 应用PCR方法检测RhD阴性表型的个体,对特殊样本进行测序分析.结果 在351例样本中,检出d/d基因型248例,占70.7%;DEL型67例,占19.1%;RHD-CE(2-9)-D/d融合基因型22例,占6.3%;DⅥ,Ⅲ型7例,占2.0%,高于国内其他地区;弱D-15型、弱D25型和Dva型各1例;弱D33型和RHD711delC各2例;DEL血型个体中具有C抗原者比例较高,但亦有C抗原阴性表型存在;首次在中国报道发现弱D25型和弱D33型.结论 阴性表型个体中主要的RHD基因阳性个体是DEL型,对汉中地区Rh阴性无偿献血者D基因多态性进行研究,揭示了Rh阴性个体D基因多态性,既有临床意义,也有遗传学意义.
作者:丁珂;徐强 刊期: 2012年第05期
利用Excel表格,做一套微生物实验室K-B法药敏自动判读软件,输入药物的抑菌环直径时,软件会自动判断该药物的敏感度.纸片扩散法(K-B)法,是临床微生物实验室进行常规药敏试验时使用多的方法.其优点:技术简单,重复性好;试验成本相对较低,不需要特殊设备;药物选择灵活;结果(敏感、中介和耐药)临床医生易理解.其缺点之一是:在判断药物的敏感度时,要查CLSI表,费时费力,且易产生错误.该文基于K-B法查CLSI表比较费时,且容易产生错误的缺点,做一款自动判读软件,当输入抑菌环直径时,计算机根据预设公式自动判读,方便、快捷、准确,大大提高了工作效率.
作者:郑枭剑 刊期: 2012年第05期
目的 了解川西地区细菌耐药状况.方法 收集川西地区18家医院2011年分离的病原菌进行鉴定和药敏试验,并对细菌耐药性进行分析.结果 共获得临床分离菌20 079株,其中革兰阳性菌5 625株,占28.0%,革兰阴性菌14 454株,占72.0%.革兰阳性菌中,以金黄色葡萄球菌为多,共1 867株,占阳性菌的33.2%;革兰阴性菌中,分离的大肠埃希菌多,共3 185株,占阴性菌的22.0 %.排名前5位的菌种依次为:大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和金黄色葡萄球菌.药物敏感性结果统计分析显示:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的发生率分别为46.3%和87.1%;未发现万古霉素耐药葡萄球菌.粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素耐药率分别为0.7%和4.0%;未发现利奈唑胺耐药肠球菌.革兰阴性菌中,非发酵革兰阴性杆菌整体耐药率较高,其中,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为54.9%和19.7%.肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对喹诺酮类保持较高的敏感性,敏感率>85%.结论 川西地区细菌耐药现象较为严重,但对某些抗生素的耐药性具有地域差异性.
作者:刘敏;邓瑛;张峻梅;杨莉莉 刊期: 2012年第05期
目的 应用6σ质量管理体系对临床定量检验项目质量进行评估,根据sigma水平可以对质控规则进行合理选择,为医学实验室提供了质量改进的客观依据.方法 对该实验室常规开展的32项临床化学项目,利用室内质控得到的平均CV和卫生部EQA获得的偏倚计算sigma值.结果 该室参加质控的32个检验项目其中18个检验项目的 性能达到6σ水平,占检验项目的 56.3%;5个项目达到5~6σ水平,占总项目的 15.6%,5σ水平以上可以采用单一的质控规则;3个项目达到4~5σ水平,占总项目的 9.4%;6个项目在4σ水平以下,占总项目的 18.7%,需采用westgurd多规则控制质量.结论 应用6σ质量管理体系进行评估临床定量检验质量及室内质控规则设计等以实现实验室质量改进的过程中,6σ体系依据数据进行决策,以实际调查的数据作为分析基础,在建立目标、确定关键因素以及提出改善方案上有更强的客观性和说服力.
作者:赵建忠 刊期: 2012年第05期
目的 探讨福州地区妇女人乳头瘤病毒(HPV)感染的分布特点及主要型别,为福州地区宫颈癌防治及流行病学研究提供一定依据.方法 采用PCR-反向点杂交法基因芯片技术,对2010年8月~2011年8月769例门诊妇女进行HPV基因分型检测,以了解福州地区HPV感染的年龄和亚型分布.结果 769例妇女中HPV阳性381例,阳性率49.5%,HPV感染的高峰年龄段为36~40岁,各年龄段HPV感染的阳性检出率差异有统计学显著性意义(χ2=33.02,P<0.01).23种HPV亚型中,检出21种.单亚型感染主要为HPV16,58,6,多亚型感染主要为HPV16,52,58.高危型HPV感染率从高到低依次为:16亚型占21.0%;58亚型占17.6%;52亚型占13.4%;18亚型占8.7%;31亚型占5.8%.低危型HPV感染主要为6亚型,占12.1%和43亚型占11.5%.结论 福州地区妇女高危型HPV感染主要以16,58,52,18,31亚型为主,低危型HPV感染主要以6,43亚型为主.36~40岁妇女为易感人群.
作者:林伟;徐桂秋;刘洁 刊期: 2012年第05期
目的 研制HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品应用于实时荧光PCR检测分析的室内质量控制.方法 采用HPV(6/11)型和HPV(16/18)型荧光定量PCR诊断试剂盒,对患者的分泌物进行FQ-PCR检测.提取双阳性分泌物,经适当灭活后,将HPV(6/11),(16/18)型核酸模式的阳性混合标本经过回收、防腐、调剂及分装等流程,制成中、高值各3个批次的质控品,完成校准和比对试验.分别进行不少于6个月的室内质控检测,观察其稳定性,确定其靶值,计算s,CV,绘制质控图.结果 各批次质控品前6个月的HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品相对稳定(P<0.05),质控物高低值的变异范围分别为1.99%和2.61%(CV<5%),批间差CV<10%,稳定性好.结论 HPV型模式的阳性混合标本制备定量检测的HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品的稳定性好,可用于HPV(6/11),(16/18)型核酸荧光定量的PCR诊断的室内质量控制,测定结果能反应标本的真实性,有一定的临床实用价值.
作者:裴兵 刊期: 2012年第05期
目的 探讨影响糖化血红蛋白(HbA1c)测定的影响因素.方法 同时用4种临床常用真空抗凝管空腹采集38例糖尿病患者的静脉血,在HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪上测定不同保存条件、保存时间及用新鲜蒸馏水、生理盐水及5 g/dl葡萄糖水按1∶1稀释后的HbA1c水平.结果 EDTA-K2、肝素锂、枸橼酸钠1∶4和枸橼酸钠1∶9抗凝后的全血即时HbA1c水平分别为(8.37±2.43)%,(8.62±2.63)%,(8.78±2.53)%和(8.31±2.49)%,不同抗凝剂采血管间HbA1c水平无明显差异(P>0.05).4℃室温-20℃保存至72 h血中HbA1c水平差异无统计学显著性意义,但用新鲜蒸馏水、生理盐水及5 g/dl葡萄糖水按1∶1稀释后的HbA1c水平明显高于稀释前(P<0.05).结论 用患者近3日内的抗凝血检测HbA1c没有明显影响,临床一定要按规范程序采血,否则,标本稀释后检测HbA1c结果明显偏高.
作者:曹晶晶;彭俊华;殷瑞鹏;朱晓红;王正;常亚丽 刊期: 2012年第05期
目的 探讨液流荧光技术在临床检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)中的应用,并与电化学发光技术检测结果进行比较和评价.方法 利用Luminex200和Cobas e-411两台仪器检测30例健康对照者外周血清中AFP与CEA含量,计算两种方法的检测阈值,同时检测41例乙肝患者的AFP与CEA含量,分析两种检测结果的一致性及相关性.结果 Luminex200与Cobas e-411的AFP与CEA的正常检测限分别为6.57,2.81 ng/ml与4.19,2.38 ng/ml.t值分别为2.799和1.485,P值分别为0.007和0.142 9.以Cobas e-411仪器作为参考仪器,Luminex200的AFP与CEA检测的灵敏度、特异度和准确度分别为94.4%,97.1%,95.8%与97.3%,88.2%,92.9%.两台仪器的相关性分析结果显示,AFP的相关系数达0.9以上,CEA的相关系数0.8左右.结论 AFP和CEA在两种仪器的检测结果有各自的正常检测限,检测结果虽相关性较好,但不同仪器不同试剂不同溯源,必须使用各自的正常值范围,检验单必须注明仪器方法,检验结果的互认好建立在同类仪器同种方法相同溯源的基础上.Luminex200以Cobas e-411为参考,具有较高的灵敏度、特异度和准确度,而且该仪器具有高通量特性,可以根据检测项目的 需求进行组合,在临床检测和科研上具有独特的优势,在实际操作上简便快捷,标本用量少,便于推广.
作者:胥萍;陈慧;周晓玲;吴敏娟;陈永井 刊期: 2012年第05期
目的 研究氟达拉宾(fludarabine,FDB)联合格列卫(STI571)诱导对慢性粒细胞白血病(CML)细胞株K562耐药性的影响.方法 通过逐步增加STI571的浓度诱导培养耐药性K562-R细胞,在STI571存在的情况下,用不同浓度(0,1,2,3,4,5 μmol/L)的FDB药物处理K562-R细胞,作用24 h后,收集细胞,进行Hoechst细胞染色计数,流式细胞仪检测肿瘤多药耐药基因MDR-1的表达,实时定量PCR(RT-PCR)检测 bcr-abl融合基因,细胞形态观察,western blot检测相关凋亡蛋白的表达.结果 成功得到K562-R细胞株,该细胞可以在浓度为0.8 μmol/L的STI571中稳定生长并且可以快速增殖,经过FDB药物处理K562-R细胞24 h后发现,实验中任何浓度的FDB均可降低K562-R细胞的耐药性,抑制细胞的生长,抑制率分别为23%,36%,47%,78%和93%,抑制率与FDB浓度呈正相关,并促使细胞进入凋亡期,相关凋亡蛋白的表达均能检测到,同时可以降低MDR-1和bcr-abl融合基因的表达,细胞形态观察也显示细胞出现大量死亡,K562-R的耐药性明显降低.结论 FDB联合 STI571 诱导K562 细胞,可以明显降低K562 细胞的耐药性,提高治疗效果,可为临床抗肿瘤免疫治疗提供新的借鉴与思路.
作者:苗玉迪;焦红侠;王晖;魏绪仓 刊期: 2012年第05期