倪丽丽;景玲杰;杨景卉;刘丽蓉;张军;王晓飞;陈晋
目的 获得四种氟喹诺酮(FQ)对结核分枝杆菌的小抑菌浓度(MIC),评价PCR探针熔解曲线法(PMAA)检测结核分枝杆菌对氟喹诺酮药物耐药性的临床价值.方法 124例对氧氟沙星敏感的菌株和78例对氧氟沙星耐药的菌株,在96孔细菌培养板中,用Middlebrook 7H9液体培养基将药物进行连续倍比稀释后,加入5×10-2 mg/ml菌液100 μl,用刃天青显色法测定MIC;并用PCR探针熔解曲线法(PMAA)检测结核分枝杆菌对氟喹诺酮(FQ)药物的耐药突变.结果 氧氟沙星折点浓度为2 μg/ml,加替沙星和莫西沙星对结核分枝杆菌的MIC90比氧氟沙星和左氧氟沙星要低4~8倍,具有比氧氟沙星和左氧氟沙星更好的抗结核分枝杆菌的活性.以罗氏比例法为金标准,PCR-PMAA检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和符合率分别为96.2%,97.6%,96.2%,97.6%和97.0%.结论 利用微量MIC方法较常规药敏方法可以获得更多的耐药信息.用PCR-PMAA法能高效快速的检出耐药突变菌株.两种方法结合应用,对临床肺结核疾病早期用药具有更好的指导价值.
作者:倪丽丽;景玲杰;杨景卉;刘丽蓉;张军;王晓飞;陈晋 刊期: 2014年第02期
目的 了解铜陵地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,分析该地区HBV不同基因型别与肝功能损害、病毒复制水平及血清标志物的关系,探讨不同基因型的临床意义.方法 采用聚合酶链式反应-反向点杂交法(polymerase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)对铜陵地区228例ABV阳性感染者的血清分别进行HBV基因型的分型、HBV-DNA载量以及HBV血清标志物和肝功能等的检测,并结合其指标进行相关性分析.结果 在228份患者的血清样本中,226份样本成功分型,其中B型54.4%(124/228),C型37.3%(85/228),B/C混合型7.5%(17/228),2例未检出占0.88%(2/228).在各临床分型的慢性HBV感染者中,B基因型在慢性乙型肝炎组(CHB)、肝硬化组(LC)和原发性肝细胞癌组(HCC)中的构成比依次为61.8%,36.4%和60%,C基因型依次为25.7%,63.6%和40%,B型在CHB组占优势(x2=19.253,P=0.001);C型在LC组占优势,差异有统计学显著性意义(x2=9.818,P<0.001).C基因型HBV-DNA载量明显高于B型及B/C混合型,差异具有统计学非常显著性意义(P<0.01).在不同基因型HBV患者中,除了性别,男性高于女性外,患者的生化指标经方差分析各组差异均无统计学显著性意义(P>0.05).结论 铜陵地区HBV基因型主要以B型为主,对HBV基因分型有助于了解患者的病情,对HBV感染患者的临床诊治具有重要指导意义.
作者:唐吉斌;翁伟;张盛;宋有良;焦瑞宝;章文 刊期: 2014年第02期
目的 分离鉴定源于假性动脉瘤破裂继发急性坏疽患者感染组织中的未知细菌.方法 PCR法扩增细菌的16SrRNA基因,通过测序并与GenBank中相关序列进行比对.结果 16S rRNA PCR扩增产物经测序与GenBank中序列比对,发现与厌氧消化链球菌有99%同源性.结论来源于该患者组织中的未知细菌是厌氧消化链球菌.
作者:李节;王文凯;朱益;孙常秀;陈建国 刊期: 2014年第02期
目的 探讨急性脑梗死患者早期缺血修饰清蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的临床意义.方法 采用终点法和电化学发光法分别对50例入院12 h内的急性脑梗死患者和50例体检健康者血清中的IMA和NSE进行测定.结果 急性脑梗死组血清中IMA的ACB值(56.7±6.10 U/ml)低于对照组(72.55±5.53 U/ml),差异有统计学意义(t=-13.39,P<0.01);急性脑梗死组血清中NSE水平(23.03±6.91 ng/ml)高于对照组(10.85士2.61 ng/ml),差异有统计学显著性意义(t=11.94,P<0.01).结论 IMA可以帮助判断脑组织缺血、缺氧程度,NSE可以帮助判断脑组织受损程度,两者联合检测可以作为急性脑梗死早期诊断、判断疾病缺血和损伤严重程度的指标.
作者:石坚;蒋洪敏 刊期: 2014年第02期
DC+ CIK免疫治疗由于它的毒副作用小,能减少肿瘤患者术后复发、转移的概率,能提高患者对化放疗的敏感性及耐受性、还能明显的改善患者的生活质量,现已开始逐步应用于临床中,大多数的实验室都建立了标准化实验室及制定了严格的标准化操作规程(SOP),力求培养DC+ CIK的培养和回输安全.该文重点讨论了DC+ CIK培养中的常见污染和预防要点,希望能给广大的细胞培养工作者提供参考.
作者:陈娅;邱育淼;欧阳学农 刊期: 2014年第02期
目的 了解目前我国干化学测定胆红素的检测现状,以改进和提高胆红素检测质量.方法 对2012年自愿参加干化学胆红素检测室间质量调查的148家实验室发放两个批号的冻干粉质控品(批号为A1565和B1567),要求回报总胆红素(TBIL)、结合胆红素(CB)、未结合胆红素(UB)和Delta胆红素(DELB),并对回报结果进行统计分析,以评价实验室检测水平.结果 调查回报率为81.8%(121/148),分别有118,113,113和91家实验室回报了TBIL,CB,UB和DELB的检测结果,这四个检测项目在Vitros系列仪器上检测所得的稳健变异系数(RCV)差异较大.四个项目的实验室间CV的算术平均数分别为5.68%,19.41%,12.37%和53.98%;TBIL和CB的统计结果与2012年干化学第一次EQA比较,实验室间变异相差不大.根据目前干化学室间质量评价的评价标准,TBIL两个批号合格率较高,均为98.3%;CB为78.8%和92.9%;UB为85.8%和93.8%;Delta胆红素合格率较低,分别为46.2%和34.4%.结论 该次调查数据显示出目前我国干化学胆红素检测水平还需进一步提高,实验室应严格按照操作程序进行检测,并采取有效的室内质量控制,参加室间质量评价计划,以减小胆红素检测结果的误差并提高结果间的可比性.
作者:王薇;钟堃;何法霖;康凤凤;王治国 刊期: 2014年第02期
microRNA(miRNA)是长21 nt~25 nt内源性非编码小分子RNA.miRNA通过调节基因的表达,广泛参与心血管系统细胞的增殖、迁移、分化、凋亡等病理生理过程,在心血管系统疾病的发生发展过程中起着重要的调控作用.近研究发现,miRNA参与了心肌肥厚、心肌梗死、心肌纤维化、心律失常和血管病变等的生理病理过程.该文就miRNA在心血管系统生理病理过程中的作用予以综述.
作者:李勤;王玉明;段勇 刊期: 2014年第02期
目的 探讨血清肿瘤标志物人附睾分泌蛋白4(HE4),CA125和ROMA指数在卵巢癌预测和诊断中的应用价值.方法 用化学发光法检测手术前卵巢癌患者96例和卵巢良性肿瘤患者60例及健康体检者75例的血清中HE4,CA125水平,并计算出卵巢癌风险预测模型(ROMA)值,联合绝经状态预测患卵巢癌的风险性.结果 卵巢癌组HE4,CA125和ROMA值三项指标的中位水平分别为222.2 pmol/L,153.9 U/ml和73.0%,与卵巢良性肿瘤组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).将HE4和CA125的cut-off值定在140 pmol/L和35 U/ml,绝经前、后妇女ROMA指数cut-off值定为11.4%和29.9%,则HE4,CA125和ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度分别为72.9%,89.6%和87.5%;特异度分别为98.3%,55.0%和90.0%;准确度分别为87.1%,81.9%和90.5%;联合检测HE4,CA125与ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度、特异度分别为97.0%和92.8%.结论 联合检测血清HE4和CA125并计算出ROMA指数有助于预测腹盆腔肿块患者患卵巢癌的风险性,鉴别卵巢肿瘤的良恶性,提高卵巢癌的早期诊断率.
作者:朱自力;戴伟萍;肖春红;顾建美;张金业 刊期: 2014年第02期
目的 以基于生物学变异确定的允许不精密度,1/3TEa,1/4TEa作为质量规范,评价2012年4月份参加卫生部临检中心心肌损伤标志物的380家单位和脑钠肽/N末端脑钠肽140家单位的室间质评单位室内质控不精密度.方法 组织全国心肌损伤标志物和脑钠肽/N末端脑钠肽室间质评参加单位回报2012年4月份当月在控室内质控变异系数,对肌酸激酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白T(cTnT)、脑钠肽(BNP)和N末端前脑钠肽(NT-proBNP)7个检测项目(其中CK-MB项目,回报单位分别为μg/L和U/L,视为两个检测项目)2个批号的变异系数进行统计分析,判断室内变异系数小于基于生物学变异导出的不精密度(CV%)质量规范和1/3TEa,1/4TEa质量规范所占的比例.结果 以80%实验室变异系数小于质量规范作为判断标准,结果显示:只有cTn Ⅰ的1批号不能满足1/3TEa的要求;而要满足1/4TEa的要求只有NT-pro BNP的两个批号同时满足;对于低标准所有项目都可以满足,对于适当标准只有CK-MB两个批号同时满足;目前还没有项目可以满足佳标准.结论 目前,大多数实验室都可以满足1/3TEa的精密度要求和允许不精密度的低标准,但还不能满足适当标准,说明我国实验室在精密度性能上还需要进一步提高.
作者:张妍;王薇;何法霖;钟堃;王治国 刊期: 2014年第02期
目的 采用ROC曲线探讨血液学指标对单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血(俗称地中海贫血,简称地贫)的诊断价值,确定平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞计数(RBC)及血红蛋白(Hb)筛查单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血的佳截断值(cutoff值).方法 对基因确诊的124例单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血患者(实验组)和126例健康体检者(对照组)进行血常规检查,采用ROC曲线分析血液学指标MCV,MCH,MCHC,RBC和Hb,评价其筛查单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血临床诊断价值.结果 ①对照组与实验组的血液学指标MCH,MCV,MCHC,Hb和RBC分别为(29.9±1.18 vs 26.1±3.01)pg,(88.8±3.38 vs80.2±7.13)fl,(337士10.06 vs 321±18.4)g/L,(133士10.8 vs 123±20.6)g/L和(4.48±0.39 vs4.75±0.61)×1012/L.与对照组比较,实验组血液学指标MCV,MCH,MCHC和Hb均明显降低,RBC明显增高,差异具有统计学意义(t=-12.09,-13.13,-8.23,-5.09和4.11,P值均<0.01).②以基因诊断的结果为金标准,MCH,MCV,MCHC,Hb和RBC的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.941,0.894,0.799,0.688,0.630;佳cutoff值分别为28.35 pg,84.75 fl,329.5g/L,125.5 g/L,4.17×1012/L;对应的灵敏度和特异度,分别是MCH(88.7%,90.5%),MCV(77.4%,89.7%),MCHC(69.5%,77.0%),Hb(61.3%,78.6%),RBC(51.6%,75.4%).③在AUC>0.75的三项指标中,MCH的诊断灵敏度高,明显高于MCV和MCHC(P<0.05,卡方值5.62,14.02),MCH和MCV的特异度明显高于MCHC(P<0.05,卡方值8.42,7.31),差异具有统计学意义.结论 用ROC曲线分析的结果表明MCV,MCH,MCHC对单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血有较好的诊断价值(AUC>0.75),其中MCH的诊断价值高(AUC>0.9),以MCV,MCH和MCHC的佳cutoff值作为单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血筛查指标具有较好的临床诊断意义.掌握单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血的血液学特点,有助于更准确地筛查出单基因缺失型珠蛋白生成障碍性贫血患者,减少漏诊.
作者:喻晶;何柏林;卢丽华;吴夏枫;张银汉 刊期: 2014年第02期
目的 构建抗衰老Klotho分泌表达载体,鉴定表达产物.方法 采用高保真PCR扩增Klotho基因,将其克隆到穿梭载体pMG36e中,经鉴定后电击转化乳酸菌.通过RT-PCR和Western blot检测目的基因表达情况.结果 特异PCR、酶切和测序鉴定均证实Klotho基因克隆入表达载体pMG36e;将其转化至乳酸菌后,该乳酸菌能有效分泌表达Klotho.结论 成功构建能有效分泌表达Klotho的基因工程菌,为进一步口服重组乳酸菌进行抗衰老研究奠定了基础.
作者:谢宁;郭斌;熊元;黄义山;廖涛;唐中 刊期: 2014年第02期
目的 调查西安地区2006~2012年无偿献血者抗-HIV检测不合格情况及变化趋势,为今后采取有效预防措施,降低血液不合格率,提高临床输血安全提供可靠依据.方法 收集西安市中心血站2006~2012年无偿献血者血液标本共895 317份,采用两种不同厂家ELISA试剂对无偿献血者标本进行初筛检测.检测结果均为阳性或一阴一阳经再次复查为阳性者判定为该血液抗-HIV有反应性,按照《全国艾滋病检测技术规范》要求送西安市疾病预防控制中心做确认试验.对确认后的结果进行不同性别、不同血型、不同年龄、不同职业无偿献血者的抗-HIV检测结果进行回顾性统计和分析.结果 895 317份无偿献血标本,检出阳性标本2 958份,阳性率为0.33%,其中确认阳性数174,阳性率为0.02%.并且2006~2012年间不同年龄、不同年份、不同职业无偿献血者分布上的差异均具有统计学意义.HIV感染者男性(94.83%)明显多于女性(5.17%),年龄分布主要集中于20~40岁,职业主要集中于自由职业或无业人群.血型分布符合陕西血型分布特点.结论 应加强采血前的筛查工作,以降低采集血液的不合格率.
作者:陈冬;段勇 刊期: 2014年第02期
目的 血浆(1,3)-β-D葡聚糖的检测为临床提供深部真菌感染的诊断价值.方法 使用MB-80真菌快速检测仪,检测2011年1~12月泸州医学院附属医院486例不同年龄阶段疑似深部真菌感染患者的552份血浆标本中(1,3)-β-D葡聚糖的含量,将其进行卡方检验和ROC曲线分析及探讨.结果 552份标本中(1,3)-β-D葡聚糖对深部真菌感染检测的阳性率为15.94%(88/552),培养与镜检对深部真菌感染的阳性率为12.14%(67/552),两组差异有统计学意义(x2=26.80,P<0.05);深部真菌感染组患者血浆(1,3)-β-D葡聚糖水平为(153.18±183.04) pg/ml,无深部真菌感染组为(19.53±97.92)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.001);用于诊断深部真菌感染的ROC曲线下面积为0.96(P<0.05);以20 pg/ml水平为临界值的血浆(1,3)-β-D葡聚糖对深部真菌感染诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为89.55%,95.46%,73.17%,98.51%和94.75%.结论 血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测与传统方法诊断的一致性好(Kappa=0.93,P<0.05).该方法简便、快速且阳性率较高,可用于深部真菌感染的早期快速诊断.
作者:杨葵;丁银环;田刚;向成玉;林雁 刊期: 2014年第02期
目的 定量检测精神分裂症患者血清中免疫球蛋白(IgG,IgM,IgA)核心岩藻糖的糖基化水平,探讨其糖链结构改变的免疫球蛋白对免疫功能的影响.方法 应用小扁豆凝集素(LCA)亲合ELISA法定量检测了46例精神分裂症患者及47例正常对照者血清中LCA-Ig水平.结果 精神分裂症患者血清中LCA-IgG水平(A值)1.598±0.311,LCA-IgM水平0.226±0.067,LCA-IgA水平0.281±0.071,显著高于对照组1.388±0.285,0.175±0.045和0.208±0.044(t=3.417,4.359,5.972;P<0.01).不同性别、不同病程的精神分裂症患者间LCA-Ig水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 精神分裂症患者血清中较高水平的LCA-Ig可能是造成患者免疫球蛋白糖链的构象变化影响其正常调节功能的分子基础.
作者:郭静;邱锦云;冯方波 刊期: 2014年第02期
目的 定量检测生物被膜在生物材料表面的形成过程,评价生物被膜形成的定量技术.方法 将表皮葡萄球菌RP62A接种于不锈钢垫圈上分别培养0~8,24和48 h.采用生物被膜覆盖率实验(BCR),活细胞计数(VCC)以及ATP-生物发光(ATP)定量检测不同时期生物被膜的量,并提取总RNA检测ica基因的转录水平,对各组实验结果进行比较分析.结果 BCR显示生物被膜的量随着培养时间的增长而逐渐增多,在8h时达到(92.79±8.13)%,24 h或者48 h增长到近100%.VCC在24 h(12.33×106CFU)和48 h(16.30×106CFU)显著高于0~8 h(8 h:2.21×106CFU),差异有统计学意义(P<0.05).ATP结果从5h时开始增加,在24 h后趋于稳定(~15 000 RLU),48 h时增加至(44 545.20±22323.79)RLU,差异有统计学意义(P<0.01).6h后ica基因的RT-PCR检测结果与BCR结果相符.BCR与VCC和ATP结果在0~8 h内具有显著的相关性(r=0.73,P=0.007 1;r=0.78,P=0.008 5).结论 各检测方法的联合应用可以提高定量分析的准确度,定量分析显示细菌生物被膜的形成在细菌粘附于生物材料表面后6~8h内迅速完成,为感染早期治疗提供依据.
作者:许惠根;苏炳森;王军;黄婷;蔡旭清 刊期: 2014年第02期
文章对钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,CaSR)的结构、分布、生理功能及其与疾病的关系做了简要介绍.并详细地阐述了在不同的细胞上,CaSR通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路引起的生理或者病理的变化.
作者:武春丽;孙轶华 刊期: 2014年第02期
目的 探讨冠心病患者联合检测血清ⅡA分泌型磷脂酶A2 (secretory groupⅡA phospholipase A2,ⅡA-sPLA2)及脂蛋白相关磷脂酶A2 (LP-PLA2)对于其诊疗的意义.方法 对健康对照组50例、急性心肌梗死(AMI)组13例、稳定型心绞痛(UAP)组17例和不稳定型心绞痛(SAP)组70例的生化指标(主要ⅡA-sPLA2和LP-PLA2水平)进行测定,统计分析各组之间的差异是否有统计学意义.结果 随着冠心病患者病变程度加剧,HDL水平有降低的趋势,即AMI组比SAP和UAP组患者的HDL水平均高,三组相比差异均有统计学意义(t=3.013~3.987,均P>0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2在冠心病各亚型患者中的水平明显比对照组高,且AMI组比SAP和UAP组,SAP比UAP患者的水平均高,差异有统计学意义(t=3.507~9.967,均P<0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2指标之间呈正相关关系(r=0.657,P<0.05),HDL分别和ⅡA-sPLA2与LP-PLA2之间呈显著的负相关关系(r=-0.351,-0.294,均P<0.05).结论 ⅡA-sPLA2与LP-PLA2含量将可能是治疗冠状动脉粥样硬化和预防心血管疾病的新指标.
作者:刘津;应国光;田刚;林祥灿;李海平;王连环 刊期: 2014年第02期
目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性B细胞(Breg)的含量,了解Breg在SLE疾病中的作用.方法 选择2013年1月~4月在南京大学医学院附属鼓楼医院住院的SLE患者34例、健康对照30例,以CD19+ CD5+CD1d+作为Breg标记,分别采用流式细胞术检测外周血Breg占B淋巴细胞的比率.结果 SLE患者组Breg的比率(7.86±4.10)%显著低于健康对照组(22.71±9.17)%(Z=2.16,P<0.01).结论 SLE患者外周血中Breg的比率显著降低,提示可能与SLE的发病相关.
作者:黄中伟;陈军浩;张立平 刊期: 2014年第02期
目的 研究新喋定、CA19-9和组织多肽特异性抗原(polypeptide-specific antigen,TPS)对胰腺癌和慢性胰腺炎的鉴别诊断价值.方法 选取2010~2012年75名胰腺癌患者和62例慢性胰腺炎患者,同时选择50例健康人作为对照,采集临床资料,检测血清CA19-9、新喋定和TPS,并进行统计学分析.结果 胰腺癌惠者的新喋定(17.7 nmol/L),CA19-9(102.2U/ml)和TPS(135.3 U/L)高于慢性胰腺炎患者(6.1 nmol/L,23.5 U/ml,61U/L)(p<0.01).慢性胰腺炎患者TPS和CA19-9高于正常对照组(40U/1,9.3 U/ml) (P<0.01),而新喋定差异无统计学意义(P>0.05).新喋定对胰腺癌的灵敏度和特异度(92.2%,87.3%)高于CA19-9(82.2%,75.3%)和TPS(72.2%,64.3%).结论 新喋定对鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎具有较好的诊断价值.
作者:伍海英;桂满元;刘卓然 刊期: 2014年第02期
目的 比较白藜芦醇(resveratrol,Res)对红色毛癣菌(Trichoph yton rubrum,T.rubrum)和烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)体外抑菌作用.方法 按照CLSI M38-P方案的微量肉汤稀释法检测Res对14株T.rubrum和3株A.fumigatus的体外低抑菌浓度(MIC),比较亚浓度Res作用下两种真菌在电镜下细胞结构的改变.结果 Res对T.rubrum和A.fumigatus的MIC分别为0.064 mg/ml和0.512 mg/ml,电镜下Res作用后的红色毛癣菌细胞内容物严重缺失,出现大片空白区,空泡大小不一,排列凌乱;烟曲霉菌菌丝出现空白区,内容物排列不整.结论 Res对T.rubrum 体外抑菌浓度MIC低于A.fumigatus,Res对T.rubrum抑菌效果明显,电镜下Res两种真菌的抑菌效果明显.
作者:王鑫;张瑞;李雅静;付杰;薛文颖 刊期: 2014年第02期