陈冬;段勇
近年来,随着器官移植、艾滋病、恶性肿瘤放化疗等引起的免疫低下患者的增多,侵袭性曲霉菌病(IAD)的发病率也大幅度增加.尽管目前检测曲霉菌的方法很多,但尚未有一种能满足临床对曲霉菌病早期、快速、准确诊断的要求,致使曲霉菌病的病死率仍居高不下.PCR检测技术在生物基因相关方面的研究有很多突出优点,已有多种类型的PCR技术被广泛应用于临床诊断曲霉菌病,但一些方法的检测环节及检测性能仍存争议,以致尚未有被公认作为临床曲霉菌检测的标准化参考方法.该综述主要对曲霉菌PCR检测方法标准化的相关要素进行探讨,为今后曲霉菌PCR检测方法的研究及其标准化提供参考.
作者:廖新辉;易浔飞;兰小鹏 刊期: 2014年第02期
目的 对四种不同样本保存方法用于强直性脊椎炎(AS)患者流式细胞术测定B27表达情况的临床效果进行评估;从而探讨一种更好的流式细胞术B27样本保存方式的可能性.方法 收集武汉大学人民医院2009年10月~2012年11月间门诊及住院AS 155例患者外周血标本作为研究对象,将上述样本分别按照不同的保存方式分为室温保存全血细胞(RTWB)、冻存单个核细胞(FMNC)、冻存去红细胞的白细胞(FWBC)、冻存血小板(FPLT)、新鲜全血样本(IWB)和新鲜血小板(IPLT);采用流式细胞术(FCM)对上述几种方法保存的样本HLA-B27表达情况进行测定;分别计算出上述不同样本保存方法用于AS诊断的诊断效能指标(灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预告值、阴性预告值),以评估不同样本保存方法对AS临床诊断价值的影响.结果 FMNC,FWBC,FPLT与IWB和IPLT用于AS病诊断的灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预告值和阴性预告值分别均为87.1%,88.5%,11.5%,12.9%,86%和89.4%,诊断效能指标完全一致;而RTWB敏感度和特异度分别为77.4%和80.8%,明显低于新鲜标本(x2=11.23,8.11,P<0.05),误诊率和漏诊率分别为19.2%和22.6%,高于新鲜标本(x2=10.53,7.85,P<0.05).结论 该研究表明采用一定方式冻存的外周血样在流式细胞术HLA-B27测定用于AS病的诊断中能够达到与新鲜样本一样的诊断效能,FPLT样本进行FCM B27测定结果可靠且操作简单、高效,更适合临床诊断.
作者:洪俊;饶永彩 刊期: 2014年第02期
目的 探讨血清N端脑钠肽前体在心脏功能衰竭、脑梗死及肾脏功能衰竭疾病的诊断以及治疗监测中的研究.方法 选择健康体检者30例作为正常对照组,同时选取经临床确诊的心功能衰竭患者101例、脑梗死患者95例及肾脏功能衰竭患者66例;采用罗氏全自动电化学发光免疫分析系统检测受检者血清N端脑钠肽前体浓度.结果 正常对照组、肾功能衰竭组、心功能衰竭组及脑梗死组血清N端脑钠肽前体的检测结果((x)士s,pg/ml)分别为:55.41士25.63,15 110.08±22 951.45,5 082.35±9 546.15和1 960.06±2 653.07.正常对照组与临床三组间及临床三组之间结果经t检验分析,t值在-2.73~6.99之间,P均<0.01,差异有统计学意义.结论 血清N端脑钠肽前体浓度水平不仅是评价和监测心功能状态的良好指标,同时对脑梗死及肾脏功能衰竭患者的诊断与治疗监测亦具有重要的临床意义.研究结果表明,即血清N端脑钠肽前体浓度水平在临床疾病的诊断中具有非常广泛的应用价值.
作者:李玲;王华;刘文康;解娟;王俊燕;任健康 刊期: 2014年第02期
目的 了解人免疫缺陷病毒(HIV)在河南省肿瘤患者中的感染分布情况,以协助临床诊断和治疗,防止HIV院内传播.方法 对2012年3月~2013年2月期间,郑州大学附属肿瘤医院门诊及住院的35 585名肿瘤患者血清进行HIV抗体检测,并按性别、年龄和部位计算频数、构成比和感染率.结果 35 585例标本中阳性21例(男性7例,女性14例),年龄27~67岁,感染率是0.06%,颈部肿瘤感染构成比高为23.8%(5/21).结论 肿瘤患者HIV抗体阳性率较高,对其进行HIV常规检测,减少医源性感染,有利于艾滋病的防控工作.
作者:王书锋;王园园;周丽莉 刊期: 2014年第02期
目的 分析BCR/ABL阴性的骨髓增殖性疾病(MPD)患者JAK2V617F点突变的突变率及其外周血细胞水平,为其分子诊断及靶向治疗提供理论依据.方法 应用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR),对158例初诊患者JAK2基因的V617F位点进行扩增,并对其发病年龄和临床血液学指标进行统计分析.结果 158例患者JAK2V617F总突变率为72.15%,其中真性红细胞增多症(PV) 78.46%,原发性血小板增多症(ET) 69.05%和特发性骨髓纤维化(PMF)55.56%.血液学指标显示PV患者中JAK2V617F突变型组的外周血血红蛋白水平和白细胞计数分别为(200.26±19.72)g/L,(17.57±10.96)×109/L,显著高于野生型组(t=1.636~2.406,P值均<0.05).ET患者中JAK2V617F突变型组的年龄、红细胞计数和白细胞计数分别为(60.41±18.52)岁,(4.72士1.51)×1012/L,(14.78±12.21)×109/L,显著高于野生型组(t=1.634~3.284,P值均<0.05).PMF患者中JAK2V617F点突变型组的红细胞计数和血红蛋白含量分别为(4.51±1.42)×1012/L和(135.58±34.76) g/L,显著高于野生型组(t=2.274~2.810,P值均<0.05).结论 JAK2V617F有助于BCR/ABL阴性的不同类型MPD的诊断.
作者:韩瑞玲;李艳;汪明;童永清;吴薇 刊期: 2014年第02期
目的 探讨心肌酶检测在新生儿窒息诊断中的应用价值.方法 选取陕西省人民医院收治的82例窒息新生儿为研究对象,根据Apgar评分将其分为Apgar 4~7分为轻度组59例,Apgar<3分为重度组23例,抽取入院后12 h内及治疗后第3天静脉血,并选取30例同期住院无缺氧的新生儿为对照组,采用日立7170用速率法检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟酸脱氢酶(HBDH).结果 重度窒息组AST,CK,CK-MB,LDH和HBDH水平(170.1±32.3 U/L,1 264.5±207.2 U/L,214.5±86.1 U/L,918.5±239.5U/L和747.3士172.5 U/L)高于轻度度窒息组(72.7±20.9 U/L,460.4±164.1 U/L,70.1±26.6 U/L,402.7±107.5 U/L和349.6±122.1 U/L,t值=7.81,15.87,9.95,11.59和10.07,P均<0.01)高于正常组(33.1±11.8 U/L,201.1±44.8 U/L,23.2±6.5 U/L,181.2±34.9 U/L和198.1±35.4 U/L,t值=5.48,4.97,5.46,6.43和3.89,P均<0.01),治疗3天后心肌酶水平大幅回落,与治疗前比较差异有统计学意义(t=1.73,P<0.05).结论 血清心肌酶水平能较及时地反映窒息新生儿缺氧性心肌损伤的程度,及早测定其水平变化,对判断病情,指导治疗有重要临床意义.
作者:吕晓莉;苍金荣;王华;毛学源;杨娜;罗小峰;康华;任健康 刊期: 2014年第02期
目的 用生物信息学方法挑选中国汉族人群中的MAPT基因标签单核苷酸多态性(tag-SNPs)位点,考察中国汉族人群MAPT基因与老年痴呆症的关系.方法 通过Hapmap数据库获取中国汉族人群的MAPT基因SNPs数据;应用Haploview4.2对MAPT基因进行连锁不平衡分析;在D'值95%可信区间内构建单体域;根据单体域内SNPs之间的r2值和LOD值,挑选标签SNP.结果 MAPT基因70个SNPs中,15个(21.43%) SNPs为纯合基因型,MAF高于10%的SNPs为44个,占62.86%.利用55个合格SNPs确定了26个标签SNPs,构建了8个单体域,各单体域以其前两种单体型为主,累计频率在61.9%~100.0%之间.结论 中国汉族人群MAPT基因的26个SNPs位点是较具代表性的标志性位点,可被选为标签SNPs,并作为中国汉族人群MAPT基因与老年痴呆症的关联研究.
作者:徐向红;郭天康;苏海翔;魏丽;李永红;徐辉 刊期: 2014年第02期
目的 了解南京市鼓楼医院碳青霉烯酶在耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌中的分布情况,并进行其同源性分析.方法 收集耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌34株,K-B纸片法测定菌株对药物的敏感性;采用改良Hodge试验及EDTA协同试验进行A,B类碳青霉烯酶初筛试验;PCR法扩增碳青霉烯酶基因并进行序列分析,ERIC-PCR后进行同源性分析.结果 34株肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素呈现泛耐药现象,耐药率达100%,仅对丁胺卡那、复方新诺明、左氧氟沙星敏感性相对较高,分别为17.6%,50%和23.5%.ERIC分析结果显示34株菌株主要分为两型,其中A型27株,B1型2株,B2型5株.结论 南京市鼓楼医院的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的首要原因是产KPC-2酶.
作者:宁明哲;张之烽;周万青;沈瀚 刊期: 2014年第02期
目的 研究肾移植术后患者抗HLA抗体与移植肾长期存活的关系.方法 选择2008年前已行移植肾手术的652例肾移植患者,于2009年10月~2010年4月检测群体反应性抗体(PRA),而后每年连续观察肾功能.结果 652例肾移植患者中,抗HLA抗体阳性患者81例,占12.42%(81/652),移植肾功能下降或丧失患者71例,占87.65%(71/81).PRA阴性患者571例,占87.58%(571/652),移植肾功能下降患者44例,占7.71%(44/571).PRA阳性与阴性对肾移植患者移植肾功能的影响具有统计学差异(x2 =306.64,P<0.001).结论 抗HLA抗体可能是引起移植肾慢性失功的重要因素之一.
作者:贾保祥;武俊杰;徐秀红;尚东浩 刊期: 2014年第02期
目的 探讨冠心病患者联合检测血清ⅡA分泌型磷脂酶A2 (secretory groupⅡA phospholipase A2,ⅡA-sPLA2)及脂蛋白相关磷脂酶A2 (LP-PLA2)对于其诊疗的意义.方法 对健康对照组50例、急性心肌梗死(AMI)组13例、稳定型心绞痛(UAP)组17例和不稳定型心绞痛(SAP)组70例的生化指标(主要ⅡA-sPLA2和LP-PLA2水平)进行测定,统计分析各组之间的差异是否有统计学意义.结果 随着冠心病患者病变程度加剧,HDL水平有降低的趋势,即AMI组比SAP和UAP组患者的HDL水平均高,三组相比差异均有统计学意义(t=3.013~3.987,均P>0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2在冠心病各亚型患者中的水平明显比对照组高,且AMI组比SAP和UAP组,SAP比UAP患者的水平均高,差异有统计学意义(t=3.507~9.967,均P<0.05).ⅡA-sPLA2和LP-PLA2指标之间呈正相关关系(r=0.657,P<0.05),HDL分别和ⅡA-sPLA2与LP-PLA2之间呈显著的负相关关系(r=-0.351,-0.294,均P<0.05).结论 ⅡA-sPLA2与LP-PLA2含量将可能是治疗冠状动脉粥样硬化和预防心血管疾病的新指标.
作者:刘津;应国光;田刚;林祥灿;李海平;王连环 刊期: 2014年第02期
胰腺癌是致命的癌症之一,需要有效的早期检测方法.该文综述几种生物标志物的当前状况,以及它们在临床实践中的用途,包括组织、体液、大便中的生物标志物以及新兴的标志物,…等等.
作者:王继贵 刊期: 2014年第02期
目的 定量检测生物被膜在生物材料表面的形成过程,评价生物被膜形成的定量技术.方法 将表皮葡萄球菌RP62A接种于不锈钢垫圈上分别培养0~8,24和48 h.采用生物被膜覆盖率实验(BCR),活细胞计数(VCC)以及ATP-生物发光(ATP)定量检测不同时期生物被膜的量,并提取总RNA检测ica基因的转录水平,对各组实验结果进行比较分析.结果 BCR显示生物被膜的量随着培养时间的增长而逐渐增多,在8h时达到(92.79±8.13)%,24 h或者48 h增长到近100%.VCC在24 h(12.33×106CFU)和48 h(16.30×106CFU)显著高于0~8 h(8 h:2.21×106CFU),差异有统计学意义(P<0.05).ATP结果从5h时开始增加,在24 h后趋于稳定(~15 000 RLU),48 h时增加至(44 545.20±22323.79)RLU,差异有统计学意义(P<0.01).6h后ica基因的RT-PCR检测结果与BCR结果相符.BCR与VCC和ATP结果在0~8 h内具有显著的相关性(r=0.73,P=0.007 1;r=0.78,P=0.008 5).结论 各检测方法的联合应用可以提高定量分析的准确度,定量分析显示细菌生物被膜的形成在细菌粘附于生物材料表面后6~8h内迅速完成,为感染早期治疗提供依据.
作者:许惠根;苏炳森;王军;黄婷;蔡旭清 刊期: 2014年第02期
目的 研究新喋定、CA19-9和组织多肽特异性抗原(polypeptide-specific antigen,TPS)对胰腺癌和慢性胰腺炎的鉴别诊断价值.方法 选取2010~2012年75名胰腺癌患者和62例慢性胰腺炎患者,同时选择50例健康人作为对照,采集临床资料,检测血清CA19-9、新喋定和TPS,并进行统计学分析.结果 胰腺癌惠者的新喋定(17.7 nmol/L),CA19-9(102.2U/ml)和TPS(135.3 U/L)高于慢性胰腺炎患者(6.1 nmol/L,23.5 U/ml,61U/L)(p<0.01).慢性胰腺炎患者TPS和CA19-9高于正常对照组(40U/1,9.3 U/ml) (P<0.01),而新喋定差异无统计学意义(P>0.05).新喋定对胰腺癌的灵敏度和特异度(92.2%,87.3%)高于CA19-9(82.2%,75.3%)和TPS(72.2%,64.3%).结论 新喋定对鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎具有较好的诊断价值.
作者:伍海英;桂满元;刘卓然 刊期: 2014年第02期
目的 分离鉴定源于假性动脉瘤破裂继发急性坏疽患者感染组织中的未知细菌.方法 PCR法扩增细菌的16SrRNA基因,通过测序并与GenBank中相关序列进行比对.结果 16S rRNA PCR扩增产物经测序与GenBank中序列比对,发现与厌氧消化链球菌有99%同源性.结论来源于该患者组织中的未知细菌是厌氧消化链球菌.
作者:李节;王文凯;朱益;孙常秀;陈建国 刊期: 2014年第02期
目的 比较白藜芦醇(resveratrol,Res)对红色毛癣菌(Trichoph yton rubrum,T.rubrum)和烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)体外抑菌作用.方法 按照CLSI M38-P方案的微量肉汤稀释法检测Res对14株T.rubrum和3株A.fumigatus的体外低抑菌浓度(MIC),比较亚浓度Res作用下两种真菌在电镜下细胞结构的改变.结果 Res对T.rubrum和A.fumigatus的MIC分别为0.064 mg/ml和0.512 mg/ml,电镜下Res作用后的红色毛癣菌细胞内容物严重缺失,出现大片空白区,空泡大小不一,排列凌乱;烟曲霉菌菌丝出现空白区,内容物排列不整.结论 Res对T.rubrum 体外抑菌浓度MIC低于A.fumigatus,Res对T.rubrum抑菌效果明显,电镜下Res两种真菌的抑菌效果明显.
作者:王鑫;张瑞;李雅静;付杰;薛文颖 刊期: 2014年第02期
目的 应用基因测序技术检测分析武汉地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因型及其分布特点.方法 收集2013年2月~2014年1月武汉大学人民医院感染科254例HCV-RNA阳性慢性丙型肝炎患者血浆标本,通过Sanger测序法测定靶片段的基因序列,然后与NCBI genebank数据库中HCV基因型数据进行比对,分析患者HCV基因型.结果 研究检测的慢性丙型肝炎患者血浆中,共检测出11种HCV基因型,分别是1a,1b,2a,3a,3b,6a,6b,1b/2a混合型,1b/2k混合型,6a/1b混合型和6d/6k混合型.其中,HCV1a型为2例(0.79%),1b型189例(74.41%),2a型35例(13.78%),3a型4例(1.57%),3b型12例(4.72%),6a型6例(2.36%),6b型1例(0.39%),1b/2a混合型2例(0.79%),1b/2k型1例(0.39%),6a/1b混合型型1例(0.39%)和6d/6k混合型1例(0.39%).结论 武汉地区HCV-RNA基因型以1b型为主,其次为2a型,亦可见其他型别,提示武汉地区HCV流行的基因型呈多样性.
作者:吴泽刚;李艳;郑红云 刊期: 2014年第02期
目的 通过定量检测2型糖尿病(T2DM)患者血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)及尿微量清蛋白/肌酐比值(mAlb/Cr)的变化,探讨其在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的临床价值.方法 按DN临床诊断标准,将185例T2DM患者分为单纯DM组127例,DN组58例(其中早期DN组32例,临床期DN组26例).并以DM病程分为<5年、5~10年、>10年三组.研究对象血清Cys C,Hcy采用乳胶颗粒增强免疫比浊法及循环酶法检测.尿微量清蛋白(mAlb)采用免疫散射比浊法检测,同时以酶法检测尿肌酐(Cr),计算尿mAlb/Cr比值.各组间进行统计学分析.结果 DN组血清Cys C,Hcy和尿mAlb/Cr检测结果均明显高于单纯DM组和对照组,单纯DM组也明显高于对照组,三项指标在实验组和对照组间的差异均有统计学意义(F值分别为66.14,76.22和98.35,P<0.01).Cys C,Hcy和mAlb/Cr间的相关性分析,单纯DM组为正相关性(r=0.735,0.621和0.716);DN组也呈正相关性(r=0.761,0.684和0.750).在不同病程组中,Cys C,Hcy和mAlb/Cr阳性率均随着DM病程的延长而明显增高,其三项指标在不同病程组和对照组间的阳性率差异均具有统计学意义(x2值分别为57.11,52.93和49.56,P<0.01).结论 血清Cys C,Hcy和尿mAlb/Cr检测可作为DN早期诊断的敏感指标,对于有效监控、预防和延缓DN的发生及治疗效果评价具有重要价值.
作者:赵建军;朱武 刊期: 2014年第02期
目的 分析伴t(8;21)易位急性髓细胞初诊白血病患者FAB分型、血常规、骨髓细胞形态学、细胞遗传学及临床预后特点.方法 20例患者为中日友好医院2004年~2011年按WHO标准确诊的急性髓细胞白血病(AML)患者,血常规采用XE-2100全自动分析仪分析;骨髓细胞形态学检测对骨髓涂片进行瑞氏-姬姆萨染色,显微镜计数细胞;细胞遗传学检测为常规培养骨髓细胞,采用G显带技术对染色体核型进行分析.结果 伴t(8;21)易位AML患者中55%(11/20)患者外周血白细胞升高,20%(4/20)患者白细胞减低,所有患者均伴血小板减低.85%(17/20)患者骨髓涂片中可见奥氏小体.根据FAB分型,20例患者中15%(3/20)诊断为MDS-RAEB,20%(4/20)为MDS-RAEBt,55%(11/20)为AML-M2,10%(2/10)为AML-M4.55%(11/20)患者为单纯t(8;21)易位,45%(9/20)患者为t(8;21)易位同时伴有其它异常,其中伴性染色体丢失占所有患者35%(7/20),伴有9q-占所有患者的10%(2/20).82.4%(14/17)患者能达到完全缓解.结论 伴t(8;21)易位AML患者可见于FAB分型的不同亚型,主要见于AML-M2.t(8;21)患者常伴有附加异常,以性染色体丢失常见.t(8;21)易位患者疗效较好.
作者:沈军;马亮;钟明华;韩呈武;曹永跃;湛玉良;曹永彤 刊期: 2014年第02期
目的 探讨急性脑梗死患者早期缺血修饰清蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的临床意义.方法 采用终点法和电化学发光法分别对50例入院12 h内的急性脑梗死患者和50例体检健康者血清中的IMA和NSE进行测定.结果 急性脑梗死组血清中IMA的ACB值(56.7±6.10 U/ml)低于对照组(72.55±5.53 U/ml),差异有统计学意义(t=-13.39,P<0.01);急性脑梗死组血清中NSE水平(23.03±6.91 ng/ml)高于对照组(10.85士2.61 ng/ml),差异有统计学显著性意义(t=11.94,P<0.01).结论 IMA可以帮助判断脑组织缺血、缺氧程度,NSE可以帮助判断脑组织受损程度,两者联合检测可以作为急性脑梗死早期诊断、判断疾病缺血和损伤严重程度的指标.
作者:石坚;蒋洪敏 刊期: 2014年第02期
目的 建立深圳龙华新区健康成年女性人群血清CA125和CA153含量水平的参考区间.方法 采用罗氏Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪对2 745例健康成年女性人群的新鲜血清进行CA125及CA153含量测定,检测结果按CLSIC28-A3(临床实验室参考范围的定义和确认,第3版)进行统计处理,确定健康成年女性人群CA125及CA153含量水平正常参考区间,并分析成年女性人群之间CA125及CA153含量水平变化情况.结果 CA125及CA153检测结果呈偏态分布,龙华新区健康成年女性CA125总体参考区间为0.93~33.12U/ml及CA153总体参考区间为0.67~26.09U/ml;与CA125及CA153推荐参考区间(35±0.7 U/ml)和(28士0.6 U/ml)比较差异无统计学显著性意义(x2=0.762,P=0.378,P>0.05),成年女性人群CA125及CA153含量随年龄增加而呈逐渐下降趋势;月经期及孕期血清中CA125及CA153含量明显高于其他人群;更年期低于除50岁以上外其他人群.结论 龙华新区健康成年女性人群CA125及CA153含量水平的参考区间稍低于推荐参考区间,两者比较差异无统计学显著性意义.依据实验允许误差范围,本区CA125及CA153的含量水平参考区间可以采用相应的推荐参考区间.
作者:施俊柱;刘爱胜;陈荣贵;文艳 刊期: 2014年第02期