学术投稿

禽流感病毒 H7N9型实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究

陈勉乔;于浩洋

关键词:禽流感病毒 H7N9 型, 实时荧光定量, RT-PCR, 检测
摘要:目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心(NCBI)公布的 H7N9基因 HA序列,设计特异性引物及TaqMan探针;构建阳性重组质粒,验证其低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒,线性关系在6×102 copies/μl~6×108 copies/μl范围内检测结果良好;用该方法测得低拷贝数为600 copies/μl,特异度和重复性(CV<1%)良好,无交叉反应;用该荧光定量 RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品,准确率为100%(16/16)。结论实验建立的实时荧光定量 RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒 H7N9型的快速检测。
现代检验医学杂志相关文献
  • 应用灰色动态GM(1,1)数学模型进行临床血液采集量预测

    目的探讨应用灰色动态 GM(1,1)模型,分析和预测常态下承德市中心血站血液品种采集数量的动态发展变化趋势,根据模型的应用效果做出定量预测。方法根据承德市中心血站2004年1月~2013年12月的全血(400 ml)(人次)、单采少白血小板(人份)血液品种年采集数据,将2013年预测值与实际值比较,检验模型的预测能力,同时分析2014~2016年血液采集数量。结果以上两类血液采集品种数量灰色动态 GM(1,1)模型的 Y(t)后验差比(均方差)C均<0.35,小误差概率P值均为1。精度均为优,用于血液采集量预测的效果好。结论承德市中心血站以上两类血液采集品种数量呈逐渐增高趋势。灰色系统一阶模型 GM(1,1)作为一种新型预测模型,能够在常态下合理预测采供血系统血液采集量。

    作者:张小伟;王淑香;王岩;马玲 刊期: 2016年第03期

  • 慢性阻塞性肺疾病患者miR-21表达与IL-12水平关系探讨*修回日期:2016-05-11

    目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞 miR-21表达和血清 IL-12水平的关系。方法选取COPD患者共80例,对照组50例为健康人群,通过实时荧光定量 PCR检测外周血单个核细胞 miR-21表达,酶联免疫吸附法检测血清 IL-12水平。结果 COPD稳定期组、急性期组和对照组间血糖、胆固醇和三酰甘油水平差异均无统计学意义(F=0.341~1.542,均P>0.05),而 miR-21表达和 IL-12水平比较差异有统计学意义(F=8.951~15.017,均P<0.05)。COPD稳定期组和急性期组miR-21表达和 IL-12水平均比对照组高,差异有统计学意义(t=10.501~25.612,均P<0.05)。COPD急性期组比稳定期组 miR-21表达和 IL-12水平高,且差异有统计学意义(t=13.298~36.415,均P<0.05)。IL-12和miR-21存在显著的正相关(r=0.381~0.496,均P<0.05)。结论 miR-21可能参与调控 IL-12的水平, miR-21表达与COPD的发病机制相关。

    作者:岳金芳;帕提古丽·吾甫尔 刊期: 2016年第03期

  • 冠心病患者α-内收蛋白基因多态性与表达水平研究

    目的探讨α-内收蛋白基因(ADD1)的单核苷酸多态性(SNP)及表达水平与冠心病(CAD)的相关性。方法提取2011年1月~2013年10月就诊于火箭军总医院的114例CAD患者和116例健康对照者外周血白细胞DNA和RNA,应用荧光标记单碱基延伸及杂交技术检测ADD1基因的rs3775067和rs1263359多态性,应用荧光标记及毛细管电泳技术检测 ADD1的基因表达水平。结果 ADD1基因2个 SNP的基因型频率和等位基因频率在两组间差异无统计学意义(χ2=0.018~1.317,P 值均>0.05)。CAD 组的 ADD1基因表达水平为0.226±0.284,明显高于健康对照组(0.153±0.144),差异有统计学意义(P<0.05)。通过对不同基因型间表达水平的比较,结果显示 CAD组 rs3775067的 TC型患者的基因表达水平(0.250±0.319)明显高于健康对照组(0.154±0.156,P<0.05),余各基因型两组间表达水平差异无统计学意义(t=0.557~1.867,P 值均>0.05)。结论 ADD1基因表达水平的升高是 CAD 的危险因素,而 rs3775067和rs1263359多态性与CAD的易感性无关。

    作者:张阳东;陈洁;楚瑞雪;王利营;云洁;安娟;方靓 刊期: 2016年第03期

  • 浙江舟山群岛居民高尿酸血症人群分布及发病率分析

    目的探讨浙江舟山群岛居民发生高尿酸血症的人群分布以及发病率,为海岛居民健康管理提供科学依据。方法回顾性统计分析2013年10月~2015年10月间,7310例海岛居民于解放军413医院健康体检中心体检的血尿酸结果,其中剔除患有其他代谢性疾病,如糖尿病、慢性肾衰竭等的人群;按照不同性别、不同年龄分组,分别统计平均血尿酸水平、高尿酸血症的发生率以及各组间的差别。采用 Microsoft 2003 Excel软件对数据进行统计分析,组间比较采用单因素方差分析。结果7310例海岛居民的平均血尿酸水平为283±82μmol/L,高尿酸血症发生率为21.2%;31~40岁组高尿酸血症发生率为33.6%,平均血尿酸水平为343±86μmol/L,与≤30岁年龄组相比明显增高,差异有统计学显著性意义。41岁以上年龄组高尿酸血症发生率均超过15%,明显高于≤30岁年龄组。体检人数多集中于31~40岁年龄组。男性海岛居民5214人,高尿酸血症发生率为27.9%,平均血尿酸水平为368±74μmol/L,高于女性组及所有人群的平均水平(P<0.001)。31~40岁年龄组高尿酸血症发生率43.1%,平均血尿酸水平与≤30岁年龄组相比差异无统计学意义(P>0.05)。≥61岁年龄组和41~50岁年龄组平均血尿酸水平低于≤30岁年龄组(P<0.05),但高尿酸血症发生率均高于30岁以下年龄组。体检人数也多集中于31~40岁年龄组。女性居民2096人,高尿酸血症发生率为4.6%,平均血尿酸水平为257±57μmol/L,各个年龄组的平均血尿酸水平低于男性组(P<0.001)。除60岁以上年龄组高尿酸血症发生率为18.6%外,其余各组均低于10%,随着年龄的增长高尿酸血症发生率逐渐增加。结论舟山群岛居民高尿酸血症发生率较高,男性高于女性;高尿酸血症的发生明显年轻化;健康教育,合理膳食调整,改善生活方式和饮食习惯等措施应该长期进行,以预防高尿酸血症及其相关疾病的发生。

    作者:安映红;翁余海;陈友谊;徐玉金;马红雨;朱美财 刊期: 2016年第03期

  • C反应蛋白测定两种检测系统间结果的比较

    目的对两种不同检测系统测定C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的结果进行比对和偏倚分析,以评价不同检测系统CRP测定结果的可比性。方法参照美国临床实验室标准研究所(CLSI)EP9-A2文件要求,收集长海医院急诊患者乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝血50例,同时使用全自动免疫分析仪(Beckman Immage 800)和免疫荧光分析仪(i-CHROMATM Reader)检测待测样本中的CRP浓度,评价两种方法检测结果的相关性。结果使用血浆标本时,两方法相关性良好,回归方程为Y=1.0765X-3.0315,R2=0.986。全血测定的回归方程为Y=0.8826X-1.1808,R2=0.9311。对于红细胞压积(HCT)较低的标本(<30.45%)使用纠正公式:全血 CRP(纠正后)=全血 CRP 结果(纠正前)/(1-HCT)。Y(纠正后)=1.0068X-3.6122,R2=0.9509。结论两种检测系统血浆 CRP的测定结果具有可比性,适合临床应用。遇 HCT较低的标本时,通过校正公式校正,可提高全血结果的可比性。

    作者:汪怀周;陈燕;岳展伊;朱荣荣;邓安梅 刊期: 2016年第03期

  • 2013~2014年深圳市腹泻疾病的病原学分析研究

    目的分析北京大学深圳医院2013~2014年门急诊腹泻患者肠道病原菌的分布情况,为临床诊断和治疗提供参考依据;同时了解沙门菌检测方法改进的成效。方法2013~2014年间,在北京大学深圳医院门急诊采集了1719名腹泻患者的粪便标本,进行致泻性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、弧菌的分离培养、鉴定和血清分型;对其中451份水样便标本进行轮状病毒、诺沃克病毒、星状病毒和肠道腺病毒的荧光PCR检测。沙门菌检测由标本直接接种改为用增加亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)增菌培养,分析两种方法检出率的统计学差异。结果在1719份粪便标本中,共检出肠道病原菌143株[阳性率为8.3%(143/1719)],其中沙门菌76株,占53.1%(76/143);致泻性大肠埃希菌46株,占32.2%(46/143),包括肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)25株、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)12株、肠黏附性大肠埃希菌(EAEC)8株和肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)1株;副溶血弧菌19株,占13.3%(19/143);志贺菌2株,占1.4%(2/143)。检测到两种病原菌(沙门菌+EPEC)混合感染病例一例。在451份水样便标本中,有189份检出一种或两种肠道病毒,阳性率为41.9%(189/451),其中诺沃克病毒91份,占48.1%(91/189),轮状病毒79份,占41.8%(79/189),星状病毒10份,占5.3%(10/189)和肠道腺病毒9份,占4.8%(9/189)。有4份标本同时检出轮状病毒和诺沃克病毒,有1份标本同时检出星状病毒和诺沃克病毒;检出致病菌和病毒混合感染10例。沙门菌检测方法改进后阳性率由0.6%(17/2627)提高到4.4%(76/1719),χ2=67.2,P<0.01,差异具有统计学意义。结论腹泻病原微生物类型复杂多样,临床应重视和加强腹泻病原微生物的常规检验,改进检测方法,降低漏检率,对完善当前腹泻病的病因诊断和治疗有重要参考意义。

    作者:文明明;韩美玲;李卫宁;李迎慧;张海龙;杨虹 刊期: 2016年第03期

  • STING在原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

    目的探讨刺激干扰素基因(STING)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)中的表达及其潜在的临床意义。方法纳入2014年1月~2015年10月期间在上海长海医院和长征医院就诊的PBC患者28例,平均年龄32.5±11.3岁,纳入同期体检的健康对照28例,平均年龄37.5±13.7岁。分离单个核细胞(PBMC),采用实时荧光定量PCR检测 STING mRNA表达水平;采用Spearman检验分析STING表达水平与PBC患者临床指标的相关性;随访5例初诊的PBC患者,观察临床治疗前后 STING表达水平的变化。结果与健康对照组相比,STING mRNA在 PBC患者 PBMC中显著增高,在Ⅲ期和Ⅳ期中的表达显著高于 I期和Ⅱ期,差异有统计学意义(U=0.00,P<0.05)。STING mRNA水平与患者 Mayo评分、GGT正相关(R=0.45,R=0.42,P<0.05),与 AST,ALT和 ALP无相关性(R=0.33,0.21,0.27,P>0.05)。临床治疗有效后,STING mRNA的表达量显著降低,差异有统计学意义(U=0.00,P<0.05)。结论 STING可能参与了PBC的发病机制。

    作者:陈燕;谷明莉;叶辛;李腾达;邓安梅 刊期: 2016年第03期

  • 白藜芦醇对金黄色葡萄球菌标准株抑菌作用及超微结构的影响

    目的研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对金黄色葡萄球菌标准株ATCC 25923(简称金葡菌标准株)抑菌作用。方法采用微量肉汤稀释法,检测金葡菌标准株低抑菌浓度(minimal inhibitory concentrations,MIC);通过透射和扫描电子显微镜观察白藜芦醇对金葡菌标准株超微形态的影响。结果白藜芦醇对金葡菌标准株的 MIC为0.256 mg/ml。白藜芦醇对金葡菌标准株作用后,与对照组相比,电镜下可见金葡菌标准株菌体细胞形态变形严重,菌体大小不一,菌体边界粗糙不圆润,细胞壁缺损并有破裂,边缘疏松不光滑,菌体内结构松散,核膜断裂,局部呈现空泡化特征,菌体细胞形态超微结构有明显破坏和抑制作用。结论白藜芦醇对金葡菌标准株有明显抑制和破坏作用,抑制机制可能和破坏细胞膜通透性有关。

    作者:王鑫;张瑞;李雅静;董倩倩 刊期: 2016年第03期

  • 血清胃蛋白酶原和胃泌素-17对萎缩性胃炎及胃癌患者诊断价值

    目的探索血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)Ⅰ,PGⅡ和胃泌素-17(gastrin-17,G-17)对萎缩性胃炎及胃癌患者的早期临床诊断价值。方法研究采用观察性病例-对照研究,共430例受检者纳入研究。血清测试前,受检者经活检组织病理学检查证实。根据病理结果将受检者分为非萎缩性胃炎160例、萎缩性胃炎118例、胃癌152例,用酶联免疫吸附试验方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清 PGⅠ,PGⅡ和 G-17含量,并计算 PGⅠ/PGⅡ比值。结果与非萎缩性胃炎组相比,萎缩性胃炎组血清PGⅠ和 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05),胃癌组血清 PGⅠ, PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与萎缩性胃炎组相比,胃癌组血清 PGⅠ和 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。根据受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),PGⅠ,PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及G-17诊断萎缩性胃炎的佳临界值为84.706μg/L,10.873μg/L,11.008和8.265 pg/L,诊断胃癌的佳临界值为65.145μg/L,10.089μg/L,6.375和4.971 pg/L。结论血清 PGⅠ,PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及 G-17水平低下是萎缩性胃炎及胃癌生物学标志,对胃癌早期诊断具有重要的临床意义。

    作者:杨建华;王炳华;林勇 刊期: 2016年第03期

  • ICU继发性肺结核患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

    目的了解深圳、龙岗、光明和龙华新区四家三级区属医院 ICU继发性肺结核患者并发下呼吸道感染的病原菌分布特征及其耐药性现状,为临床诊断和合理选用抗生素治疗提供参考依据。方法对随机选取2013年2月~2015年10月在三家区属医院 ICU确诊为继发性肺结核并发下呼吸感染患者593例的痰标本病原菌培养和药敏结果进行回顾性分析。结果593例 ICU继发性肺结核并发下呼吸道感染患者中共分离出617株病原菌,其中真菌占49.6%(306/617),革兰阴性杆菌占40.4%(249/617),革兰阳性球菌占10.0%(62/617);真菌感染主要病原体为白色假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌,分别占44.2%(273/617)和4.5%(28/617),革兰阴性杆菌主要为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及流感嗜血杆菌,分别占16.7%(103/617),12.0%(74/617)及7.3%(45/617),革兰阳性球菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血葡萄球菌,分别占4.5%(28/617),3.2%(20/617)及0.9%(5/617);分离出的病原菌为多药耐药菌,对常用抗菌药物呈现不同程度的耐药性。结论 ICU继发性肺结核患者并发下呼吸道感染的病原菌以真菌和革兰阴性杆菌多见,常见为白色假丝酵母菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌,且对常用抗菌药物产生不同程度的耐药性。

    作者:林丽云;刘爱胜;魏玉娥;魏灵芝;王艳梅;施俊柱;刘小君;文艳 刊期: 2016年第03期

  • 叉头框蛋白J2在非小细胞肺癌组织和癌旁组织中的表达及临床意义

    目的探讨叉头框蛋白J2(forkhead box J2,Foxj2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者癌组织中的表达及其临床意义。方法收集50例 NSCLC患者手术切除肺癌组织标本,用免疫印迹法(western blot)和免疫组化法检测 Foxj2在癌组织和癌旁组织中的表达。结果 western blot显示 Foxj2在癌旁组织中的表达高于癌组织,两组间差异具有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果表明 Foxj2在癌旁组织中的阳性细胞数明显高于癌组织,且无淋巴结转移组 Foxj2的表达强度高于有淋巴结转移组,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Foxj2参与 NSCLC的发生发展过程,并且可能与 NSCLC淋巴结转移有关。

    作者:陈相;陶国华;周峰;赵枰;杨其昌;沈屹;曹兴建 刊期: 2016年第03期

  • 锰超氧化物歧化酶基因变异与血脂和同型半胱氨酸水平的关系研究

    目的探讨锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)9 Ala/Val基因多态性与血脂和同型半胱氨酸(HCY)水平的关系。方法应用测序法检测137例冠心病患者和85例对照组的 Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性的基因型,应用比色法检测血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)和 Mn-SOD活性,应用终点法测定血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,应用酶法测定血清 HCY水平。结果冠心病组的Mn-SOD 9 VV基因型和V等位基因频率显著高于对照组。冠心病组的T-SOD和 Mn-SOD活性显著低于对照组。Mn-SOD 9 VV基因型的 T-SOD和 Mn-SOD活性显著低于 Mn-SOD 9 AA基因型。Mn-SOD 9 VV基因型的血清 TC,TG,LDL-C和 HCY水平显著高于 Mn-SOD 9 AA基因型,HDL-C水平显著低于Mn-SOD 9 AA基因型。Mn-SOD活性与血清TC,TG,LDL-C和 HCY水平呈负相关,与血清 HDL-C水平呈正相关。结论冠心病患者机体的抗氧化能力降低。Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性通过影响 Mn-SOD活性进而导致血脂代谢紊乱,促进冠心病的发生发展。HCY通过自身氧化和抑制 Mn-SOD活性,致使体内氧化物质增多,增加冠心病的发病风险。

    作者:赵佳;左林;姚创利;黎阳;姜小建;杨军乐 刊期: 2016年第03期

  • 全国网织红细胞计数参考区间和决定限现状调查与分析

    目的调查目前中国网织红细胞计数参考区间的来源、上下限分布以及决定限的现状。方法利用基于 Web方式的室间质量评价软件系统,收集参加2014年网织红细胞计数参考区间调查的实验室参考区间上下限、临床决定水平、来源情况、方法原理、仪器和试剂等相关信息。按照仪器对各实验室进行分组,然后使用 SPSS19.0软件对各组结果进行统计描述。结果共276家实验室回报了有效结果。参考区间来源中所占比例依次为《全国临床检验操作规程》(53.99%)、仪器厂家说明书(16.30%)、教科书(9.78%)、试剂厂家说明书(9.06%)等。决定限来源中所占比例依次为《全国临床检验操作规程》(56.06%)、仪器厂家说明书(16.67%)、教科书(7.58%)、试剂厂家说明书(7.58%)等。不同组间的参考区间上下限以及临床决定水平的中位数与均值较为接近,但P2.5和P97.5差异较大。仅有45.65%和48.48%的实验室在使用参考区间和决定限前对其进行了验证。参考区间下限和决定限在不同组间无明显差异(P>0.05),但参考区间上限在不同仪器组间差异具有统计学意义(P<0.001)。结论中国网织红细胞参考区间现状不尽如人意,应建立适应中国大多实验室和主要检测仪器的参考区间和决定限,为网织红细胞技术的标准化工作提供参考。

    作者:章晓燕;王薇;何法霖;钟堃;王治国 刊期: 2016年第03期

  • 湖北地区非小细胞肺癌EGFR 基因突变及其意义的研究

    目的探讨湖北地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者中 EGFR基因的突变情况,评价湖北地区 EGFR突变的检测力度,为临床合理选择酪氨酸激酶抑制剂提供可靠的实验依据。方法采用 PCR-sanger测序法以及 ADx-ARMS法检测2010~2015年期间253例肺癌标本中 EGFR基因突变情况,探讨不同检测手段的敏感度,探讨不同性别、不同组织分型间EGFR不同外显子的突变频率差异及其临床意义。结果253例肺癌标本中共检测到突变位点93个,以 E19和 E21的突变为常见,占比为53.76%和35.38%。ADx-ARMS法的 EGFR总突变检出率明显高于 Sanger测序法(P=0.001)。女性肺癌患者的检出率明显高于男性(P=0.001)。不同组织分型中,腺癌(38.01%)的检出率高,腺鳞癌(30.77%)与大细胞癌(20%)次之,鳞癌(4.55%)较低。无吸烟史的肺癌患者检出率(51.6%,81/157)明显高于有吸烟史患者(24%,12/50)。结论与PCR-sanger测序法相比,ADx-ARMS法对临床筛选 EGFR-TKI治疗的受益亚群,预测 EGFR-TKI疗效更为敏感有意义。湖北地区女性肺癌患者中 EGFR突变频率明显高于男性,与激素水平变化及吸烟状况有关。

    作者:王京伟;李艳;童永清;吴薇;郑红云 刊期: 2016年第03期

  • 非高密度脂蛋白胆固醇与冠心病患者心功能分级的相关性研究

    目的探讨非高密度脂蛋白胆固醇(non-HLD-C)与冠心病(cardiac heart disease,CHD)患者心功能分级的相关性。方法选取162例CHD患者为CHD实验组,并同期选取经健康体检合格者100例为正常对照组。CHD实验组按照心功能受损程度分为轻度受损组和重度受损组,其中轻度受损组包括心功能分级的 I级与 II级,重度受损组包括心功能分级的 III级和 IV级。分别测定各组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),并计算出非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量。比较CHD实验组与正常对照组中血脂各指标的差异性及血脂各指标与心功能受损程度的相关性。结果 CHD实验组中心功能轻度受损组血清中的 TG,LDL,non-HDL-C高于正常对照组,两组间差异有统计学意义(t=2.438,2.887,5.253,P值均<0.05),CHD实验组中的心功能重度受损组血清中的TG,LDL,non-HDL-C 高于正常对照组中,两组间差异有统计学意义(t=4.979,4.957,7.190,P 值均<0.05), CHD实验组中心功能轻度受损组血清中的 HDL较正常对照组低,两组间差异有统计学意义(t=-3.132,P<0.05),CHD实验组中心功能重度受损组血清中的 HDL较正常对照组低,两组间差异有统计学意义(t=-6.028,P<0.05),CHD实验组中只有心功能重度受损组的TC与正常对照组间差异有统计学意义(t=3.278,P<0.05),CHD实验组中心功能轻度受损组的 LDL,non-HDL-C,TG与重度受损组间差异有统计学意义(t=2.051,2.057,2.281,P 值均<0.05)。Logistic回归分析显示,CHD组血清 non-HDL-C的 OR值低于 LDL,高于 HDL和TG,并随着心功能受损程度的增加 OR值增加。结论 non-HDL-C与CHD的严重程度呈正相关,可在一定程度上反映 CHD的严重程度,是 CHD临床诊断与治疗的重要参考指标。

    作者:程俊杰;李静;梁西强;段霞霞;肖尧;郭炫 刊期: 2016年第03期

  • 尿靛甙测定对糖耐量减退患者的应用价值

    目的探讨尿靛甙监测对糖耐量减退患者的应用价值。方法在2015年1~2月健康查体的人群中选出96例符合 W H O糖耐量减退(IGT)诊断标准的患者,随机分成48例实验组患者和48例对照组患者,两组患者在年龄和性别构成上差异无统计学意义,均无其他疾病,且均未服用过控制血糖的药物。IGT患者实验组使用尿靛甙监测来建立个体化饮食营养指导,而对照组使用普通健康教育指导,两组分别于实验前和实验结束时检测尿靛甙、空腹血糖、2h糖耐量浓度水平,并进行比较。结果根据两组人群一年的跟踪回访和实验数据的收集发现,实验结束时 IGT患者实验组的尿靛甙水平为(50.7±6.2 mg/L vs 78.5±7.9 mg/L),空腹血糖水平为(6.34±0.11 mmol/L vs 6.91±0.29 mmol/L),2 h糖耐量水平为(7.81±0.52 mmol/L vs 9.57±1.13 mmol/L)低于对照组的水平,两组比较差异有统计学意义(t=2.0,2.60,3.06,P值均<0.05)。IGT患者实验组内比较,实验结束时尿靛甙水平为(50.7±6.2 mg/L vs 78.3±8.1 mg/L),空腹血糖水平为(6.34±0.11 mmol/L vs 6.78±0.19 mmol/L),2h糖耐量水平为(7.81±0.52 mmol/L vs 9.33±0.93 mmol/L)明显低于实验开始前的水平,差异有统计学意义(t=2.01,2.28,2.83,P值均<0.05)。在糖尿病各阶段的转归方面,IGT患者实验组明显优于对照组,差异有统计学意义(χ2=10.85,P<0.05)。结论通过尿靛甙测定来指导糖耐量减退患者合理饮食,有利于糖耐量减退患者对血糖的控制,能有效减缓糖耐量减退(IGT)向糖尿病(DM)的转化,转变向积极的方向发展。

    作者:韩振;徐鹏波;杨莉 刊期: 2016年第03期

  • 乙型肝炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR方法的建立及临床应用

    目的建立 SYBR Green I实时荧光定量 PCR检测乙型肝炎病毒 DNA的快速方法,并探讨其临床应用价值。方法根据GenBank公布的Hepatitis B virus gp1基因序列设计引物,建立SYBR Green I实时荧光定量PCR,并对反应体系和扩增程序进行优化。定量标准品通过基因克隆方法获得,同时以浙江省夸克公司 HBV DNA定量检测试剂盒作对照,应用于随机选取的100份乙型肝炎患者血清检测。结果 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检出限范围为5×102 copies/ml~5×108 copies/ml,HBV DNA浓度与CT值有良好线性关系,无交叉反应,整个过程仅需2.5 h。在随机抽取的100份临床标本应用中,与浙江省夸克公司的 HBV荧光定量 PCR检测试剂相比,建立的 SYBR Green I实时荧光定量PCR体系灵敏度100%,特异度92.5%。结论 SYBR Green实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强,可用于乙型肝炎患者病情监测,有效指导临床用药,准确评价 HBV感染者的病情。

    作者:何维娜;吕东月;刘和录;韩杰辉;何玥;李培培 刊期: 2016年第03期

  • 肺炎链球菌经典血清分型与分子分型两种方法比较

    目的比较肺炎链球菌经典血清分型法与分子分型法,为建立快速、准确的血清分型方法提供依据。方法选取2013年10月~2015年2月肇庆市第一人民医院住院患者分离的150株肺炎链球菌为研究对象,分别采用经典荚膜肿胀法和多重PCR法进行血清分型。比较两种方法的分型率及血清分型结果,用两独立样本的非参数检验对分型率高的几种血清型进行统计分析对比,并计算结果的总符合率、灵敏度及特异度。结果肺炎链球菌经典荚膜肿胀法分型率为53.3%,血清群以19群(32.7%),6群(7.3%)和23群(4%)为主,使用单因子血清分得血清型19F(23.3%),19A(2.7%),6 C(2%)和23 F(2.7%)。多重PCR法分型率为76.0%,血清群以19群(41.3%),6群(10.7%)和23群(10.7%)为主,具体的血清型以19F(32.7%),19A(8.0%),6(10.7%)和23F(9.3%)为主,采用两独立样本的非参数检验进行比较,以血清型结果为19F,19A和23F作对比,统计结果P>0.05,显示两种分型方法结果分布类别上相同,无显著性差异;两种方法结果总符合率为74.6%;以多重PCR法验证经典荚膜肿胀法的敏感度,敏感度为70.2%,特异度为100%,显示经典荚膜肿胀法敏感度不及分子分型法。结论与传统的血清学分型技术相比,分子分型技术具有快速、准确、灵敏及分辨力高等优点,成为可依赖的分型手段。

    作者:梁丽霞;申学基;高少东;李南洋;李成德;李海珠 刊期: 2016年第03期

  • 黄芩苷对一株产NDM-1大肠埃希菌体内外抗菌作用的研究

    目的观察黄芩苷对产 NDM-1大肠埃希菌的体内外抗菌作用。方法肉汤稀释法测定黄芩苷的小抑菌浓度(MIC)、小杀菌浓度(MBC);棋盘联合药敏试验检测黄芩苷与亚胺培南的协同作用;通过小鼠菌血症模型,观察黄芩苷对感染模型的保护作用。结果黄芩苷的小抑菌浓度和小杀菌浓度相同,均为8 mg/ml;黄芩苷与亚胺培南呈明显的协同作用(FIC=0.125),单独使用黄芩苷使菌血症小鼠死亡率降低25%。结论黄芩苷体内、外均具有一定的抗产 NDM-1大肠埃希菌活性。

    作者:刘志远;潘健;齐杰;张婷菊;马玉芝 刊期: 2016年第03期

  • 外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值

    目的评价外周血异常淋巴细胞(异淋)形态学的检查和实时荧光定量 PCR技术检测 EB病毒 DNA定量在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值。方法回顾性分析了2013年1月~2014年12月收治的212例传染性单核细胞增多症的患儿,分别抽取其发热初期和1周后抗凝静脉血做外周血涂片细胞形态学检查和实时荧光定量 PCR技术检测EBV-DNA定量。结合患儿初诊时的临床表现进行综合分析。异型淋巴细胞>10%及 EBV-DNA定量超过1.0×103拷贝为阳性。结果在212例传染性单核细胞增多症的患儿中,发热初期外周血涂片细胞形态学检查,82例异型淋巴细胞阳性,100例外周血 EBV-DNA定量阳性。1周后复检外周血,156例异型淋巴细胞阳性,高可达56%;180例 EBV-DNA定量阳性。联合检测外周血细胞形态学异型淋巴细胞及 EBV-DNA定量,发热初期,阳性125例,较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测(χ2=17.45,P<0.01)及 EBV-DNA定量检测(χ2=5.92,P<0.05)均明显提高;但1周后,阳性190例,较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测明显升高(χ2=18.16,P<0.01),但与 EBV-DNA定量检测比较,无明显提高(χ2=2.12,P>0.05)。结论联合检测外周血细胞学形态及 EBV-DNA定量对早期诊断小儿传染性单核细胞增多症十分重要,结合临床表现,能提高诊断的及时性及准确性。

    作者:肖波;毛金娥;陈万新 刊期: 2016年第03期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院