赵佳;左林;姚创利;黎阳;姜小建;杨军乐
目的调查目前中国网织红细胞计数参考区间的来源、上下限分布以及决定限的现状。方法利用基于 Web方式的室间质量评价软件系统,收集参加2014年网织红细胞计数参考区间调查的实验室参考区间上下限、临床决定水平、来源情况、方法原理、仪器和试剂等相关信息。按照仪器对各实验室进行分组,然后使用 SPSS19.0软件对各组结果进行统计描述。结果共276家实验室回报了有效结果。参考区间来源中所占比例依次为《全国临床检验操作规程》(53.99%)、仪器厂家说明书(16.30%)、教科书(9.78%)、试剂厂家说明书(9.06%)等。决定限来源中所占比例依次为《全国临床检验操作规程》(56.06%)、仪器厂家说明书(16.67%)、教科书(7.58%)、试剂厂家说明书(7.58%)等。不同组间的参考区间上下限以及临床决定水平的中位数与均值较为接近,但P2.5和P97.5差异较大。仅有45.65%和48.48%的实验室在使用参考区间和决定限前对其进行了验证。参考区间下限和决定限在不同组间无明显差异(P>0.05),但参考区间上限在不同仪器组间差异具有统计学意义(P<0.001)。结论中国网织红细胞参考区间现状不尽如人意,应建立适应中国大多实验室和主要检测仪器的参考区间和决定限,为网织红细胞技术的标准化工作提供参考。
作者:章晓燕;王薇;何法霖;钟堃;王治国 刊期: 2016年第03期
目的探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血Th9细胞所占百分比并初步探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测PBC患者(n=38)和健康对照者(n=38)外周血Th9细胞所占百分比,利用临床资料对患者进行 Mayo评分。采用实时荧光定量PCR法检测患者组和健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)中 IL-9,PU-1, TGF-β的表达量。并采用 ELISA方法检测患者血清中 IL-9的表达量。进一步分析 Th9细胞百分比与 PBC患者生化指标和Mayo评分的相关性。结果与健康对照组相比,PBC患者Th9细胞百分比增高(t=27.29;P<0.01),且随疾病分期加重逐渐增高。IL-9,PU-1和TGF-βmRNA的表达量显著增高(t=14.69,23.92,10.48;均P<0.01),且血清中 IL-9的表达量也显著增高(t=11.66;P<0.01)。生化指标(ALP,AST,ALT,GGT,TBIL)较健康对照组均显著增高(t=10.94,12.95,10.56,14.92,27.70;均P<0.01)。Th9细胞百分比与患者 Mayo评分、AST,ALT,GGT和TBIL间呈正相关(P<0.05)。结论 Th9细胞可能参与了PBC发病机制,且与疾病的发展相关,这为未来免疫调节治疗靶点的探索提供了新的依据。
作者:李虎;陈燕;张蕾;刘挺挺;叶辛;郭杰;邓安梅 刊期: 2016年第03期
目的对两种不同检测系统测定C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的结果进行比对和偏倚分析,以评价不同检测系统CRP测定结果的可比性。方法参照美国临床实验室标准研究所(CLSI)EP9-A2文件要求,收集长海医院急诊患者乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝血50例,同时使用全自动免疫分析仪(Beckman Immage 800)和免疫荧光分析仪(i-CHROMATM Reader)检测待测样本中的CRP浓度,评价两种方法检测结果的相关性。结果使用血浆标本时,两方法相关性良好,回归方程为Y=1.0765X-3.0315,R2=0.986。全血测定的回归方程为Y=0.8826X-1.1808,R2=0.9311。对于红细胞压积(HCT)较低的标本(<30.45%)使用纠正公式:全血 CRP(纠正后)=全血 CRP 结果(纠正前)/(1-HCT)。Y(纠正后)=1.0068X-3.6122,R2=0.9509。结论两种检测系统血浆 CRP的测定结果具有可比性,适合临床应用。遇 HCT较低的标本时,通过校正公式校正,可提高全血结果的可比性。
作者:汪怀周;陈燕;岳展伊;朱荣荣;邓安梅 刊期: 2016年第03期
目的探讨白细胞介素-19(IL-19)水平在2型糖尿病(T2DM)患者中的表达以及与血管病变的关系。方法选取T2DM患者120例(其中并发大血管病变32例,微血管病变52例,无血管病变36例),同期选择健康体检者50例为对照组,分别检测研究对象中 IL-19,空腹血糖(FBG),胰岛素(FINS)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平,并与对照组作比较。结果T2DM组中 IL-19水平显著高于正常对照组(41.9±11.9 pg/ml vs 16.2±8.5 pg/ml),差异有统计学意义(t=7.56,P<0.05)。T2DM并发大血管病变组和微血管病变组 IL-19水平显著高于无血管病变组(t=4.57,3.26;均P<0.05),且与病变血管数量有关。IL-19与胰岛素抵抗(HOMA-IR),HbA1c呈显著正相关(r分别为0.523和0.491,均P<0.01)。结论T2DM患者中 IL-19水平显著升高,与 HbA1c和 HOMA-IR抵抗密切相关,并且 IL-19可能参与了 T2DM血管病变的发生和发展。
作者:李礼;胡娟玉;于正清 刊期: 2016年第03期
目的探讨湖北地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者中 EGFR基因的突变情况,评价湖北地区 EGFR突变的检测力度,为临床合理选择酪氨酸激酶抑制剂提供可靠的实验依据。方法采用 PCR-sanger测序法以及 ADx-ARMS法检测2010~2015年期间253例肺癌标本中 EGFR基因突变情况,探讨不同检测手段的敏感度,探讨不同性别、不同组织分型间EGFR不同外显子的突变频率差异及其临床意义。结果253例肺癌标本中共检测到突变位点93个,以 E19和 E21的突变为常见,占比为53.76%和35.38%。ADx-ARMS法的 EGFR总突变检出率明显高于 Sanger测序法(P=0.001)。女性肺癌患者的检出率明显高于男性(P=0.001)。不同组织分型中,腺癌(38.01%)的检出率高,腺鳞癌(30.77%)与大细胞癌(20%)次之,鳞癌(4.55%)较低。无吸烟史的肺癌患者检出率(51.6%,81/157)明显高于有吸烟史患者(24%,12/50)。结论与PCR-sanger测序法相比,ADx-ARMS法对临床筛选 EGFR-TKI治疗的受益亚群,预测 EGFR-TKI疗效更为敏感有意义。湖北地区女性肺癌患者中 EGFR突变频率明显高于男性,与激素水平变化及吸烟状况有关。
作者:王京伟;李艳;童永清;吴薇;郑红云 刊期: 2016年第03期
目的了解深圳、龙岗、光明和龙华新区四家三级区属医院 ICU继发性肺结核患者并发下呼吸道感染的病原菌分布特征及其耐药性现状,为临床诊断和合理选用抗生素治疗提供参考依据。方法对随机选取2013年2月~2015年10月在三家区属医院 ICU确诊为继发性肺结核并发下呼吸感染患者593例的痰标本病原菌培养和药敏结果进行回顾性分析。结果593例 ICU继发性肺结核并发下呼吸道感染患者中共分离出617株病原菌,其中真菌占49.6%(306/617),革兰阴性杆菌占40.4%(249/617),革兰阳性球菌占10.0%(62/617);真菌感染主要病原体为白色假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌,分别占44.2%(273/617)和4.5%(28/617),革兰阴性杆菌主要为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及流感嗜血杆菌,分别占16.7%(103/617),12.0%(74/617)及7.3%(45/617),革兰阳性球菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血葡萄球菌,分别占4.5%(28/617),3.2%(20/617)及0.9%(5/617);分离出的病原菌为多药耐药菌,对常用抗菌药物呈现不同程度的耐药性。结论 ICU继发性肺结核患者并发下呼吸道感染的病原菌以真菌和革兰阴性杆菌多见,常见为白色假丝酵母菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌,且对常用抗菌药物产生不同程度的耐药性。
作者:林丽云;刘爱胜;魏玉娥;魏灵芝;王艳梅;施俊柱;刘小君;文艳 刊期: 2016年第03期
目的探讨锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)9 Ala/Val基因多态性与血脂和同型半胱氨酸(HCY)水平的关系。方法应用测序法检测137例冠心病患者和85例对照组的 Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性的基因型,应用比色法检测血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)和 Mn-SOD活性,应用终点法测定血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,应用酶法测定血清 HCY水平。结果冠心病组的Mn-SOD 9 VV基因型和V等位基因频率显著高于对照组。冠心病组的T-SOD和 Mn-SOD活性显著低于对照组。Mn-SOD 9 VV基因型的 T-SOD和 Mn-SOD活性显著低于 Mn-SOD 9 AA基因型。Mn-SOD 9 VV基因型的血清 TC,TG,LDL-C和 HCY水平显著高于 Mn-SOD 9 AA基因型,HDL-C水平显著低于Mn-SOD 9 AA基因型。Mn-SOD活性与血清TC,TG,LDL-C和 HCY水平呈负相关,与血清 HDL-C水平呈正相关。结论冠心病患者机体的抗氧化能力降低。Mn-SOD 9 Ala/Val基因多态性通过影响 Mn-SOD活性进而导致血脂代谢紊乱,促进冠心病的发生发展。HCY通过自身氧化和抑制 Mn-SOD活性,致使体内氧化物质增多,增加冠心病的发病风险。
作者:赵佳;左林;姚创利;黎阳;姜小建;杨军乐 刊期: 2016年第03期
目的了解深圳地区未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血基因缺陷携带现状,为优生婚配提供科学依据。方法随机选取2014年3月~2015年10月来医院体检未婚青年人群6182例,采用Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪和红细胞渗透脆性试验进行珠蛋白生成障碍性贫血初筛检查,对平均红细胞体积(MCV)≤82 fl和平均红细胞含量(MCH)≤27 pg或红细胞渗透脆性率<60%的人群进行血红蛋白电泳分析,对初筛阳性者采用 PCR和反向点杂交法进行基因确诊,并对结果进行统计分析。结果6182例未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血初筛阳性率17.3%(1069/6182),其中可疑α-为12.2%(752/6182),可疑β-为5.1%(317/6182);基因确诊珠蛋白生成障碍性贫血阳性率为11.6%(717/6182),其中α-为6.7%(413/6182),β-为3.4%(209/6182),α复合β为1.5%(95/6182);α-基因缺陷类型主要为-SEA/αα,-α3.7/αα及-α4.2/αα,缺陷率分别为60.8%,23.5%及10.4%;β-基因缺陷类型主要为 CD41/42,CD17及-28,缺陷率分别为41.1%,28.2%及12.9%。结论深圳地区未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血有一定的携带率,当地计划生育部门应引起高度重视。加强未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血筛查,对指导优生婚配和预防重症珠蛋白生成障碍性贫血患儿的出生,提高优生优育率,具有重要的意义。
作者:陈望;刘爱胜;文艳;阳建 刊期: 2016年第03期
目的探讨类风湿关节炎患者滑膜抗环瓜氨酸肽(CCP)表位表达与肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)基因的相关性。方法2013年2月~2015年选择在湖北医药学院附属东风医院风湿免疫科住院的类风湿关节炎患者110例作为观察组,同期选择在该院进行体检的健康者110例作为对照组,两组都进行滑膜抗 CCP表位表达阳性率检测与 PADI4基因表达检测,同时进行相关性分析。结果观察组与对照组的滑膜抗 CCP表位表达阳性率分别为70.9%和9.1%,观察组明显高于对照组(χ2=23.289,P<0.05)。观察组 PADI4-104基因型的表达频率与对照组对比差异有统计学意义(χ2=2.984,P<0.05),多为 G/G表达,而对照组多为C/G表达。Pearson相关性分析显示在观察组中,滑膜抗 CCP表位阳性表达情况与PADI4-104基因型表达频率之间存在明显相关性(r=0.344,P<0.05);logistic逐步回归分析显示 PADI4-104基因型表达频率是影响滑膜抗CCP表位表达的主要因素(P<0.05)。结论类风湿关节炎患者的滑膜抗 CCP表位表达阳性率明显增加,同时也存在PADI4基因多态性紊乱情况,两者也存在明显的相关性,从而影响类风湿关节炎的发病状况。
作者:沈小辉;喻伟;杨菲 刊期: 2016年第03期
目的观察黄芩苷对产 NDM-1大肠埃希菌的体内外抗菌作用。方法肉汤稀释法测定黄芩苷的小抑菌浓度(MIC)、小杀菌浓度(MBC);棋盘联合药敏试验检测黄芩苷与亚胺培南的协同作用;通过小鼠菌血症模型,观察黄芩苷对感染模型的保护作用。结果黄芩苷的小抑菌浓度和小杀菌浓度相同,均为8 mg/ml;黄芩苷与亚胺培南呈明显的协同作用(FIC=0.125),单独使用黄芩苷使菌血症小鼠死亡率降低25%。结论黄芩苷体内、外均具有一定的抗产 NDM-1大肠埃希菌活性。
作者:刘志远;潘健;齐杰;张婷菊;马玉芝 刊期: 2016年第03期
目的了解2015年北京地区育龄妇女 TORCH 感染情况,并探讨近期感染与 TNF-α水平的关系。方法采用ELISA法对2015年1月~12月进行孕检的970例妇女筛查 TOX,RV,CMV,HSV-I,HSV-II IgM和 IgG抗体。同时对IgM阳性妇女检测血清TNF-α水平,对结果进行统计分析。结果孕前妇女TOX,RV,CMV,HSV-I和HSV-II IgM的阳性率分别为1.65%,2.16%,4.54%,17.42%和6.08%。IgG 的阳性率依次是3.81%,93.40%,92.47%,64.02%和14.64%。<30岁妇女CMV和 HSV-I IgM阳性率高于≥30岁妇女(χ2=4.558,4.051;均P<0.05)。HSV-I型夏季感染率高于其他季节(χ2=5.356,P<0.05)。TORCH IgM阳性患者血清TNF-α水平高于正常体检组(t=10.219,P<0.01)。结论2015年北京地区孕前妇女TORCH感染率较高且有其流行特点,检测 TNF-α水平对于生殖健康具有重要病理意义。
作者:靳庆娥;谷俊朝;苏建荣 刊期: 2016年第03期
目的探讨α-内收蛋白基因(ADD1)的单核苷酸多态性(SNP)及表达水平与冠心病(CAD)的相关性。方法提取2011年1月~2013年10月就诊于火箭军总医院的114例CAD患者和116例健康对照者外周血白细胞DNA和RNA,应用荧光标记单碱基延伸及杂交技术检测ADD1基因的rs3775067和rs1263359多态性,应用荧光标记及毛细管电泳技术检测 ADD1的基因表达水平。结果 ADD1基因2个 SNP的基因型频率和等位基因频率在两组间差异无统计学意义(χ2=0.018~1.317,P 值均>0.05)。CAD 组的 ADD1基因表达水平为0.226±0.284,明显高于健康对照组(0.153±0.144),差异有统计学意义(P<0.05)。通过对不同基因型间表达水平的比较,结果显示 CAD组 rs3775067的 TC型患者的基因表达水平(0.250±0.319)明显高于健康对照组(0.154±0.156,P<0.05),余各基因型两组间表达水平差异无统计学意义(t=0.557~1.867,P 值均>0.05)。结论 ADD1基因表达水平的升高是 CAD 的危险因素,而 rs3775067和rs1263359多态性与CAD的易感性无关。
作者:张阳东;陈洁;楚瑞雪;王利营;云洁;安娟;方靓 刊期: 2016年第03期
目的探索高原地区流感病毒在犬肾细胞(MDCK)上的佳培养条件,提高流感病毒的分离效果。方法将原始标本分别接种于 MDCK细胞,通过比较CO2百分浓度(5%,4.8%,4.6%,4.4%,4.2%),TPCK-胰酶浓度(1,2,3,4,5,6,8,10μg/ml),接种量(100,200,300,400,500μl),培养时间(48,72,96,120,144 h),接种方法(吸附接种,直接接种),培养容器(细胞瓶,6孔板)对流感病毒的影响,确定佳培养条件,对分离的各型病毒用红细胞凝集(HA)检测病毒滴度。结果通过病毒血凝素滴度结果比较,4.4% CO2与4.6% CO2,2μg/ml TPCK-胰酶,300μl与400μl的接种量、吸附接种、72 h~96 h的培养时间、6孔板收获的病毒血凝素滴度高。结论在高原地区实验室建立了 MDCK细胞培养流感病毒的优条件。
作者:胡澜怀;周霞 刊期: 2016年第03期
目的比较黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌囊性纤维化跨膜传导调节体抑制因子(Cif)基因表达差异,并结合临床资料比较对应患者白细胞(WBC)及 C反应蛋白(CRP)等炎症指标的不同。方法采用逆转录 PCR和实时荧光定量PCR检测两种型别铜绿假单胞菌Cif基因的表达量。收集相应患者临床数据比较 WBC数和 CRP水平及其与 Cif基因表达的相关性。结果黏液型铜绿假单胞菌Cif基因表达量显著高于非黏液型铜绿假单胞菌,差异有统计学意义(t=2.09, P<0.05),黏液型铜绿假单胞菌组和非黏液型铜绿假单胞菌组的患者其WBC数和CRP水平差异无统计学意义(t=0.65,0.60,P>0.05);Cif基因表达与CRP水平相关性极弱(a=-0.061,R2=0.04),与 WBC数相关性也极弱(a=0.095,R2=0.029)。结论 Cif基因表达可能与黏液型铜绿假单胞菌生物被膜的形成有关,可能为铜绿假单胞菌新的毒力因子。
作者:邱晓明;林锦骠;黄尔;杨滨 刊期: 2016年第03期
目的建立基于mec A/nuc/fem B三基因联合的 Taqman-探针荧光定量 PCR鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法。方法以常规检验标本中分离和采用 VITEK 2 Compact微生物分析仪鉴定为凝固酶阳性的 MRSA为研究对象,通过PrimerPremier5.0和Beacon Designer 7软件设计针对mec A/nuc/fem B特异性PCR引物及Taqman荧光探针,荧光探针5’端分别采用 FAM,HEX及 ROX标记,3’端采用BHQ1标记,在荧光定量PCR仪进行检测。结果①1 g/dl凝胶电泳结果显示mec A/nuc/fem B三个基因引物特异性较好,扩增出的条带分子量与预期分子量一致且未见非特异性扩增;②在单管单通道及单管多通道的 PCR检测中 mec A/nuc/fem B均获得特异性扩增,且三个基因在单管多通道的PCR扩增效果与单管单通道的相类似。结论成功建立了多通道 Taqman-探针荧光定量 PCR鉴定 MRSA的方法, mec A/nuc/fem B三种基因联合检测可有效区分凝固酶阴性和阳性的 MRSA,提高鉴定 MRSA的准确率。
作者:陈昌国;李艳君;郭建巍;陈秋圆;刘敏;马志家;郝秀红;赵强元 刊期: 2016年第03期
目的探索血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)Ⅰ,PGⅡ和胃泌素-17(gastrin-17,G-17)对萎缩性胃炎及胃癌患者的早期临床诊断价值。方法研究采用观察性病例-对照研究,共430例受检者纳入研究。血清测试前,受检者经活检组织病理学检查证实。根据病理结果将受检者分为非萎缩性胃炎160例、萎缩性胃炎118例、胃癌152例,用酶联免疫吸附试验方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清 PGⅠ,PGⅡ和 G-17含量,并计算 PGⅠ/PGⅡ比值。结果与非萎缩性胃炎组相比,萎缩性胃炎组血清PGⅠ和 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05),胃癌组血清 PGⅠ, PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与萎缩性胃炎组相比,胃癌组血清 PGⅠ和 G-17均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。根据受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),PGⅠ,PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及G-17诊断萎缩性胃炎的佳临界值为84.706μg/L,10.873μg/L,11.008和8.265 pg/L,诊断胃癌的佳临界值为65.145μg/L,10.089μg/L,6.375和4.971 pg/L。结论血清 PGⅠ,PGⅡ,PGⅠ/PGⅡ及 G-17水平低下是萎缩性胃炎及胃癌生物学标志,对胃癌早期诊断具有重要的临床意义。
作者:杨建华;王炳华;林勇 刊期: 2016年第03期
目的探讨尿靛甙监测对糖耐量减退患者的应用价值。方法在2015年1~2月健康查体的人群中选出96例符合 W H O糖耐量减退(IGT)诊断标准的患者,随机分成48例实验组患者和48例对照组患者,两组患者在年龄和性别构成上差异无统计学意义,均无其他疾病,且均未服用过控制血糖的药物。IGT患者实验组使用尿靛甙监测来建立个体化饮食营养指导,而对照组使用普通健康教育指导,两组分别于实验前和实验结束时检测尿靛甙、空腹血糖、2h糖耐量浓度水平,并进行比较。结果根据两组人群一年的跟踪回访和实验数据的收集发现,实验结束时 IGT患者实验组的尿靛甙水平为(50.7±6.2 mg/L vs 78.5±7.9 mg/L),空腹血糖水平为(6.34±0.11 mmol/L vs 6.91±0.29 mmol/L),2 h糖耐量水平为(7.81±0.52 mmol/L vs 9.57±1.13 mmol/L)低于对照组的水平,两组比较差异有统计学意义(t=2.0,2.60,3.06,P值均<0.05)。IGT患者实验组内比较,实验结束时尿靛甙水平为(50.7±6.2 mg/L vs 78.3±8.1 mg/L),空腹血糖水平为(6.34±0.11 mmol/L vs 6.78±0.19 mmol/L),2h糖耐量水平为(7.81±0.52 mmol/L vs 9.33±0.93 mmol/L)明显低于实验开始前的水平,差异有统计学意义(t=2.01,2.28,2.83,P值均<0.05)。在糖尿病各阶段的转归方面,IGT患者实验组明显优于对照组,差异有统计学意义(χ2=10.85,P<0.05)。结论通过尿靛甙测定来指导糖耐量减退患者合理饮食,有利于糖耐量减退患者对血糖的控制,能有效减缓糖耐量减退(IGT)向糖尿病(DM)的转化,转变向积极的方向发展。
作者:韩振;徐鹏波;杨莉 刊期: 2016年第03期
目的制备特异性抗人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列,将多肽序列与牛血清蛋白(bovine albumin,BSA)偶联,以偶联后多肽为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体;以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得 HPV 18 E6基因,将该基因插入表达质粒 pET-28a,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体;重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确,成功表达 HPV18 E6蛋白;纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列,该抗体具有较好的特异性。
作者:孔倩倩;唐振华;相芬芬;詹月萍;许健;吴蓉;康向东 刊期: 2016年第03期
目的探讨髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因及蛋白在原发性肝癌和肝硬化组织中的表达及临床病理学意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法,蛋白质印迹法(western blot,WB)和免疫组织化学 ENVISION法分别检测20例肝癌组织,19例肝硬化组织和12例对照肝组织中 Mcl-1的表达,并分析其表达与肝癌临床病理学特征的关系。结果 Mcl-1 mRNA相对表达强度在对照组、肝硬化组和肝癌组中分别为0.52±0.17,3.46±1.7,3.65±2.93,其中肝癌组及肝硬化组分别与对照组间比较,差异均有统计学意义(t=7.925,5.334,P<0.05)。Mcl-1蛋白相对表达量在肝硬化组(0.51±0.35)和肝癌组(0.75±0.36)均显著高于对照组(0.21±0.19)(t=5.526和6.355,P<0.05)。肝癌组Mcl-1的阳性表达率为55.00%(11/20),显著高于对照组33.33%(4/12)(t=7.835,P<0.05),Mcl-1蛋白阳性表达与肿瘤有无坏死和TNM分期有关(χ2=4.201,P<0.05)。结论 Mcl-1基因及蛋白在肝癌组、肝硬化组和对照肝组织中的表达存在差异,可能参与了肝硬化的发生、发展及向肝癌的恶性转化。
作者:李峰;魏群;周国雄;黄东凤;张弘 刊期: 2016年第03期
目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心(NCBI)公布的 H7N9基因 HA序列,设计特异性引物及TaqMan探针;构建阳性重组质粒,验证其低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒,线性关系在6×102 copies/μl~6×108 copies/μl范围内检测结果良好;用该方法测得低拷贝数为600 copies/μl,特异度和重复性(CV<1%)良好,无交叉反应;用该荧光定量 RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品,准确率为100%(16/16)。结论实验建立的实时荧光定量 RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒 H7N9型的快速检测。
作者:陈勉乔;于浩洋 刊期: 2016年第03期