刘青；樊冰
目的通过比较5个常用的不同血脂检测系统在使用参考方法赋值新鲜血清校准前后的结果可比性，探讨实现血脂检测一致化的方法。方法采用室内质控总变异（CV％）评价5个血脂检测系统的不精密度。参考美国临床及实验室标准化委员会（CLSI）EP 9 A2方案，比对54份新鲜患者血清在5个临床常用的总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）检测系统上的结果，并将不同检测系统结果与均值进行偏倚评估。其中8份样本采用参考方法定值，并评估不同系统的偏倚。尝试采用参考方法赋值的新鲜冰冻血清校准以上检测系统，并使用相同的54份患者新鲜血清再次进行比对及偏倚评估。比对校准前后54份样本在不同检测系统测定的变异。结果5个检测系统 TG 总不精密度在3.76％～23.65％之间，TC 在2.19％～23.43％之间。各系统结果相关良好，TG和TC的r值分别在0.9967～0.9996和0.9562～0.9967之间，但系统间结果存在较明显的偏差，各系统大百分偏差 TG在14.72％～34.21％，TC在3.11％～14.57％。用参考方法赋值的血清对不同系统进行校准之后系统间偏差和变异均明显降低。结论用参考方法赋值的新鲜血清校准不同的血脂检测系统，可以有效地提高测定结果的一致性。
作者：邸茜；邱玲；侯立安；董军；赵芳；李鹏昌；王凯；程歆琦；国秀芝 刊期： 2016年第03期
目的评价外周血异常淋巴细胞（异淋）形态学的检查和实时荧光定量 PCR技术检测 EB病毒 DNA定量在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值。方法回顾性分析了2013年1月～2014年12月收治的212例传染性单核细胞增多症的患儿，分别抽取其发热初期和1周后抗凝静脉血做外周血涂片细胞形态学检查和实时荧光定量 PCR技术检测EBV-DNA定量。结合患儿初诊时的临床表现进行综合分析。异型淋巴细胞＞10％及 EBV-DNA定量超过1.0×103拷贝为阳性。结果在212例传染性单核细胞增多症的患儿中，发热初期外周血涂片细胞形态学检查，82例异型淋巴细胞阳性，100例外周血 EBV-DNA定量阳性。1周后复检外周血，156例异型淋巴细胞阳性，高可达56％；180例 EBV-DNA定量阳性。联合检测外周血细胞形态学异型淋巴细胞及 EBV-DNA定量，发热初期，阳性125例，较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测（χ2＝17.45，P＜0.01）及 EBV-DNA定量检测（χ2＝5.92，P＜0.05）均明显提高；但1周后，阳性190例，较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测明显升高（χ2＝18.16，P＜0.01），但与 EBV-DNA定量检测比较，无明显提高（χ2＝2.12，P＞0.05）。结论联合检测外周血细胞学形态及 EBV-DNA定量对早期诊断小儿传染性单核细胞增多症十分重要，结合临床表现，能提高诊断的及时性及准确性。
作者：肖波；毛金娥；陈万新 刊期： 2016年第03期
目的探讨非高密度脂蛋白胆固醇（non-HLD-C）与冠心病（cardiac heart disease，CHD）患者心功能分级的相关性。方法选取162例CHD患者为CHD实验组，并同期选取经健康体检合格者100例为正常对照组。CHD实验组按照心功能受损程度分为轻度受损组和重度受损组，其中轻度受损组包括心功能分级的 I级与 II级，重度受损组包括心功能分级的 III级和 IV级。分别测定各组总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），并计算出非高密度脂蛋白胆固醇（non-HDL-C）的含量。比较CHD实验组与正常对照组中血脂各指标的差异性及血脂各指标与心功能受损程度的相关性。结果 CHD实验组中心功能轻度受损组血清中的 TG，LDL，non-HDL-C高于正常对照组，两组间差异有统计学意义（t＝2.438，2.887，5.253，P值均＜0.05），CHD实验组中的心功能重度受损组血清中的TG，LDL，non-HDL-C 高于正常对照组中，两组间差异有统计学意义（t＝4.979，4.957，7.190，P 值均＜0.05）， CHD实验组中心功能轻度受损组血清中的 HDL较正常对照组低，两组间差异有统计学意义（t＝-3.132，P＜0.05），CHD实验组中心功能重度受损组血清中的 HDL较正常对照组低，两组间差异有统计学意义（t＝-6.028，P＜0.05），CHD实验组中只有心功能重度受损组的TC与正常对照组间差异有统计学意义（t＝3.278，P＜0.05），CHD实验组中心功能轻度受损组的 LDL，non-HDL-C，TG与重度受损组间差异有统计学意义（t＝2.051，2.057，2.281，P 值均＜0.05）。Logistic回归分析显示，CHD组血清 non-HDL-C的 OR值低于 LDL，高于 HDL和TG，并随着心功能受损程度的增加 OR值增加。结论 non-HDL-C与CHD的严重程度呈正相关，可在一定程度上反映 CHD的严重程度，是 CHD临床诊断与治疗的重要参考指标。
作者：程俊杰；李静；梁西强；段霞霞；肖尧；郭炫 刊期： 2016年第03期
目的探讨刺激干扰素基因（STING）在原发性胆汁性肝硬化（PBC）中的表达及其潜在的临床意义。方法纳入2014年1月～2015年10月期间在上海长海医院和长征医院就诊的PBC患者28例，平均年龄32.5±11.3岁，纳入同期体检的健康对照28例，平均年龄37.5±13.7岁。分离单个核细胞（PBMC），采用实时荧光定量PCR检测 STING mRNA表达水平；采用Spearman检验分析STING表达水平与PBC患者临床指标的相关性；随访5例初诊的PBC患者，观察临床治疗前后 STING表达水平的变化。结果与健康对照组相比，STING mRNA在 PBC患者 PBMC中显著增高，在Ⅲ期和Ⅳ期中的表达显著高于 I期和Ⅱ期，差异有统计学意义（U＝0.00，P＜0.05）。STING mRNA水平与患者 Mayo评分、GGT正相关（R＝0.45，R＝0.42，P＜0.05），与 AST，ALT和 ALP无相关性（R＝0.33，0.21，0.27，P＞0.05）。临床治疗有效后，STING mRNA的表达量显著降低，差异有统计学意义（U＝0.00，P＜0.05）。结论 STING可能参与了PBC的发病机制。
作者：陈燕；谷明莉；叶辛；李腾达；邓安梅 刊期： 2016年第03期
目的分析北京大学深圳医院2013～2014年门急诊腹泻患者肠道病原菌的分布情况，为临床诊断和治疗提供参考依据；同时了解沙门菌检测方法改进的成效。方法2013～2014年间，在北京大学深圳医院门急诊采集了1719名腹泻患者的粪便标本，进行致泻性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、弧菌的分离培养、鉴定和血清分型；对其中451份水样便标本进行轮状病毒、诺沃克病毒、星状病毒和肠道腺病毒的荧光PCR检测。沙门菌检测由标本直接接种改为用增加亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）增菌培养，分析两种方法检出率的统计学差异。结果在1719份粪便标本中，共检出肠道病原菌143株[阳性率为8.3％（143／1719）]，其中沙门菌76株，占53.1％（76／143）；致泻性大肠埃希菌46株，占32.2％（46／143），包括肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）25株、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）12株、肠黏附性大肠埃希菌（EAEC）8株和肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）1株；副溶血弧菌19株，占13.3％（19／143）；志贺菌2株，占1.4％（2／143）。检测到两种病原菌（沙门菌＋EPEC）混合感染病例一例。在451份水样便标本中，有189份检出一种或两种肠道病毒，阳性率为41.9％（189／451），其中诺沃克病毒91份，占48.1％（91／189），轮状病毒79份，占41.8％（79／189），星状病毒10份，占5.3％（10／189）和肠道腺病毒9份，占4.8％（9／189）。有4份标本同时检出轮状病毒和诺沃克病毒，有1份标本同时检出星状病毒和诺沃克病毒；检出致病菌和病毒混合感染10例。沙门菌检测方法改进后阳性率由0.6％（17／2627）提高到4.4％（76／1719），χ2＝67.2，P＜0.01，差异具有统计学意义。结论腹泻病原微生物类型复杂多样，临床应重视和加强腹泻病原微生物的常规检验，改进检测方法，降低漏检率，对完善当前腹泻病的病因诊断和治疗有重要参考意义。
作者：文明明；韩美玲；李卫宁；李迎慧；张海龙；杨虹 刊期： 2016年第03期
目的通过研究 Toll 受体4（TLR4）及髓样细胞分化因子88（MyD88）在慢性肾功能不全组织中的表达，探讨TLR4／MyD88蛋白在慢性肾功能不全发生发展中的作用。方法选取2011.07～2014.05华北理工大学附属医院确诊的40例肾功能不全的患者为观察对象，40例肾癌切除患者未被浸润的肾组织为对照，通过免疫组化方法检测慢性肾功能不全患者肾脏组织中TLR4及 MyD88的表达情况，通过腺嘌呤（200mg／kg）连续灌胃制备大鼠模型，定时逆转录 PCR（RT-PCR）及 Western blot检测TLR4及 MyD88的表达，同时将大鼠模型分为TLR4组、未阻断组和 IgG对照组分别检测外周血中尿素氮（BNN）及肌酐（RE）的浓度。结果慢性肾功能不全患者肾脏组织中TLR4及 MyD88的表达明显高于正常对照组；腺嘌呤制备的大鼠模型中的TLR4及 MyD88的基因及蛋白的表达明显高于正常大鼠；TLR4阻断组尿素氮（15.65±3.97mmol／L）明显低于未阻断组（23.33±7.62mmol／L）及 IgG对照组（26.33±6.77mmol／L）（t＝2.887，P＝0.045）；肌酐（523.89±52.67μmol／L）也明显低于未阻断组（789.51±98.17μmol／L）及 IgG 对照组（809.51±94.19μmol／L）（t＝4.125，P＝0.015）。结论 TLR4及 MyD88蛋白在慢性肾功能不全中表达增加，并且显著促进疾病的发展过程。
作者：吴景华；郭佳培；王志刚；王海欣 刊期： 2016年第03期
目的建立 SYBR Green I实时荧光定量 PCR检测乙型肝炎病毒 DNA的快速方法，并探讨其临床应用价值。方法根据GenBank公布的Hepatitis B virus gp1基因序列设计引物，建立SYBR Green I实时荧光定量PCR，并对反应体系和扩增程序进行优化。定量标准品通过基因克隆方法获得，同时以浙江省夸克公司 HBV DNA定量检测试剂盒作对照，应用于随机选取的100份乙型肝炎患者血清检测。结果 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检出限范围为5×102 copies／ml～5×108 copies／ml，HBV DNA浓度与CT值有良好线性关系，无交叉反应，整个过程仅需2.5 h。在随机抽取的100份临床标本应用中，与浙江省夸克公司的 HBV荧光定量 PCR检测试剂相比，建立的 SYBR Green I实时荧光定量PCR体系灵敏度100％，特异度92.5％。结论 SYBR Green实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强，可用于乙型肝炎患者病情监测，有效指导临床用药，准确评价 HBV感染者的病情。
作者：何维娜；吕东月；刘和录；韩杰辉；何玥；李培培 刊期： 2016年第03期
目的对两种不同检测系统测定C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）的结果进行比对和偏倚分析，以评价不同检测系统CRP测定结果的可比性。方法参照美国临床实验室标准研究所（CLSI）EP9-A2文件要求，收集长海医院急诊患者乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝血50例，同时使用全自动免疫分析仪（Beckman Immage 800）和免疫荧光分析仪（i-CHROMATM Reader）检测待测样本中的CRP浓度，评价两种方法检测结果的相关性。结果使用血浆标本时，两方法相关性良好，回归方程为Y＝1.0765X－3.0315，R2＝0.986。全血测定的回归方程为Y＝0.8826X－1.1808，R2＝0.9311。对于红细胞压积（HCT）较低的标本（＜30.45％）使用纠正公式：全血 CRP（纠正后）＝全血 CRP 结果（纠正前）／（1－HCT）。Y（纠正后）＝1.0068X－3.6122，R2＝0.9509。结论两种检测系统血浆 CRP的测定结果具有可比性，适合临床应用。遇 HCT较低的标本时，通过校正公式校正，可提高全血结果的可比性。
作者：汪怀周；陈燕；岳展伊；朱荣荣；邓安梅 刊期： 2016年第03期
目的应用化学发光法检测血液C肽时，实验室缺乏相应的质控品。探讨自制 C肽混合血清质控品作为该法测定C肽室内质控品的可行性。方法从糖尿病患者和健康体检血清中分别收集 C肽低值血清（浓度在1.20 ng／ml左右）和高值血清（浓度在12.00 ng／ml左右），排除溶血、黄疸及脂浊血清，防止细菌污染，乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒指标均为阴性，然后分别进行混合、防腐、分装，－20℃保存。使用西门子公司化学发光 C肽试剂盒进行测定，对自制C肽混合血清质控品进行性能评价。结果低值、高值两个水平的血清 C肽质控品的批内不精密度分别是4.46％和4.15％；天间不精密度分别是6.00％，5.56％；－20℃保存稳定期至少6个月；经单因素方差分析，每个月之间相比，低值和高值的F值分别是0.665，0.602，P值分别是0.471，0.568，均＞0.05，差异无统计学意义；瓶间无显著性差异。结论－20℃保存的低值和高值两个水平自制C肽混合血清质控品能够符合室内质控品要求。
作者：张培育；邓演超；李全双 刊期： 2016年第03期
目的分析特发性膜性肾病患者血清抗 PLA2R抗体的表达，探讨其在特发性膜性肾病诊断及病情评估中的价值。方法收集经肾活检确诊的118例肾小球疾病患者，其中包括97例 IMN和21例 IgA肾病与19例健康体检者作为研究对象，应用 ELISA法检测血清抗 M型磷脂酶 A2受体（PLA2R）抗体表达水平，并分析其与 IMN患者血清清蛋白，24 h尿蛋白量等指标的相关性。结果 IMN组，IgA肾病组及健康体检组血清抗 PLA2R抗体含量中位数分别为45.2（3.6～705.9）RU／ml，5.9（2.3～10.6）RU／ml和1.2（0.6～9.3）RU／ml，IMN组血清抗PLA2R抗体含量高于 IgA肾病组及健康体检组，差异有统计学意义（t＝－5.027，－3.077；P均＜0.05）；97例 IMN患者中76例血清抗PLA2R抗体阳性，阳性率为78.35％，IgA肾病组与健康体检组均未检出阳性样本。IMN组患者血清抗PLA2R抗体与血清清蛋白呈负相关（r＝－0.453，P＜0.05）；与肌酐、胆固醇、红细胞沉降率、24 h尿蛋白呈正相关（r＝0.233，0.234，0.363，0.586；P 均＜0.05）。结论血清抗PLA2R抗体可作为 IMN特异性标志物用于 IMN的血清学诊断，并对评估 IMN患者病情的严重程度有重要参考意义。
作者：朱涛；赵涌；彭梦乐；施小晴；秦东春 刊期： 2016年第03期
目的比较黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌囊性纤维化跨膜传导调节体抑制因子（Cif）基因表达差异，并结合临床资料比较对应患者白细胞（WBC）及 C反应蛋白（CRP）等炎症指标的不同。方法采用逆转录 PCR和实时荧光定量PCR检测两种型别铜绿假单胞菌Cif基因的表达量。收集相应患者临床数据比较 WBC数和 CRP水平及其与 Cif基因表达的相关性。结果黏液型铜绿假单胞菌Cif基因表达量显著高于非黏液型铜绿假单胞菌，差异有统计学意义（t＝2.09， P＜0.05），黏液型铜绿假单胞菌组和非黏液型铜绿假单胞菌组的患者其WBC数和CRP水平差异无统计学意义（t＝0.65，0.60，P＞0.05）；Cif基因表达与CRP水平相关性极弱（a＝－0.061，R2＝0.04），与 WBC数相关性也极弱（a＝0.095，R2＝0.029）。结论 Cif基因表达可能与黏液型铜绿假单胞菌生物被膜的形成有关，可能为铜绿假单胞菌新的毒力因子。
作者：邱晓明；林锦骠；黄尔；杨滨 刊期： 2016年第03期
目的探索高原地区流感病毒在犬肾细胞（MDCK）上的佳培养条件，提高流感病毒的分离效果。方法将原始标本分别接种于 MDCK细胞，通过比较CO2百分浓度（5％，4.8％，4.6％，4.4％，4.2％），TPCK-胰酶浓度（1，2，3，4，5，6，8，10μg／ml），接种量（100，200，300，400，500μl），培养时间（48，72，96，120，144 h），接种方法（吸附接种，直接接种），培养容器（细胞瓶，6孔板）对流感病毒的影响，确定佳培养条件，对分离的各型病毒用红细胞凝集（HA）检测病毒滴度。结果通过病毒血凝素滴度结果比较，4.4％ CO2与4.6％ CO2，2μg／ml TPCK-胰酶，300μl与400μl的接种量、吸附接种、72 h～96 h的培养时间、6孔板收获的病毒血凝素滴度高。结论在高原地区实验室建立了 MDCK细胞培养流感病毒的优条件。
作者：胡澜怀；周霞 刊期： 2016年第03期
目的了解2015年北京地区育龄妇女 TORCH 感染情况，并探讨近期感染与 TNF-α水平的关系。方法采用ELISA法对2015年1月～12月进行孕检的970例妇女筛查 TOX，RV，CMV，HSV-I，HSV-II IgM和 IgG抗体。同时对IgM阳性妇女检测血清TNF-α水平，对结果进行统计分析。结果孕前妇女TOX，RV，CMV，HSV-I和HSV-II IgM的阳性率分别为1.65％，2.16％，4.54％，17.42％和6.08％。IgG 的阳性率依次是3.81％，93.40％，92.47％，64.02％和14.64％。＜30岁妇女CMV和 HSV-I IgM阳性率高于≥30岁妇女（χ2＝4.558，4.051；均P＜0.05）。HSV-I型夏季感染率高于其他季节（χ2＝5.356，P＜0.05）。TORCH IgM阳性患者血清TNF-α水平高于正常体检组（t＝10.219，P＜0.01）。结论2015年北京地区孕前妇女TORCH感染率较高且有其流行特点，检测 TNF-α水平对于生殖健康具有重要病理意义。
作者：靳庆娥；谷俊朝；苏建荣 刊期： 2016年第03期
目的研究丙型肝炎患者自身抗体检出率、丙肝病毒（HCV）载量及肝功能三者之间的相关性。方法检测168例丙肝患者自身抗体、丙肝病毒载量以及肝功能结果，并选取和检测129例健康对照者的自身抗体，其中计数资料采用卡方检验、计量资料采用t检验或者非参数秩和检验，统计分析丙肝患者与健康对照组自身抗体检出率差异，分析丙肝患者中自身抗体、病毒载量以及肝功能三者间的相关性，并分析自身抗体检出率与患者年龄、性别的关系。结果丙肝患者自身抗体阳性检出率为35.12％（59／168），各抗体阳性率分别为：抗核抗体（ANA）33.93％，抗平滑肌抗体（SMA）2.98％，抗线粒体 M2抗体（AMA-M2）1.80％，抗肝肾微粒体抗体（anti-LKM1）1.20％。抗胞浆抗体和抗可溶性肝抗原抗体未检出阳性。丙肝患者自身抗体总检出率及抗核抗体检出率较健康对照组高（χ2＝23.179，P＝0.000；χ2＝21.360，P＝0.000）。丙肝患者中，自身抗体阳性组与阴性组间丙肝病毒载量、总胆红素、谷氨酸氨基转移酶以及天冬氨酸氨基转移酶水平差异无统计学意义（χ2＝0.113，P＝0.945；Z＝－1.087，P＝0.277；Z＝－1.356，P＝0.175；Z＝－0.153，P＝0.878）；自身抗体检出率与性别无关（χ2＝2.897，P＝0.089），而与年龄相关（t＝3.274，P＝0.001）。HCV RNA阴性组与阳性组间谷氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平以及年龄的差异具有统计学意义（Z＝－6.430，P＝0.000；Z＝－6.123，P＝0.000；t＝－3.152，P＝0.002），HCV RNA阴性组年龄低于阳性组（44.17岁 vs 55.27岁）。结论丙肝患者容易发生自身免疫，自身抗体的产生与年龄有关，而与体内丙肝病毒载量的高低无关，也不能预测患者的肝功能损伤情况。HCV载量与患者年龄及肝损伤相关，高龄组病毒载量较高，肝损伤较严重。
作者：甘志超；刘莹；赵冰红；郭桂玲；黄前川 刊期： 2016年第03期
目的探索血清胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）Ⅰ，PGⅡ和胃泌素-17（gastrin-17，G-17）对萎缩性胃炎及胃癌患者的早期临床诊断价值。方法研究采用观察性病例-对照研究，共430例受检者纳入研究。血清测试前，受检者经活检组织病理学检查证实。根据病理结果将受检者分为非萎缩性胃炎160例、萎缩性胃炎118例、胃癌152例，用酶联免疫吸附试验方法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清 PGⅠ，PGⅡ和 G-17含量，并计算 PGⅠ／PGⅡ比值。结果与非萎缩性胃炎组相比，萎缩性胃炎组血清PGⅠ和 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05），胃癌组血清 PGⅠ， PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与萎缩性胃炎组相比，胃癌组血清 PGⅠ和 G-17均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。根据受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），PGⅠ，PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及G-17诊断萎缩性胃炎的佳临界值为84.706μg／L，10.873μg／L，11.008和8.265 pg／L，诊断胃癌的佳临界值为65.145μg／L，10.089μg／L，6.375和4.971 pg／L。结论血清 PGⅠ，PGⅡ，PGⅠ／PGⅡ及 G-17水平低下是萎缩性胃炎及胃癌生物学标志，对胃癌早期诊断具有重要的临床意义。
作者：杨建华；王炳华；林勇 刊期： 2016年第03期
目的了解深圳地区未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血基因缺陷携带现状，为优生婚配提供科学依据。方法随机选取2014年3月～2015年10月来医院体检未婚青年人群6182例，采用Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪和红细胞渗透脆性试验进行珠蛋白生成障碍性贫血初筛检查，对平均红细胞体积（MCV）≤82 fl和平均红细胞含量（MCH）≤27 pg或红细胞渗透脆性率＜60％的人群进行血红蛋白电泳分析，对初筛阳性者采用 PCR和反向点杂交法进行基因确诊，并对结果进行统计分析。结果6182例未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血初筛阳性率17.3％（1069／6182），其中可疑α-为12.2％（752／6182），可疑β-为5.1％（317／6182）；基因确诊珠蛋白生成障碍性贫血阳性率为11.6％（717／6182），其中α-为6.7％（413／6182），β-为3.4％（209／6182），α复合β为1.5％（95／6182）；α-基因缺陷类型主要为-SEA／αα，-α3.7／αα及-α4.2／αα，缺陷率分别为60.8％，23.5％及10.4％；β-基因缺陷类型主要为 CD41／42，CD17及-28，缺陷率分别为41.1％，28.2％及12.9％。结论深圳地区未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血有一定的携带率，当地计划生育部门应引起高度重视。加强未婚青年人群珠蛋白生成障碍性贫血筛查，对指导优生婚配和预防重症珠蛋白生成障碍性贫血患儿的出生，提高优生优育率，具有重要的意义。
作者：陈望；刘爱胜；文艳；阳建 刊期： 2016年第03期
目的制备特异性抗人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列，将多肽序列与牛血清蛋白（bovine albumin，BSA）偶联，以偶联后多肽为抗原免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体；以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板，聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）获得 HPV 18 E6基因，将该基因插入表达质粒 pET-28a，转化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达；采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体；重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确，成功表达 HPV18 E6蛋白；纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列，该抗体具有较好的特异性。
作者：孔倩倩；唐振华；相芬芬；詹月萍；许健；吴蓉；康向东 刊期： 2016年第03期
目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心（NCBI）公布的 H7N9基因 HA序列，设计特异性引物及TaqMan探针；构建阳性重组质粒，验证其低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒，线性关系在6×102 copies／μl～6×108 copies／μl范围内检测结果良好；用该方法测得低拷贝数为600 copies／μl，特异度和重复性（CV＜1％）良好，无交叉反应；用该荧光定量 RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品，准确率为100％（16／16）。结论实验建立的实时荧光定量 RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒 H7N9型的快速检测。
作者：陈勉乔；于浩洋 刊期： 2016年第03期
目的探讨髓样细胞白血病-1（myeloid cell leukemia-1，Mcl-1）基因及蛋白在原发性肝癌和肝硬化组织中的表达及临床病理学意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法，蛋白质印迹法（western blot，WB）和免疫组织化学 ENVISION法分别检测20例肝癌组织，19例肝硬化组织和12例对照肝组织中 Mcl-1的表达，并分析其表达与肝癌临床病理学特征的关系。结果 Mcl-1 mRNA相对表达强度在对照组、肝硬化组和肝癌组中分别为0.52±0.17，3.46±1.7，3.65±2.93，其中肝癌组及肝硬化组分别与对照组间比较，差异均有统计学意义（t＝7.925，5.334，P＜0.05）。Mcl-1蛋白相对表达量在肝硬化组（0.51±0.35）和肝癌组（0.75±0.36）均显著高于对照组（0.21±0.19）（t＝5.526和6.355，P＜0.05）。肝癌组Mcl-1的阳性表达率为55.00％（11／20），显著高于对照组33.33％（4／12）（t＝7.835，P＜0.05），Mcl-1蛋白阳性表达与肿瘤有无坏死和TNM分期有关（χ2＝4.201，P＜0.05）。结论 Mcl-1基因及蛋白在肝癌组、肝硬化组和对照肝组织中的表达存在差异，可能参与了肝硬化的发生、发展及向肝癌的恶性转化。
作者：李峰；魏群；周国雄；黄东凤；张弘 刊期： 2016年第03期
目的探讨α-内收蛋白基因（ADD1）的单核苷酸多态性（SNP）及表达水平与冠心病（CAD）的相关性。方法提取2011年1月～2013年10月就诊于火箭军总医院的114例CAD患者和116例健康对照者外周血白细胞DNA和RNA，应用荧光标记单碱基延伸及杂交技术检测ADD1基因的rs3775067和rs1263359多态性，应用荧光标记及毛细管电泳技术检测 ADD1的基因表达水平。结果 ADD1基因2个 SNP的基因型频率和等位基因频率在两组间差异无统计学意义（χ2＝0.018～1.317，P 值均＞0.05）。CAD 组的 ADD1基因表达水平为0.226±0.284，明显高于健康对照组（0.153±0.144），差异有统计学意义（P＜0.05）。通过对不同基因型间表达水平的比较，结果显示 CAD组 rs3775067的 TC型患者的基因表达水平（0.250±0.319）明显高于健康对照组（0.154±0.156，P＜0.05），余各基因型两组间表达水平差异无统计学意义（t＝0.557～1.867，P 值均＞0.05）。结论 ADD1基因表达水平的升高是 CAD 的危险因素，而 rs3775067和rs1263359多态性与CAD的易感性无关。
作者：张阳东；陈洁；楚瑞雪；王利营；云洁；安娟；方靓 刊期： 2016年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
