学术投稿

PCR产物与结核分支杆菌分子信标杂交优化及荧光检测的初步实验研究

匡红;孙薏;张聪;府伟灵;陈庆海;冯怀志;李硕

关键词:分子信标, 结核分支杆菌, PCR, 荧光分光光度计
摘要:目的 建立PCR反应后再加入结核分支杆菌分子信标杂交试验,优化杂交条件.并对分子信标PCR杂交产物荧光信号的观测条件进行摸索.方法 通过对杂交温度、杂交时间以及杂交方式的优化,建立PCR反应后再加入TB分子信标杂交试验.运用荧光分光光度计和荧光显微镜对MB PCR杂交产物荧光信号的观测条件进行摸索.并进行不同荧光-淬灭分子对标记分子信标的观测试验.结果 PCR反应后再加入,TB分子信标杂交试验中水浴、PCR仪、恒温摇床的适杂交温度和适杂时间分别为:55℃,6h;55℃,4h;50℃,7h.阴-阳性效果区分;水浴>恒温摇床>PCR仪.荧光分光光度仪检测MB PCR杂交阳性产物、MB PCR杂交阴性产物(茎环结构未打开)、无游离分子信标探针PCR产物(空白对照)三者的荧光光亮度比值为:6.102/0.136/0.003.荧光显微镜观测MB PCR杂交阳性产物、MB PCR杂交阴性产物(茎环结构未打开)荧光强度明显区别.本试验Cy3-BDH组成分子信标荧光-淬灭效率较Cy3-DABCLYE高,FAM-DABCLYE组成分子信标荧光.淬灭效率较FAM-BDH高.结论 建立起结核分支杆菌分子信标荧光芯片的检测技术,包括样本制备、芯片制备、杂交反应以及扫描和图像分析等方法 .并兼顾到各种因素对单侧延长臂分子信标芯片的影响,对反应体系中各条件进行了合理的优化,使所建立的检测体系稳定可靠.
四川医学杂志相关文献
  • ICU患者重型脑伤术后肺部感染抗菌药物的应用分析

    目的 探讨ICU患者重型脑伤术后肺部感染抗菌药物的合理应用.方法 总结2004年1月~2007年12月我院ICU病房重型脑伤术后肺部感染的患者392例,分析抗菌药物的应用情况.结果 抗菌药物使用共涉及8大类34种,联合用药15类34种.结论 重型脑伤术后ICU患者肺部感染抗菌药物的应用存在诸多不合理现象,应针对不合理用药的现象提出解决方法 ,促进ICU肺部感染抗菌药物的合理应用.

    作者:毛素芳 刊期: 2009年第06期

  • 雷莫司琼预防术后患者自控镇痛恶心呕吐的效果及安全性

    目的 观察雷莫司琼预防术后患者自控静脉镇痛(PCIA)期间恶心呕吐的防治效果及安全性.方法 全麻下择期腹部手术患者60例,ASA Ⅰ~Ⅱ级,随机分为雷莫司琼组(R组)和格拉斯琼组(G组),术毕待患者清醒后R组或G组分别静脉注射雷莫司琼0.3mg或格拉斯琼3mg,后接一次性微量止痛泵行PCIA 48h.R组或G组镇痛液配方为:芬太尼10μg/kg+雷莫司琼0.3mg(或格拉斯琼3mg)+生理盐水至100ml.采用VAS评价术后48h内患者的镇痛效果、恶心、呕吐及止吐药物不良反应的发生情况.结果 两组患者术后各时点VAS评分均<3,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);术后镇痛期间恶心、呕吐发生率R组显著低于G组(P<0.05);两组不良反应的发生率均较低,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 雷莫司琼能安全、有效地预防术后患者自控镇痛引起的恶心、呕吐,其效果优于格拉司琼.

    作者:苏瑛;冉菊红;马民玉 刊期: 2009年第06期

  • 老年胃癌术后胃肠减压及早期肠内营养置管方式的探讨

    目的 探讨老年胃癌术后胃肠减压及早期肠内营养的佳方法 .方法 我科2005年1月~2007年1月行老年胃癌手术105例,根据置管情况随机分成普通鼻胃管+普通空肠营养造口管(或鼻肠管)组、经鼻置三腔胃肠管组和胃造口置三腔胃肠管组,对3组胃管方法 在胃肠减压和早期肠内营养方面进行临床研究和评估.结果 术中胃造口置三腔胃肠管进行胃肠减压同时能早期行肠内营养,鼻咽部不适、恶心呕吐、肺炎等并发症发生率明显较低,能较好达到预期营养目标.结论 术中胃造口置三腔胃肠管进行胃肠减压和早期肠内营养,并发症低、耐受性好,尤其适合老年胃手术患者.

    作者:郭志义;庞明辉;何学文;李平 刊期: 2009年第06期

  • 高血压脑出血448例的诊治

    1 临床资料本组448例高血压脑出血中男266例,女182例,男:女为2:1.年龄21~79岁,其中>55岁313例(70%).并分为手术组244例,非手术组204例.临床表现:头疼368例,头晕207例,呕吐325例,意识障碍GCS≤7分177例,>7分271例,其中脑疝123例,双侧瞳孔散大47例,一侧瞳孔散大76例,偏瘫172例,失语71例.

    作者:可宗军 刊期: 2009年第06期

  • 维持性血液透析患者微炎症状态相关因子与低血清清蛋白血症的关系

    目的 分析维持性血液透析患者(MHD)血中C反应蛋白(CRP)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、血清清蛋白(ALB)指标之间关系,探讨MHD患者微炎症状态相关因子与低血清清蛋白血症的关系.方法 选择34例MHD患者,并根据ALB水平分为两组:ALB<35g/L组(20例)和ALB≥35g/L组(14例),检测CRP、IL-1、IL-6、ALB水平,与30例健康人(对照组)进行对照.结果 MHD患者中CRP、IL-1、IL-6等指标明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且ALB<35g/L组CRP、IL-1、IL-6水平较ALB≥>35g/L组可明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).CRP、IL-1、IL-6分别与ALB呈负相关(P<0.01,P<0.05).结论 MHD患者存在微炎症状态,炎性细胞因子可能与低血清清蛋白血症有关.

    作者:何敬东;王保和;李赞;曾莉;陈廷芳;李会娟;卿山林 刊期: 2009年第06期

  • 粘连性肠梗阻手术时机的选择

    目的 分析了解粘连性肠梗阻病程发展,正确掌握肠梗阻的手术时机.方法 对1990年~2006年9月我科手术治疗的312例粘连性肠梗阻患者的临床资料进行回顾性总结、分析.结果 急诊手术探查218例,中转手术94例,术后出现并发症23例,其中15例为肠绞窄患者.死亡9例,均为出现肠坏死患者,治愈298例(95.5%),好转5例.结论 非手术治疗无效者应及时手术治疗,好在发病后24h内手术,以减少术后并发症及病死率,改善绞窄性肠梗阻预后,提高治愈率.

    作者:麦志惠;潘辅全 刊期: 2009年第06期

  • 低浓度布比卡因、利多卡因、地卡因用于无痛分娩效果的比较

    目的 探讨布比卡因、利多卡因与地卡因混合液3种常用局麻药低浓度在持续硬膜外麻醉下镇痛分娩效果的差异.方法 将在本院产科137例孕妇随机分为4组,对照组不采取镇痛措施,其余3组分别使用低浓度的布比卡因、利多卡因、地卡因镇痛,比较该3种局麻药对无痛分娩的效果.结果 3种低浓度局麻药均可降低分娩产妇的疼痛,镇痛效果有差异.结论 分娩镇痛对母婴并无不良影响,3种局麻药均能达到分娩镇痛目的 ,但0.125%布比卡因镇痛效果佳,可作为临床首选.

    作者:刘革;谢斌 刊期: 2009年第06期

  • 吲达帕胺治疗老年单纯收缩期高血压疗效观察

    目的 探讨吲迭帕胺对老年单纯收缩期高血压(ISH)的疗效.方法 以110例老年ISH患者随机分为吲达帕胺治疗组(n=55,吲达帕胺1.25mg/d)和氨氯地平对照组(n=55),氨氯地平5mg/d).每周测量坐位血压2次.治疗前和治疗后3个月后分别检测空腹血糖、血脂、血尿酸、血钾、血钠.结果 两组治疗前后降压疗效差异均有统计学意义(P<0.05),组间比较差异有统计学意义(P<0.01).两组治疗前后空腹血糖、血脂、血尿酸、血钾、血钠差异无统计学意义.结论 吲达帕胺治疗老年ISH安全、有效.

    作者:岳晓春 刊期: 2009年第06期

  • 婴儿川崎病冠状动脉损害危险因素分析

    目的 探讨婴儿川崎病并发冠状动脉损害(CAL)的危险因素.方法 分析我院2002年2月~2008年12月期间住院的婴儿川崎病患儿74例,并对CAL组及无冠状动脉损害(NCAL)组的临床及实验室资料进行统计学分析.结果 74例婴儿川崎病中并发CAL 36例(48.6%).有关因素分析显示:①发热天数:热程≥10d与<10d相比CAL发生率显著增高(χ2=7.402,P<0.05),差异有统计学意义;②CAL组血红蛋白(Hb)较NCAL组明显降低,差异有统计学意义(t=3.95,P<0.001);③CAL组C-反应蛋白(CRP)较NCAL组明显增高,差异有统计学意义(t=10.21,P<0.001).结论 婴儿川崎病CAL发生率高,CAL与热程、Hb、CRP有明显相关性.凡热程≥10d、Hb降低、CRP显著增高(≥100mg/L)的婴儿川崎病均应给予足够重视,高度警惕CAL发生.

    作者:史宏;徐鸣;周敏 刊期: 2009年第06期

  • Chiari Ⅰ型畸形合并脊髓空洞的诊治体会

    目的 探讨Chiari Ⅰ型畸形合并脊髓空洞的诊断及治疗.方法 我科自1997年7月~2006年7月对收治的15例经MRI证实的Cldari Ⅰ型畸形合并脊髓空洞症患者实施了后颅窝减压、小脑延髓池扩大成形加空洞-蛛网膜下隙分流术,术后均得到随访,其中12例复查头颈部MRI.结果 按Tator标准进行评定,优9例,良5例,差1例,有效率为93.3%,无手术死亡者.结论 MRI是Chirari畸形合并脊髓空洞症的理想、可靠的检查方法 .后颅窝减压,小脑延髓池扩大成形加空洞-蛛网膜下隙分流术是Chiari Ⅰ型畸形合并脊髓空洞的理想的治疗方法 .

    作者:蔡洪;王星;刘谊;陈忠 刊期: 2009年第06期

  • 双歧杆菌三联活菌联合菌桅黄治疗新生儿母乳性黄疸

    目的 通过双歧杆菌三联活菌联合菌桅黄治疗母乳性黄疸与传统治疗方法 ,探讨母乳性黄疸的治疗方法 .方法 符合条件的新生儿随机分组,通过两组治疗,测血清胆红素进行比较.结果 治疗组胆红素日均下降值及胆红素下降天数均明显优于对照组.结论 双歧杆菌三联活菌联合菌栀黄治疗,效果明显,为治疗母乳性黄疸的有效方法 之一.

    作者:彭旭东 刊期: 2009年第06期

  • ASMA及FAM技术评价缬沙坦对高血压病心脏整体功能的影响

    目的 应用自动室壁分区运动分析(ASMA)与全方位M型超声心动图(FAM)技术评价缬沙坦对原发性高血压病心脏整体功能的影响.方法 原发性高血压病患者178例应用缬沙坦80mg/d口服治疗,疗程12个月.观察治疗过程中患者血压及症状体征的变化情况,分别在治疗前及治疗后每3个月应用ASMA-FAM技术观察心脏整体功能变化情况.结果 缬沙坦在治疗2周后血压开始下降,左室壁运动状态及心脏整体功能在治疗3个月后开始逐渐改善(P<0.05),治疗6个月~1年后改善明显并趋于稳定(P<0.01).结论 缬沙坦能够明显提高原发性高血压病患者的心脏整体功能,ASMA-FAM能够全面、客观地评价室壁运动状态及心脏整体功能情况.

    作者:赖小今;陶杰;朱峻;邓旦;杨永健;廖明松;梁燕 刊期: 2009年第06期

  • 清开灵注射液对糖尿病并发虹膜睫状体炎患者血脂和纤维蛋白原的影响

    目的 探讨清开灵注射液对2型糖尿病(T2DM)并发虹膜睫状体炎患者血脂和纤维蛋白的影响.方法 41例(52眼)T2DM并发虹膜睫状体炎患者(治疗组)应用清开灵注射液前后检测血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和纤维蛋白原(Fg)的变化.同时设33例健康人(对照组)对照.结果 治疗组治疗前同对照组相比TC、Fg显著高于正常人(P<0.01),TG明显高于正常人(P<0.05);治疗组应用清开灵注射液30d后,TC、Fg有明显降低(P<0.05),TG有显著下降(P<0.01).结论 清开灵注射液能降低T2DM并发虹膜睫状体炎患TC、TG和Fg的作用.

    作者:李桂生;祝云淑 刊期: 2009年第06期

  • 13例高龄老年患者跌倒原因分析及护理管理对策

    目的 通过分析13例高龄老年患者跌倒的原因,探寻相关护理管理对策,达到有效防范和减少老年患者跌倒的目的 .方法 收集本病区近3年来收治的发生于院内院外的跌倒患者,进行跌倒原因分析.结果 老年患者跌倒的危险因素众多,原因复杂,防范困难,尤其是高龄老年患者,但跌倒仍然是可以防范的.我科老年患者跌倒的发生率不足3%,远远低于文献报道20%的发生率.结论 只有加强管理,积极动员医、护、患、陪、保洁等多方面共同参与到跌倒的防范工作中来,才能有效防范和减少跌倒的发生.

    作者:李甦;张钦芳 刊期: 2009年第06期

  • 头孢丙烯治疗小儿急性呼吸道感染疗效观察

    目的 评价头孢丙烯治疗小儿急性呼吸道感染的临床疗效及安全性.方法 将轻、中度急性呼吸道感染患儿180例随机分成两组,头孢丙烯组90例,给予头孢丙烯15mg/(kg·d),口服,2次,头孢克洛组90例,给予头孢克洛20mg/(kg·d),口服,3次,两组疗程均为7~10d.结果 头孢丙烯组与头孢克洛组临床有效率分别为90.24%与85.00%(P>0.05),两组比较差异无统计学意义.两组均无明显不良反应.结论 头孢丙烯治疗小儿轻、中度急性呼吸道感染疗效确切且安全.

    作者:刘群;雷加萍 刊期: 2009年第06期

  • 瑞格列奈治疗初发2型糖尿病患者

    目的 了解瑞格列奈对初发2型糖尿病患者的血糖控制的有效性和安全性.方法 通过对11例初发2型糖尿病患者用瑞格列奈治疗16周的观察.在治疗0周,治疗16周分别测体重,BMI,腰臀比,OGTF实验以及糖化血红蛋白(HbAlc)水平,了解治疗16周中的低血糖发生情况.结果 治疗前后11例患者的体重,BMI及腰臀比无明显变化(P>0.05),治疗16周后OGTT的0、30、60、120min血浆葡萄糖水平以及糖化血红蛋白水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).治疗期间仅1例发生轻微低血糖.结论 诺和龙对2型糖尿病患者在不增加体重和BMI的同时,安全有效降低血糖和糖化血红蛋白水平,是初发2型糖尿病患者治疗糖尿病的首选方案之一.

    作者:胡茂清;罗玉;张伟;杨雪;张林 刊期: 2009年第06期

  • 维持性血液透析患者肾功能、血清iPTH、钙、磷、外周血红系及血小板间的相关性分析

    目的 探讨维持性血液透析患者肾功能、血清全段甲状腺旁素(intact parathyroid hormone,iPTH)、血钙、血磷、外周血红系及血小板(PLT)间的相关性.方法 选择我院52例长期维持血液透析的尿毒症患者作为病例组,40例健康体检者作为对照组,回顾性分析试验组患者临床资料及检验指标,比较两组的变化并对患者肾功能、血清iPTH、血钙、血磷、外周血红系及血小板间的相关性进行分析.结果 与对照组相比,病例组患者血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、血清尿酸(UA)、血清iPTH、血磷(P)均升高,且差异有统计学意义(P<0.01),血钙(Ca)、血红蛋白(HGB)及PLT均降低,差异有统计学意义(P<0.01);血清iPTH与UA、P和CRP成正相关(r值分别为0.515,0.577,0.526,P<0.01);血清iPTH与HGB、PLT无相关性(P>0.05);血清铁饱和度(IS)与血清转铁蛋白(SF)、PLT呈正相关(r值分别为0.724,0.298,(P<0.05);HGB与IS、SF呈负相关(r值分别为-0.330、-0.433,P<0.05).结论 维持性血液透析尿毒症患者除肾功能受损外,普遍存在继发性甲旁亢、高磷、低钙及贫血等症状,且各项指标之间存在相关性,高磷是各种关系中相关性强元素,有效的降低血磷对治疗患者继发性甲旁亢及由此引起的并发症,缓解病情均有重要的作用.

    作者:马云霞;马行一;米绪华;冯霞;任艳霞;徐红艳;熊瑜 刊期: 2009年第06期

  • 瑞芬太尼复合七氟烷或异氟烷用于脊柱侧弯矫形术中控制性降压及苏醒质量的比较

    目的 探讨瑞芬太尼复合七氟烷或异氟烷用于脊柱侧弯矫形术中控制性降压及苏醒质量的比较.方法 ASA Ⅰ~Ⅱ级择期行脊柱侧弯矫形术患者30例,随机分为瑞芬太尼+七氟烷组(S组)和瑞芬太尼+异氟烷组(D组),每组15例.两组麻醉诱导相同,麻醉维持分别采用瑞芬太尼+七氟烷或异氟烷,术中监测吸/呼浓度,使呼气末麻醉药浓度均达到1.3MAC,目标MAP控制在60~65mmHg并维持至术毕,如果超过目标血压,加用丙泊酚.比较两组各时点血流动力学指标、乳酸(Lac)浓度、术毕麻醉恢复情况及复合使用丙泊酚降压例数,评估术后患者苏醒质量.结果 两组在控制性降压期间血流动力学指标、Lac浓度差异无统计学意义.术毕呼吸恢复、睁眼、拔管时间S组明显短于D组(P<0.05).在拔管即刻S组OAAS评分均高于D组,拔管后30min两组患者差异无统计学意义(P>0.05),复合使用丙泊酚例数S组少于D组.结论 瑞芬太尼复合七氟烷,麻醉可控性好,降压及恢复平稳,苏醒快质量优,适用于脊柱侧弯矫形术.

    作者:钟惠;范晓华;周斌;杜健儿 刊期: 2009年第06期

  • 精确放疗整体挡铅射野验证片与TPS射野DRR图对比及误差分析

    目的 射野验证片在精确放疗中的重要性.方法 加速器治疗机上的拍摄验证片与放射治疗计划系统(TPS)射野的数字重建影像(DRR)图比较.结果 验证片与射野的DRR图吻合度为96%.结论 人为误差、患者的器官运动及体重变化是精确放疗产生误差的主要原因.

    作者:肖贵珍 刊期: 2009年第06期

  • 16367例健康体检人群空腹血糖状况分析

    目的 调查体检人群空腹血糖水平及空腹糖调节受损与体重指数、血压、血脂水平的关系.方法 对健康体检16367例人群的身高、体重、空腹血糖、血压、血脂资料进行统计分析,比较空腹糖调节受损组与正常血糖组之间的体重指数、血压、血脂水平并进行相关性分析.结果 空腹血糖平均水平为(5.03±1.11)mmol/L,空腹糖调节受损及糖尿病发生率均为3.2%且均随年龄增加而升高,空腹糖调节受损组体重指数、血压、血脂(总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白)水平高于血糖正常组,高密度脂蛋白水平低于正常血糖组,差异均有统计学意义;空腹糖调节受损与总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白水平正相关,与高密度脂蛋白水平负相关.结论 空腹糖调节受损和体重指数、血压、血脂密切相关,早期定期体检发现空腹糖调节受损有助于相关心脑血管病的防治.

    作者:陈永宏;周建中;龚涛;杨松;张铁须;鲁力;杭丽玮;王珍 刊期: 2009年第06期

四川医学杂志

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主办:四川省医学会