学术投稿

起始Met对增强型绿色荧光蛋白功能的影响

肖利佳;王丹;李昌龙;翟芬

关键词:增强型绿色荧光蛋白, 起始甲硫氨酸, 结构, 功能
摘要:目的 以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)中起始Met为例,初步探索组成EGFP的不同氨基酸对EGFP发光功能的影响,为绿色荧光蛋白的变体改造提供理论基础.方法 运用分子生物学技术去掉质粒pEGFP-N1中编码EGFP的起始氨基酸Met的密码子,将beta-actin的上游的435bp序列引入突变型EGFP阅读框的上游,将此融合型质粒转染A549细胞后,运用一系列检测方法检测融合蛋白的表达水平及转染细胞的的发光强度.结果 突变掉起始Met后,EGFP丧失了发光功能.结论 起始Met对保持EGFP的发光功能有重要作用,提示Met作为绝大多数蛋白质的生物合成起始氨基酸,可能是维持某些蛋白质的正确的空间结构所必须的氨基酸.
西部医学杂志相关文献
  • 小鼠β防御素2、3融合基因载体构建及其抗流感病毒作用

    目的 构建mBD2与mBD3融合基因的真核表达栽体,检测其在MDCK细胞中的表达情况,并探讨其抗病毒特性.方法 利用PCR方法分别扩增mBD2与mBD3基因片段,通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD2与mBD3通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD2与mBD3.将该融合基因插入真核表达栽体pcDNA3.1(+)获得重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD2-mBD3,经酶切、PCR及测序鉴定正确后.用脂质体转染MDCK细胞,通过免疫荧光检测融合蛋白表达情况,后采用CCID50测定并分析抗流感病毒作用.结果 经鉴定后证实,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD2-mBD3正确,该重组质粒能在MDCK细胞中稳定表达,CCID50实验结果说明有较好的抗流感活性.结论 本研究成功构建mBD2-mBD3融合基因的真核表达质粒,并证实其融合蛋白能在MDCK细胞中稳定表达,该结果为进一步研究防御素抗病毒机制奠定了坚实的基础.

    作者:张强;李明远;丰锋;巩天祥;李婉宜;刘冯欢;冯艳;邝玉;王保宁 刊期: 2010年第03期

  • 锁定加压钢板内固定治疗肱骨近端骨折

    目的 探讨锁定加压钢板内固定治疗肱骨近端骨折的疗效.方法 取肩关节前侧入路,采用切开复位锁定加压钢板内固定治疗肱骨近端骨折35例,术后早期功能锻炼.结果 全部病例均获随访,3~7个月骨折均骨性愈合,平均愈合时间5个月.按照Neer评分法评定疗效,优良率为85.7%.结论 应用锁定加压钢板内固定治疗肱骨近端骨折,固定牢固,操作简单,允许早期功能锻炼,肩关节功能恢复良好,是一种理想的手术方法.

    作者:刘清毅;黄南翔;林宏 刊期: 2010年第03期

  • 碘伏润滑预防留置尿管尿路感染的效果观察

    目的 观察0.5%碘伏消毒外阴及尿道口并润滑导尿管,对预防导尿和留置导尿管尿路感染的临床效果.方法 将需导尿和留置导尿管的神经外科、普外科、泌尿外科患者100例,随机分为对照组50例和实验组50例.对照组用0.1%新洁尔灭消毒外阴及尿道口,用消毒石蜡油润滑导尿管进行导尿,实验组采用0.5%碘伏消毒外阴、尿道口,并用0.5%碘伏润滑尿管进行导尿.结果 对照组尿路感染发生率为12%,实验组尿路感染发生率为4%,差异有显著性(P<0.05%).结论 0.5%碘伏消毒外阴及尿道口并润滑导尿管.可降低导尿和留置导尿管引起的尿路感染,减少院内感染的发生.

    作者:何述萍;任正华;温大翠 刊期: 2010年第03期

  • 腹腔镜下肌瘤剔除术与开腹手术的比较

    目的 评价应用腹腔镜与传统开腹手术进行子宫肌瘤剔除术的优缺点.方法 分析腹腔镜下肌瘤剔除40例与传统开腹手术52例的临床资料,对手术的适应证、并发症、手术时间、术中出血及术后恢复情况进行比较分析.结果 腹腔镜手术较开腹手术时间长,差异有显著性(P<0.05),腹腔镜手术出血量、术后排气、术后病率和住院时间均明显优于开腹手术组,差异有显著性(P<0.05).结论 腹腔镜下子宫肌瘤剔除术具有创伤小、恢复快、住院时间短、术中、术后并发症少等优点,选择好适应症在有条件的医院可广泛开展.但不能完全取代开腹手术.

    作者:赵玉华;关玉静;孙万卉 刊期: 2010年第03期

  • 小鼠β-防御素6与甲型流感病毒M2e基因融合表达及其免疫特性研究

    目的 构建小鼠β-防御素6(mBD6)与甲型流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)真核表达质粒,并研究其在真核细胞中的表达与免疫特性.方法 通过重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将M2e与mBD6通过一段多肽接头Gly4Ser融合成为mBD6-M2e.将其插入戢体pcDNA3.1(+),构建成pcDNA3.1(+)/mBD6-M2e.鉴定正确后,转染MDCK细胞,免疫荧光、MTT检测mBD6-M2e表达和分泌.免疫小鼠,半定量PCR检测脾细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α、CCR7表达.结果 融合基因mBD6-M2e真核表达栽体pcDNA3.1(+)/mBD6-M2e构建成功,在MDCK细胞膜上成功表达融和蛋白,转染细胞的培养上清刺激淋巴细胞增殖.免疫小鼠细胞因子表达改变.结论 融合基因mBD6-M2e真核表达栽体成功构建,为研究防御素在流感病毒核酸疫苗中的佐剂作用奠定了基础.

    作者:冯伟;李婉宜;李明远;张强;巩天祥;刘冯欢;罗俊;邝玉;王保宁;蒋忠华 刊期: 2010年第03期

  • 灾后绵竹学校板房食堂卫生监督管理探讨

    震后绵竹板房学校食堂食品卫生日常监督管理工作形势非常严峻,如何做好日常监管已成为目前摆在灾区卫生监督员面前一个亟待解决的问题.本文通过查找目前板房学校食堂存在的问题,探寻解决问题的对策,以确保灾种后师生的饮食安全.

    作者:龚杰;王戈 刊期: 2010年第03期

  • 前S1抗原与乙肝病毒血清标志物相关性研究

    目的 探讨HBV血清标志物与乙肝病毒前S1抗原检测结果的关系.方法 用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测常规的乙肝病毒血清标志物和乙肝病毒前S抗原.结果 分析常规的HBV血清标志物不同组合模式发现,表面抗原阳性的模式中,HBV前S1抗原的检出率较高.结论 乙肝病毒前S1抗原可作为临床上乙型肝炎病毒感染诊断的一项理想检测指标.

    作者:于莉;龚见习;陈新文 刊期: 2010年第03期

  • 苯妥英钠对脑卒中患者血清HDL-c水平及卒中复发率的影响

    目的 观察苯妥英钠对脑卒中患者血清HDL-c水平及脑卒中复发率的影响.方法 选择38例脑卒中患者作为苯妥英钠治疗组及同期34例脑卒中患者作为常规治疗对照组,两组常规予以降血压及抗血小板治疗,苯妥英钠治疗组:苯妥英钠0.1 Bid,6个月后改为0.1qd,随访两年,随访期间每6个月检测HDL-c水平,比较两组脑卒中复发率和HDL-c水平变化.结果 苯妥英钠治疗组脑卒中复发率明显低于对照组(P<0.05),治疗组六个月后血清HDL-c 水平明显升高,与治疗前相比具有显著差异(P<0.01).对照组血清HDL-c水平与治疗前相比变化不明显(P>0.05).随访两年,苯妥英钠治疗组6个月后HDL-C仍维持在一较高水平.而对照组与治疗前相比变化无统计学差异.结论 苯妥英钠能提高血清HDL-c水平,可以降低脑卒中的复发率.

    作者:赵颖;赵连东;王增军;林森;卢玉振 刊期: 2010年第03期

  • 重组人血管内皮抑素联合化疗治疗多种晚期恶肿瘤的临床观察

    目的 前瞻性观察抗肿瘤新药重组人血管内皮抑素注射液(YH-16,恩度)联合化疗治疗多种晚期恶性肿瘤的有效性和安全性.方法 经病理组织学或细胞学检查确诊的Ⅳ期恶性肿瘤患者23例,接受恩度联合化疗的方案治疗.其中恩度15mg,加入生理盐水500ml中匀速缓慢静脉滴注,第1~14天连续给药,间歇7天重复;同时联合使用化疗药物.每21天为1个周期.按照RECIST(实体瘤疗效评价标准)标准评价近期疗效,参照Kamofsky评分(KPS)变化评价生活质量(QOL),按照NCICTC3.0版标准评价毒性反应.用药1周期即评价毒性,2周期后评价疗效.结果 全组23例患者中,有21例患者可以评价客观疗效,23例均可进行安全性评价.总共完成的周期数为50个周期,平均2.1个周期.21例可评价病例中,获得PR 2例,SD12例,PD7例,客现有效率(RR)为9.52%(2/21),疾病控制率(DCR)67.O%(14/21);而生活质量改善者7例(33.3%),稳定9例(42.8%),仅5例(23.8%)下降.G3/4级毒性主要与化疗药物有关,包括2例(8.7%)白细胞下降、1例(4.34%)血小板下降、1例(4.34%)恶心/呕吐.结论 恩度与化疗药物联合使用可以改善和稳定多种晚期恶性肿瘤患者的生活质量,与部分化疗药物具有协同作用,其毒性低,安全性好.

    作者:庞东生;宋志刚;汪雪原;钱洪 刊期: 2010年第03期

  • 胺碘酮在院前心肺复苏中的应用

    目的 探讨胺碘酮在心肺复苏过程中出现的快速性心律失常患者中的疗效.方法 将158例心肺复苏过程中出现快速性心律失常患者随机分成3组,分别用利多卡因(53例)、胺碘酮(55例)、利多卡因联合胺碘酮(50例)治疗,比较其疗效.结果 利多卡因组总有效率54.72%,胺碘酮组总有效率81.82%,利多卡因联合胺碘酮总有效率76%,胺碘酮组及利多卡因联合胺碘酮组与利多卡因组比较,差异有显著性意义.结论 胺碘酮对心肺复苏过程中出现的快速性心律失常患者有比较好的疗效.

    作者:谭光林;段文涛;肖莉;杨思芸;孙治勇;李四新;杜平;焦林 刊期: 2010年第03期

  • T细胞免疫功能变化对严重烧伤病人的影响及调节机制

    目的 研究T淋巴细胞免疫功能的变化对严重烧伤病人的影响及机制.方法 选择35例严重烧伤病人,分为脓毒症组(20例)和非脓毒症组(15例).分别于两组患者伤后1d、5d、10d、15d、20d、25d采集外周静脉血分离T淋巴细胞.方法 采用放射免疫法检测白细胞介素2、4、6、8(IL-2、IL-4、IL-6、IL-8)、TNF-α的水平,通过流式细胞仪检测CD4+/CD8+T淋巴细胞的百分率及其凋亡率.结果 与非脓毒症组比较,脓毒症组患者伤后1d、5d、10d、15d、20d、25dT淋巴细胞的TNF和IL-2、IL-4、IL-6、IL-8的分泌水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),两指标呈显著正相关(r=0.78,P<0.01).伤后1d、5d、10d、15d、20d、25d,脓毒症组患者CD4+/CD8+ T淋巴细胞的百分率明显低于非脓毒症组,而其凋亡率呈相反趋势(P<0.05或P<0.01),两指标呈显著负相关(r=-0.73,P<0.05).结论 严重烧伤后,T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态;T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫紊乱的病理生理过程.

    作者:李江华;何明武;胡军;姚忠军 刊期: 2010年第03期

  • 四种宫内节育器的临床效果观察

    目的 观察常用的4种官内节育器的临床应用效果.方法 2006年1月~12月我院以随机的方法放置4种IUD 468例,其中TcuIUD 138例,γIUD 124例,元宫IUD 109例,吉妮IUD 97例.于放置后第1、3、6、12个月进行随访.结果 4种IUD使用1年的脱落率、妊娠率、因症取出率和累积续用率分别为;TcuIUD2.17%、1.45%、8.70%和86.23%;γIUD 7.26%、1.61%、3.23%和86.29%;元宫IUD 2.75%、0.92%、2.75%和92.66%;吉妮IUD 1.03%、0、2.06%、95.88%.4种IUD脱落率比较,差异有统计学意义(P<0.05),γIUD的脱落率高,带器妊娠率差异无统计学意义(P>0.05).TcuIUD因症取出率明显高于其他3种IUD,差异有统计学意义(P<0.05).吉妮IUD和元宫IUD的累积续用率高,与其他两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 吉妮IUD和元宫IUD具有脱落率低、因症取出率低、累积续用率高的优点,值得推广.

    作者:王艳霞 刊期: 2010年第03期

  • 小儿肠套叠空气灌肠整复成功影响因素

    目的 分析小儿肠套叠空气灌肠整复成功影响因素,提高空气灌肠整复小儿肠套叠的成功率.方法 对328例小儿肠套叠患儿行空气灌肠,分析整复成功率与肠套叠发生的时间、套头部位、空气灌肠中解痉药物的使用的关系.结果 整复率与发病时间、套头部位、病理类型、整复压力的掌握及解痉药物的适时选用有关.结论 早期诊断,及早采用空气灌肠的方法进行整复,合理控制空气灌肠的整复压力,必要时选用解痉药物,可提高小儿肠套叠的整复成功率.

    作者:景彦民;王利顺;闫春霞;金伟 刊期: 2010年第03期

  • CT双期增强扫描对小儿肾母细胞瘤的诊断价值

    目的 探讨小儿肾母细胞瘤CT表现及诊断价值.方法 回顾性分析36例经手术、病理证实为肾母细胞瘤的CT表现.结果 本组全为单侧发病,多发生于肾脏的一极,也可全部,常表现为强化不均匀的实性肿块,瘤内常有坏死、囊变,少数有出血、钙化,典型表现为残存肾实质变薄,呈新月形或肾的正常结构消失.本组术前诊断准确率94%(34/36).结论 CT检查能准确显示肾母细胞瘤的大小、形态、密度、侵犯的范围及转移情况,对肿瘤分期、指导临床制定治疗方案有极高的价值.

    作者:李胜;陈玉峰;侯明伟;郑怀忠 刊期: 2010年第03期

  • 游离股前外侧皮瓣加外固定架治疗小腿骨折合并软组织缺损

    目的 总结应用股前外侧皮瓣加外固定架治疗小腿骨折合并软组织缺损临床疗效.方法 应用股前外侧皮瓣加外固定架治疗小腿骨折皮肤软组织缺损骨外露、感染85例患者.结果 85例患者中除1例所切取的皮瓣出现皮肤、皮下组织坏死,筋膜成活,后期游离植皮成活外,其余全部成活.6例伤口渗液,二期死骨摘除后愈合,其余伤口均一期愈合.术后随访6~24个月,无再感染,保留了肢体并且均恢复一部分感觉.结论 应用股前外侧皮瓣加外固定架治疗小腿骨折软组织缺损,具有骨折固定可靠、创面覆盖满意、早期进行关节功能练习等优点.

    作者:张艳茂;刘会仁;曹磊;刘志旺;王岩;李国华;吴学强;贾庆灵 刊期: 2010年第03期

  • 腰-硬联合麻醉在手术中的应用价值

    目的 探讨腰-硬联合麻醉(CSEA)应用于剖宫产术,子宫切除术、前列腺汽化电切术及下肢手术的临床效果及不良反应,评价在基层医院的应用前景.方法 对300例需行剖宫产、子宫切除、前列腺汽化电切及下肢手术的病员随机分组施行腰-硬联合麻醉(CSEA)和硬膜外麻醉(EA)两组,每组150例,CSEA组用药为0.75%盐酸布比卡因1.5ml+10%葡萄糖注射液1.5ml,EA组用药2%盐酸利多卡因10~15ml(含/20万肾上腺素),两组皆控制麻醉平面达T7~8水平,监测并记录BP、MAP、SpO2、ECG、HR,麻醉起效时间,麻醉阻滞效果,脊神经阻滞上界平面时间.结果 CSEA组MAP.HR的下降程度比EA组小(P<0.05),麻醉起效时间和眷神经阻滞上界面时间比EA组少(P<0.01),麻醉效果优良率比EA组高(P<0.05).结论 CSEA综合腰麻和硬膜外麻的优点,具有诱导快、用药少、阻滞完善,对循环呼吸干扰少,术后并发症少,是剖宫产术、子宫切除术、前列腺电切术等较理想安全的麻醉方法,在基层医院有广泛的应用前景.

    作者:任文烈;黄强;陈中林 刊期: 2010年第03期

  • 自杀性急性中毒患者的临床分析

    目的 通过对自杀患者急性中毒资料进行分析,为今后自杀患者发生急性中毒提供防治参考依据.方法 对2005年1月至2009年6月我院收治的932例自杀急性中毒患者的中毒情况、月份分布、患者性别与年龄进行分析研究.结果 自杀性急性中毒病例中,女性551例,男性381例.自杀性中毒年龄发生在19~38岁者占60.08%.自杀性急性中毒的人数与国民经济发展呈负相关(r=-0.985,P<0.05).自杀急性中毒时间以每年1,2,5,6月多见.结论 自杀性急性中毒患者以中青年为主,且女性多见;冬季和夏季自杀性急性中毒病例居多;经济发展速度快,则自杀性中毒人数相对较低.

    作者:代将;王雷;付晶;荆晓明;王晓梅;施阳 刊期: 2010年第03期

  • 采用临床实用法配制药液注射器细菌污染与安全性评价

    目的 研究采用临床实用法[1]配制药液次数与注射器细菌污染的关系.方法 实验1组和实验2组各取150具注射器,抽吸药液方法均采用临床实用法,实验1组配置非抗生素类药液,加药注射器使用3次、5次、8次;实验2组配置抗生素类药液,加药注射器使用次数同实验1组.观察两组注射器细菌污染情况及微生物分类情况.结果 采用临床实用法配置药液,实验2组结果同实验1组.即:加药注射器连续使用3次与使用5次、8次分别组内比较,P<0.05,差异有统计学意义.加药注射器连续使用5次与8次组内比较,P>0.05,差异无统计学意义.结论 启封后的加药注射器在1小时内抽吸同种药液,连续使用3次,具有安全性.

    作者:刘彦荣;张丽华;李贤 刊期: 2010年第03期

  • 汶川大地震某部长途徒步行军脚外伤的调查分析

    目的 调查汶川大地震救援中某部长途徒步行军脚外伤的发病情况及影响因素,为探讨防治措施提供依据.方法 以145名长途徒步行军男性救援队员为调查时象,调查脚外伤发生情况.结果 脚泡发生率46.2%;脚踝扭伤发生率2.8%;脚腿疼痛发生率为100%,其中脚腿肿胀发生率17.9%;脚部皮肤破溃发生率4.8%;脚软组织挫伤发生率1.4%.结论 长途徒步行军脚外伤发生率较高,应加强有针对性的训练和防护.

    作者:青廉;李虎 刊期: 2010年第03期

  • 99mTc-MDP骨三相显像诊断急性化脓性骨髓炎的临床价值

    目的 探讨99mm 锝-亚甲基二磷酸盐(99mm Tc-MDP)骨三相显像诊断急性化脓性骨髓炎的临床价值.方法 回顾分析28例急性化脓性骨髓炎患者99mm Tc-MDP骨三相显像的特点.结果 所有病例病变部位动脉期血流灌注均高于对侧,血池相期病变部位放射性浓聚程度增高,延迟显像病变部位骨放射性浓聚程度明显增高,其中8例邻近肢体关节放射性分布高于对侧.结论 99mm Tc-MDP骨三相显像诊断急性化脓性骨髓炎有着重要的临床应用价值.

    作者:龚建辉;黄慧;王洪州;董晓芳;唐珍珍 刊期: 2010年第03期

西部医学杂志

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主管:川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院

主办:四川