学术投稿

人间充质干细胞体外扩增及生物学特性的研究

周敦华;黄绍良;吴燕峰;魏菁;陈戈煜;黎阳;包蓉

关键词:干细胞, 细胞分裂, 细胞分化, 免疫表型分型, 组织工程
摘要:目的探讨成人骨髓、胎儿骨髓和人脐血3种不同来源的人类间充质干细胞(MSC)体外扩增及其生物学特性.方法观察3种来源的MSC的生长、增殖和表面标志的表达,从而评价MSC的纯化、增殖能力及其免疫学特性.结果 (1)3种不同来源的人MSC的细胞形态、集落数、集落大小均无差异;但成人骨髓MSC在集落形成及集落交错融合时间上均早于胎儿骨髓和脐血MSC; (2) 3种来源的人MSC传代培养增殖速度无差异,但脐血和胎儿MSC融合后无接触抑制,而成人骨髓MSC存在接触抑制; (3) 来源于骨髓单个核细胞(MNC)8×106或脐血MSC 25×106的MSC,经体外扩增3代、5代和10代后,细胞数分别为107、108和1010个; (4)MSC易纯化,P2代细胞均一性为90%,P3代细胞均一性为95%,P5代细胞均一性达到99%;(5) 不同来源的MSC表面重要标志:CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达均为阳性,其造血细胞表面标志:CD11a、CD14、CD33、CD34、CD28、CD45、CD117表达均为阴性,与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志:HLA-DR、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、CD40和CD40L均为阴性.3种不同来源的人MSC表面标志,差异无显著性.(6) 两种不同培养体系对人MSC的纯化扩增及生物学特性无影响.结论 (1)不同来源的人MSC生物学特性无明显差异;(2) 人MSC在体外易扩增纯化,增殖能力强,符合临床组织工程的需要;(3) 人MSC不表达造血细胞及与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志,有可能突破HLA屏障,广泛应用于临床.
中华儿科杂志相关文献
  • 严重急性呼吸综合征相关冠状病毒的研究进展

    自2002年11月在中国广东发现第一例病例以来,非典型肺炎(atypical pneumonia)便在中国大陆,香港和加拿大等地迅速蔓延,截至5月20日已累及全球31个国家和地区,累计患病人数7 919人,累计相关死亡人数662人.

    作者:顾绍庆;朱启镕 刊期: 2003年第08期

  • 宫内急性缺血缺氧后胎鼠肾脏表皮生长因子及其受体表达变化的研究

    研究证实,外源性表皮生长因子(EGF)对防治缺血缺氧性肾损伤有重要作用.同时,对胚胎肾发育的研究表明,转化生长因子-α(TGF-α)对肾脏的发育和成熟起主要促进作用[1].EGF和TGF-α共同作用于一个受体--表皮生长因子受体(EGFR).研究肾组织EGF和TGF-α及其受体EGFR在宫内窘迫时的动态变化,无疑对指导临床应用EGF防治围生期缺血缺氧性肾损伤具有重要的指导意义.

    作者:吴捷;刘雪雁;高红;王伟;魏克伦 刊期: 2003年第08期

  • 新生鼠败血症时核因子-κB的表达

    目的探讨核因子-κB(NF-κB)信号途径在新生鼠败血症中的作用,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据.方法新生10 d的Wistar大鼠,采用金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)皮下注射的方法制作败血症模型.(1)采用电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测金葡菌败血症新生鼠肺、肝脏 NF-κB活性的表达水平;(2)采用免疫组织化学方法检测金葡菌败血症新生鼠脾脏NF-κB P65活化的表达水平;(3)检测抗氧化剂--吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)对金葡菌败血症新生鼠肺、肝脏NF-κB活化以及脾脏NF-κB P65活化的影响.结果金葡菌败血症新生鼠肺脏NF-κB活性1 h开始有增强,3 h达高峰,24 h已无明显激活.肝脏NF-κB在1 h也开始有激活,4 h达高峰,24 h无明显活化.脾脏NF-κB P65活化阳性表达在细菌刺激后1 h,细胞核内P65阳性细胞数(12.0±3.7)即明显增加;3 h阳性细胞数(51.4±5.9)增加明显;而在24 h阳性细胞数明显减少(3.4±1.4),与对照组比较差异无显著性.应用PDTC 50~200 mg/kg对肺、肝脏NF-κB活化及脾脏NF-κB P65活化阳性表达均有抑制作用,且剂量越大,抑制作用越强.应用PDTC 200 mg/kg,对NF-κB活性抑制作用强.结论新生鼠金葡菌败血症时肺、肝、脾脏NF-κB均有明显激活,且都存在一高峰期;抗氧化剂PDTC能对金葡菌败血症新生鼠肺、肝、脾脏NF-κB活化有所抑制,且存在量-效依赖关系.

    作者:潘凤;史源;李华强;赵锦宁;唐仕芳;姚忠凯 刊期: 2003年第08期

  • 上海市四家儿童医院重症监护室中急性呼吸窘迫综合征发生率调查

    急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种以急性进行性呼吸窘迫、持续性低氧血症和肺水肿为特征的、病死率很高的临床综合征.文献报道成人发病率为3~14/10万[1],小儿尚未见相应报道.为了解上海市小儿ARDS在各医院的发病情况,我们对2001年3月~2002年2月上海四所医院儿科重症监护室(PICU)中ARDS发生率及临床特征进行调查.

    作者:陆铸今;王莹;汤定华;密越群;孙波 刊期: 2003年第08期

  • 131碘-抗CD45单克隆抗体在幼鼠体内分布的实验研究

    本实验研究了131I标记的抗CD45单抗在正常4~6周性成熟前小鼠体内的生物学分布情况,并根据美国医学内照射辐射吸收剂量委员会(MIRD)提出的方法,应用MIRDOSE 3.1程序中10岁儿童标准数据模型计算出主要脏器的内照射吸收剂量,以估测该单抗在儿童体内对淋巴造血组织的选择性照射效果.

    作者:吕慧;柴忆欢;徐杰;范我;许玉杰;朱玲琍 刊期: 2003年第08期

  • 内毒素致伤后新生大鼠肺组织病理改变及炎性反应的观察

    新生儿肺出血是新生儿期重要的死亡原因之一,其发病机制尚不十分清楚[1].本研究于2001年4月~2001年8月利用内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)制备新生和成年大鼠动物模型,通过对其肺组织病理改变及炎性反应的观察,以阐明LPS引起新生大鼠肺损伤的特点,探讨新生大鼠肺出血的机制.

    作者:蔡栩栩;杜悦;韩晓华;尚云晓;韩玉昆 刊期: 2003年第08期

  • 艾滋病高发农村儿童人类免疫缺陷病毒感染与艾滋病发病的关系

    目的了解艾滋病高发区儿童感染人类免疫缺陷病毒(HIV)情况.方法对某艾滋病高发农村高危育龄妇女及其年龄小于15岁的子女进行现场询问调查和采静脉血作HIV检测.结果 159名儿童中37例HIV阳性,其中33例为母婴途径感染,占89.2%,3例经输血感染,占8.1%,其他途径感染1例,占2.7%.HIV母婴传播率为38.4%(33/86).艾滋病状态母亲组母婴传播率(68.8%,22/32)显著高于HIV携带状态组(20.4%,11/54),P<0.05.37名感染儿童中12例发展成艾滋病, 4例死亡,其中2例死于结核.33例中31例造成母婴传播的HIV阳性妇女在孕产前未作HIV检测,占93.9%.8名妊娠期HIV阳性妇女,1例艾滋病病情加重,2例自然流产,2例经规劝终止妊娠,3例继续妊娠.结论母婴传播是儿童感染HIV的主要途径.未对高危生育期妇女进行有效的HIV监测及咨询,未采取有效干预措施是造成儿童HIV/AIDS的主要原因.亟需采取相应的对策控制HIV进一步蔓延,保护AIDS高发区妇女及儿童的健康.

    作者:庄柯;桂希恩;骆嘉拉;王晓榕;苏擘;张永喜 刊期: 2003年第08期

  • 应用缺口-连接酶链反应检测新生儿沙眼衣原体感染

    目的建立缺口-连接酶链反应(gap ligase chain reaction, G-LCR)诊断新生儿沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)感染.方法根据沙眼衣原体主要外膜蛋白基因设计两对探针,应用LCR技术扩增衣原体标准株DNA,并用于检测328例新生儿肺炎鼻咽拭子标本中的沙眼衣原体,在敏感性、特异性方面与传统的细胞培养法进行比较.结果 G-LCR可检测出两个衣原体原体;可扩增5种沙眼衣原体标准株 DNA,不扩增鹦鹉热衣原体及其他细菌DNA,显示出很高的特异性.328例鼻咽拭子标本中,G-LCR扩增检出67例阳性,培养检出60例.经结果不一致分析后,共检出69例阳性,阳性率为21%.以扩大标准为金标准判断,G-LCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为98.6%、100%、100%和99.6%,而培养则分别为86.9%、100%、100%和96.6%.结论 G-LCR检测新生儿沙眼衣原体感染具有较高的敏感性和特异性.G-LCR是一种有应用前景的核酸扩增方法.

    作者:韦红;吴仕孝;余加林;杨军;刘官信 刊期: 2003年第08期

  • 小儿HIV感染和艾滋病诊断及处理建议

    艾滋病即获得性免疫缺陷综合症(AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所致的一种传播迅速、病死率极高的恶性病.我国目前HIV感染人群已超过100万(2002年),且大多数集中在生育期成人.如果控制不好,10年后HIV感染者可能超过1 000万.HIV感染的母婴传播率高达22%~65%.小儿HIV感染与成人比较,其发生率增长快、潜伏期短、疾病进展快、死亡率高.因此小儿HIV感染和AIDS防治已成为我国儿科所面临的严峻挑战和紧迫任务.本建议适用于各级儿科医疗机构对HIV感染和AIDS患儿的诊断、报告和处理.

    作者:中华医学会儿科学分会感染学组;中华医学会儿科学分会免疫学组 刊期: 2003年第08期

  • 脐血免疫学状态的初步观察

    由于新生儿免疫系统未完全发育成熟,其功能与儿童和成人有较大差别.为探讨新生儿免疫功能的特点,1999年5月至2000年6月,我们将正常儿童和成人作为对照,研究正常新生儿脐血T淋巴细胞亚群、血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆一氧化氮(NO)、红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(E-ICR)等免疫指标的变化,为新生儿的免疫学保护提供理论依据.

    作者:刘敬;申鲁生;孙绍勇 刊期: 2003年第08期

  • 咪唑安定治疗毒鼠强中毒所致惊厥一例

    患儿男,7岁.因突然抽搐、昏迷30 min入院.既往无抽搐史,发病前曾捡食方便面.查体:浅昏迷状,四肢肌张力高,双侧踝阵挛.实验室检查:血气分析示混合性酸中毒,低氧血症.

    作者:阳军 刊期: 2003年第08期

  • 肿瘤坏死因子α和白细胞介素10 基因启动子区多态性与川崎病的相关性研究

    目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)和白细胞介素10(IL-10)基因启动子区多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测TNF-ɑ和IL-10基因启动子区4个多态性位点,对96例川崎病患儿及160例正常对照儿童进行相关性分析.结果 (1)中国汉族健康儿童TNF-ɑ基因-308(A/G)位点等位基因频率与日本人和美国白人正常人群相近;而IL-10基因-1082(G/A)、-819(C/T)、-592(A/C)3个位点等位基因频率与英国正常人群差异有显著性(P均<0.01);(2)TNF-ɑ基因-308位点等位基因频率在川崎病组和健康对照组间差异无显著性;IL-10 -1082、-819、-592的3个位点等位基因频率和单体型在两组之间比较差异亦无显著性;(3)临床表型分析发现,TNF-α-308 A基因型在静脉注射免疫球蛋白(IVIG)非敏感型川崎病患者中的发生频率高于TNF-α-308 G基因型,比较差异有显著性(67% vs 5%,χc2=90.48,P<0.01),前者发生静脉注射用IVIG非敏感型川崎病的相对危险度(RR)是后者的42.25倍(RR 95% CI=15.81~112.88,P<0.01).IL-10-1082A/-819T/-592A单体型在川崎病合并冠状动脉损伤患者中的发生频率高于Non-ATA单体型, 比较差异有显著性 (52%vs 20%,χ2=18.36, P<0.01), IL-10基因启动子区ATA单体型合并冠状动脉损伤的RR是Non-ATA单体型的4.26倍(RR 95% CI=2.20~8.25,P<0.01).结论 TNF-α、IL-10基因启动子区多态性可能是影响川崎病疗效和预后的重要因素.

    作者:杨军;李成荣;李永柏;李若馨;孙来保;黄惠君;王国兵 刊期: 2003年第08期

  • 急性呼吸窘迫综合征儿童俯卧位时气管内插管向头部方向移位的研究

    作者: 刊期: 2003年第08期

  • 儿科医生应重视艾滋病的防治工作

    自从1981年发现首例人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus,HIV-1)感染﹑即获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome, AIDS,艾滋病)以来,该病在全世界190多个国家和地区迅速传播流行,1990年全世界病例为800~1 000万,1993年1 400万,1995年1 800万,至2002年已达3 600万人.仅2002年发病数即达500万例,死亡病例为300万.估计到2010年全球患者将达到4 500万.

    作者:杨锡强 刊期: 2003年第08期

  • 新疗法联合应用治疗呼吸衰竭

    1953年使用常规机械通气(conventional mechanical ventilation,CMV)治疗新生儿呼吸衰竭,开辟了儿科呼吸治疗的新纪元.近年来,各种呼吸新疗法的不断问世为治疗严重呼吸衰竭提供了更丰富的手段.临床观察发现:在呼吸治疗水平提高,病死率降低的同时,存活者慢性肺疾患及发育迟缓发生率仍较高.

    作者:张琪;宋国维 刊期: 2003年第08期

  • 全国儿科感染性疾病学术会议纪要

    作者:中华医学会儿科学分会感染消化学组 刊期: 2003年第08期

  • 小儿重症监护病房的死亡状况: 阿根廷儿童放弃生命支持的多中心协作研究

    作者: 刊期: 2003年第08期

  • 超低出生体重儿生后两年内护理经费的研究

    作者: 刊期: 2003年第08期

  • 积极推广应用小儿危重病例评分法

    客观评估患儿病情严重程度,对现代医学的发展有重要意义.评估疾病严重程度是一项复杂的工作,不同种类的疾病对人体危害程度不同,相同种类的疾病病情也可能有很大差别.

    作者:宋国维 刊期: 2003年第08期

  • 新生儿肝糖原累积症一例

    患儿女,15 h,因呼吸困难12 h入院.患儿为第2胎第2产,足月顺产, Apgar评分1、5 min 9分,10 min 10分.生后3 h出现呼吸困难,青紫,伴频繁抽搐.经鼻导管吸氧青紫无缓解.体检:体温不升,脉搏 150次/ min,呼吸 26次/ min.反应差,全身皮肤青紫.前囟平坦,张力不高,双侧瞳孔等大等圆,对光反射迟钝.呼吸深大不规则,心肺听诊无异常.

    作者:安正红;常平;封志纯 刊期: 2003年第08期

中华儿科杂志

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