学术投稿

人胃癌细胞环氧合酶-2调节延迟整流钾通道的实验研究

吴汉平;吴开春;韩英;时永全;幺立萍;王钧;樊代明

关键词:胃肿瘤, 钾通道, 环氧合酶-2
摘要:目的研究胃癌细胞中延迟整流钾电流(IK)与环氧合酶-2 (COX-2)表达的关系,探讨COX-2在胃癌发生中的机制. 方法构建人COX-2的反义真核表达载体,转染COX-2高表达的人胃癌细胞系SGC7901.采用穿孔膜片钳全细胞记录法比较反义核酸转染和COX-2抑制剂消炎痛对细胞的Ik的影响.以MTT法检测延迟整流钾通道抑制剂对SGC7901及其反义核酸转染细胞生长的抑制作用.结果反义核酸稳定转染的细胞COX-2在蛋白及mRNA水平表达均下调.膜片钳记录提示,在钳制电压为-40 mV,阶跃电压为-80 mV~+80 mV时,在每个测试电压下,转染细胞的Ik均显著低于亲本细胞.给予消炎痛(10 μmol/L)后,Ik亦显著降低,停药冲洗后可完全恢复.延迟整流钾通道的抑制剂四乙铵 (TEA) 及四氨吡啶 (4-AP)对SGC7901及转染细胞的生长有显著抑制作用,并具有剂量依赖性.结论人胃癌细胞系SGC7901存在Ik,延迟整流钾通道与细胞生长有关.胃癌细胞中高表达的COX-2可能通过调节该通道影响细胞的生物学行为.
中华肿瘤杂志相关文献
  • 实时定量检测肝癌组织中端粒酶逆转录酶基因的表达

    在肝癌中,端粒酶活性高达80%以上,且活性越高,复发率也越高.因此,定量检测端粒酶活性对诊断肝癌、预测复发等有重要意义.我们采用实时定量RT-PCR方法,对50例肝癌及癌旁组织中的端粒酶hTERT基因表达水平进行了定量检测,现将结果报告如下.

    作者:高劲松;周昕煦;仝明;何蕴韶;周远帆;冯启龙 刊期: 2002年第05期

  • 血管内皮生长因子部分多肽抗血管生成的研究

    目的观察血管内皮生长因子(VEGF)部分多肽(3-4外显子)抗血管生成的作用.方法抽提LoVo细胞总RNA,进行RT-PCR,克隆VEGF部分多肽cDNA,构建VEGF部分多肽原核表达载体,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物.表达产物经亲和层析纯化后,以人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 和鸡胚尿囊膜(CAM)血管测定其生物学活性.结果表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中,具有良好的抗原性和特异性,并具有抑制HUVEC增殖及CAM血管形成的活性.结论 VEGF部分多肽具有竞争抑制血管生成的功能,在肿瘤生物靶向治疗中具有一定潜在价值.

    作者:李先茂;曾位森;张亚历 刊期: 2002年第05期

  • 非霍奇金淋巴瘤自体外周血干细胞中肿瘤污染的临床研究

    目的了解非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者自体外周血干细胞(APBSC)移植物中肿瘤细胞污染的情况,探讨移植物被肿瘤细胞污染对预后的影响.方法以免疫球蛋白重链(IgH)、T细胞受体γ(TCRγ)基因克隆性重排和BCL-2/IgH融合基因为检测标志,应用PCR结合SSCP技术检测了33例NHL患者APBSC标本中的微量肿瘤细胞,同时还检测了部分患者自体外周血干细胞移植(APBSCT)前后骨髓中的微量肿瘤细胞.结果 8例(24.2%)患者的17份(23.6%)APBSC标本微量肿瘤细胞检测阳性.动员时骨髓微量肿瘤细胞检测为阳性和阴性的患者,其APBSC污染阳性率分别为66.7%(6/9)和8.7%(2/23),二者差异有显著性(P<0.01).APBSC污染阳性和阴性患者的移植后预期3年总生存率分别为71.4%和71.2%,预期3年无病生存率分别为25.0%和61.5%. 结论 NHL患者采集的APBSC可受到肿瘤细胞的污染.APBSC动员时骨髓微量肿瘤细胞阳性增加APBSC污染的几率.

    作者:周爱萍;石远凯;冯奉仪;陆士新;何小慧;韩晓红 刊期: 2002年第05期

  • 中国大陆地区鼻咽癌放疗后放射性脑病的系统评价

    目的了解中国大陆地区鼻咽癌放射治疗后放射性脑病的整体情况.方法应用系统评价的方法,经过计算机检索、确定文献的入选与排除标准以及资料摘录等过程,对描述该病临床特征和与发病相关因素的数据进行统计学处理. 结果共有16家医院、18篇文献、累计病例数为553例的资料进入研究.在CT或MRI检查的条件下,放射性脑损伤的发生率平均为1.9 %;病变部位位于颞叶和脑干;首程常规放疗后脑病患者鼻咽和颅底区放疗总剂量的均数为72.9 Gy;发病的潜伏期平均为3.6年. 结论为了准确地掌握鼻咽癌放射性脑病的临床特征,必须组织多中心的病例对照研究或队列研究.

    作者:田野;郭志荣;祝梅芳 刊期: 2002年第05期

  • 端粒酶基因hTRT在乳腺癌中的表达

    端粒酶在肿瘤发生、诊断、治疗及预后判断等研究中均具有重要地位.端粒酶的蛋白亚单位hTRT(human telomerase reverse transcriptase)基因已经被克隆.我们采用hTRT基因探针和原位杂交技术检测了46例乳腺癌及其癌旁组织和53例乳腺良性病变中的hTRT基因mRNA表达,探讨hTRT基因表达在乳腺癌诊断中的价值.

    作者:李贵新;王会东;张永庆;赵常在;徐功立 刊期: 2002年第05期

  • CacyBP编码基因对胃癌细胞多药耐药性形成的影响

    目的探讨CacyBP在胃癌多药耐药机制中的作用.方法构建CacyBP正义核酸真核表达载体pcDNA3.1 /hCacyBP+,以脂质体将其导入胃癌药敏细胞SGC7901.以RT-PCR检测hCacyBP mRNA水平的变化;以MTT检测SGC7901及转染细胞对ADR的药物敏感性;以流式细胞仪(FCM)检测SGC7901及转染细胞内ADR的蓄积浓度及细胞周期.结果转染pcDNA3.1/hCacyBP+的SGC7901,其hCacyBP mRNA表达水平显著高于空载体转染及未转染之SGC7901,且细胞生存率亦有所增高.未转染之SGC7901及分别转染空载体或pcDNA3.1 /hCacyBP+之SGC7901细胞,平均ADR蓄积浓度分别为5.64,5.49和5.17.与未转染之SGC7901相比,转染pcDNA3.1/hCacyBP+和空载体的SGC7901细胞G1期减少,G2期及S期增高.结论 CacyBP在胃癌MDR机制中可能有一定作用.

    作者:胡文华;尹芳;金晓航;樊代明 刊期: 2002年第05期

  • 气管恶性肿瘤的外科治疗

    我科1987年8月至2000年9月,手术治疗气管恶性肿瘤伴严重气道梗阻13例,疗效满意,现报告如下.

    作者:谢德耀;孙成超;杨笃聪;林超西;董光同;汪良骏 刊期: 2002年第05期

  • 人内皮抑素转基因治疗B16黑色素瘤的实验研究

    目的研究瘤内直接注射携带人内皮抑素(hEN)基因逆转录病毒包装的细胞株对体内B16黑色素瘤细胞生长的抑制作用.方法修饰、鉴定hEN基因.构建含hEN基因的逆转录病毒载体pLNC-hEN,转染包装细胞株,筛选稳定转染该基因之PA317-pLNChEN细胞.建立小鼠B16黑色素瘤动物模型.瘤内直接注射PA317-pLNChEN细胞,分时间测量肿瘤体积,切取肿瘤,免疫组化检测肿瘤组织微血管密度(MVD),TUNEL染色检测肿瘤组织中的凋亡细胞.结果细胞接种后第7~9天,全部小鼠均长出2~3 mm直径肿瘤.hEN基因转染后第3,5,7,9天,转基因组肿瘤的平均体积(mm3)分别为4.67±1.10、22.25±13.06、84.17±43.5和155.08±81.1;空载体对照组分别为136.17±30.61、390.17±220.47、1 021.67±537.40和2 920.20±220.01,两组差异有显著性.转基因组和对照组的平均MVD分别为8.00±2.28和28.17±5.31,平均凋亡细胞数分别为23.33±3.83和2.33±1.21,差异均有显著性.结论瘤内注射携带hEN基因逆转录病毒包装的细胞,可抑制小鼠种植性B16黑色素瘤的微血管数目,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长.

    作者:张波;邹卫国;吴国豪;靳大勇;许德华;郑仲承;吴肇汉;刘新垣 刊期: 2002年第05期

  • 颈动脉体瘤的超声诊断

    目的分析颈动脉体瘤的灰阶及彩色多普勒超声图像特征,以提高诊断的准确率.方法回顾性分析18例颈动脉体瘤灰阶超声及其中11例彩色超声的图像资料,并与易引起误诊的多种病变作对比分析.结果 B超显示肿块均位于颈动脉分叉处,边界清楚,内回声略低,较均匀,常包绕颈总、内、外动脉,颈动脉夹角增宽,肿瘤内血流丰富,均为动脉.17个颈动脉体瘤超声诊断正确,其诊断准确率为94.4%.结论超声检查是颈动脉体瘤安全、可靠的诊断方法.

    作者:牛丽娟;郝玉芝;周纯武;朱利;陈宇;王勇;李洪林;黄苏里 刊期: 2002年第05期

  • 胃癌细胞中免疫球蛋白轻链Igκ和Igλ的共同表达

    目的研究免疫球蛋白(Ig)轻链kappa(Igκ)和lambda(Igλ)在胃癌细胞中的表达状况,以及Igκ和Igλ在胃癌细胞中表达的一致性.方法运用免疫组织化学技术LSAB法对22例石蜡包埋人胃癌组织标本 Igκ和Igλ进行检测.结果在22例胃癌组织中,胃癌细胞内Igκ和Igλ均阳性者17例,占77.3%;仅Igκ阳性者2例,占9.1%;仅Igλ阳性者1例,占4.5%;两者均阴性者2例,占9.1%.结果显示,胃癌细胞内Igκ和Igλ两者的表达关系密切(χ2=5.489 8,P<0.05).结论胃癌细胞中同时有两种类型免疫球蛋白轻链(Igκ和Igλ)表达,提示其可能有不同于B淋巴细胞的Ig基因活化机制.

    作者:杨少波;王孟薇;尤纬缔 刊期: 2002年第05期

  • 人DNA MTase反义基因转染诱导E-钙黏附蛋白高表达

    目的观察人DNA MTase反义基因转染后肝癌细胞系SMMC-7721 E-钙黏附蛋白表达的变化.方法用基因重组技术构建包含人DNA MTase正、反义基因片段的真核表达载体;采用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC-7721;采用RT-PCR法观察DNA MTase 基因mRNA、E-钙黏附蛋白基因mRNA表达变化;以甲基化特异的PCR法检测E-钙黏附蛋白基因启动子区域甲基化状态的改变;以免疫组化和流式细胞法检测E-钙黏附蛋白表达变化.结果正、反义真核表达载体构建成功并转染入SMMC-7721细胞,其中DNA MTase 基因mRNA表达减低,E-钙黏附蛋白基因mRNA表达上调,E-钙黏附蛋白基因启动子区域呈现去甲基化状态,E-钙黏附蛋白表达上调.结论抑制DNA MTase基因的表达可使肝癌SMMC-7721细胞中E-钙黏附蛋白基因启动子区域去甲基化和表达增加;DNA MTase通过诱导启动子区域高甲基化,可使E-钙黏附蛋白基因低表达.

    作者:张宏;肖文华;梁后杰;房殿春;杨仕明;罗元辉 刊期: 2002年第05期

  • 化疗与三维适形放疗同步治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床观察

    三维适形放疗(three dimensional-conformal radiotherapy,3D-CRT)是一项新的放射治疗技术,能大限度地增加肿瘤的局部控制概率(TCP),减低周围正常组织的放射并发症(NTCP).现将我院应用化疗与3D-CRT同步治疗24例Ⅲ期肺癌的初步结果报告如下.

    作者:宋启斌;谢声强;徐利明;胡德胜;张明和 刊期: 2002年第05期

  • 胃肠道间质瘤中原癌基因c-kit突变及其蛋白表达

    目的探讨c-kit基因蛋白表达及基因突变在胃肠道间质瘤(GIST)发病中的作用及其与临床病理、预后的关系.方法采用免疫组化和聚合酶链反应单链构象多态性技术(PCR-SSCP)方法,检测82例GIST中c-kit 蛋白的表达及c-kit基因exon 11突变的情况.结果全组c-kit蛋白的阳性率为97.6%(80/82),c-kit基因突变率为41.5%(34/82).良性GIST c-kit蛋白表达率为95.0%(19/20),c-kit基因突变为阴性;恶性GIST c-kit蛋白表达率为98.4%(61/62),c-kit基因突变率为54.8%(34/62).与基因突变阴性病例相比,突变阳性组的GIST容易出现邻近组织的侵袭、转移或者复发.结论 c-kit蛋白是GIST的重要诊断指标;c-kit基因突变在GIST发生发展中可能发挥重要作用,可作为判断GIST患者预后的指标之一.

    作者:马大烈;刘晓红;蔡在龙;谢强 刊期: 2002年第05期

  • 兰他隆治疗绝经后晚期乳腺癌临床观察

    目的观察兰他隆(Lentaron)治疗绝经后复发转移乳腺癌的疗效和副作用.方法 34例绝经后复发转移乳腺癌患者给予兰他隆250 mg肌肉注射,每2周1次,至少1个月.结果 34例可评价疗效和毒副作用的患者中,部分缓解(PR)5例,占14.7%;稳定(SD)20例,占58.8%,其中病情稳定≥6个月者12例,占35.3%;临床获益患者(PR+SD≥6个月)17例,占50.0%;病情进展9例,占26.5%.骨、软组织和内脏转移有效率依次为30.8%(4/13)、13.6%(3/22)和5.3%(1/19).治疗中无严重不良反应.结论兰他隆治疗绝经后复发转移乳腺癌有一定疗效,药物不良反应轻,患者容易耐受.

    作者:刘晓晴;宋三泰;江泽飞;吴世凯;于静新;王涛 刊期: 2002年第05期

  • 乳腺癌组织中NOEY2基因的mRNA表达及其与临床病理的关系

    目的观察乳腺癌组织中NOEY2基因的mRNA表达情况,并探讨其与临床病理及其他分子指标的关系.方法以RT-PCR法和反义RNA探针原位杂交法,检测乳腺良恶性病变组织中NOEY2基因的mRNA表达.以免疫组化法检测乳腺癌石蜡标本中的雌激素受体(ER)状态、Ki67标记指数以及p27和p21WAF1的表达.结果 RT-PCR法检测显示,24例冻存乳腺组织中,6例良性病变NOEY2均为阳性;18例乳腺癌中,13例(72.2%)NOEY2为阳性.原位杂交法检测显示,10例乳腺良性病变NOEY2均为阳性;而60例乳腺侵袭性癌中,仅有31例NOEY2为阳性,占51.7%.良恶性病变NOEY2阳性率差异有显著性(P<0.025).NOEY2的阳性率有随组织学分级升高而递减的趋势.淋巴结阴性者阳性率为76.7%,而阳性者仅为26.7%,两者差异有显著性(P<0.001).NOEY2基因mRNA表达与其他临床病理指标以及免疫组化指标均无显著相关性.结论 NOEY2基因可能在一定程度上参与了乳腺癌的发生和发展,该基因的失表达可能与乳腺癌的转移机制有关.

    作者:施宗高;周晓燕;许良中;张廷璆;侯英勇;朱伟萍;张太明 刊期: 2002年第05期

  • 右开胸结合体外循环切除左主支气管残端肿瘤复发并隆凸成形一例

    患者女,64岁.以左肺上叶癌累及左主支气管于1998年10月9日行左全肺切除术.术后病理诊断为左肺上叶中分化鳞癌,转移性淋巴结癌(0/18).临床病理分期为Ib期(T2N0M0). 2000年5月患者开始咳嗽,11月10日再次入院.纤维支气管镜检查发现左主支气管残端肿瘤复发,累及隆凸,活检病理为鳞癌.胸部CT示左主支气管残端肿物,和左肺动脉干关系密切,左主支气管旁及主动脉弓窗可见肿大淋巴结.

    作者:王永岗;张德超;陈新杰 刊期: 2002年第05期

  • 原发扁桃体非霍奇金淋巴瘤的预后因素

    目的评价原发扁桃体非霍奇金淋巴瘤(NHL)的肿瘤侵犯范围(T分期)和国际预后指数(IPI)的预后价值,并对早期患者提出治疗建议. 方法回顾分析306例原发扁桃体NHL. 根据Ann Arbor分期,Ⅰ期35例,Ⅱ期178例,Ⅲ期49例,Ⅳ期44例.根据1997年AJCC TNM分期标准,T1 29例,T2 142例,T3 117例,T4 18例.Ⅰ期单纯放射治疗12例,综合治疗23例;Ⅱ期单纯放射治疗57例,单纯化疗2例,综合治疗119例;Ⅲ、Ⅳ期以化疗为主. 结果 T1、T2、T3和T4的5年癌症相关生存率(CSS)分别为73.8%、59.0%、56.5%和26.5%(P<0.05);IPI评分0分、1分和2或3分的5年CSS分别为69.9%、49.0% 和25.0%(P<0.01). Ⅱ期单纯放疗和综合治疗的5年无瘤生存率(DFS)分别为46.2%和60.4%(P<0.05). 多因素分析证明,影响预后的因素有一般状态、B症状、Ann Arbor分期、T分期和IPI. 结论原发肿瘤T分期和IPI是扁桃体NHL重要的预后因素.综合治疗改善了Ⅱ期扁桃体NHL的DFS.

    作者:高远红;李晔雄;袁智勇;赵路军;刘新帆;顾大中;钱图南;余子豪 刊期: 2002年第05期

  • 电化学治疗联合化疗泵植入治疗肝转移瘤的临床研究

    自1998年2月至2000年6月,我们以电化学治疗(ECT)联合化疗泵植入治疗肝转移瘤40例,现将结果报告如下.

    作者:宋京海;黄美雄;吴国举;赵刚;王在同 刊期: 2002年第05期

  • 散发性结直肠癌患者5号染色体杂合缺失分析

    目的探讨散发性结直肠癌患者5号染色体上与抑癌基因相关的杂合缺失(LOH)情况,并探索新的抑癌基因位点.方法对83例散发性结直肠癌患者基因组DNA,以15个不同荧光标记的高度多态性微卫星引物(平均遗传距离12.67 cm)扩增相应的微卫星位点,用ABI PRISM 377 测序仪进行基因扫描,统计各位点杂合缺失率.结果在15个微卫星位点中,平均杂合缺失率为25.80%.5p中高为D5S416,占48.15%;5q中高为D5S471,占38.71%.D5S471周围的3个位点(D5S428、D5S2027和D5S2115)也存在高频的杂合缺失(>30.00%).结论 5号染色体上存在着高频的杂合缺失,其中5q13.3~31.1区域中,有与结直肠癌发生密切相关的APC、MCC、CTNNA1及IL家族等基因;而在5p15.1上的D5S416的杂合缺失率高达48.15%,此区域至今尚未发现与结直肠癌相关的基因位点,估计可能有未知的抑癌基因存在.

    作者:张放;周崇治;凌云;裘国强;柏邵春;刘万清;贺林;彭志海 刊期: 2002年第05期

  • 多单位核酶对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制及凋亡诱导效应研究

    目的探讨多单位核酶体外净化慢性粒细胞白血病(慢粒)骨髓的可能性,研究多单位核酶的体外切割活性及对慢粒细胞恶性表型的逆转作用.方法针对慢粒发病中起重要作用的bcr-abl融合基因,在融合位点两侧44碱基范围内设计、合成3个核酶,其中2个切割位点位于bcr基因,1个位于abl基因.通过基因重组构建多单位核酶体外转录载体及逆转录病毒表达载体,鉴定其体外切割活性.将多单位核酶逆转录病毒表达载体转染K562细胞,应用MTT、3H-TdR掺入、RT-PCR、斑点杂交、流式细胞仪、透射及扫描电镜等方法,检测多单位核酶对慢粒细胞增殖活性及细胞超微结构、细胞周期、凋亡等的影响.结果多单位核酶的体外切割活性为70.8%,逆转录病毒载体转染慢粒K562细胞系后,细胞DNA合成及细胞增殖受到明显抑制,转染后96 h抑制率达50%左右.多单位核酶转染细胞后能够有效切割细胞RNA,使转染细胞RNA减少1 000倍左右.流式细胞仪检测显示多单位核酶转染72 h后,18.4%的细胞发生凋亡,大多数细胞被阻滞于G期,分裂期(S期)细胞数减少约41.9%.透射、扫描电镜见转染细胞出现核固缩、凋亡小体等细胞凋亡的特异性表现. 结论多单位核酶不仅具有较高的体外切割活性,而且其逆转录病毒载体能够有效转染慢粒细胞系,在细胞内持续表达、切割细胞RNA,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,逆转慢粒细胞的恶性表型,在慢粒基因治疗中具有潜在应用价值.

    作者:冯琦;孙秉中;孙凯;尚振川;王莎;王玮;赵永同;颜真;韩苇;张英起 刊期: 2002年第05期

中华肿瘤杂志

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