学术投稿

全自动免疫组化仪与手工操作应用体会

陈艳;潘美华

关键词:全自动免疫组化仪, 手工操作, 免疫组织化学
摘要:免疫组化技术作为病理诊断的重要辅助手段,在临床病理鉴别诊断、肿瘤评估及耐药检测等方面发挥不可或缺的作用,大大提高病理诊断水平。近年随着社会总人口以及癌症患者数量增长,病理科的工作量相应增大,传统的手工操作已不能满足工作需要,因此各种型号的自动免疫组化仪应运而生。本科室于2014年3月开始使用全自动免疫组化染色仪,经过一段时间的实践摸索,现将其应用体会总结如下。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 全自动免疫组化仪与手工操作应用体会

    免疫组化技术作为病理诊断的重要辅助手段,在临床病理鉴别诊断、肿瘤评估及耐药检测等方面发挥不可或缺的作用,大大提高病理诊断水平。近年随着社会总人口以及癌症患者数量增长,病理科的工作量相应增大,传统的手工操作已不能满足工作需要,因此各种型号的自动免疫组化仪应运而生。本科室于2014年3月开始使用全自动免疫组化染色仪,经过一段时间的实践摸索,现将其应用体会总结如下。

    作者:陈艳;潘美华 刊期: 2015年第06期

  • 睾丸混合性生殖细胞肿瘤并胚胎性癌成分肺转移1例

    患者男性,32岁,因“10天前无明显诱因出现咳血”入院。无其他不适症状,外院胸部CT示右上肺占位性病灶,行抗生素治疗1周余,右上肺肿块无改变。患者自述10年前左侧睾丸开始无痛性增大,未做任何检查及治疗,本院行睾丸检查示左侧睾丸内见一大小3.92 cm ×2.04 cm的低回声,边界欠清晰,形态不规则,内部回声不均匀,由多个结节融合而成。逐行手术切除术。

    作者:肖兰;刘汉忠 刊期: 2015年第06期

  • 具有微乳头状结构的乳腺单纯型黏液癌1例

    患者女性,39岁,因“发现左乳肿物1个月余”就诊。查体:双乳对称,外观大致正常,左乳内下可触及一1.0 cm ×0.8 cm大小肿物,质韧硬,界欠清,活动度差,左乳内上象限可及片状不均回声区,右乳未及明显异常,双腋下未及明显肿大淋巴结。外院B超示:左侧乳腺内侧腺体结构显示紊乱,呈片状,分布欠均匀。外院双侧乳腺CC+MLO示:双乳致密腺体型,左乳结节伴钙化,右乳结节,BI-RADS 3级。外院乳腺 MRI 示:左乳乳头内侧节段性明显强化,考虑 BI-RADS-MRI 4级;左乳乳头上方小结节,BI-RADS-MRI 3级;右乳BI-RADS-MRI 2~3级。

    作者:刘晓刚;吴艳;蔡辉;薛慧忠;张新鹏;马郁琳 刊期: 2015年第06期

  • 结直肠癌中5-氟尿嘧啶代谢酶的表达及临床意义

    目的:分析5-氟尿嘧啶(5-F1uorouraci1,5-FU)代谢酶在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征及预后的关系,为进一步探讨其在指导结直肠癌化疗中的潜在意义提供理论依据。方法构建含有72例结直肠癌、56例癌旁远端切缘的组织芯片,采用免疫组化EnVision两步法检测胸苷酸合成酶( thymidy1ate synthetase,TS)、胸苷酸磷酸化酶( thymidine phosphory1ase, TP)、二氢嘧啶脱氢酶( dihydropyrimidine dehydrogenase,DPD)在两种组织芯片中的表达,并分析三者表达与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中的TS表达水平低于癌旁远端切缘组织( P=0.876);其表达与TNM分期有关(P=0.043);与患者总生存期呈正相关(P=0.027)。结直肠癌组织中TP表达水平高于癌旁远端切缘组织(P=0.315);其表达与淋巴结转移有关( P=0.009);与患者预后呈负相关( P=0.040)。结直肠癌组织中DPD表达水平高于癌旁远端切缘组织(P=0.071);其表达与组织学类型有关(P=0.029);DPD高表达的患者总生存期显著缩短(P=0.011)。结论在以5-FU为基础化疗的结直肠癌患者中,TS、TP、DPD可以作为预后的重要指标。TS表达与临床分期密不可分,可作为结直肠癌进展的生物学标志。TP表达与淋巴结远处转移及复发密切相关,是影响患者术后复发转移的重要因素。

    作者:吴月琴;白文启;李灵敏;郗彦凤 刊期: 2015年第06期

  • 36例小细胞骨肉瘤的临床病理学、免疫组化及分子分析

    Righi A,Gambarotti M,Longo S,et al. Sma11 ce11 osteosarco-ma:c1inicopatho1ogic,immunohistochemica1,and mo1ecu1ar a-na1ysis of 36 cases. Am J Surg Patho1,2015,39(5):691-9.小细胞骨肉瘤是骨肉瘤的一种非常罕见亚型,组织学类似骨的其它小细胞恶性肿瘤,特别是尤因肉瘤。为鉴别小细胞骨肉瘤及骨的其他原发性小细胞恶性肿瘤,作者对36例原发性骨的小细胞骨肉瘤进行CD99和SATB2(一种成骨细胞分化标志物)的免疫组化(IHC)表达情况评估。并通过荧光原位杂交和(或)逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)分析了EWSR1和FUS 基因突变情况,进一步评估小细胞骨肉瘤和尤因肉瘤是否有相同的遗传性学改变。

    作者:魏建国(摘译);许春伟(审校);邰艳红(审校) 刊期: 2015年第06期

  • 伴有黏液样变的原发性肝脏肿瘤:形态学罕见的肝脏腺瘤和肝细胞性肝癌

    Sa1aria S N,Graham R P,Aishima S,et al. Primary hepatic tumors with myxoid change:morpho1ogica11y unique hepatic ade-nomas and hepatoce11u1ar carcinomas. Am J Surg Patho1,2015,39(3):318-24。

    作者:魏建国(摘译);许春伟(审校) 刊期: 2015年第06期

  • 胃癌新鲜和石蜡组织及癌前病变组织中miR-106a的表达

    目的:比较miR-106a在胃癌新鲜和石蜡组织中的表达,探讨其在胃癌前病变组织中的表达。方法收集人胃癌和对应癌旁组织新鲜样本30对和石蜡样本40对,采用实时荧光定量 PCR技术检测miR-106a在两组样本中的表达。收集人胃癌前病变石蜡样本20例和胃腺癌石蜡样本40例,采用原位杂交技术检测miR-106a在胃癌早期发生阶段中的表达并与胃癌组织相比较。结果新鲜组织中miR-106a的相对表达量为3.25±1.99,石蜡组织中miR-106a的相对表达量为3.18±2.14,两组相比miR-106a表达量差异无统计学意义(P>0.05),两组样本miR-106a的表达具有显著相关性(rs =0.998,P<0.001)。在胃癌前病变阶段可以检测到miR-106a的表达,阳性率为70%,阳性颗粒位于不典型增生的上皮细胞内,呈深蓝色细颗粒状物;胃癌组织中miR-106a的阳性率为87.5%,阳性表达范围和强度较癌前病变明显扩大和增强。结论胃癌新鲜组织和石蜡组织中miR-106a的表达呈显著正相关,应用石蜡组织检测miR-106a在胃癌前病变中出现的早期表达变化,可以为胃癌的早期诊断提供有价值的信息。

    作者:朱萌;张宁 刊期: 2015年第06期

  • 鞍区垂体细胞瘤10例临床病理分析

    目的:探讨垂体细胞瘤的临床病理学特征。方法回顾性分析10例垂体细胞瘤的临床病理资料,并复习相关文献。结果10例患者中男性4例,女性6例,年龄4~68岁。肿瘤由伸长的双极梭形细胞构成,肿瘤细胞表达S-100(10/10)、vimentin (10/10)、GFAP(10/10)、EMA(4/10),不表达CKpan,Ki-67增殖指数1%~5%。随访9例患者,均存活,其中1例女性患者术后2年复发。结论垂体细胞瘤是一种低级别、好发于鞍区的梭形细胞肿瘤,成人多见,肿瘤易与毛细胞星形细胞瘤、神经垂体颗粒细胞瘤等混淆,免疫组化标记有助于鉴别诊断。手术完整切除预后良好,不完全切除者有复发可能。

    作者:吴燕妮;何燕;李南云;吴波 刊期: 2015年第06期

  • 肾黏液样小管状和梭形细胞癌的临床病理学分析

    目的:探讨肾黏液样小管状和梭形细胞癌( mucinous tubu1ar and spind1e ce11 carcinoma,MTSCC)的临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断。方法回顾性分析2例MTSCC的临床病理学特征,并复习相关文献。结果 MTSCC临床表现无特异性,CT、MRI等影像学检查可辅助诊断,确诊需依赖病理检查。免疫表型:瘤细胞表达 CK7、CK18、CK19、P504S、EMA、vimentin、CK34βE12、E-cadherin,不表达 CD15、CD10、CD56、Syn、CgA、CD117、C-erbB-2及 vi11in。结论MTSCC是一种罕见的低级别恶性肿瘤,需与集合管癌、乳头状肾细胞癌、肾髓质癌等鉴别,CT、MRI及免疫组化检查有助于诊断。

    作者:苏丽丽;陈俊毅 刊期: 2015年第06期

  • 浆细胞骨髓瘤伴结晶体储备性组织细胞增多症1例并文献复习

    目的:探讨浆细胞骨髓瘤( p1asma ce11 mye1oma,PCM)伴结晶体储备性组织细胞增多症( crysta1-storing histiocytosis, CSH)的临床病理学特征。方法对1例PCM伴CSH进行光镜、电镜观察及免疫组化标记,并复习相关文献。结果PCM 伴CSH 中,肿瘤由CD38、CD138弥漫强阳性的浆细胞和内含单克隆性免疫球蛋白沉积的CD68、CD163弥漫强阳性的组织细胞组成。电镜显示组织细胞及浆细胞胞质内见大量菱形、多角形或不规则形的结晶体形成,电子密度高,部分结晶体内有小空泡。结论 PCM 伴CSH 是一类罕见的由某种原因导致组织细胞溶酶体内免疫球蛋白轻链物质聚积、结晶体结构形成的特征性病变,其具有独特的病理学特征,临床上与单纯浆细胞性骨髓瘤相比,生存期较长。

    作者:胡舜;刘伟 刊期: 2015年第06期

  • 维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、Ki-67和PCnA的表达

    目的:探讨维吾尔族妇女子宫颈癌组织中 IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白的表达。方法采用免疫组化SP法检测IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白在维吾尔族妇女子宫颈癌和慢性子宫颈炎组织中的表达。结果 IFITM1蛋白在子宫颈鳞癌组织中的表达低于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义(P=0.003);子宫颈癌组织中Ki-67和PCNA蛋白表达高于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义( P =0.019,P =0.000)。结论 IFITM1蛋白在子宫颈癌组织中的表达降低,Ki-67和PCNA蛋白在子宫颈癌组织中的表达水平增高,可能与维吾尔族妇女子宫颈癌的发生有关。

    作者:赵志敏;王红英;木拉提;郑威楠;杨昕;李玉华;左强强;龙海晨;张金莉;潘泽民 刊期: 2015年第06期

  • 酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用

    冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的结果及科研的可靠性。影响冷冻切片质量的因素很多,分化液是其中之一。酵素又称为酶,具有催化、净化等作用,现今在生产、生活中广泛应用,如清洗、灭菌、净化、美容、减肥等。有关其在病理切片制作中的应用尚未尝试。作者在不同组织冷冻切片染色中利用酵素水溶液分化,以期探索出提高切片染色清晰度、对比度,优化冷冻切片质量的方法。

    作者:高宝莲;钱萍;沈志炜;胡泊;马祯一 刊期: 2015年第06期

  • 肺腺癌中EGFR突变特异性抗体的表达及其意义

    目的:探讨表皮生长因子受体( epithe1ia1 growth factor receptor,EGFR)突变特异性抗体在肺腺癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学( immunohistochemistry,IHC)法检测171例已知EGFR突变情况[扩增阻滞突变系统-PCR( amp1ification refractory mutation system-PCR,ARMS-PCR)法检测]的肺腺癌中EGFR基因19、21号外显子突变特异性蛋白( EGFR-19、EGFR-21)和非突变蛋白( EGFR-P)的表达,分析EGFR-19、21表达与临床病理特征的关系,检验IHC与ARMS-PCR法检测结果的一致性。结果 EGFR突变蛋白表达与低分化腺癌(微乳头型、实体型)有关( P=0.021);EGFR-21高表达与肿瘤侵犯胸膜有关(P=0.005)。IHC法检测EGFR-19、21表达与ARMS-PCR法检测EGFR突变具有一致性(Kappa值均>0.4);EGFR-19、21的敏感性、特异性分别为65.0%、89.4%和70.0%、97.6%。结论肺腺癌中EGFR突变蛋白表达与组织分化差、胸膜侵犯有关,提示其可作为预后不良的指标;IHC法检测EGFR突变特异性蛋白可用作EGFR突变初筛手段。

    作者:顾霞;吴洁瑜;何新明;林云恩;何萍;吴其年;李广秋 刊期: 2015年第06期

  • 应用ARMS检测不同类型的肺腺癌标本EGFR基因突变

    目的:探讨应用扩增阻滞突变系统( amp1ification re-fractory mutation system,ARMS)法检测不同类型肺腺癌标本表皮生长因子受体( epithe1ia1 growth factor receptor,EGFR)基因突变的特点。方法收集80例山东省西部地区肺腺癌患者肿瘤标本(胸水细胞块、肺活检、手术切除组织),采用ARMS法检测EGFR基因19、20、21号外显子突变状态,并分析EGFR突变与标本类型、患者性别、年龄、吸烟状态及家族史等的关系。结果肺腺癌中,总EGFR突变率为41.25%,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织 EGFR 突变率分别为43.14%、31.25%、46.15%( P =0.649)。EGFR 突变标本中,21号外显子错义突变(L858R)发生比例高(59.58%,19/33),其次为19号外显子缺失(19de1)(39.39%,13/33),二者同时突变占3.03%(1/33);女性与男性的突变率差异有显著性(54.55% vs 25.00%,P=0.008);吸烟与不吸烟患者的突变率差异有显著性(25.81% vs 51.02%,P=0.026)。结论在肺腺癌中,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织等标本均可用于EGFR基因突变检测,21号外显子L858R突变常见;女性、不吸烟患者突变率明显高于男性、吸烟患者。

    作者:李迎雪;温文娟;韩琳;尹艳华;张杰;许俊龙;任玉波 刊期: 2015年第06期

  • 胃癌中Girdin和EGFR蛋白的表达及临床意义

    目的:检测Girdin和EGFR蛋白在胃癌中的表达,分析二者表达与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化法检测115例胃癌和40例正常胃组织中Girdin和EGFR蛋白的表达。结果 Girdin 和 EGFR 在胃癌中的阳性率(40.9%、54.8%)均明显高于正常胃组织(17.5%、22.5%)(P<0.05)。Girdin和EGFR在胃癌中的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关( P>0.05),与患者年龄、性别、组织学分级无关( P>0.05)。在胃癌中,Girdin和EGFR的表达呈正相关( P<0.05)。结论 Girdin和EGFR可能在胃癌的发展和转移中起协同作用,联合检测Girdin和EGFR表达有助于判断胃癌的恶性程度和转移潜能。

    作者:许欣;姚冬颖;刘晓丽;齐蕾 刊期: 2015年第06期

  • 原发性心骨肉瘤1例

    患者女性,39岁。无明显诱因出现胸闷、气促、呼吸困难1个月。查体:心尖搏动位于左侧第5肋间锁骨中线1 cm内,心律齐,心尖区可闻及双期杂音。超声心动图检查示左心房、左心室增大,左心房内有类实质不均质肿块并钙化(图1);肿块与二尖瓣后瓣根部黏连并致二尖瓣机械性狭窄。遂于全麻体外循环下行左心房肿物切除术及二尖瓣置换术。患者术后恢复良好。7个月后患者出现咳嗽、气促,CTA检查示心包内占位,大小65 mm ×60 mm,附着于脏层心包膜,性质待定(图2)。再次行全麻下心包肿瘤切除术。

    作者:郭乔楠;刁鑫伟;欧小燕 刊期: 2015年第06期

  • Annexin A3高表达对胃癌 MGC803细胞增殖及凋亡的作用

    目的:探讨Annexin A3高表达对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响。方法构建重组质粒pYr-ads-4-Annexin A3,转染至胃癌MGC803细胞,G418筛选稳定表达株,Western b1ot法检测转染前后Annexin A3蛋白表达变化;以空载体转染组及未转染MGC803细胞为对照,采用CCK8、平板克隆和流式细胞仪技术检测Annexin A3高表达对MGC803细胞增殖、克隆形成及细胞周期的作用。结果成功构建重组质粒pYr-ads-4-Annexin A3;pYr-ads-4-Annexin A3稳定转染细胞株中Annexin A3蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染MGC803细胞组( P<0.05);CCK8实验显示,pYr-ads-4-Annexin A3组中肿瘤细胞数目显著多于空载体转染及未转染MGC803细胞组( P<0.05);平板克隆实验发现,pYr-ads-4-Annexin A3组中肿瘤细胞形成克隆数量多于其余两组(P<0.05);流式细胞仪检测结果提示,Annexin A3高表达抑制了MGC803细胞凋亡(P<0.05)。结论 An-nexin A3在胃癌的发生过程中起重要作用,其机制可能与促进胃癌细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡有关,提示Annexin A3可能成为胃癌治疗的新靶点。

    作者:张大勇;王连东;曾超 刊期: 2015年第06期

  • 尿路上皮癌诊断中 DNA倍体分析和尿脱落细胞学检查的临床价值

    目的:探讨DNA倍体分析和尿脱落细胞学检查对尿路上皮癌诊断的临床价值,寻找早期诊断尿路上皮癌的理想方法。方法随机收集121例尿路上皮癌患者的尿液标本作为实验组,另取95例良性血尿非肿瘤患者的尿液标本作为对照组,分别进行尿脱落细胞学检查和DNA倍体分析。结果尿脱落细胞学检查的敏感性高于DNA倍体分析,但特异性低于DNA倍体分析。尿脱落细胞学检查敏感性为85.10%,特异性为76.80%;DNA倍体分析敏感性为81.80%,特异性为81.10%。121例中,膀胱癌103例,上尿路上皮癌18例。对于不同分型的尿路上皮癌,两种方法在高级别肿瘤中均有较好的敏感性,尤其是DNA倍体分析在浸润性膀胱癌和上尿路上皮癌的诊断中具有极好的敏感性,均>94%。结论 DNA倍体分析结合尿脱落细胞学检查,可大大提高尿路上皮癌检测的特异性,以及增加对浸润性膀胱癌及上尿路上皮癌诊断的灵敏度,是对尿路上皮癌检测方法的有利补充。

    作者:唐燕;余龙 刊期: 2015年第06期

  • 结肠低度恶性黏液纤维肉瘤1例

    患者女性,55岁,因“反复右下腹痛2个月余伴便血1周”入院。患者于2个月前无明显诱因出现右下腹部胀痛,疼痛呈持续性,阵发性加剧,改变体位无明显加剧及缓解。近1周出现大便带血,余无异常。外院肠镜检查示:升结肠近肝曲可见一3 cm ×2.5 cm大小息肉样带蒂肿物,考虑:(1)结肠息肉;(2)结肠癌?外院病理示:结肠增生性息肉。专科检查:神志清楚,营养中等,全身浅表淋巴结无肿大及压痛,心肺无阳性体征,腹部平坦、软,全腹无压痛及反跳痛,未触及腹部包块,肠鸣音正常,双下肢无水肿。实验室检查:肿瘤标志物AFP、CEA、CA125、CA153、CA199均阴性。CT示升结肠近肝曲见一30 mm ×22 mm大小的不规则肿块影,与肠壁广基底相连,突入肠腔内生长,增强扫描后肿块呈不均匀强化。

    作者:肖秋香;肖学文;杨庆春;范钦和 刊期: 2015年第06期

  • 乳腺癌中miR-134的表达及其与上皮-间质转化的关系

    目的:探讨miR-134在乳腺癌中的表达及临床意义,分析其表达与上皮-间质转化( epithe1ia1-mesenchyma1 transition, EMT)标志物的相关性。方法采用原位分子杂交法检测97例乳腺癌组织中miR-134的表达,同时应用免疫组化MaxVision两步法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达,并分析三者表达与临床病理特征的关系。结果 miR-134在乳腺癌中的阳性率随组织学分级的升高而降低,其表达与HER-2表达呈负相关。miR-134的阳性率随E-cadherin表达下调及N-cadherin、vimentin表达上调而降低;E-cadherin在乳腺癌中表达下调以及N-cadherin、vimentin在乳腺癌中表达上调均与组织学分级升高、淋巴结转移和HER-2阳性以及ER、PR阴性有关。结论 miR-134在乳腺癌组织中的表达随肿瘤恶性程度的升高而下调,并与EMT关系密切,是乳腺癌的潜在生物学标志物。

    作者:黄雅菁;吴正升;王弦;吴强 刊期: 2015年第06期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会