学术投稿

免疫组化技术在实验动物组织中的应用体会

范尔钟;李颖;刘仲燕

关键词:免疫组化技术, 实验动物, 动物组织, 疾病造模, 免疫组化实验, 研究领域, 科研人员, 健康服务, 规律性, 防治措施, 动物模型, 应用, 医学, 模拟, 鉴定, 检测
摘要:医学研究领域中常应用实验动物建立具有人类疾病模拟表现的疾病动物模型,这是人类认识自身疾病发生、发展规律和研究防治措施的重要途径.当科研人员利用实验动物完成疾病造模后,往往采用免疫组化技术对动物组织进行鉴定,以检测疾病造模效果,并从中总结出规律性的东西为人类健康服务.但是在以往实验动物组织的免疫组化实验中存在一些问题,下面就相关问题谈点我们的思考和体会.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 上皮样血管内皮瘤伴血管内生长和砂粒体1例及文献复习

    上皮样血管内皮瘤(epithelioid haemangioendothelioma,EHE)是一种具有转移潜能的、生物学行为介于血管瘤和高级别血管肉瘤中间的血管肿瘤,由短索或巢状排列的上皮样内皮细胞及独特的黏液透明基质组成[1],临床很少见,常见于深浅部软组织、肺、肝脏及皮肤.笔者报道近期遇到的1例形态独特迄今尚未描述的软组织EHE,进行组织学和免疫组化研究,结合文献讨论其临床病理特点.

    作者:姜惠峰;黄晓红;薛忠伟;黄守白 刊期: 2005年第01期

  • 1747例宫颈阴道病变筛查结果分析

    目的探讨膜式液基薄层细胞学检测(ThinPrep cytology test,TCT)技术在宫颈病变筛查中的价值. 方法对1 747例门诊及住院患者行TCT检测.细胞学检查阳性者行阴道镜检查及多点活检,并行病理组织学检查. 结果 1 747例中51例不满意,不满意率2.92%,剩余1 696例中1 455例(85.79%)在正常范围内;139例(8.20%)为良性反应性改变;101例属非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells,ASC)及其以上病变,检出率5.96%,其中ASC 52例(3.07%),鳞状上皮内病变(squamous intraepithelial lesion,SIL)及鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)共40例(2.36%),二者之比为1.30 ∶ 1;低度鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)33例(1.95%);高度鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)7例(0.41%);宫颈鳞状细胞癌(SCC)4例(0.24%).不典型腺细胞(atypical glandular cells,AGC)4例(0.24%),腺癌(Adenocarcinoma1)4例(0.06%).在微生物检测中,霉菌52例,检出率3.07%,滴虫4例,检出率0.24%.与病理组织学对照,细胞学检出15例中的LSIL 11例;检出7例HSIL中的6例;检出了全部4例鳞状细胞癌;组织学证实的1例腺癌被检出. 结论 TCT技术制作的薄片,细胞结构清晰,背景清朗,可明显提高标本的满意率;且具有较高的阳性检出率,与组织学对照的诊断符合率亦较高,是临床宫颈病变筛查的好方法.

    作者:梅平;刘艳辉;庄恒国;曾仁海;张威;陈国艳;钱德英 刊期: 2005年第01期

  • 肝原发性淋巴瘤抑制基因杂合性缺失分析

    目的探讨肿瘤抑制基因杂合性缺失(LOH)在肝原发性淋巴瘤(PHL)发生中的作用.方法采用显微组织切割术从石蜡组织切片中提取DNA,在PCR基础上进行毛细管电泳DNA测序,对9例手术切除的PHL标本进行了视网膜母细胞瘤1基因(Rb1)、腺瘤性息肉病基因(APC)、结直肠癌突变基因(MCC)、结直肠癌缺失基因(DCC)等4种肿瘤抑制基因(TSGs)LOH检测.结果 B细胞系PHL中APC基因LOH发生率为50.0%,其余3种基因未检测到LOH,T细胞系PHL中LOH发生率为APC(33.3%)、Rb1(50.0%)、DCC(20.0%)、MCC(0.0). 结论 PHL中有较高频的APC和Rb1基因LOH,提示在PHL的形成过程中APC和Rb1基因的变异起重要作用.

    作者:潘晶;丛文铭 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺导管内增生性病变及浸润性癌中树突状细胞的检测

    目的检测乳腺导管内增生性病变和微小浸润性癌及浸润性导管癌中树突状细胞(dendritic cells,DC)和T细胞的分布状况和浸润密度,探讨乳腺癌发生、发展中机体免疫状态的变化规律.方法应用免疫组化S-P法和两步法对16例正常副乳腺、58例导管内增生性病变、4例微浸润导管癌及67例浸润性导管癌乳腺标本进行S-100蛋白+DC、HLA-DR+DC、CD1a+DC(DC三参数)及CD45RO+T细胞的浸润密度检测.结果浸润癌中DC三参数浸润密度均高于其它病变组织(P<0.05).导管原位癌、微浸润癌及浸润癌组织中CD45RO+T细胞浸润密度均高于其它病变组织(P<0.05).DC三参数间及其与CD45RO+T细胞间均呈正相关(P<0.001).结论 DC浸润密度随增生性病变加重而逐渐增高,发展为浸润癌时则明显增高.

    作者:谷彦军;马鸿达;古强;王健 刊期: 2005年第01期

  • 软组织良性上皮样外周神经鞘膜肿瘤

    作者: 刊期: 2005年第01期

  • ALK阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤

    目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤的组织病理形态和免疫组化表达的意义.方法参照WHO 2001年恶性淋巴瘤分类,对222例弥漫性大B细胞淋巴瘤进行形态学观察和免疫组化Polymer两步法标记.结果 6例弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫组化ALK阳性表达,阳性反应物质定位于细胞质内,成粗大的颗粒状,1例合并CD30阳性表达,全部表达B系列抗原CD20、CD79α和CD138,4例不表达CD45.组织病理形态:3例为浆母细胞性,2例为免疫母细胞性伴浆细胞样分化,1例为间变性. 结论 ALK阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤是组织形态和免疫表型独特的变异类型,与CLTC-ALK基因易位和NPM-ALK融合基因易位有关,其分子遗传学的异质性不同于以往的认识.

    作者:张彤;侯宁;曲渊;莫伏根 刊期: 2005年第01期

  • 肺癌p73蛋白表达及其临床病理学意义

    p73 基因与p53 基因同抑癌基因家族,p73 蛋白在结构和功能上具有与p53蛋白高度相似性,都具有抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡的功能,但两者又存在明显差异.文献报道,p73 蛋白在一些癌细胞中呈高水平表达,与多种人类肿瘤的发生、发展密切相关[1].

    作者:田辉;王善政;彭书华 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺大汗腺癌的形态学与免疫表型特征

    目的观察乳腺大汗腺癌(apocrine carcinoma,AC)的形态学和免疫表型特征,并探讨其诊断标准.方法对HE染色片中显示有大汗腺细胞学特点的30例乳腺癌标本进行组织学观察和免疫组化S-P法检测,并选取5例大汗腺化生(apocrine metaplasia,AM)及2例大汗腺腺病(apocrine adenosis,AA)和AA伴导管原位癌(DCIS)1例标本作对照组.使用的一抗包括GCDFP-15、Mucin-1、AR、ER、c-erbB-2、Ki-67.结果① 8例被确定为AC,均为高核级,其中大汗腺导管原位癌(ADCIS)1例、ADCIS伴浸润性大汗腺癌(IAC)5例,IAC伴导管原位癌(DCIS)2例.镜下AC细胞的共同特征为:细胞大,胞界清,胞质丰富,深嗜伊红染,颗粒状;核大、圆,核仁常大而突出.依据胞质形态可分为:A型,胞质深伊红染,有数量不等的清晰颗粒;B型,胞质内大量细空虚的小泡,可聚呈泡沫状,类似组织细胞或皮脂腺细胞;C型,胞质浅染、均质,如细磨砂玻璃样;② 8例AC与5例AM及2例AA均共同表达GCDFP-15、AR、Mucin-1及Ki-67;除1例外,ER均不表达;③ AC的GCDFP-15的表达与大汗腺化生不同:前者呈胞质内弥漫颗粒或空泡状,表达有异质性;后者阳性颗粒聚成小球状团簇,位于细胞质的核上区.④ AR平均阳性细胞数在AC及AM分别为33.4%及93.8%;Ki-67平均阳性细胞数在AC及AM分别为52.4%及40%.结论 AC的诊断须具备3项标准:① HE细胞形态成分90%以上符合AC型细胞;② GCDFP-15阳性,阳性细胞数占癌细胞总数50%以上;③AR阳性,阳性细胞数大于癌细胞总数20%.

    作者:邵牧民;孟刚;龚西騟 刊期: 2005年第01期

  • 青春期前外阴纤维瘤

    作者: 刊期: 2005年第01期

  • 小细胞型间变性大细胞淋巴瘤2例临床病理分析

    间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)是一种独立类型的非霍奇金淋巴瘤,该瘤以高度异型并呈未分化形态的大细胞为特征,几乎所有病例都显示Ki-1(CD30)抗原阳性,有t(2;5)(p23;q35)细胞遗传学改变.在新的WHO分类中,ALCL被归类于外周T细胞淋巴瘤,组织学上可分为普通型、淋巴组织细胞变型、小细胞变型及其他组织学类型等.小细胞型ALCL以小的不规则的淋巴细胞样瘤细胞为主,瘤细胞呈CD30及ALK阳性,好发于年轻人,常累及皮肤和淋巴结[1].因为此型比较少见,临床及病理医师往往认识不足,易被误诊.笔者在外检工作中遇见2例,现结合文献对其形态学和免疫表型特征探讨如下.

    作者:耿舰;朱梅刚;丁彦青;兰海梅;韩慧霞 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺腺样囊性癌临床病理特点及文献复习

    目的探讨乳腺腺样囊性癌的临床病理特点及鉴别诊断要点.方法观察4例乳腺腺样囊性癌的临床病理和免疫组化特点,并复习相关文献.结果 4例乳腺腺样囊性癌大体上均表现为界限清楚的肿块.该肿瘤在结构上可以分为筛孔型、管状-小梁状型和实体型三种类型,并需与一系列乳腺良恶性病变相鉴别,如胶原小球病、筛状癌、小细胞癌等.结论乳腺腺样囊性癌是一种少见肿瘤,具有其独特的组织病理学特点,预后较好.

    作者:杨文涛;张廷璆;沈铭昌;袁亚 刊期: 2005年第01期

  • 人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤中mts1和nm23-H1表达及其与肺癌淋巴结转移关系

    目的探讨肿瘤转移相关基因mts1和nm23-H1在人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤中的表达及其与肺癌淋巴结转移的关系.方法用高转移的人巨细胞肺癌瘤株PLA-801-D和低转移的人巨细胞肺癌瘤株PLA-801-C在裸鼠中建立转移模型,观察瘤细胞在裸鼠淋巴结及肺中的转移情况;原位杂交检测mts1和nm23-H1 mRNA在移植瘤中的表达.结果 PLA-801-D在12只移植裸鼠中均有淋巴结转移,转移率100%,2只裸鼠中有肺转移,转移率17%;PLA-801-C在12只移植的裸鼠中均无淋巴结及肺转移.mts1 mRNA在PLA-801-D、PLA-801-C裸鼠移植瘤中阳性表达分别为12例、2例;nm23-H1 mRNA在PLA-801-D、PLA-801-C裸鼠移植瘤中阳性表达分别为12例、11例.结论 mts1 mRNA表达与人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤淋巴结转移呈正相关,nm23-H1 mRNA表达与人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤淋巴结转移不相关.

    作者:许建平;谢青;张哉根;叶明福;陈意生;高广正;罗刚 刊期: 2005年第01期

  • Fhit、p53表达与子宫内膜癌发生和发展的相关性

    目的探讨正常子宫内膜、子宫内膜增殖症及内膜癌组织中Fhit、p53蛋白表达,以及与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法应用免疫组化S-P法检测37例正常子宫内膜组织、27例单纯型增生过长、28例复杂型增生过长、38例子宫内膜癌组织中Fhit、p53蛋白的表达.结果在正常子宫内膜(增生期、分泌期)、子宫内膜增殖症(单纯型增生过长、复杂型增生过长、不典型增生)、子宫内膜腺癌组织中Fhit蛋白的阳性表达率依次递增,差异有显著性(χ2 =33.726,P<0.005).p53蛋白的阳性表达率也依次递增,差异有显著性(χ2=58.474,P<0.005).在腺瘤型增生过长、不典型增生及子宫内膜腺癌组织中Fhit(χ2=6.571,P=0.037)、p53(χ2=6.915,P=0.032)蛋白的阳性表达率依次递增,差异有显著性.Fisher精确概率检验显示不同肌层浸润组Fhit(P=0.033)、p53(P=0.034)蛋白的表达差异有统计学意义,而在年龄、是否绝经、手术病理分期、组织学分级组的表达无统计学意义(P>0.05).Spearman等级相关分析显示Fhit、p53蛋白表达呈正相关 (r =0.900,P<0.05).在月经期内膜的腺上皮细胞胞质中的Fhit蛋白阳性表达率为72.72%.结论 Fhit、p53蛋白的表达与子宫内膜癌的发生相关.Fhit基因可能成为子宫内膜组织早期癌变的分子标记物.

    作者:秦天生;杨凤云;杨毓琴 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺伴梭形细胞化生腺癌2例及文献复习

    目的探讨乳腺伴梭形细胞化生腺癌的临床病理特点及鉴别诊断要点.方法复习2例乳腺伴梭形细胞化生腺癌的临床资料,并行免疫组化标记.结果组织学特点:癌组织由梭形细胞构成,细胞异型不明显,核分裂象不多,呈片巢状、条索状、编织状排列,梭形细胞内可见腺癌的管状成分.免疫组化染色显示:癌细胞呈上皮性免疫表型,CK(pan)、EMA阳性,ER、PR、c-erbB-2常阴性,不表达S-100蛋白、desmin和vimentin.结论乳腺伴梭形细胞分化的腺癌是上皮性特殊性乳腺癌中乳腺化生性癌的1种,其诊断主要依靠组织病理学及免疫组化标记.

    作者:卢洪胜;郑晓刚;孟奎;吴波;石群立 刊期: 2005年第01期

  • 酵母多糖致伤MODS模型小鼠的胸腺树突状细胞病理观察

    目的研究树突状细胞在MODS免疫器官损伤中的病变特点.方法运用光镜、电镜与免疫组化(CD1a、CD205及MIDC-8标记)方法,观察小鼠MODS模型中胸腺树突状细胞的变化特点.结果致伤早期胸腺树突状细胞大量增生、机能活跃伴淋巴细胞大量凋亡;在缓解期(3~7天)胸腺及树突状细胞恢复正常;MODS期(8~12天)树突状细胞数量再次增加,但功能减弱.同时伴有较多树突状细胞和淋巴细胞变性凋亡.结论树突状细胞病变是MODS免疫系统损伤的首发病变,树突状细胞的数量与机能变化与MODS模型病程具有高度平行,提示树突状细胞病变与MODS启动机制和病程转归有重要关系.

    作者:孙宇;陆江阳;王晓虹;杨毅;李玲 刊期: 2005年第01期

  • IgH、TCR-γ基因重排与免疫组化诊断非霍奇金淋巴瘤的价值

    目的探讨基因重排与免疫组化在诊断非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)中的价值.方法对131例NHL的石蜡包埋组织进行免疫组化和基因重排检测.结果 60例B细胞NHL中51例IgH基因重排检测为阳性,阳性率85%;50例T细胞NHL中38例TCR-γ基因重排检测为阳性,阳性率76%;HE形态学和免疫组化分型诊断率为84%(110例),加用IgH和TCR-γ基因重排,分型诊断率达94.6%(124例),两分型诊断率差异有显著性(P<0.05).6例巨大淋巴结增生和3例血管免疫母细胞性淋巴结病IgH和TCR-γ基因重排检测均为阴性.基因重排与形态学和免疫组化结果不相符的病例有7例.结论联合运用免疫组化和基因重排技术,可提高NHL的分型诊断率.

    作者:杨倩;薛玲;林汉良;周慕珩 刊期: 2005年第01期

  • 5-脱氧杂氮胞苷对HepG2肝癌细胞恶性表型及caspase-3和bcl-2表达的影响

    目的观察5-脱氧杂氮胞苷(5-aza-CdR)对HepG2细胞株生长抑制和凋亡的影响.方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;通过Giemsa染色观察细胞贴壁克隆形成率;用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学方法检测caspase-3和bcl-2蛋白的表达变化.结果 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞株生长,并呈剂量依赖性,第4天时的抑制率大,可达60.2%,细胞贴壁克隆形成率从36.3%下将至17.3%;流式细胞术结果表明8 μmol/L 5-aza-CdR作用第4天凋亡率为10.26%,与对照相比差异有统计学意义;caspase-3蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白表达则明显下调.结论 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞增殖并能促进凋亡,其机制可能是通过恢复某些抑癌基因表达,上调caspase-3蛋白并下调bcl-2蛋白表达.

    作者:张翠娟;周庚寅;喻芳;李丽;林晓燕;马超 刊期: 2005年第01期

  • 胃肠MALT淋巴瘤中bcl-10 mRNA和蛋白的表达

    目的探讨bcl-10基因在胃肠黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤中的表达情况及意义.方法采用免疫组化S-P法及原位杂交技术检测40例胃肠MALT淋巴瘤和14例正常淋巴结中bcl-10基因的表达.结果 40例MALT淋巴瘤中有36例(90.0%)表达bcl-10蛋白,其中21例仅在胞质表达,15例在胞质胞核同时表达; 39例(97.5%)表达bcl-10 mRNA.bcl-10蛋白与mRNA表达之间差异无统计学意义(P>0.05).MALT淋巴瘤临床分期与bcl-10蛋白核表达明显相关(P<0.01).14例淋巴结中,8例(57.1%)表达bcl-10蛋白.淋巴滤泡内生发中心B细胞呈高度表达,边缘区B细胞中等强度表达,套区细胞微弱表达.结论 bcl-10的高度表达在MALT淋巴瘤发生发展可能起着重要作用.bcl-10蛋白核表达与进展期MALT淋巴瘤相关.bcl-10蛋白在淋巴滤泡各区域的表达差异提示它对B细胞分化成熟有着重要意义.

    作者:王海;范钦和;李百周;彭韬 刊期: 2005年第01期

  • 伴巨菊形团的玻璃样变梭形细胞肿瘤

    伴巨菊形团的玻璃样变梭形细胞肿瘤(hyalinizing spindle cell tumor with giant rosettes,HSCTGR)由Lane等[1]于1997年首先报道,是一种主要由梭形纤维母细胞样细胞组成的肿瘤,并认为是低度恶性纤维黏液样肉瘤(low-grade fibromyxoid sarcoma,LGFMS)的一种少见变异,截至2003年英文文献有近60例报道[1~17],但多数为个案或短篇,目前国内尚未见报道.HSCTGR中常含有低度恶性纤维黏液样肉瘤区域,40%的低度恶性纤维黏液样肉瘤中有巨菊形团结构[4],2002年WHO软组织肿瘤分类已将其定为低度恶性纤维黏液样肉瘤的一个亚型--巨胶原的菊形团型[19].

    作者:张仁亚 刊期: 2005年第01期

  • 两肺弥漫结节性子宫内膜异位症 1例

    患者女性,48岁.因轻微咳嗽、咳痰、偶伴痰血3个月,CT示两肺散在大小不等结节入院.2年前曾于外院作全子宫和右输卵管峡部及阔韧带结节切除术.病理诊断: 子宫肌腺病,右输卵管峡部、阔韧带子宫内膜异位结节.否认结核病史.查阅原始病例档案,2年前住院手术时常规体检未发现肺部病变.本次纤支镜检查未见异常;胸片示两肺弥漫性结节,以右肺中、上叶,左肺上叶明显.拟诊转移性肿瘤,于2001年2月14日剖胸探查取右肺中叶表面绿豆大结节2枚活检.1年后复查胸片、CT见两肺结节较前明显增多、增大(图1)再次入院.患者无痰血、发热、胸痛等症状.查体见胸腔略塌陷,呼吸运动减弱,触觉震颤略强,余无明显阳性体征;再次开胸探查以明确诊断.术中见左肺上叶表面多个直径0.4~1.5 cm结节,取6枚结节活检.

    作者:黄伟良;蒋智铭;陆惠娟;焦琼 刊期: 2005年第01期

临床与实验病理学杂志

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主管:

主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会