学术投稿

免疫组化技术在实验动物组织中的应用体会

范尔钟;李颖;刘仲燕

关键词:免疫组化技术, 实验动物, 动物组织, 疾病造模, 免疫组化实验, 研究领域, 科研人员, 健康服务, 规律性, 防治措施, 动物模型, 应用, 医学, 模拟, 鉴定, 检测
摘要:医学研究领域中常应用实验动物建立具有人类疾病模拟表现的疾病动物模型,这是人类认识自身疾病发生、发展规律和研究防治措施的重要途径.当科研人员利用实验动物完成疾病造模后,往往采用免疫组化技术对动物组织进行鉴定,以检测疾病造模效果,并从中总结出规律性的东西为人类健康服务.但是在以往实验动物组织的免疫组化实验中存在一些问题,下面就相关问题谈点我们的思考和体会.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 乳腺活检中热点问题的新认识(一)

    乳腺活检中热点问题多半也是诊断中的难点.经过近10多年的探讨,对其中一些问题逐渐形成以下共识或相近的观点.

    作者:龚西騟 刊期: 2005年第01期

  • 弥漫性淀粉样变1例

    淀粉样变病被认为是一种代谢性疾病,其发病机制不清.近年来一些国外学者提出淀粉样变病的发病与患者机体的免疫异常有关[1],但目前尚无明确结论.淀粉样变是一种少见疾病,东营市人民医院于2003年3月收治1例,现介绍如下.

    作者:孙希印;高虹 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺腺样囊性癌临床病理特点及文献复习

    目的探讨乳腺腺样囊性癌的临床病理特点及鉴别诊断要点.方法观察4例乳腺腺样囊性癌的临床病理和免疫组化特点,并复习相关文献.结果 4例乳腺腺样囊性癌大体上均表现为界限清楚的肿块.该肿瘤在结构上可以分为筛孔型、管状-小梁状型和实体型三种类型,并需与一系列乳腺良恶性病变相鉴别,如胶原小球病、筛状癌、小细胞癌等.结论乳腺腺样囊性癌是一种少见肿瘤,具有其独特的组织病理学特点,预后较好.

    作者:杨文涛;张廷璆;沈铭昌;袁亚 刊期: 2005年第01期

  • 小细胞型间变性大细胞淋巴瘤2例临床病理分析

    间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)是一种独立类型的非霍奇金淋巴瘤,该瘤以高度异型并呈未分化形态的大细胞为特征,几乎所有病例都显示Ki-1(CD30)抗原阳性,有t(2;5)(p23;q35)细胞遗传学改变.在新的WHO分类中,ALCL被归类于外周T细胞淋巴瘤,组织学上可分为普通型、淋巴组织细胞变型、小细胞变型及其他组织学类型等.小细胞型ALCL以小的不规则的淋巴细胞样瘤细胞为主,瘤细胞呈CD30及ALK阳性,好发于年轻人,常累及皮肤和淋巴结[1].因为此型比较少见,临床及病理医师往往认识不足,易被误诊.笔者在外检工作中遇见2例,现结合文献对其形态学和免疫表型特征探讨如下.

    作者:耿舰;朱梅刚;丁彦青;兰海梅;韩慧霞 刊期: 2005年第01期

  • Fhit、p53表达与子宫内膜癌发生和发展的相关性

    目的探讨正常子宫内膜、子宫内膜增殖症及内膜癌组织中Fhit、p53蛋白表达,以及与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法应用免疫组化S-P法检测37例正常子宫内膜组织、27例单纯型增生过长、28例复杂型增生过长、38例子宫内膜癌组织中Fhit、p53蛋白的表达.结果在正常子宫内膜(增生期、分泌期)、子宫内膜增殖症(单纯型增生过长、复杂型增生过长、不典型增生)、子宫内膜腺癌组织中Fhit蛋白的阳性表达率依次递增,差异有显著性(χ2 =33.726,P<0.005).p53蛋白的阳性表达率也依次递增,差异有显著性(χ2=58.474,P<0.005).在腺瘤型增生过长、不典型增生及子宫内膜腺癌组织中Fhit(χ2=6.571,P=0.037)、p53(χ2=6.915,P=0.032)蛋白的阳性表达率依次递增,差异有显著性.Fisher精确概率检验显示不同肌层浸润组Fhit(P=0.033)、p53(P=0.034)蛋白的表达差异有统计学意义,而在年龄、是否绝经、手术病理分期、组织学分级组的表达无统计学意义(P>0.05).Spearman等级相关分析显示Fhit、p53蛋白表达呈正相关 (r =0.900,P<0.05).在月经期内膜的腺上皮细胞胞质中的Fhit蛋白阳性表达率为72.72%.结论 Fhit、p53蛋白的表达与子宫内膜癌的发生相关.Fhit基因可能成为子宫内膜组织早期癌变的分子标记物.

    作者:秦天生;杨凤云;杨毓琴 刊期: 2005年第01期

  • TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及Thy-1肾炎中表达的影响

    目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)对醛糖还原酶(AR)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy-1肾小球肾炎模型(ATG)中表达的影响. 方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测TGF-β1刺激后体外培养大鼠系膜细胞AR的表达以及TGF-β1和AR在ATG中的表达;应用免疫组化检测ATG中TGF-β1、AR的表达,并对染色强度进行图像分析. 结果外源性TGF-β1作用后,大鼠系膜细胞中AR表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性.ATG中,随着病程的延长,TGF-β1、AR表达升高,对免疫组化结果进行图像分析显示,二者表达之间具有相关性(r=0.65,P<0.05). 结论 TGF-β1可以上调其相关反应性基因AR的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程.

    作者:蒋涛;杨静;李慧;赵仲华;张秀荣;张农 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺导管内增生性病变及浸润性癌中树突状细胞的检测

    目的检测乳腺导管内增生性病变和微小浸润性癌及浸润性导管癌中树突状细胞(dendritic cells,DC)和T细胞的分布状况和浸润密度,探讨乳腺癌发生、发展中机体免疫状态的变化规律.方法应用免疫组化S-P法和两步法对16例正常副乳腺、58例导管内增生性病变、4例微浸润导管癌及67例浸润性导管癌乳腺标本进行S-100蛋白+DC、HLA-DR+DC、CD1a+DC(DC三参数)及CD45RO+T细胞的浸润密度检测.结果浸润癌中DC三参数浸润密度均高于其它病变组织(P<0.05).导管原位癌、微浸润癌及浸润癌组织中CD45RO+T细胞浸润密度均高于其它病变组织(P<0.05).DC三参数间及其与CD45RO+T细胞间均呈正相关(P<0.001).结论 DC浸润密度随增生性病变加重而逐渐增高,发展为浸润癌时则明显增高.

    作者:谷彦军;马鸿达;古强;王健 刊期: 2005年第01期

  • 上皮样血管内皮瘤伴血管内生长和砂粒体1例及文献复习

    上皮样血管内皮瘤(epithelioid haemangioendothelioma,EHE)是一种具有转移潜能的、生物学行为介于血管瘤和高级别血管肉瘤中间的血管肿瘤,由短索或巢状排列的上皮样内皮细胞及独特的黏液透明基质组成[1],临床很少见,常见于深浅部软组织、肺、肝脏及皮肤.笔者报道近期遇到的1例形态独特迄今尚未描述的软组织EHE,进行组织学和免疫组化研究,结合文献讨论其临床病理特点.

    作者:姜惠峰;黄晓红;薛忠伟;黄守白 刊期: 2005年第01期

  • 伴巨菊形团的玻璃样变梭形细胞肿瘤

    伴巨菊形团的玻璃样变梭形细胞肿瘤(hyalinizing spindle cell tumor with giant rosettes,HSCTGR)由Lane等[1]于1997年首先报道,是一种主要由梭形纤维母细胞样细胞组成的肿瘤,并认为是低度恶性纤维黏液样肉瘤(low-grade fibromyxoid sarcoma,LGFMS)的一种少见变异,截至2003年英文文献有近60例报道[1~17],但多数为个案或短篇,目前国内尚未见报道.HSCTGR中常含有低度恶性纤维黏液样肉瘤区域,40%的低度恶性纤维黏液样肉瘤中有巨菊形团结构[4],2002年WHO软组织肿瘤分类已将其定为低度恶性纤维黏液样肉瘤的一个亚型--巨胶原的菊形团型[19].

    作者:张仁亚 刊期: 2005年第01期

  • 1747例宫颈阴道病变筛查结果分析

    目的探讨膜式液基薄层细胞学检测(ThinPrep cytology test,TCT)技术在宫颈病变筛查中的价值. 方法对1 747例门诊及住院患者行TCT检测.细胞学检查阳性者行阴道镜检查及多点活检,并行病理组织学检查. 结果 1 747例中51例不满意,不满意率2.92%,剩余1 696例中1 455例(85.79%)在正常范围内;139例(8.20%)为良性反应性改变;101例属非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells,ASC)及其以上病变,检出率5.96%,其中ASC 52例(3.07%),鳞状上皮内病变(squamous intraepithelial lesion,SIL)及鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)共40例(2.36%),二者之比为1.30 ∶ 1;低度鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)33例(1.95%);高度鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)7例(0.41%);宫颈鳞状细胞癌(SCC)4例(0.24%).不典型腺细胞(atypical glandular cells,AGC)4例(0.24%),腺癌(Adenocarcinoma1)4例(0.06%).在微生物检测中,霉菌52例,检出率3.07%,滴虫4例,检出率0.24%.与病理组织学对照,细胞学检出15例中的LSIL 11例;检出7例HSIL中的6例;检出了全部4例鳞状细胞癌;组织学证实的1例腺癌被检出. 结论 TCT技术制作的薄片,细胞结构清晰,背景清朗,可明显提高标本的满意率;且具有较高的阳性检出率,与组织学对照的诊断符合率亦较高,是临床宫颈病变筛查的好方法.

    作者:梅平;刘艳辉;庄恒国;曾仁海;张威;陈国艳;钱德英 刊期: 2005年第01期

  • 组织细胞性坏死性淋巴结炎继发白血病、淋巴瘤2例

    组织细胞性坏死性淋巴结炎(histiocytic necrotizing lymphadenitis,HNL)首先由日本Kikuchi与Fujimoto于1972年报道,故又称Kikuchi-Fujimoto病或Kikuchi淋巴结炎.亚洲地区高发,但西方国家也有报道,其具有特殊的临床表现和病理改变,在病理组织学方面可分为增生型、坏死型和黄色瘤样型[1].笔者报道1例HNL继发急性淋巴母细胞白血病,1例HNL继发T细胞淋巴瘤的临床病理资料,结合文献讨论二者的关系,为进一步研究提供线索.

    作者:朱梅刚;邓燕艺 刊期: 2005年第01期

  • 低度恶性子宫内膜间质肉瘤临床病理分析

    目的探讨低度恶性子宫内膜间质肉瘤(LESS)的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断. 方法分析17例LESS的临床病理特点,通过网织纤维染色、免疫组化染色和电镜观察来研究其病理学特征. 结果 LESS临床上主要表现为阴道不规则流血.HE染色见肿瘤组织成巢团样浸润,肿瘤细胞圆形、卵圆形或梭形.肿瘤内有大量的小血管.网织纤维染色见网状纤维丰富,围绕瘤细胞生长.肿瘤细胞14例CD10阳性,12例ER阳性,13例PR阳性,3例actin阳性,CD34、CD117、Melan-A肿瘤细胞均阴性.电镜观察见肿瘤细胞胞质内的中间丝呈杂乱无序的排列. 结论 LESS易误诊,确诊主要依靠组织病理学和免疫组织化学;病理形态上看似良好的低度恶性子宫内膜间质肉瘤,预后不一定好.

    作者:李静;韦立新 刊期: 2005年第01期

  • 子宫肌瘤雌激素受体亚型mRNA的表达

    目的探讨雌激素受体亚型的表达与子宫平滑肌瘤发生、发展的关系.方法将60例子宫肌瘤患者分为AB两组,A组32例<48岁,B组28例>48岁,应用原位杂交技术测定平滑肌瘤组织中雌激素两种受体亚型mRNA的表达,取肿瘤周围正常的平滑肌作对照.结果子宫肌瘤组织中ERα mRNA的表达明显高于正常的平滑肌组织,而ERβ mRNA的表达降低;B组ERα mRNA在子宫平滑肌瘤组织中的表达较A组呈下降趋势,而ERβ mRNA的表达呈上升趋势.结论子宫肌瘤的发生发展与ERα mRNA的高表达有关,亦与ERβ mRNA表达减少有关.肌瘤的萎缩可能与ERβ mRNA表达的升高趋势及ERα mRNA表达的下降趋势均相关.

    作者:张桂香;赵学东;郑纪宁;王文勇;梅立新;许倩;张金环;孙春荣 刊期: 2005年第01期

  • 肺癌p73蛋白表达及其临床病理学意义

    p73 基因与p53 基因同抑癌基因家族,p73 蛋白在结构和功能上具有与p53蛋白高度相似性,都具有抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡的功能,但两者又存在明显差异.文献报道,p73 蛋白在一些癌细胞中呈高水平表达,与多种人类肿瘤的发生、发展密切相关[1].

    作者:田辉;王善政;彭书华 刊期: 2005年第01期

  • 乳腺黏液腺癌的细针吸取细胞学诊断价值及标准

    目的探讨细针吸取细胞学(FNAC)在诊断乳腺黏液腺癌中的价值及标准.方法对14例乳腺黏液腺癌FNAC涂片的基本形态学要素进行回顾性比较研究,并对细胞学诊断为Ⅰ~Ⅲ级的病例进行原因分析. 结果乳腺黏液腺癌核级主为1~2级,属轻~中度异型性,诊断敏感性为71.4%,假阴性率为28.6%.14例均出现多少不等的黏液,12例出现三维结构为主以及弥散为主的细胞排列方式,11例出现中度异型的游离肿瘤细胞.乳腺纯黏液腺癌组4例出现砂粒体.结论只要掌握乳腺黏液腺癌FNAC涂片基本形态特征,FNAC诊断乳腺黏液腺癌是可行的.

    作者:何长青;李进;宋容 刊期: 2005年第01期

  • 卵巢癌中k-ras 基因点突变及p53蛋白表达

    目的探讨k-ras 基因点突变和p53蛋白表达在卵巢癌发生中的作用及致癌机制. 方法采用显微切割技术、半巢式PCR-RFLP技术和免疫组化染色检测55例卵巢癌及其交界性病变中的k-ras基因点突变和p53蛋白表达. 结果 k-ras基因点突变率在黏液性腺癌(61.9%)明显高于浆液性腺癌(14.2%),在黏液性交界性腺瘤(61.5%)明显高于浆液性交界性腺瘤(12.5%).p53蛋白表达率在浆液性腺癌(80%)明显高于黏液性腺癌(52%),并随组织学分级而增高.结论黏液性腺癌主要通过腺瘤-交界性腺瘤-腺癌途径致癌,k-ras基因点突变是黏液性腺癌的早期事件,黏液性交界性腺瘤是黏液性腺癌的癌前病变.浆液性腺癌主要通过生发上皮直接恶性转化形成,p53蛋白表达在浆液性腺癌的发生中起重要作用,是浆液性腺癌的晚期事件.

    作者:潘晓琳;高志斌;陆天才;李洪安;郑兴征 刊期: 2005年第01期

  • 网状纤维染色在显示胃肠道间质瘤中的应用

    网状纤维染色是常用的特殊染色之一[1].网状纤维为细胞外间质成分,存在于人体各组织器官中,通过网状纤维染色观察网状纤维在肿瘤组织中的形态变化是鉴别诊断中重要参考依据.笔者在对来源于胃肠道以梭形细胞为主的间叶源性肿瘤且组织学形态相似的平滑肌瘤、神经鞘瘤和梭形细胞型间质瘤,辅以网状纤维染色,目的在于区分肿瘤的组织来源.

    作者:胥维勇;杨群;范小莉 刊期: 2005年第01期

  • 肝原发性淋巴瘤抑制基因杂合性缺失分析

    目的探讨肿瘤抑制基因杂合性缺失(LOH)在肝原发性淋巴瘤(PHL)发生中的作用.方法采用显微组织切割术从石蜡组织切片中提取DNA,在PCR基础上进行毛细管电泳DNA测序,对9例手术切除的PHL标本进行了视网膜母细胞瘤1基因(Rb1)、腺瘤性息肉病基因(APC)、结直肠癌突变基因(MCC)、结直肠癌缺失基因(DCC)等4种肿瘤抑制基因(TSGs)LOH检测.结果 B细胞系PHL中APC基因LOH发生率为50.0%,其余3种基因未检测到LOH,T细胞系PHL中LOH发生率为APC(33.3%)、Rb1(50.0%)、DCC(20.0%)、MCC(0.0). 结论 PHL中有较高频的APC和Rb1基因LOH,提示在PHL的形成过程中APC和Rb1基因的变异起重要作用.

    作者:潘晶;丛文铭 刊期: 2005年第01期

  • IgH、TCR-γ基因重排与免疫组化诊断非霍奇金淋巴瘤的价值

    目的探讨基因重排与免疫组化在诊断非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)中的价值.方法对131例NHL的石蜡包埋组织进行免疫组化和基因重排检测.结果 60例B细胞NHL中51例IgH基因重排检测为阳性,阳性率85%;50例T细胞NHL中38例TCR-γ基因重排检测为阳性,阳性率76%;HE形态学和免疫组化分型诊断率为84%(110例),加用IgH和TCR-γ基因重排,分型诊断率达94.6%(124例),两分型诊断率差异有显著性(P<0.05).6例巨大淋巴结增生和3例血管免疫母细胞性淋巴结病IgH和TCR-γ基因重排检测均为阴性.基因重排与形态学和免疫组化结果不相符的病例有7例.结论联合运用免疫组化和基因重排技术,可提高NHL的分型诊断率.

    作者:杨倩;薛玲;林汉良;周慕珩 刊期: 2005年第01期

  • 免疫组化技术在实验动物组织中的应用体会

    医学研究领域中常应用实验动物建立具有人类疾病模拟表现的疾病动物模型,这是人类认识自身疾病发生、发展规律和研究防治措施的重要途径.当科研人员利用实验动物完成疾病造模后,往往采用免疫组化技术对动物组织进行鉴定,以检测疾病造模效果,并从中总结出规律性的东西为人类健康服务.但是在以往实验动物组织的免疫组化实验中存在一些问题,下面就相关问题谈点我们的思考和体会.

    作者:范尔钟;李颖;刘仲燕 刊期: 2005年第01期

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会