王志美；徐忠伟；王佳宝；代二庆；徐瑞成
目的 观察楸毒素(mallotoxin,MTX)对E-4031诱发豚鼠离体心脏和心肌细胞LQT2的作用.方法 采用Langendorff逆行主动脉灌流法对豚鼠离体心脏进行灌流,采集离体心脏表面Ⅱ导联心电图以考察低、中、高3个浓度MTX及其在应用hERG通道阻断剂E-4031条件下,对QT/QTc间期、跨室壁离散度、电生理平衡指数的影响;酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术分别在正常和hERG通道阻断剂E-4031存在条件下,记录低、中、高3个浓度的MTX对动作电位时程的影响.结果 MTX缩短豚鼠离体心脏QT间期,降低跨室壁离散度,减小电生理平衡指数.MTX可逆转E-4031诱发的QT间期延长、跨室壁离散度增加和电生理平衡指数增大.MTX缩短豚鼠心室肌细胞动作电位复极时程,降低APD9o、APD60、APD30,加速复极.MTX可逆转E-4031诱发的动作电位复极时程延长.结论 MTX缩短QT间期,降低复极跨室壁离散度,减小电生理平衡指数和缩短动作电位复极时程,具有抗E-4031所致LQT2的作用.
作者：潘莹莹；韩钰；杨帆；尹永强；康毅；娄建石 刊期： 2017年第11期
目的 研究上调miR-320a对注射用核糖核酸Ⅱ(BP素)诱导的肝癌Bel-7402细胞凋亡和迁移的影响.方法 用定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-320a在正常肝细胞与肝癌细胞中的表达差异;将miR-320a mimic转染到Bel-7402细胞中,qRT-PCR法检测miR-320a的表达水平;CCK-8法检测注射用核糖核酸Ⅱ对肝癌细胞增殖的影响;FCM检测细胞周期分布及凋亡变化;Transwell法检测注射用核糖核酸Ⅱ对肝癌细胞迁移和侵袭的影响;Western blot检测细胞周期蛋白D1的表达及凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2,迁移相关蛋白MMP-3的表达.结果 与正常肝细胞相比,miR-320a的表达水平在肝癌细胞中明显下调.转染miR-320a mimic的Bel-7402细胞命名为Bel-7402-miR-320a,CCK-8结果显示,给予注射用核糖核酸Ⅱ(l00、200、300、400、500 mg·L-1)后,Bel-7402及Bel-7402-miR-320a细胞的增殖均受到了抑制.在Bel-7402和BelG402-miR-320a中,12h半数抑制浓度为250、200 mg·L-1,24 h半数抑制浓度为150、120 mg·L-1.FCM检测结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可诱导Bel-7402、Bel-7402-miR-320a细胞周期阻滞在G0/G1期,上调miR-320a后细胞凋亡率明显增加.Transwell结果显示,与Control组和加药组相比,Bel-7402-miR-320a+ Ribonucleic acidⅡ组细胞迁移和侵袭明显受到抑制.Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ作用Bel-7402和Bel-7402-miR-320a细胞后,凋亡相关蛋白p53、Bax的表达增加,而Cyclin D1、Bcl-2、MMP-3蛋白的表达下调.结论 miR-320a在肝癌Bel-7402细胞中的表达水平明显低于正常肝细胞.注射用核糖核酸Ⅱ可以通过下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期,激活p53信号通路,下调Bcl-2、上调Bax,破坏Bcl-2/Bax的比例,促进入肝癌Bel-7402细胞的凋亡,并通过抑制MMP-3的表达抑制人肝癌细胞的迁移和侵袭.而过表达miR-320a后,可提高肝癌细胞对注射用核糖核酸Ⅱ的敏感性,增强注射用核糖核酸Ⅱ对肝癌细胞Bel-7402的作用.
作者：吕晓婷；郭珮；宋丹；熊伟；石雪萍；李海星；李静；冉建华 刊期： 2017年第11期
桥粒芯糖蛋白(desmoglein,DSG)是Ca2依赖型的黏附蛋白桥粒钙黏蛋白(desmosomal cadherins)的一种,它是构成桥粒的重要部分.DSG广泛存在于上皮、心肌等组织中,在细胞与细胞连接之间起到十分重要的作用.近年来,DSG被发现在皮肤、黏膜以及肿瘤等多种疾病中出现表达或功能异常.药物可以通过干预DSG的表达及功能变化发挥治疗疾病的作用.该文就DSG家族的几种亚型的分布及其在相关疾病中的作用与功能进行综述,以期为以DSG为靶点的药物研发提供一定线索.
作者：张译丹；尹清晟；耿诗涵；许梦习；庄朋伟；张艳军 刊期： 2017年第11期
AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)是调节生物能量恒定性的重要传感分子,能激活上游激酶LKB1、CaMKKβ和Takl等.AMP/ATP比值可调节AMPK的活性,从而控制能量代谢的分解与合成通路,骨骼肌收缩与心肌缺血时能够激活AMPK,调节脂肪细胞的代谢和血管功能,促进葡萄糖转运和脂肪酸氧化.排除动脉粥样硬化、高血压及其他潜在病因,由糖尿病引发的心肌结构与功能异常的一种独立的原发病,称之为糖尿病心肌病,可引起患者死亡.由于血糖水平、脂肪酸氧化和糖原代谢受AMPK的调节,因此,在DCM形成过程中AMPK起着至关重要的作用.该文综述了AMPK信号通路在糖尿病心肌病发生、发展过程中的作用.
作者：张景怡；鲍翠玉；李晶 刊期： 2017年第11期
目的 探讨当归多糖对X线辐射所致SD大鼠骨髓及脾脏损伤的防护作用.方法 将40只6 SD大鼠随机分为空白组、模型组、当归多糖低剂量组(63.5 mg· kg-1)、中剂量组(127 mg·kg-1)、高剂量组(254 mg·kg-1).药物组每日以不同浓度的当归多糖2 mL灌胃1次,空白组及模型组用等量的蒸馏水代替,连续给药7d后,分别对除空白组以外的各组大鼠进行全身X线照射,连续照射2d,辐射总吸收剂量为6 Gy,末次辐射后d3,麻醉后采血处死大鼠.检测各组大鼠一般生存质量、骨髓有核细胞数量、血常规,检测各组大鼠脾脏指数,显微镜观察脾脏病理变化,检测血清中γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)的含量.结果 与空白组比较,模型组大鼠生存质量、骨髓有核细胞数量、白细胞数、脾脏指数、IFN-γ及IL-4表达量明显降低,而红细胞数、血红蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色可见脾小体萎缩明显,生发中心、白髓和红髓结构紊乱,淋巴细胞数量明显减少.与模型组比较,当归多糖给药组大鼠生存质量、骨髓有核细胞数量、白细胞数、脾脏指数、IFN-γ及IL-4表达量明显升高,而红细胞数、血红蛋白含量降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色可见脾脏病理损伤有所减轻,脾小体依稀可见,生发中心、红髓和白髓分界尚可见,淋巴细胞数量升高.结论 当归多糖对辐射所致SD大鼠骨髓及脾脏损伤具有防护作用,其机制可能是通过减轻辐射对骨髓及脾脏造血细胞、免疫细胞的损伤,并补充机体血液及津液来实现的.
作者：许小敏；卢志伟；王磊；张利英；安方玉；何进鹏；华君瑞；张艳辉；刘永琦 刊期： 2017年第11期
肿瘤是死亡率很高的一种疾病,严重威胁人类的生命和健康.从中药或天然药物中提取有效成分,研究其抗肿瘤作用或对某些抗肿瘤化学药物的增敏和抗耐药作用已成为当前医药学界关注的热点.多甲氧基黄酮是近年来发现的一类具有较强抗肿瘤活性的黄酮类成分.该文就多甲氧基黄酮类成分抗肿瘤作用及其机制的研究进展作一综述.
作者：陈圣敏；董杨 刊期： 2017年第11期
肿瘤细胞能量代谢依赖于糖酵解和氧化磷酸化,肿瘤细胞由于其生长迅速,常常出现葡萄糖等营养物质摄取增多、糖酵解增加等现象.近年来,针对肿瘤细胞能量代谢的研究受到了广泛的关注.该文总结了肿瘤细胞能量代谢过程中所需要的营养物质、调控网络以及治疗靶点,为后续研究和临床治疗提供重要参考.
作者：李其响；张配；刘浩 刊期： 2017年第11期
同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是一种含巯基氨基酸,是甲硫氨酸去甲基化过程中的产物,可通过多种途径促发炎症反应,启动由细胞免疫所介导的局部和全身慢性炎症.研究发现[1],Hcy可激活核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB),导致多种炎症基因转录,参与炎症的发生.炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病,发病机制目前尚未完全明确.研究发现,IBD患者肠黏膜中,经由5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)代谢合成白三烯(leukotrienes,LTs)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)代谢合成前列腺素(prostaglandins,PGs)的量升高.
作者：王晶；丁少桢；胡翠；胡静；刘晓昌；梅俏；许建明 刊期： 2017年第11期
目的 探讨糖尿病大鼠脑额叶皮层血流量的动态变化,初步研究其与主要血管活性物质变化的关系,为进一步研究糖尿病认知障碍以及中枢神经系统功能变化提供前期基础.方法 34只♂ Wistar大鼠随机分为空白对照组和糖尿病模型组.模型组腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 60 mg·kg-1复制糖尿病模型,葡萄糖氧化酶法测定72 h空腹血糖≥16.7 mmol·L-1作为成模标准,血糖仪连续动态测定FBG,Moms水迷宫检测糖尿病大鼠学习记忆能力,双通道激光多普勒血流仪检测大鼠90 d额叶皮层血流量.另取34只♂ Wistar大鼠分组造模同前,连续动态监测造模d0、7、14、21、28、35、42、56、75额叶皮层血流量;ELISA法检测脑脊液中iNOS、cNOS和ET-1的浓度.结果 Morris水迷宫检测显示,糖尿病模型组大鼠从训练第6次逃避潜伏期明显延长(P＜0.05),额叶皮层血流量/100 g体重明显降低(P＜0.05);额叶皮层血流量动态监测结果显示,糖尿病大鼠造模d 21脑血流量/100 g体重下降(P＜0.05),并在相似水平持续到成模d 75(P ＜0.01,P ＜0.05);与对照组相比,模型组脑脊液中iNOS和cNOS浓度明显升高(P＜0.05),ET-1浓度明显下降(P＜0.01).结论 糖尿病认知障碍大鼠额叶皮层血流量减少,提示脑血流量的减少可能是导致糖尿病发生认知障碍的因素之一.糖尿病动态脑血流量检测显示脑血流量减少发生在糖尿病早期,之后并无明显继续恶化.脑血流减少可能与NO、ET-1浓度变化无明显关系,但脑血流的变化趋势可能与二者变化有关.
作者：杨明艳；王玥；毕田田；毕玉莹；王冬雪；赵瑛 刊期： 2017年第11期
目的 考察载天冬酰胺酶(asparaginase,Ase)磺丁基-β-环糊精脂质体(sulfobutyl ether-β-cyclodextrin liposomes loaded with asparaginase,ASDL)的稳定性,并探究其稳定性增强的相关机制.方法 采用逆向蒸发法制备ASDL,通过酸碱稳定性、热稳定性、抗胰蛋白酶稳定性、血浆稳定性和贮存稳定性,考察ASDL的体外稳定性,并利用荧光光谱法探究其稳定性增强的相关机制.结果 稳定性实验结果显示,ASDL的酸碱稳定性、热稳定性、抗胰蛋白酶稳定性、血浆稳定性和贮存稳定性都优于Ase.荧光实验结果显示,ASDL特性提高的原因可能与荧光发色团周围微环境和疏水结构的改变有关.结论 磺丁基-B-环糊精脂质体能够有效保护Ase不受外界环境,如水解酶、pH、温度的影响,从而提高了Ase的稳定性.
作者：李瑶；万胜利；张永红；胡雪原；张景勍 刊期： 2017年第11期
目的 探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤中的作用.方法 不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8 mmol·L-1)棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激HUVECs0、12、24、48 h,CCK-8法检测血管内皮细胞增殖能力;免疫印迹法检测血管内皮细胞NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox、p67phox、gp91phox的表达水平;免疫荧光法检测血管内皮细胞细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的表达水平.结果 0.4 mmol·L-1 PA刺激HUVECs24、48 h组的细胞增殖率出现明显降低.因此,实验中我们采用0.4 mmol· L-1PA刺激24 h作为模型组;0.4 mmol·L-1PA刺激HUVECs24、48 h时,p22phox、p47phox、p67phox、gp91phox的表达均明显升高(P＜0.05),24h组与48 h组差异不明显(P＞0.05);0.4mmol·L-PA刺激血管内皮细胞24、48 h时,细胞内ROS表达水平均明显增高(P＜0.05),24 h组与48 h组差异不明显(P＞0.05);与模型组(0.4 mmol·L-1 PA刺激24 h)相比,NADPH氧化酶抑制剂diphenyliodonium(DPI,10 μmol·L-1)预处理可以使模型组血管内皮细胞ROS表达水平明显下调(P＜0.05).结论 NADPH氧化酶活性对高脂所致血管内皮细胞氧化应激损伤的防治有重要意义.
作者：许文虎；金春子；王晓龙；丛柏林；崔兰 刊期： 2017年第11期
目的 探究三氧化二砷(ATO)引起内质网应激的效应机制,为掌控急性早幼粒白血病治疗药物监测提供间接药理学指标.方法 通过ATO的毒理学数据库关联基因数据整理建立蛋白-蛋白互作网络,使用MCODE算法对网络拓扑关系聚类分析寻找关联基因群;采用HL-60细胞模型进行实验研究.MTT法评价ATO对HL-60的细胞毒活性;Realtime PCR法检测细胞内质网应激相关基因表达变化;Westem blot检测内质网应激相关蛋白表达水平;用ER-Tracker Red对内质网进行特异性荧光染色;流式细胞技术检测细胞分化及凋亡指标变化.结果 ATO相关的206个基因PPI网络中有3 794对关系,排名前4的基因群中内质网应激模块凸显;ATO能抑制HL-60细胞增殖,并呈浓度依赖性;AT0在给药4h即可引起细胞内质网应激,GRP78和GRP94表达较明显,随着时间延长基因表达水平变化明显,1 ～4 μmol·L-1引起GRP78、GRP94和Nrf2表达,8μmol·L-1引起CHOP大量表达.ATO在1、2μmol·L-时引起eIF2α蛋白磷酸化水平增加,在8 μmol·L-1时诱导CHOP蛋白大量表达;内质网染色结果显示,4、8 μmol·L-1的ATO诱导内质网的肿胀;流式结果表明ATO在1μmol·L-1时引起细胞分化,在2 μmol·L-时出现明显分化群,4、8 μmol·L-1时细胞分化同样明显,但在8 μmol·L-1时细胞同时出现凋亡群.结论 ATO抑制HL-60细胞增殖过程中出现内质网应激,并呈浓度依赖性阶段性切换效应.
作者：张闪闪；李天一；王晓琴；张波 刊期： 2017年第11期
目的 探讨红景天苷(Sal)通过抑制补体C3对MCAO大鼠缺血侧NeuN、Egr4的影响.方法 ♂成年SD大鼠45只随机分成假手术组(sham)、模型组(MCAO)以及给药组(MCAO+ Sal),采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO).连续给药1、2d,免疫荧光及Western blot技术检测NeuN、Egr4、C3和C1的表达情况.健康成年♂ SD大鼠60只,随机分为6组,即人工脑脊液+ sham、C3aR抑制剂+sham、人工脑脊液+MCAO、C3aR抑制剂+MCAO、人工脑脊液+MCAO+ Sal、C3aR抑制剂+MCAO+ Sal,Western blot技术检测缺血侧脑组织NeuN、Egr4、C3的表达水平.结果 与MCAO组相比较,经红景天苷分别作用1、2d能使C3的表达明显下降,NeuN表达明显上升;红景天苷给药ld对Egr4和Cl没有明显影响,但能使2d的Egr4表达明显升高,C1的表达明显降低;经连续2d侧脑室注射C3 aR抑制剂或给予红景天苷后,均能够降低P50的表达,增加Egr4的表达.结论 红景天苷对脑缺血/再灌注亚急性期的神经保护功能可能与抑制补体经典途径的激活,调控Egrs,从而减少细胞凋亡有关.
作者：宋百颖；赖文芳；苏燕青；林昱；许文；洪桂祝 刊期： 2017年第11期
目的 探讨蟾酥活性成分蟾蜍灵和华蟾毒配基协调索拉非尼抑制肝癌HepG2细胞生长的机制.方法 MTT法检测HepG2细胞经药物作用12、24、48 h后的增殖活性;Hoechst 33342荧光染色检测细胞形态学变化;流式细胞仪检测药物对HepG2细胞周期的影响;Western blot检测Akt、p-Akt(Ser473)、IκB、NF-κB、p-NF-κB p65、Bcl-2、Bax、cyclin A、PC-NA蛋白表达水平.结果 蟾蜍灵、华蟾毒配基和索拉非尼作用组均能抑制HepG2细胞增殖,且药物联合作用组的增殖抑制率明显高于单独药物作用组,呈时间依赖性,用金氏公式得出在24 h具有协同作用(P＜0.01);荧光染色结果显示,HepG2细胞经药物处理24 h后,细胞呈现出核染色质凝集的凋亡形态特征;细胞周期检测结果显示,索拉非尼作用组使细胞周期阻滞于G0/G1期(P＜0.01),蟾蜍灵、华蟾毒配基作用组使细胞周期阻滞于S期(P＜0.01),药物联合作用组使细胞周期阻滞于S期(P＜0.01);Westem blot结果显示,蟾蜍灵、华蟾毒配基和索拉非尼单独药物作用组和联合作用组Akt、NF-κB总蛋白表达均无明显变化,p-Akt(Ser473)、p-NF-κB p65、Bcl-2、cyclin A、PCNA蛋白表达水平逐渐降低,联合作用组比单独药物作用组降低更为明显(P＜0.01).IκB、Bax蛋白表达水平逐渐升高,联合作用组比单独药物作用组升高更加明显(P＜0.01).结论 蟾酥活性成分蟾蜍灵和华蟾毒配基协调索拉非尼通过下调Akt/NF-κB信号通路,抑制肝癌HepG2细胞增殖.
作者：王志美；徐忠伟；王佳宝；代二庆；徐瑞成 刊期： 2017年第11期
目的 比较两种不同的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)树鼩模型大脑神经病理改变,探索优化的AD树鼩模型.方法 50只树鼩随机分为5组:D-半乳糖复合鹅膏蕈氨酸(IBO)高、低剂量组(腹腔注射D-半乳糖复合双侧大脑基底注射IBO),Aβ25-35复合IBO高、低剂量组(双侧基底前脑注射)及对照组,10只/组.HE染色法观察各组树鼩大脑神经细胞形态;免疫组化法检测各组树鼩大脑胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和突触素(SYP)的表达;免疫印迹法检测β淀粉样蛋白1-42(Aβ142)、淀粉样蛋白前体蛋白(APP)和磷酸化tau蛋白(p-tau)的表达.结果 HE染色显示,造模树鼩大脑神经细胞均出现程度不同的形态损伤改变,以D-半乳糖复合IBO高剂量组和Aβ25-35复合IBO高剂量组改变明显;免疫组化染色结果显示,造模组的ChAT和SYP的表达均明显下降(P＜0.01),其中以Aβ25-35复合IBO高剂量组下降明显.免疫印迹检测结果显示,造模组的Aβ1-42、APP和p-tau的表达均明显升高(P＜0.05或P＜0.01),其中以Aβ25-35复合IBO高剂量组升高明显.结论 Aβ25-35合并IBO注射Meynert核损毁造模方法更适合构建AD树鼩模型.
作者：陈奔；覃梅春；黄金兰；吴登攀；郭尔楚；许哲郝；刘志萍；钟振国 刊期： 2017年第11期
血管生成抑制剂通过抑制肿瘤血管生成,使肿瘤细胞处在恶劣的生长环境中,而有效阻断肿瘤的发展进程.但在临床应用中,抗血管生成的药物却表现出治疗效果短暂、不良反应较多、适用肿瘤类型少等局限.这些问题制约着药物开发与应用,限制肿瘤治疗的研究进展.诸多文献研究显示,肿瘤细胞可以通过多种机制和途径逃脱血管生成抑制剂的治疗,使血管生成抑制剂“失效”.该文着重分析治疗失效的原因和机制,拟提出对应的解决策略,以改善目前抗血管生成药物疗效,为抗血管生成新药研发及临床用药提供参考.
作者：王蔚；余苏云；吴佳伟；黄帅；吴媛媛；陈文星；王爱云；陆茵 刊期： 2017年第11期
目的 通过观察孕期尼古丁暴露(PNE)所致的宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠出生后,在高脂饮食(HFD)模型下,血中皮质酮(CORT)浓度和肾上腺甾体合成功能的变化及其性别差异,从胰岛素样生长因子-1(IGF-1)信号通路角度探讨其发生机制.方法 PNE(2.0 mL·kg-1·d-1)建立大鼠IUGR模型,子代断奶后给予HFD喂养直至出生后第24周.检测仔鼠血CORT含量、肾上腺甾体合成功能、IGF-1信号通路及11β-HSDs/CR系统表达.结果 与HFD对照组相比,PNE组♂子代血CORT浓度呈降低趋势,♀呈升高趋势;PNE组♂子代肾上腺甾体合成酶表达(如StAR、3β-HSD、P450c11)明显降低,PNE组♀子代肾上腺甾体合成酶表达(如SF-1和P450c21)增加;PNE组♂子代IGF-1信号通路中IGF-1、IGF-1R升高,PNE组♀子代IGF-1信号通路各基因表达明显增加;PNE组♂子代11β-HSD2、GR表达降低,11β-HSD1/11 β-HSD2比值升高,而PNE组♀子代相应的基因表达以增加为主.结论 PNE可致HFD子代大鼠肾上腺甾体合成功能异常变化,并呈现较明显的性别差异,其发生机制与尼古丁所致的肾上腺甾体合成低功能宫内编程及出生后IGF-1介导的追赶性生长有关.
作者：段芳芳；刘莲；黄鹤归；祝春燕；何正；汪晖 刊期： 2017年第11期
目的 评价不同剂量黄芩苷对SD大鼠类风湿关节炎的疗效,并探讨其可能的作用机制.方法 制备SD大鼠类风湿关节炎模型,测量后足的肿胀度;通过不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察膝关节滑膜HE染色切片病理变化;实时荧光定量PCR测定膝关节滑膜组织TLR2及MyD88mRNA表达;Western blot测定滑膜组织TLR2、MyD88及NF-κB p65蛋白表达.结果 黄芩苷30、60 mg·kg-1均能明显减弱滑膜组织中成纤维细胞的增殖及炎性损伤程度,明显降低滑膜组织TLR2及MyD88 mRNA表达(P＜0.01),明显减弱TLR2、MyD88及NF-κBp65蛋白表达(P＜0.05).结论 黄芩苷具有良好的抗类风湿关节滑膜炎作用,其可能是通过抑制TLR2-NF-κB信号通路的活化来实现的.
作者：白琳；杨雨欣；万巧凤；黄菱；段海政 刊期： 2017年第11期
目的 SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)和成年SD大鼠脾脏调节性T细胞(Tregs)体外共培养,探讨二者相互作用,并观察依普利酮(EPL)对其的影响.方法 免疫磁珠法分选大鼠Tregs,差速贴壁法分选大鼠CFs,分为CFs、CFs+ Tregs、CFs+Tregs+EPL(30 μmol.L-1)、Tregs组.孵育后,CCK-8法检测CFs的增殖情况;ELISA法检测CFs分泌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白相对表达水平;RT-qPCR检测Tregs的Kvl.3、KCa3.1、CRAC通道mRNA的相对表达水平;In-Cell Westem blot法检测Tregs的Kv1.3通道蛋白质的表达水平.结果 共培养48 h后,CFs增殖趋稳,共培养组CFs增殖明显(P＜0.01),EPL可明显抑制其增殖(P ＜0.01);CFs分泌的Ⅰ型、Ⅲ型胶原和MMP-2的相对表达水平均明显增加(P＜0.01),EPL可明显抑制其增加(P＜0.01);Tregs的Kv1.3、KCa3.1、CRAC通道mRNA的相对表达水平分别增加6.95、1.99、1.53倍(CFs+Tregs vs Tregs,P＜0.01),EPL明显抑制Kv1.3、KCa3.1 mR-NA的表达(CFs+Tregs+EPLvsCFs+Tregs,P＜0.01),其中Kv1.3通道的抑制为明显;Tregs的Kv1.3通道蛋白增加了67.9％(CFs+Tregs vs Tregs,P＜0.01),EPL可明显抑制其表达(P＜0.01).结论 体外Treg与CFs共培养48h后,Tregs能明显促进CFs的增殖,EPL可以通过下调Tregs细胞膜上Kv1.3通道的表达,抑制Tregs的活化/增殖,间接抑制心肌纤维化.
作者：邵培培；徐琦；李少华；程路峰 刊期： 2017年第11期
目的 探讨人肝癌HepG2细胞单纯肝脂肪变性细胞模型的建立方法与模型的应用.方法 体外培养HepG2细胞,以不同浓度的油酸处理24 h诱导细胞脂肪变性,油红O和尼罗红染色定性观察细胞内脂滴蓄积情况,并测定细胞内甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及培养液中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平,确定佳模型浓度;同时,利用此模型观察黄酮类化合物对脂肪变性肝细胞内TG的影响.结果 油酸终浓度为0.4mmol·L-1时,肝细胞内有大量脂滴形成,且细胞内TG含量明显增加,而MDA含量、SOD活性及培养液中ALT、AST释放量较正常组无明显变化;槲皮素和表儿茶素可明显降低模型细胞内TG含量.结论 采用0.4 mmol·L-1油酸可成功诱导HepG2细胞发生脂肪变性,建立单纯性肝细胞脂肪变性模型,该模型适用于预防非酒精性脂肪肝病的天然降脂药物研究.
作者：董丽红；张瑞芬；黄菲；魏振承；张名位 刊期： 2017年第11期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
