严国强；陈春香；陈芳辉；高艳；储佳佳；李腾；黄起壬
目的：观察大鼠戊四唑急性癫痫模型造模后不同时间海马神经元损伤程度的变化。方法大鼠腹腔注射10 g· L －1（64 mg·kg －1）戊四唑1次，诱发大鼠急性癫痫发作，分别于注射戊四唑后24、72、120、144 h 将大鼠麻醉，灌流取脑，采用尼氏染色及免疫组化染色观察大鼠海马神经元损伤程度。结果与空白对照组相比，腹腔注射戊四唑后海马神经元损伤程度随着时间的延长逐渐加重。结论戊四唑急性致痫模型大鼠海马神经元损伤的大差异出现在腹腔注射戊四唑后120 h 附近，可以将其作为药效学研究的海马组织取材时间。
作者：刘小虎；向绍杰；齐越；李淼；李心培；孟莉；陈贺；贾冬 刊期： 2015年第04期
目的：建立同时测定血浆中氯米帕明和4种苯二氮类药物奥沙西泮、地西泮、氯硝西泮、阿普唑仑浓度的固相萃取－高效液相色谱法（HPLC）。方法XTerraC8RP（4.6mm×150mm，5μm）为色谱柱，磷酸盐缓冲液（50mmol·L－1，pH3.0）和乙腈（73.2：26.8，V／V）为流动相，流速1.2mL·min－1，柱温45℃；检测波长220nm，血浆经C1固相萃取柱预处理。结果线性范围分别为：阿普唑仑、氯硝西泮5.0～200.0μg·L－1，地西泮10.0～500.0μg·L－1，氯米帕明20.0～500.0μg·L－1，奥沙西泮7.5～2000μg·L－1，相关系数均大于0.9994；低检测限分别为：阿普唑仑1.5μg·L－1、氯硝西泮1.4μg·L－1、地西泮3.0μg·L－1、氯米帕明5.5μg·L－1、奥沙西泮2.2μg·L－1；日内及日间精密度（CV％）分别为2.2％～12.6％、2.1％～13.2％，偏差－10.6％～14.6％，提取回收率81.1％～100.1％。结论该法可用于临床血浆中氯米帕明和4种苯二氮类药物的同时检测，方法新颖、灵敏、经济，结果准确、可靠。
作者：郑付春；石刚刚 刊期： 2015年第04期
目的：研究卡托普利（captopril，Cap）对高糖（high glu-cose，HG，33 mmol·L －1）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelium cells，HUVECs）胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）的作用及机制。方法首先观察 Cap 对 HG （33 mmol·L －1）诱导的 HUVECs IR 的改善作用。实验随机分为5组，即正常对照（Control）组、IR 组、IR ＋CapⅠ（1×10－6 mol·L －1）组、IR ＋CapⅡ（1×10－5 mol·L －1）组、IR ＋CapⅢ（1×10－4 mol·L －1）组。其次证实 Cap 改善 HG（33 mmol·L －1）诱导 HUVECs IR 的作用是由 PPARγ介导。实验随机分为6组，即 Control 组、IR 组、IR ＋Cap（1×10－5 mol ·L －1）组、PPARγ抑制剂 GW9662（PI，1.0μmol·L －1）组、IR ＋PPARγ抑制剂（IR ＋PI，1.0μmol·L －1）组、IR ＋Cap ＋PPARγ抑制剂（IR ＋Cap ＋PI，1.0μmol·L －1）组，除 Control组和 PI 组外，所有各组先用含33 mmol · L －1葡萄糖的DMEM培养48 h，Cap 各组再加不同浓度的 Cap 处理4 h，后胰岛素（100 nmol·L －1）处理30 min，抑制剂组再加抑制剂（1.0μmol·L －1）处理1 h，后进行指标检测。结果IR组 NO 水平明显降低、ET-1含量明显升高，提示细胞已产生IR，但 PPARγmRNA 和蛋白表达水平与 Control 组相比差异无统计学意义（P ＞0.05）；Cap 呈浓度依赖性逆转 HG 诱导NO 和 ET-1水平的改变，明显增加磷酸化 PPARγ（P-PPARγ）水平，说明其可明显改善 HG 诱导的 IR，但对PPARγmRNA 和蛋白表达水平无明显影响（vs IR，P ＞0.05）；加 PI 处理后，Cap 改善 IR 的作用完全取消，提示 Cap改善 IR 的作用是由 PPARγ介导。结论 Cap 可通过PPARγ介导改善高糖所致血管内皮细胞 IR，其机制可能与PPARγ表达水平无关，而与 PPARγ激活有关。
作者：严国强；陈春香；陈芳辉；高艳；储佳佳；李腾；黄起壬 刊期： 2015年第04期
目的：考察银杏内酯 B 前体药物（PGB）的脑靶向性，并探究其靶向机制。方法采用 LC-MS ／MS 考察大鼠尾静脉注射 PGB 后的脑部药动学规律并评价其脑靶向性；采用伊文斯蓝法观察 PGB 对不完全性脑缺血小鼠脑毛细血管通透性的影响；HPLC 法测定 PGB 在正辛醇-水体系的分配系数（logP）；MVD 分子对接软件计算 PGB 与 P-糖蛋白（P-gp）的体外结合力；定磷法检测 PGB 对人 P-gp 膜 ATP 酶活性的影响。结果以治疗有效性和靶向指数评价 PGB 的脑靶向效率达6.87和4.14；PGB 预防给药可有效降低不完全性脑缺血小鼠的脑毛细血管通透性（P ＜0.05）；PGB 的 logP 为1.03，高于 GB 的0.61；分子对接计算表明 PGB 与 P-gp 结合力大于 GB，其 MolDockScore 分别为－143.36、－116.40 KJ ·mol －1；ATP 酶活性分析提示 PGB、GB 均能提高 P-gp ATP酶活性，其 Km 值分别为237.75、841.24μmol·L －1，PGB 与P-gp 亲和力高于 GB。结论PGB 具有脑靶向性，其靶向性提高一方面得益于其脂溶性提高，PGB 在脑部渗透量增加；另一方面可能为 PGB 明显提高 P-gp ATP 酶活性，从而抑制P-gp 对 GB 的外排作用。
作者：朱世璟；袁媛；尹华阳；惠爱玲；周安；潘见 刊期： 2015年第04期
骨组织中存在局部肾素－血管紧张素系统（RAS）。RAS 组分及其活性肽血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）直接参与调控骨代谢的病理生理进程。成骨细胞和破骨细胞都有 Ang Ⅱ的受体表达，这些受体介导了 Ang Ⅱ调控骨代谢的作用。该文回顾了经典 RAS 途径，探讨了组织 RAS 致局部组织病变的作用，并对 RAS 活性肽 Ang Ⅱ调控成骨细胞的靶基因、胞内信号通路、Ang Ⅱ通过成骨细胞间接调控破骨细胞功能、Ang Ⅱ受体在骨代谢调控中的交互作用进行了重点阐述。
作者：刘金鑫；张方怡；张岩 刊期： 2015年第04期
目的：建立简便、快速、灵敏的 LC-MS ／MS 法测定 Bea-gle 犬血浆中手性药物布洛芬浓度的分析方法，进行系统的方法学验证，并用于布洛芬在 Beagle 犬体内的药代动力学研究。方法以酮洛芬为内标，血浆样品经正己烷（含5％异丙醇）液萃取后，以甲醇：1 mmol·L －1甲酸铵（含0.2％甲酸，10％甲醇）（82∶18，V／V）为流动相，采用 Lux 5u Cellu-lose-3（250 mm·4.6 mm，5μm）柱分离，流速为0.8 mL· min －1。通过电喷雾电离源以多反应监测（MRM）方式进行负离子检测，用于定量分析的离子对分别为 m／z 205.2／161.2（布洛芬）和 m／z 253.1／209.2（内标，酮洛芬）。方法验证包括基质效应、提取回收率、线性、定量下限、批内与批间精密度、稳定性、稀释效应等。结果犬血浆中左／右旋布洛芬的线性范围为0.2～50 mg·L －1，低定量限为0．2 mg ·L －1，批内、批间精密度（RSD）介于1.01％～13.1％之间。Beagle 犬单次口服给予右旋布洛芬后的主要药动学参数Cmax、T1／2、AUC（0-t）分别为：（82.98±14.83）mg · L －1、（3.217±0.7298）h、（362.0±58.67）h·mg·L －1。单次口服给予消旋布洛芬后，其左／右旋布洛芬的主要药动学参数Cmax、T1／2、AUC（0-t）分别为：（70.62±14.81）／（74.48±20.08） mg·L －1、（1.520±0.9286）／（5.432±1.234）h、（177.8±34.18）／（649.6±200.2）h·mg·L －1。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重复性好，能够同时测量血浆中左／右旋布洛芬的药物浓度，可用于布洛芬在 Beagle 犬体内的药代动力学研究。
作者：赵秀红；夏媛媛；黄玉荣；张爱杰；魏广力；司端运 刊期： 2015年第04期
急性脊髓损伤可导致严重的运动、感觉和括约肌功能障碍。由炎症因子引起的炎症反应在继发性损伤的发生、发展过程中起关键作用。通过恰当的抗炎干预维持机体致炎／抗炎平衡，将成为脊髓损伤药物治疗的一条重要策略。该文主要介绍炎症反应的产生原因、作用过程以及参与急性脊髓损伤的病理生理机制，并综述抗炎药物实验研究的新进展，旨在为寻找安全有效的药物提供参考依据。
作者：王涛丽；顾兵；李华南；张国福；张思 刊期： 2015年第04期
目的：观察 Efaroxan 的促胰岛素分泌作用特点，并探讨其相关作用机制。方法应用放免法测定不同条件下Efaroxan 对大鼠胰岛素分泌的影响。cAMP 放射免疫试剂盒测定胰岛细胞内 cAMP 含量。结果Efaroxan 促进胰岛素分泌作用具有葡萄糖浓度依赖性，其特点是在高浓度葡萄糖条件下（8.3、11.1 mmol·L －1）增强胰岛素分泌，而在低浓度葡萄糖条件下（0、2.8 mmol·L －1）则没有作用。Efaroxan 的拮抗剂 KU14R 可明显抑制 Efaroxan 对胰岛素分泌的促进作用，并明显的抑制了 forskolin 和 IBMX 对胰岛素分泌的促进作用。胰岛 cAMP 含量检测发现，forskolin 和 IBMX 明显增加了胰岛细胞 cAMP 含量，但是 Efaroxan 和 KU14R 对胰岛cAMP 含量没有影响。结论Efaroxan 促进胰岛素分泌作用与激动 cAMP 下游信号通路有关，KU14R 通过阻断 cAMP 下游信号转导通路发挥抑制 Efaroxan、forskolin 和 IBMX 的促胰岛素分泌作用。
作者：章毅；刘云峰；高瞡英；丁亚琴 刊期： 2015年第04期
目的：观察促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）受体1拮抗剂 CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元，噻唑蓝（MTT）法测定细胞存活率，然后分为4组：正常对照组（Con）、CRH 刺激组（CRH）、CRH 和CP154526共同刺激组（CRH ＋CP）、CP154526刺激组（CP）。TUNEL、流式细胞术 Annexin Ⅴ-PI 法检测神经元凋亡率；Western blot 检测凋亡蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果10－8 mol·L －1的 CRH 作用于海马神经元后，细胞存活率下降（P ＜0.05）；50 mmol·L －1的 CP154526可明显提升神经元存活率（P ＜0.05）。与正常对照组相比，CRH 刺激后神经元凋亡率增加，Bax／Bcl-2比值增高，caspase-3表达增加；加用 CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax／Bcl-2比值及 caspase-3表达水平；而单独应用 CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的 CRH 可诱导海马神经元细胞凋亡，其受体1拮抗剂 CP154526可有效减轻细胞凋亡，发挥神经保护作用。
作者：周毅；刘巍；张悦 刊期： 2015年第04期
心血管疾病严重威胁人类的健康和生活质量，目前已成为导致人类死亡的头号杀手。因此，寻找有效的治疗药物以降低该病的致死率和致残率成为亟待解决的问题。丹参因其具有较好的活血化瘀功效，目前已被广泛的用于心血管疾病的治疗且取得较好的疗效。丹酚酸 B 是丹参提取物中的主要水溶性成分之一，研究证实丹酚酸 B 具有多种药理活性，不仅对心肌梗死（myocardial infarction，MI）具有很好的保护作用，同时也能够明显的改善心肌缺血／再灌注（myo-cardial ischemia-reperfusion，MI ／R）的损伤。该文就近年来丹酚酸 B 在心血管疾病中的药理研究进展进行综述，阐述丹酚酸 B 调控心血管疾病的药理作用机制及其与心血管疾病治疗的关系，为丹酚酸 B 的临床应用及后续研究提供参考。
作者：林超；刘兆国；钱星；姚远；徐斌；卞慧敏 刊期： 2015年第04期
目的：探讨低氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸（2．5，5和10 mmol·L －1）处理 PC12细胞24 h 诱导细胞损伤，采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度，采用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞内氧自由基水平， Hoechst 33258单荧光染色法观察细胞凋亡，免疫荧光染色法检测 HIF-1α在细胞内的表达，免疫印迹法检测细胞 HIF-1α、蛋白激酶 B （Akt）、磷酸化 Akt （phosphorylated-Akt，p-Akt）、淋巴瘤／白血病-2（B cell lymphoma／lewkmia-2，Bcl-2）和 Bcl-2相关 X 蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）的表达。结果喹啉酸可剂量依赖性地诱导 PC12细胞损伤，导致细胞内氧自由基增多和细胞凋亡。同时，喹啉酸可使PC12细胞 HIF-1α表达上调并聚集于核内；p-Akt 表达增加， Bax／Bcl-2表达比例增加。结论HIF-1α和 Akt 介导了喹啉酸诱导 PC12的细胞凋亡；此外，氧化应激过程也可能参与了细胞损伤。
作者：李永金；杨开勇；张谊；陈月芳；端礼荣；黄晓佳 刊期： 2015年第04期
目的：本研究旨在探讨 Salinomycin 对乳腺癌阿霉素耐药细胞株 MCF-7／DOX 增殖和凋亡的影响及可能作用机制。方法MTS 实验检测 Salinomycin 对 MCF-7／DOX 细胞增殖的影响；Annexin V-FITC ／PI 染色检测 Salinomycin 对MCF-7／DOX 耐药细胞凋亡的影响；DCFH-DA 染色检测 Sali-nomycin 对 MCF-7／DOX 耐药细胞活性氧（reactive oxygen species，ROS）产生的影响；JC-1法测定细胞线粒体膜电位；Western blot 法检测细胞凋亡相关蛋白 BAX、BCL-2、caspase-3和 caspase-9的表达变化。结果Salinomycin 能明显抑制MCF-7／DOX 耐药细胞增殖，且具有浓度依赖性；流式分析发现 Salinomycin 能够诱导 MCF-7／DOX 细胞凋亡，增加细胞内ROS 水平，降低细胞线粒体膜电位；与对照组相比较，Salino-mycin 处理明显抑制 BCL-2的表达，上调 BAX、cleaved caspase-3和 cleaved caspase-9的蛋白表达；抗氧化剂 N-ace-tylcysteine（NAC）则逆转上述作用。结论Salinomycin 能够诱导 MCF-7／DOX 细胞凋亡，其机制可能与 Salinomycin 诱导ROS 的产生，激活线粒体凋亡途径有关。
作者：刘浩；卢敏莹；贺智敏 刊期： 2015年第04期
纤维化可发生于多种器官，持续进展可致器官结构破坏和功能衰退，乃至器官衰竭，严重威胁人类健康和生命。腺苷是一种内源性嘌呤核苷，在人体各组织中均能生成，主要通过与4种不同的 G-蛋白偶联受体结合，在体内发挥不同的作用。近来研究发现，腺苷受体（adenosine receptors， ARs）在组织再生和纤维化过程中发挥重要作用，了解这些过程可能在纤维化疾病的治疗上能发挥重要作用。该文就近年来对 ARs 在纤维化疾病中的研究进展进行讨论。
作者：杨凤；王和；吕雄文；李俊 刊期： 2015年第04期
目的：探讨新型双亲姜黄素衍生物（curc-OEG）对四氯化碳（CCl4）诱导大鼠肝纤维化的抗炎抗氧化作用。方法大鼠分为正常组、模型组、姜黄素组和姜黄素衍生物组。除正常组外，其余各组给予 CCl4混合液皮下注射，每周2次。造模4周后，正常组、模型组给与尾静脉注射生理盐水，姜黄素组给予姜黄素400 mg·kg －1·d －1灌胃治疗，姜黄素衍生物组给予姜黄素衍生物100 mg·kg －1·d －1尾静脉注射。治疗4周后分别取血清及肝组织标本。血清检测 ALT、AST 水平；肝组织做病理学检查，Real-time PCR 法检测相关炎症因子的 mRNA 表达水平，试剂盒检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平。结果正常组、模型组、姜黄素组和姜黄素衍生物组 ALT 水平分别为：（31.7±8.7）U ·L －1、（383.0±75.6）U ·L －1、（406.3±204.7）U·L －1、（107.0±73.7）U·L －1；AST 水平分别为：（137.7±32.7）U·L －1、（585.3±36.7）U·L －1、（485.0±246.5）U·L －1、（202.7±56.0）U·L －1，姜黄素衍生物较姜黄素显示出更好的护肝降酶作用（P ＜0.05）。肝脏病理切片显示姜黄素衍生物较姜黄素具有更明显的延缓肝脏脂肪变性、减轻炎症细胞浸润及抗肝纤维化的作用。与姜黄素比较，姜黄素衍生物明显下调炎症相关因子 NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2mRNA 及蛋白表达水平（P ＜0.05）；明显降低肝组织中 MDA 水平，提高 GSH 、SOD 表达水平，增强抗氧化能力。结论姜黄素衍生物较传统姜黄素具有更好的抗炎、抗氧化作用，能够有效地延缓四氯化碳诱导的肝纤维化进程。
作者：黄小华；孙永；沈能；唐华东；任红；彭明利 刊期： 2015年第04期
目的：探索用 RNA 干扰（RNAi）法沉默脊髓脂质运载蛋白-2（lipocalin-2，LCN2）的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法鞘内置管成功的♂SD 大鼠48只，体质量180～220 g，随机均分为4组，每组12只：Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰 RNA（mismatch siRNA，MM siRNA）组、Ⅳ组 LCN2小干扰 RNA（LCN2 siRNA）组。所有大鼠鞘内置管术后 d 6确定导管位置，记为 d 0。d 2～8连续7 d，每天2次进行皮下注射，每次注射剂量10μg·g －1，Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水（normal saline，NS），Ⅱ－Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μL DEPC 溶液、10μL DEPC 溶液、10μL 含4μg MM siRNA 的 DEPC 溶液和10μL 含4μg LCN2 siRNA 的 DEPC 溶液。d 1、d 9，测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期（paw withdrawal thermal latency，PWTL）及皮下注射吗啡后45 min 的 PWTL，并计算吗啡的大可能镇痛效应百分比值（％ maximal possible effect，％MPE）。d 9行为学测试结束后，取脊髓腰膨大，用 Western blot 法检测磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）及 LCN2蛋白表达水平，用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果d 9，与Ⅰ组比，Ⅱ、Ⅲ组大鼠％MPE 值明显下降（P ＜0.05），腰段脊髓 LCN2、p-p38 MAPK、Iba1表达明显增加（P ＜0.05）。与Ⅱ组比，Ⅳ组大鼠的％MPE 值明显增加（P ＜0.05），脊髓 LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降（P ＜0.05）。结论鞘内注射 LCN2 siRNA 沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成，该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓 p-p38 MAPK 的表达有关。
作者：王芬；刘清珍；刘健；江姿潞；谢滔；李伟彦 刊期： 2015年第04期
目的：探讨慢性不可预知性刺激（chronically unpre-dicted stress，CUS）致大鼠抑郁行为与单胺递质合成限速酶色氨酸羟化酶（tryptophan hydroxylase，TPH）和酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）表达的关系。方法♂SD 大鼠30只，随机分为对照组（control group，CG）和模型组（model group，MG），每组15只。采用连续给予 CUS 结合孤养28 d建立抑郁模型；对照组每笼5只，正常饲养；以开场试验和糖水消耗实验进行行为学评价；以荧光定量 PCR 测定海马、前脑皮层 TPH 及 TH mRNA 表达，以 Western blot 法测定海马、前脑皮层 TPH 及 TH 蛋白表达。结果与 CG 相比，MG 大鼠开场实验水平和垂直活动得分均明显降低，糖水消耗量也显著减少，海马、前脑皮层 TPH 及 TH mRNA 和蛋白表达均明显下降。结论CUS 诱导♂大鼠产生抑郁症样行为，其发生机制可能与单胺递质合成限速酶 TPH、TH 表达下调相关。
作者：汪丽佳；邱红梅；蒋心惠；刘丹；费慧芝；胡小娅；周岐新 刊期： 2015年第04期
目的：研究白藜芦醇（resveratrol，Res）对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色和 Western blot 分析 Res 对 HCT116细胞增殖的抑制作用；应用流式细胞术和 Western blot 分析 Res 对 HCT116细胞凋亡的促进作用；利用 TCF4／LEF 萤光素酶报告质粒检测Res 对 Wnt／β-catenin 信号转导的影响。采用 Western blot 和PCR 分析 Res 对 HCT116细胞内β-catenin 表达水平的影响。结果与对照组相比，Res 能抑制 HCT116细胞增殖，下调PCNA 蛋白水平；流式细胞术和 Western blot 检测结果均显示，Res 能明显促进 HCT116细胞凋亡；报告质粒分析结果显示，Res 呈浓度依赖性降低TCF4／LEF 报告质粒萤光素酶活性（Res 为20μmol·L －1时，P ＜0.05；Res 为40或80μmol·L －1时，P ＜0．01）；Western blot 和PCR 分析结果显示，Res不仅明显降低HCT116细胞中βcatenin 的蛋白水平，同时也下调βcatenin mRNA 的表达水平。结论 Res 能抑制HCT116细胞增殖并促进凋亡，其机制可能至少与Res 下调βcatenin mRNA 表达，抑制Wnt／βcatenin 信号转导有关。
作者：袁霜雪；王东旭；伍秋香；陈前昭；李洋；曾于桦；邵英；黄军；刘映孜；何百成 刊期： 2015年第04期
目的：研究不同刺激条件对人角质形成细胞 HaCaT细胞中 TSLP、IL-33表达水平的影响，探讨过敏性疾病中关键启动因子 TSLP、IL-33体外表达细胞模型的佳刺激方法。方法应用角质形成细胞无血清培养液（K-SFM）体外培养 HaCaT 细胞，给予不同刺激剂，筛选出明显促进 HaCaT细胞中 TSLP 和 IL-33表达的刺激剂。进而考察单独与联合刺激剂时的量效关系，后对选出的刺激剂进行时效关系考察。TSLP 和 IL-33表达水平采用 ELISA 和免疫荧光法检测。结果（1）Poly（I：C）与 TNF-α两种刺激剂单独使用时均能明显刺激 HaCaT 细胞分泌 TSLP 和 IL-33，其余刺激剂在本实验浓度范围内未见明显差异。（2）Poly（I：C）100 mg· L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激对 HaCaT 细胞表达 TSLP和 IL-33的促进作用为明显。（3）对 Poly（I：C）100 mg· L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激 HaCaT 细胞的时效关系考察发现，刺激12 h HaCaT 细胞中 TSLP 和 IL-33的表达水平高。结论不同刺激剂和刺激时间对体外刺激 HaCaT细胞表达细胞因子 TSLP 和 IL-33的效应不同，其中以 Poly （I：C）100 mg·L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激 HaCaT 细胞12 h 后，TSLP 和 IL-33的表达水平升高为明显。该结果为过敏性疾病的病理机制及药物作用研究提供了合适的方法。
作者：刘海亮；包凯帆；江小燕；魏筱；于曦；陶羽；王晓钰；王燕；洪敏 刊期： 2015年第04期
内质网是真核细胞内一种重要的细胞器，当细胞低氧、糖类供应不足或有化学药物处理时均可引发内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。目前研究表明，内质网应激可激活多条通路，其中以未折叠蛋白反应（unfolded pro-tein response，UPR）通路研究为广泛。UPR 通路激活后，可参与调控肿瘤细胞耐药。其中，参与的机制涉及 DNA 损伤修复、凋亡抑制、自噬等。
作者：颜媛媛；何苗；魏敏杰 刊期： 2015年第04期
目的：建立以α-突触核蛋白损伤为靶点筛选抗帕金森病创新药物的细胞模型。方法通过 PCR 方法扩增目的基因，分子克隆技术构建原核表达载体。融合载体转化至大肠杆菌诱导后表达重组α-突触核蛋白，亲和层析法纯化目的蛋白并通过蛋白免疫印迹和质谱技术进行鉴定，MTT 法检测细胞存活率。结果α-突触核蛋白基因的 cDNA 片段与理论分子量大小一致，并成功克隆至载体 pET30a；测序正确的融合载体转化至大肠杆菌 E．Coli．BL21（DE3）。转化子经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达α-突触核蛋白，通过改变温度、IPTG 浓度及宿主菌的增殖状态等条件，获得高表达菌株；宿主菌的裂解液通过亲和层析方法获得纯化的α-突触核蛋白，纯化蛋白通过与不同抗体免疫印迹结果证明为α-突触核蛋白，质谱结果显示其分子质量为15.3 ku，与理论分子质量15.5 ku 基本一致。纯化的α-突触核蛋白刺激 PC12细胞及原代神经元细胞后，细胞存活率明显下降，存活率的降低程度与α-突触核蛋白刺激浓度呈正相关性。结论成功建立了以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型，可用于筛选具有抗帕金森病功能的创新化合物。
作者：闫文芬；衡洋；邵千航；陈乃宏；苑玉和 刊期： 2015年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
