沈一维；律峰；黎平；罗洁；谢飞；闵苏
目的：观察大鼠戊四唑急性癫痫模型造模后不同时间海马神经元损伤程度的变化。方法大鼠腹腔注射10 g· L －1（64 mg·kg －1）戊四唑1次，诱发大鼠急性癫痫发作，分别于注射戊四唑后24、72、120、144 h 将大鼠麻醉，灌流取脑，采用尼氏染色及免疫组化染色观察大鼠海马神经元损伤程度。结果与空白对照组相比，腹腔注射戊四唑后海马神经元损伤程度随着时间的延长逐渐加重。结论戊四唑急性致痫模型大鼠海马神经元损伤的大差异出现在腹腔注射戊四唑后120 h 附近，可以将其作为药效学研究的海马组织取材时间。
作者：刘小虎；向绍杰；齐越；李淼；李心培；孟莉；陈贺；贾冬 刊期： 2015年第04期
目的：建立同时测定血浆中氯米帕明和4种苯二氮类药物奥沙西泮、地西泮、氯硝西泮、阿普唑仑浓度的固相萃取－高效液相色谱法（HPLC）。方法XTerraC8RP（4.6mm×150mm，5μm）为色谱柱，磷酸盐缓冲液（50mmol·L－1，pH3.0）和乙腈（73.2：26.8，V／V）为流动相，流速1.2mL·min－1，柱温45℃；检测波长220nm，血浆经C1固相萃取柱预处理。结果线性范围分别为：阿普唑仑、氯硝西泮5.0～200.0μg·L－1，地西泮10.0～500.0μg·L－1，氯米帕明20.0～500.0μg·L－1，奥沙西泮7.5～2000μg·L－1，相关系数均大于0.9994；低检测限分别为：阿普唑仑1.5μg·L－1、氯硝西泮1.4μg·L－1、地西泮3.0μg·L－1、氯米帕明5.5μg·L－1、奥沙西泮2.2μg·L－1；日内及日间精密度（CV％）分别为2.2％～12.6％、2.1％～13.2％，偏差－10.6％～14.6％，提取回收率81.1％～100.1％。结论该法可用于临床血浆中氯米帕明和4种苯二氮类药物的同时检测，方法新颖、灵敏、经济，结果准确、可靠。
作者：郑付春；石刚刚 刊期： 2015年第04期
目的：探讨中介素（intermedin，IMD）对大鼠近端肾小管上皮细胞 NRK-52E 缺氧／复氧（H／R）后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E 细胞随机分为对照组，模型组：缺氧／复氧组（H／R）、H／R ＋空质粒组、H／R ＋IMD 质粒组。MTT 法检测细胞增殖，比色法检测培养基上清 LDH 含量，流式细胞术检测细胞周期，Real time-PCR 法和 Western blot 法检测 cyclin D1、CDK、p57 mRNA 及蛋白表达，间接免疫荧光染色检测 cyclin D1亚细胞定位。结果①与对照组相比， H／R 组培养基中 LDH 含量升高了106％，同时细胞存活率明显下降，与 H／R 组比较，H／R ＋IMD 组培养基中 LDH 含量下降了33.85％（P ＜0.01），而细胞存活率增高（79.15％±1.42％ vs 61.22％±1.63％，P ＜0.05），②细胞周期结果显示，与对照组相比，H／R 组细胞 G0／G1期比例增加，S 期细胞比例降低（P ＜0.05）；与 H／R 组比较，H／R ＋IMD 组 G0／G1期细胞比例明显降低，而 S 及 G2期细胞比例增加（P ＜0.05）。③H／R 可增加 cyclin D1、CDK4及 p57的表达也增加（与对照组比较，P ＜0.05）；而 IMD 可进一步上调 cyclin D1、CDK4的表达，同时下调 p57的表达，与对照组及 H／R 组相比差异具有显著性（P ＜0.05）。④免疫荧光检测结果可见，cyclin D1呈红色荧光，在 NRK-52E 细胞内主要表达在细胞核中。结论IMD 可以上调 cyclin D1、CDK4蛋白表达，下调 p57的表达，促进细胞周期进展，从而加速肾组织 IRI后细胞增殖和修复。
作者：王艳红；田继华；苏晓乐；乔晞；李荣山 刊期： 2015年第04期
骨组织中存在局部肾素－血管紧张素系统（RAS）。RAS 组分及其活性肽血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）直接参与调控骨代谢的病理生理进程。成骨细胞和破骨细胞都有 Ang Ⅱ的受体表达，这些受体介导了 Ang Ⅱ调控骨代谢的作用。该文回顾了经典 RAS 途径，探讨了组织 RAS 致局部组织病变的作用，并对 RAS 活性肽 Ang Ⅱ调控成骨细胞的靶基因、胞内信号通路、Ang Ⅱ通过成骨细胞间接调控破骨细胞功能、Ang Ⅱ受体在骨代谢调控中的交互作用进行了重点阐述。
作者：刘金鑫；张方怡；张岩 刊期： 2015年第04期
目的：克隆人长链非编码 RNA H19基因，构建表达载体，研究 H19表达对 MCF-7增殖的影响作用。方法制备乳腺癌 MCF-7细胞总 RNA，RT-PCR 扩增长链非编码 RNA H19全长序列，分子克隆至 pcDNA3．1（－）真核表达载体；分别转染 HEK-293T 和 COS 7细胞并行 Real-time qPCR 验证载体构建是否成功；转染 H19表达载体入 MCF-7细胞株，转染0、24和48 h 后行 MTS 检测 H19表达，同时设计 siRNA 小分子片段干扰 H19的表达，观察对 MCF-7细胞增殖活性的影响。结果成功克隆和构建了 hH19-pcDNA3.1（－）表达载体；转染入 MCF-7细胞48h 后，H19过表达，MTS 检测 H19表达载体组吸光度明显高于空载体组和空白对照组；而转染H19 siRNA 小分子片段后能干扰其表达，同时抑制细胞增殖。结论H19过表达能够促进乳腺癌 MCF-7细胞增殖。
作者：彭艳；谢海棠；孙红；曾樱；朱琼妮；李泰霖；王果；朱院山 刊期： 2015年第04期
目的：观察促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）受体1拮抗剂 CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元，噻唑蓝（MTT）法测定细胞存活率，然后分为4组：正常对照组（Con）、CRH 刺激组（CRH）、CRH 和CP154526共同刺激组（CRH ＋CP）、CP154526刺激组（CP）。TUNEL、流式细胞术 Annexin Ⅴ-PI 法检测神经元凋亡率；Western blot 检测凋亡蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果10－8 mol·L －1的 CRH 作用于海马神经元后，细胞存活率下降（P ＜0.05）；50 mmol·L －1的 CP154526可明显提升神经元存活率（P ＜0.05）。与正常对照组相比，CRH 刺激后神经元凋亡率增加，Bax／Bcl-2比值增高，caspase-3表达增加；加用 CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax／Bcl-2比值及 caspase-3表达水平；而单独应用 CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的 CRH 可诱导海马神经元细胞凋亡，其受体1拮抗剂 CP154526可有效减轻细胞凋亡，发挥神经保护作用。
作者：周毅；刘巍；张悦 刊期： 2015年第04期
目的：研究卡托普利（captopril，Cap）对高糖（high glu-cose，HG，33 mmol·L －1）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelium cells，HUVECs）胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）的作用及机制。方法首先观察 Cap 对 HG （33 mmol·L －1）诱导的 HUVECs IR 的改善作用。实验随机分为5组，即正常对照（Control）组、IR 组、IR ＋CapⅠ（1×10－6 mol·L －1）组、IR ＋CapⅡ（1×10－5 mol·L －1）组、IR ＋CapⅢ（1×10－4 mol·L －1）组。其次证实 Cap 改善 HG（33 mmol·L －1）诱导 HUVECs IR 的作用是由 PPARγ介导。实验随机分为6组，即 Control 组、IR 组、IR ＋Cap（1×10－5 mol ·L －1）组、PPARγ抑制剂 GW9662（PI，1.0μmol·L －1）组、IR ＋PPARγ抑制剂（IR ＋PI，1.0μmol·L －1）组、IR ＋Cap ＋PPARγ抑制剂（IR ＋Cap ＋PI，1.0μmol·L －1）组，除 Control组和 PI 组外，所有各组先用含33 mmol · L －1葡萄糖的DMEM培养48 h，Cap 各组再加不同浓度的 Cap 处理4 h，后胰岛素（100 nmol·L －1）处理30 min，抑制剂组再加抑制剂（1.0μmol·L －1）处理1 h，后进行指标检测。结果IR组 NO 水平明显降低、ET-1含量明显升高，提示细胞已产生IR，但 PPARγmRNA 和蛋白表达水平与 Control 组相比差异无统计学意义（P ＞0.05）；Cap 呈浓度依赖性逆转 HG 诱导NO 和 ET-1水平的改变，明显增加磷酸化 PPARγ（P-PPARγ）水平，说明其可明显改善 HG 诱导的 IR，但对PPARγmRNA 和蛋白表达水平无明显影响（vs IR，P ＞0.05）；加 PI 处理后，Cap 改善 IR 的作用完全取消，提示 Cap改善 IR 的作用是由 PPARγ介导。结论 Cap 可通过PPARγ介导改善高糖所致血管内皮细胞 IR，其机制可能与PPARγ表达水平无关，而与 PPARγ激活有关。
作者：严国强；陈春香；陈芳辉；高艳；储佳佳；李腾；黄起壬 刊期： 2015年第04期
目的：研究白藜芦醇（resveratrol，Res）对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色和 Western blot 分析 Res 对 HCT116细胞增殖的抑制作用；应用流式细胞术和 Western blot 分析 Res 对 HCT116细胞凋亡的促进作用；利用 TCF4／LEF 萤光素酶报告质粒检测Res 对 Wnt／β-catenin 信号转导的影响。采用 Western blot 和PCR 分析 Res 对 HCT116细胞内β-catenin 表达水平的影响。结果与对照组相比，Res 能抑制 HCT116细胞增殖，下调PCNA 蛋白水平；流式细胞术和 Western blot 检测结果均显示，Res 能明显促进 HCT116细胞凋亡；报告质粒分析结果显示，Res 呈浓度依赖性降低TCF4／LEF 报告质粒萤光素酶活性（Res 为20μmol·L －1时，P ＜0.05；Res 为40或80μmol·L －1时，P ＜0．01）；Western blot 和PCR 分析结果显示，Res不仅明显降低HCT116细胞中βcatenin 的蛋白水平，同时也下调βcatenin mRNA 的表达水平。结论 Res 能抑制HCT116细胞增殖并促进凋亡，其机制可能至少与Res 下调βcatenin mRNA 表达，抑制Wnt／βcatenin 信号转导有关。
作者：袁霜雪；王东旭；伍秋香；陈前昭；李洋；曾于桦；邵英；黄军；刘映孜；何百成 刊期： 2015年第04期
目的：探讨法尼醇 X 受体（farnesoid X receptor，FXR）作为一种核激素受体对情感、社交或记忆等神经行为的调节作用。方法通过一系列行为学测试，包括高架十字迷宫，强迫游泳、社交活动和避暗，以及 LC-MS ／MS 法检测大脑不同区域的神经递质，评估 FXR 基因敲除（knockout，KO）对♀小鼠中枢神经系统功能的影响。结果FXR KO 导致小鼠在强迫游泳中不动时间延长（P ＜0.01），进入高架十字迷宫开放臂次数增加（P ＜0.01），逗留时间延长，同时社交活动增强（P ＜0.01），但对避暗行为中的潜伏期和错误次数无明显影响。FXR KO 亦导致小鼠海马γ-氨基丁酸（GABA，P ＜0.05）、谷氨酸（Glu，P ＜0.05）、去甲肾上腺素（NE，P ＜0.01）以及 GABA ／Glu（P ＜0.05）明显降低，但对前额叶相关神经递质无明显影响。结论 FXR 可能参与调控中枢神经系统中神经递质稳态平衡，进而影响动物的情感和社交行为。
作者：曹秦；黄菲；王婷婷；兰云意；吴辉；张蓓蓓；胡之璧；吴晓俊 刊期： 2015年第04期
目的：探索用 RNA 干扰（RNAi）法沉默脊髓脂质运载蛋白-2（lipocalin-2，LCN2）的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法鞘内置管成功的♂SD 大鼠48只，体质量180～220 g，随机均分为4组，每组12只：Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰 RNA（mismatch siRNA，MM siRNA）组、Ⅳ组 LCN2小干扰 RNA（LCN2 siRNA）组。所有大鼠鞘内置管术后 d 6确定导管位置，记为 d 0。d 2～8连续7 d，每天2次进行皮下注射，每次注射剂量10μg·g －1，Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水（normal saline，NS），Ⅱ－Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μL DEPC 溶液、10μL DEPC 溶液、10μL 含4μg MM siRNA 的 DEPC 溶液和10μL 含4μg LCN2 siRNA 的 DEPC 溶液。d 1、d 9，测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期（paw withdrawal thermal latency，PWTL）及皮下注射吗啡后45 min 的 PWTL，并计算吗啡的大可能镇痛效应百分比值（％ maximal possible effect，％MPE）。d 9行为学测试结束后，取脊髓腰膨大，用 Western blot 法检测磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）及 LCN2蛋白表达水平，用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果d 9，与Ⅰ组比，Ⅱ、Ⅲ组大鼠％MPE 值明显下降（P ＜0.05），腰段脊髓 LCN2、p-p38 MAPK、Iba1表达明显增加（P ＜0.05）。与Ⅱ组比，Ⅳ组大鼠的％MPE 值明显增加（P ＜0.05），脊髓 LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降（P ＜0.05）。结论鞘内注射 LCN2 siRNA 沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成，该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓 p-p38 MAPK 的表达有关。
作者：王芬；刘清珍；刘健；江姿潞；谢滔；李伟彦 刊期： 2015年第04期
心血管疾病严重威胁人类的健康和生活质量，目前已成为导致人类死亡的头号杀手。因此，寻找有效的治疗药物以降低该病的致死率和致残率成为亟待解决的问题。丹参因其具有较好的活血化瘀功效，目前已被广泛的用于心血管疾病的治疗且取得较好的疗效。丹酚酸 B 是丹参提取物中的主要水溶性成分之一，研究证实丹酚酸 B 具有多种药理活性，不仅对心肌梗死（myocardial infarction，MI）具有很好的保护作用，同时也能够明显的改善心肌缺血／再灌注（myo-cardial ischemia-reperfusion，MI ／R）的损伤。该文就近年来丹酚酸 B 在心血管疾病中的药理研究进展进行综述，阐述丹酚酸 B 调控心血管疾病的药理作用机制及其与心血管疾病治疗的关系，为丹酚酸 B 的临床应用及后续研究提供参考。
作者：林超；刘兆国；钱星；姚远；徐斌；卞慧敏 刊期： 2015年第04期
目的：研究不同刺激条件对人角质形成细胞 HaCaT细胞中 TSLP、IL-33表达水平的影响，探讨过敏性疾病中关键启动因子 TSLP、IL-33体外表达细胞模型的佳刺激方法。方法应用角质形成细胞无血清培养液（K-SFM）体外培养 HaCaT 细胞，给予不同刺激剂，筛选出明显促进 HaCaT细胞中 TSLP 和 IL-33表达的刺激剂。进而考察单独与联合刺激剂时的量效关系，后对选出的刺激剂进行时效关系考察。TSLP 和 IL-33表达水平采用 ELISA 和免疫荧光法检测。结果（1）Poly（I：C）与 TNF-α两种刺激剂单独使用时均能明显刺激 HaCaT 细胞分泌 TSLP 和 IL-33，其余刺激剂在本实验浓度范围内未见明显差异。（2）Poly（I：C）100 mg· L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激对 HaCaT 细胞表达 TSLP和 IL-33的促进作用为明显。（3）对 Poly（I：C）100 mg· L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激 HaCaT 细胞的时效关系考察发现，刺激12 h HaCaT 细胞中 TSLP 和 IL-33的表达水平高。结论不同刺激剂和刺激时间对体外刺激 HaCaT细胞表达细胞因子 TSLP 和 IL-33的效应不同，其中以 Poly （I：C）100 mg·L －1与 TNF-α20μg·L －1联合刺激 HaCaT 细胞12 h 后，TSLP 和 IL-33的表达水平升高为明显。该结果为过敏性疾病的病理机制及药物作用研究提供了合适的方法。
作者：刘海亮；包凯帆；江小燕；魏筱；于曦；陶羽；王晓钰；王燕；洪敏 刊期： 2015年第04期
急性脊髓损伤可导致严重的运动、感觉和括约肌功能障碍。由炎症因子引起的炎症反应在继发性损伤的发生、发展过程中起关键作用。通过恰当的抗炎干预维持机体致炎／抗炎平衡，将成为脊髓损伤药物治疗的一条重要策略。该文主要介绍炎症反应的产生原因、作用过程以及参与急性脊髓损伤的病理生理机制，并综述抗炎药物实验研究的新进展，旨在为寻找安全有效的药物提供参考依据。
作者：王涛丽；顾兵；李华南；张国福；张思 刊期： 2015年第04期
目的：探讨慢性不可预知性刺激（chronically unpre-dicted stress，CUS）致大鼠抑郁行为与单胺递质合成限速酶色氨酸羟化酶（tryptophan hydroxylase，TPH）和酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）表达的关系。方法♂SD 大鼠30只，随机分为对照组（control group，CG）和模型组（model group，MG），每组15只。采用连续给予 CUS 结合孤养28 d建立抑郁模型；对照组每笼5只，正常饲养；以开场试验和糖水消耗实验进行行为学评价；以荧光定量 PCR 测定海马、前脑皮层 TPH 及 TH mRNA 表达，以 Western blot 法测定海马、前脑皮层 TPH 及 TH 蛋白表达。结果与 CG 相比，MG 大鼠开场实验水平和垂直活动得分均明显降低，糖水消耗量也显著减少，海马、前脑皮层 TPH 及 TH mRNA 和蛋白表达均明显下降。结论CUS 诱导♂大鼠产生抑郁症样行为，其发生机制可能与单胺递质合成限速酶 TPH、TH 表达下调相关。
作者：汪丽佳；邱红梅；蒋心惠；刘丹；费慧芝；胡小娅；周岐新 刊期： 2015年第04期
目的：探讨新型双亲姜黄素衍生物（curc-OEG）对四氯化碳（CCl4）诱导大鼠肝纤维化的抗炎抗氧化作用。方法大鼠分为正常组、模型组、姜黄素组和姜黄素衍生物组。除正常组外，其余各组给予 CCl4混合液皮下注射，每周2次。造模4周后，正常组、模型组给与尾静脉注射生理盐水，姜黄素组给予姜黄素400 mg·kg －1·d －1灌胃治疗，姜黄素衍生物组给予姜黄素衍生物100 mg·kg －1·d －1尾静脉注射。治疗4周后分别取血清及肝组织标本。血清检测 ALT、AST 水平；肝组织做病理学检查，Real-time PCR 法检测相关炎症因子的 mRNA 表达水平，试剂盒检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平。结果正常组、模型组、姜黄素组和姜黄素衍生物组 ALT 水平分别为：（31.7±8.7）U ·L －1、（383.0±75.6）U ·L －1、（406.3±204.7）U·L －1、（107.0±73.7）U·L －1；AST 水平分别为：（137.7±32.7）U·L －1、（585.3±36.7）U·L －1、（485.0±246.5）U·L －1、（202.7±56.0）U·L －1，姜黄素衍生物较姜黄素显示出更好的护肝降酶作用（P ＜0.05）。肝脏病理切片显示姜黄素衍生物较姜黄素具有更明显的延缓肝脏脂肪变性、减轻炎症细胞浸润及抗肝纤维化的作用。与姜黄素比较，姜黄素衍生物明显下调炎症相关因子 NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2mRNA 及蛋白表达水平（P ＜0.05）；明显降低肝组织中 MDA 水平，提高 GSH 、SOD 表达水平，增强抗氧化能力。结论姜黄素衍生物较传统姜黄素具有更好的抗炎、抗氧化作用，能够有效地延缓四氯化碳诱导的肝纤维化进程。
作者：黄小华；孙永；沈能；唐华东；任红；彭明利 刊期： 2015年第04期
近年来，阿司匹林抗血小板聚集活性逐渐成为其临床主要应用领域［1－2］，是心血管疾病方面一线药物。临床上，阿司匹林常与灯盏细辛注射液（DI）、脉络宁注射液等中药制剂合用，用于治疗心脑血管疾病，并取得了良好的疗效［3－4］。
作者：戴国梁；李长印；孙冰婷；丁康；刘史佳；居文政 刊期： 2015年第04期
内质网是真核细胞内一种重要的细胞器，当细胞低氧、糖类供应不足或有化学药物处理时均可引发内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。目前研究表明，内质网应激可激活多条通路，其中以未折叠蛋白反应（unfolded pro-tein response，UPR）通路研究为广泛。UPR 通路激活后，可参与调控肿瘤细胞耐药。其中，参与的机制涉及 DNA 损伤修复、凋亡抑制、自噬等。
作者：颜媛媛；何苗；魏敏杰 刊期： 2015年第04期
目的：考察银杏内酯 B 前体药物（PGB）的脑靶向性，并探究其靶向机制。方法采用 LC-MS ／MS 考察大鼠尾静脉注射 PGB 后的脑部药动学规律并评价其脑靶向性；采用伊文斯蓝法观察 PGB 对不完全性脑缺血小鼠脑毛细血管通透性的影响；HPLC 法测定 PGB 在正辛醇-水体系的分配系数（logP）；MVD 分子对接软件计算 PGB 与 P-糖蛋白（P-gp）的体外结合力；定磷法检测 PGB 对人 P-gp 膜 ATP 酶活性的影响。结果以治疗有效性和靶向指数评价 PGB 的脑靶向效率达6.87和4.14；PGB 预防给药可有效降低不完全性脑缺血小鼠的脑毛细血管通透性（P ＜0.05）；PGB 的 logP 为1.03，高于 GB 的0.61；分子对接计算表明 PGB 与 P-gp 结合力大于 GB，其 MolDockScore 分别为－143.36、－116.40 KJ ·mol －1；ATP 酶活性分析提示 PGB、GB 均能提高 P-gp ATP酶活性，其 Km 值分别为237.75、841.24μmol·L －1，PGB 与P-gp 亲和力高于 GB。结论PGB 具有脑靶向性，其靶向性提高一方面得益于其脂溶性提高，PGB 在脑部渗透量增加；另一方面可能为 PGB 明显提高 P-gp ATP 酶活性，从而抑制P-gp 对 GB 的外排作用。
作者：朱世璟；袁媛；尹华阳；惠爱玲；周安；潘见 刊期： 2015年第04期
目的：建立以α-突触核蛋白损伤为靶点筛选抗帕金森病创新药物的细胞模型。方法通过 PCR 方法扩增目的基因，分子克隆技术构建原核表达载体。融合载体转化至大肠杆菌诱导后表达重组α-突触核蛋白，亲和层析法纯化目的蛋白并通过蛋白免疫印迹和质谱技术进行鉴定，MTT 法检测细胞存活率。结果α-突触核蛋白基因的 cDNA 片段与理论分子量大小一致，并成功克隆至载体 pET30a；测序正确的融合载体转化至大肠杆菌 E．Coli．BL21（DE3）。转化子经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达α-突触核蛋白，通过改变温度、IPTG 浓度及宿主菌的增殖状态等条件，获得高表达菌株；宿主菌的裂解液通过亲和层析方法获得纯化的α-突触核蛋白，纯化蛋白通过与不同抗体免疫印迹结果证明为α-突触核蛋白，质谱结果显示其分子质量为15.3 ku，与理论分子质量15.5 ku 基本一致。纯化的α-突触核蛋白刺激 PC12细胞及原代神经元细胞后，细胞存活率明显下降，存活率的降低程度与α-突触核蛋白刺激浓度呈正相关性。结论成功建立了以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型，可用于筛选具有抗帕金森病功能的创新化合物。
作者：闫文芬；衡洋；邵千航；陈乃宏；苑玉和 刊期： 2015年第04期
目的：观察大鼠佐剂性关节炎（adjuvantrheumatoidar-thritis，AA）病程不同阶段的脾脏T细胞亚群及其重要器官的病理学变化，探讨病程不同的阶段AA大鼠T细胞亚群变化的规律及局部组织和全身重要器官的病理学变化特点。方法选用20只♂Lewis大鼠，完全弗氏佐剂（CFA）诱导AA模型，造模后d7、d10、d13、d16、d19、d22进行全身评分和关节炎指数评分，计算关节肿胀数。造模后d14（炎症初期）、d22（炎症高峰期）处死大鼠，流式细胞仪检测炎症初期和炎症高峰期脾脏总T细胞（CD3＋CD4＋）、记忆T细胞（CD4＋CD44＋）、未致敏T细胞（CD4＋CD62L＋）的细胞亚群和Th17（CD4＋IL17＋）细胞亚群比例。d22取心、肝、脾、肺、肾、踝关节、肠系膜淋巴结组织，光镜观察各组织的病理学改变。结果大鼠免疫后10d出现继发侧足爪红肿，炎症初期（d10～d14）和炎症高峰期（d19～d22）AA大鼠的全身评分、关节炎指数评分和关节肿胀数有不同程度的增加。踝关节病理见滑膜组织增生、炎细胞浸润，血管翳出现等，且心、肝、脾、肺、肾、肠系膜淋巴结组织的病理也有不同程度的炎性变化。与正常组比较，炎症初期AA大鼠脾脏总T细胞、记忆T细胞和未致敏T细胞亚群比例都无明显变化、炎症高峰期AA大鼠脾脏总T细胞、记忆T细胞和未致敏T细胞亚群比例明显升高；Th17细胞亚群比例在炎症初期和高峰期都明显升高。结论AA大鼠的T细胞亚群在炎症初期和高峰期出现不同的变化特点；在大鼠AA不仅有关节局部的病理表现，且全身主要脏器组织均有受累。
作者：孙晓静；徐澍；贾晓益；魏芳；杨雪枝；常艳；魏伟 刊期： 2015年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
