赵其辉；邱青朝；贺修胜；胡波；罗桥；李常应；刘阳春
目的 研究血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响.方法 体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和厄贝沙坦干预,采用RT-PCR及Western blot法分别检测CTGF和MT1-MMP的mRNA及蛋白的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量.结果 与对照组相比,高糖组各时间点系膜细胞CTGF表达明显上调,Ⅳ型胶原的分泌增加,且二者随时间持续增高;而MT1-MMP的表达则随时间呈明显下降趋势.厄贝沙坦能够抑制高糖引起的上述变化.结果 高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加,抑制MT1-MMP的表达.厄贝沙坦抑制肾小球系膜细胞基质分泌的作用可能部分通过抑制CTGF,增加MT1-MMP的表达而实现.
作者：姚芳；闫喆；史永红；郝军；段惠军 刊期： 2009年第04期
目的 构建大鼠的热休克蛋白27 (heat shock protein 27, HSP27)RNA干扰慢病毒载体.方法 设计并合成3对互补针对大鼠HSP27 mRNA的oligoDNA片段.磷酸化和退火后,分别克隆入pSUPER-basic质粒载体,获重组的pSUPER-HSP27-oligoDNA.将其中表达shRNA的结构酶切插入慢病毒转移质粒pNL-IRES2-EGFP,产生pNL-HSP27-IRES2-EGFP,在293T细胞中与VSVG、pHelper包装产生慢病毒.48 h后收集上清液,离心过滤后进行病毒滴度测定.用构建正确的慢病毒质粒载体感染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),检测干扰效果.结果 酶切和测序两种方法结果证明3种质粒载体的插入序列完全正确,慢病毒载体构建成功并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为3.12×109 fu·L-1.重组慢病毒质粒pNL-HSP27-IRES2-EGFP-1的RNA干扰效率高,为0.771.结果 成功构建靶向大鼠HSP27基因RNAi慢病毒载体.为进一步研究HSP27功能和用慢病毒进行基因治疗奠定基础.
作者：黄捷；谢良地；许昌声；王华军 刊期： 2009年第04期
目的 研究芍药苷(Paeoniflorin,Pae)对重组人白细胞介素1α(rhIL-1α)诱导的人成纤维样滑膜细胞(FLS)功能的影响.方法 采用组织块培养法分离培养正常人FLS,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测FLS的增殖能力,放射免疫法(RIA)检测FLS产生的TNF-α含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测FLS产生的PGE2和cAMP水平.结果 在rhIL-1α (0.01、0.1、1、10、100 μg·L-1)的刺激下FLS增殖能力增强,产生的TNF-α和PGE2水平均不同程度升高,cAMP水平下降.Pae(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4 mol·L-1)体外作用可不同程度抑制由rhIL-1α诱导的FLS增殖,降低FLS产生的TNF-α和PGE2水平,升高cAMP水平.结果 rhIL-1α体外刺激可以促进正常人FLS的增殖和分泌功能 ;Pae可以逆转rhIL-1α对人FLS功能的影响.
作者：郭晓蓉；戴杏；张玲玲；魏伟 刊期： 2009年第04期
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤(MCAO)模型,缺血前经侧脑室分别给予不同剂量的PACAP,脑缺血2 h/再灌注24 h,测定脑含水量、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.结果 与NS组相比,PACAP各组脑含水量、MDA及NO含量均明显降低, SOD活性有不同程度的提高.结果 PACAP对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有明显的脑保护作用,中、高剂量组效果优于低剂量组,其机制可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关.
作者：唐黎黎；史秀丽；李光武；傅佳 刊期： 2009年第04期
目的 探讨槲皮素和补骨脂素的雌激素作用以及调控雌激素受体亚型表达的作用机制.方法 10 μmol·L-1槲皮素和10 μmol0 μmol·L-1补骨脂L-1补骨脂素分别处理T47D细胞48 h,采用RT-PCR和Western blot方法测定对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D雌激素受体亚型Erα和Erβ表达的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价槲皮素和补骨脂素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系.结果 槲皮素、补骨脂素在10 μmol·L-1可明显诱导T47D细胞Erα mRNA和蛋白表达,而对Erβ表达没有影响.当与ICI182,780共孵育T47D细胞Erα表达被拮抗.结果 槲皮素、补骨脂素产生的促进ER阳性细胞增殖的雌激素样作用是通过增加Erα表达实现的.
作者：沈丽霞；牛建昭；王继峰 刊期： 2009年第04期
细胞外的嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸作用于P2受体产生生物学效应,P2受体分为P2X和P2Y受体.分子和功能学实验研究表明,骨骼系统的成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞有P2X和P2Y受体各种亚型表达.ATP和其他核苷酸释放到骨微环境,与P2受体结合调节骨和软骨的形成和活化,包括生长、发育、重建和修复等各方面的生物学功能.炎症条件下,核苷酸释放增加,刺激破骨细胞的活化和形成.异常的骨重塑可以产生不同的骨骼疾病.P2受体在炎症性骨疾病中起重要作用.
作者：徐昌水；梁尚栋 刊期： 2009年第04期
目的 观察环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂darbufelone对胃癌SGC-7901细胞生长的影响.方法 MTT法测定darbufelone对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;TUNEL法检测细胞凋亡;RT-PCR法分析SGC-7901细胞中5-LOX和COX-2 mRNA的表达;免疫细胞化学法检测胃癌SGC-7901细胞中5-LOX和COX-2蛋白质的表达.结果 darbufelone以时间剂量依赖的方式抑制SGC-7901细胞增殖;1.5×10-5、1.0×10-5和5×10-6 mol·L-1 darbufelone作用72 h后,细胞凋亡率分别为(30.3±2.1)%、(23.0±2.0)%和(15.0±1.5)%,均高于对照组(0.6±0.1)%(P<0.01);1.5×10-5、1.0×10-5和5×10-6 mol·L-1 darbufelone处理胃癌SGC-7901细胞72 h后,5-LOX和COX-2 mRNA 及其蛋白质表达均减少(P<0.05).结果 环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂darbufelone对人胃癌SGC-7901细胞株有抑制增殖、诱导凋亡的作用.
作者：潘敏；刘纯伦；方晓杰；石建华 刊期： 2009年第04期
目的 观察神经调节素B受体激动剂(NMBR)对孕鼠孕龄的影响并探讨其影响机制.方法 建立孕龄准确的孕鼠模型,随机分组,每组10只.妊娠18 d 2、6:00 pm分别腹腔注射NMB( 30、90、150 μg·kg-1)、缩宫素(50 mIU·kg-1)及等体积的溶剂,连续2 d,观察孕鼠孕龄及分娩间隔.妊娠18 d 6、8、10、12:00 am分别给予上述处理,末次给药后4 h取孕鼠子宫平滑肌组织,用NoShift转录因子分析法检测NF-κB P65的DNA结合活性,用半定量RT-PCR和Western blot检测HSP70及IL-6 mRNA和蛋白表达.结果 150 μg·kg-1 NMBR组孕龄明显短于对照组和低剂量组(P<0.05);且NF-κB P65 DNA结合活性、HSP70及IL-6 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05).结果 NMBR激动剂可能通过子宫平滑肌NF-κB P65-HSP70/IL-6通路缩短孕鼠的孕龄.
作者：张卫社；郭海燕；谢庆生；伍招娣；吴新华；梁清华 刊期： 2009年第04期
目的 建立一套完善的中医证候动物模型的评价方法.方法 以2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型为切入点,借助代谢组学平台,通过对空白对照组及模型组大鼠尿液的代谢指纹数据及模型组不同时间段尿液的代谢组进行分析,探讨动物模型的评价方法.结果 通过代谢组学研究,结果表明2,4-二硝基苯酚诱导的动物模型符合中医临床的热病证候表征.结果 代谢组学可用于中医证候动物模型的评价研究.
作者：刘树民；卢芳；王喜军；孙文军；董培良 刊期： 2009年第04期
目的 以Caco-2细胞单层模型,首次研究了蜕皮甾酮的口服吸收与转运特性.方法 采用普通Caco-2细胞模型、表达活性CYP3A4酶的Caco-2细胞模型,分别从AP→BL方向和BL→AP方向研究蜕皮甾酮的摄取和跨膜转运规律.结果 蜕皮甾酮在2种模型中的表观渗透系数(Papp)在0.1×10-6～1×10-6 cm·s-1之间,药物吸收情况为1%～10%;在4 h的实验过程中,4种浓度蜕皮甾酮的ER值均小于1.5.结果 研究表明,蜕皮甾酮主要以被动扩散的方式被细胞摄取和转运,其跨膜转运特性未受到CYP3A4-介导机制的影响.
作者：郑姣妮；龙潇鸿；邱峰；邱宗荫 刊期： 2009年第04期
急性缺血性心脑血管病是临床死亡率、致残率很高的常见病,疗法以溶栓为主,而从天然药物中研发新型溶栓药始终是研究热点.近年发现中药地龙提取物有良好溶栓性,并开发出口服制剂如蚓激酶胶囊(主要成分是纤维蛋白水解酶)用于临床[1,2].地龙冻干粉针(DFDP)是在此基础上研发的新型制剂,以鲜地龙为原料,含有纤维蛋白溶解酶和纤溶酶原激活物,酶活性比蚓激酶活性多两倍以上.该制剂对血液流变学的作用目前尚未见报道,本文主要研究DFDP对家兔血液流变学的作用.
作者：陈军霞；龚冬梅；蔡本志；乔国芬 刊期： 2009年第04期
目的 构建晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end-product, RAGE)胞外段基因的原核表达载体并诱导表达,应用噬菌体展示技术筛选其相互作用蛋白.方法 用RT-PCR方法扩增人RAGE胞外段cDNA,构建于原核表达载体pET14b,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导RAGE胞外段融合蛋白表达,用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化并行Western blot鉴定.以重组RAGE胞外段蛋白为靶分子,进行3轮噬菌体展示环七肽库的筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选分隔良好的噬菌体克隆扩增后进行ELISA鉴定.对获得的阳性噬菌体克隆分别进行扩增、纯化,提取DNA测序后翻译为氨基酸序列,用BLAST软件搜索GenBank中的同源序列.结果 成功构建并表达、纯化了RAGE胞外段融合蛋白.经过3轮筛选后,随机挑取的24个噬菌体克隆中11个可与RAGE胞外段结合.对11个噬菌体测序后用BLAST软件搜索同源序列,得到14个编码蛋白.结果 应用噬菌体展示技术筛选到与RAGE胞外段相互作用的蛋白,为进一步研究其功能和作用机制提供新线索.
作者：丁宁；肖慧；高巨；许立新；佘守章 刊期： 2009年第04期
目的 研究松果菊苷(echinacoside,ECH)对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制.方法 用终浓度为0.4 mmol·L-1的H2O2损伤PC12细胞,测定细胞存活率和Na+,K+-ATP酶的活性;用激光共聚焦法(LSCM)检测线粒体膜电位(MMP);用RT-PCR法检测Bcl-2和p53 mRNA表达量的变化.结果 10 mg·L-1松果菊苷可以提高H2O2损伤的PC12细胞存活率和Na+,K+-ATP酶的活力、升高线粒体膜电位、降低p53 mRNA水平但增高Bcl-2 mRNA水平 (P<0.05或P<0.01).结果 松果菊苷可保护H2O2诱导的PC12细胞损伤,升高MMP、下调p53 mRNA和上调Bcl-2 mRNA可能是其作用机制.
作者：匡荣；孙意国；邓同乐；郑筱祥 刊期： 2009年第04期
目的 紫杉醇的耐药性由多种因素引起,本文研究乳腺癌细胞中的HER2蛋白水平是否影响细胞对紫杉醇的药物敏感性.方法 以HER2低表达的MCF-7/pcDNA3.1细胞和经稳定转染获得的HER2高表达的MCF-7/HER2细胞为研究对象,MTT方法测定紫杉醇对这两种细胞的生长抑制作用,流式细胞仪测定紫杉醇对细胞周期分布的影响,Annexin V-FITC/PI实验测定紫杉醇诱导的细胞凋亡,两种细胞的裸鼠移植瘤实验测定紫杉醇的抑瘤率.结果 紫杉醇对MCF-7/HER2细胞的IC50值是MCF-7/pcDNA3.1细胞的6.2倍;紫杉醇诱导细胞G2/M期阻滞,且是HER2非依赖性的;0.01、0.1和1.0 μmol·L-1紫杉醇诱导MCF-7/pcDNA3.1细胞凋亡的百分比分别是15.1%±2.1%、21.0%±2.9%和35.7%±3.8%,诱导MCF-7/HER2细胞凋亡的百分比分别是7.5%±1.7%、14.1%±2.3%和24.2%±3.4%,同一浓度的紫杉醇诱导两细胞的凋亡百分比差异有显著性;5、10和20 mg·kg-1的紫杉醇对裸鼠移植MCF-7/pcDNA3.1肿瘤生长抑制率分别是36.9%、58.7%和75.4%,对裸鼠移植MCF-7/HER2肿瘤生长抑制率分别是20.1%、33.3%和67.3%.在相同剂量下紫杉醇对裸鼠移植的两种肿瘤的抑瘤率差异有显著性.结果 HER2蛋白的高表达可降低乳腺癌细胞对紫杉醇的药物敏感性.
作者：师以康；张胜华；黄云虹；邵荣光；甄永苏 刊期： 2009年第04期
晶状体具有良好的透光性与适度的折光性,是一个近乎完美的视觉器官.它来源于表皮外胚叶,由外向内依次为晶状体囊、晶状体上皮、皮质及核,其中晶状体上皮细胞是整个晶状体的生命中枢,不仅分泌Ⅳ型胶原形成外层晶状体囊,并在赤道部衍化为纤维细胞,构成皮质与核;而且提供了晶状体代谢所需的全部能量.在长期高糖环境下,醛糖还原酶被激活,造成大量高渗性物质--山梨醇在细胞内堆积,引起皮质高度吸水膨胀;近年来还发现p-糖蛋白、细胞容积型氯离子通道和水通道蛋白也参与了糖性白内障渗透性膨胀期的发生发展.
作者：冀立霞；申竹芳 刊期： 2009年第04期
目的 观察巯基氧化剂及还原剂对大鼠离体心脏心功能的影响,以探讨巯基氧化剂二酰胺(diamide)及还原剂二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)对心肌活动的调节意义,并观察其对硫化氢的离体心脏灌流效应的影响.方法 应用Langendorff灌流大鼠离体心脏,用生理浓度NaHS(100 μmol·L-1) 持续灌流20 min ,测量心率(HR) 、左室内压差(△LVP=左室收缩压-左室舒张压) 、左室内压变化速率(±dp/dtmax) 、冠脉灌流量(CPF)等指标;分别应用Diamide及DTT预灌流,后给予生理剂量NaHS灌流,观察其是否可以阻断NaHS的效应.结果 生理剂量NaHS持续灌流20 min内,可以明显抑制±dp/dtmax及△LVP(P<0.05) ,而对HR、CPF几乎没有影响.巯基氧化剂二酰胺可以大部分阻断H2S的心脏功能负性调节效应,而经巯基还原剂DTT灌流后,H2S可以发挥负性调节作用.结论内源性H2S可能通过作用于心肌组织蛋白质中Cys-SH位点,产生心肌的负性调节作用.
作者：孙燕；金红芳；魏红玲；张素清；唐朝枢；杜军保 刊期： 2009年第04期
目的 研究恒河猴注射促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(GP38)后体内中和抗体的产生及其对药物暴露水平的影响.方法 恒河猴24只随机分成4组(即对照组、低、中、高剂量组),每组6只,♀♂各半,分别给予生理盐水、50、100、300 μg·kg-1 GP38;采用ELISA法测定GP38及抗体滴度,中和抗体的测定采用IC50法间接测定.结果 恒河猴给药2 wk后产生抗体,具有中和GP38活性的作用;GP38首次静脉注射50、100、300 μg·kg-1时,毒代动力学参数Cmax分别为(866±88)、(1466±113)、(5436±733) μg·L-1,AUC0-t分别为(322±33)、(587±93)、(2201±307) μg·h·L-1,MRT分别为(0.27±0.02)、(0.31±0.02)、(0.40±0.08) h;相同剂量反复给药,第7次(d 14)给药后的毒代动力学参数Cmax分别为(352±136)、(589±372)、(1013±642) μg·L-1,AUC0-t分别为(139±55、322±222)、(962±743) μg·h·L-1,MRT分别为(0.26±0.03)、(0.39±0.08)、(0.68±0.45) h;试验动物毒性反应在给药1～3 wk较严重,之后毒性反应逐渐减弱.结果 恒河猴反复静脉注射GP38,能够产生中和抗体,降低药物的体内暴露水平.
作者：YI Hui；易辉；孙云霞；朱平；彭霞；顾静良；刘存刚；左从林 刊期： 2009年第04期
目的 观察七氟醚预处理对局灶性脑缺血/再灌注后大鼠空间学习与记忆能力的影响.方法 ♂ SD大鼠24只,随机分成假手术(C)组、缺血/再灌注组(I/R)和七氟醚预处理组(S),每组8只.采用线栓法行大脑中动脉阻断前脑血供1 h, 拔出栓线实现再灌注.七氟醚预处理组术前吸入七氟醚1 h(呼气末浓度维持在1.0 MAC).再灌注72 h后利用Morris水迷宫测量术后大鼠空间学习与记忆的能力,用HE染色法测定大鼠海马CA1区锥体细胞数目的 变化.结果 七氟醚预处理组大鼠逃避潜伏期明显短于缺血/再灌注组(P<0.05),在记忆保留实验中七氟醚预处理组大鼠穿越平台次数和平台所在象限探索时间明显多于缺血/再灌注组(P<0.05),海马CA1区的锥体细胞数目七氟醚预处理组也明显多于缺血/再灌注组(P<0.05).结果 1.0 MAC七氟醚预处理1 h可能通过保护CA1区锥体细胞,对局灶性缺血/再灌注大鼠的空间学习与记忆有明显的改善作用.
作者：胡宪文；张野；李云；刘健；李伟彦 刊期： 2009年第04期
目的 研究MS23对不同激动剂所致不同部位血管收缩的对抗作用或舒张作用.方法 大鼠主动脉环和小动脉环的张力舒缩状态分别采用PowerLab和DMT系统记录.结果 MS23浓度依赖性抑制去甲肾上腺(NA)引起的主动脉环收缩,使NA浓度-效应曲线非平行性右移,并抑制大反应,使大效应下降74.7%.MS23和氨茶碱对高钾和NA引起的大鼠主动脉环预收缩均表现出浓度依赖性舒张效应.去内皮和一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对MS23的血管舒张作用无明显影响.小动脉环实验结果为,MS23和氨茶碱浓度依赖性舒张高钾所致大鼠冠状动脉、大脑中动脉、肾动脉和肠系膜动脉环的收缩,此4脏器的小动脉对此二药舒张作用的敏感程度差异均无显著性.结果 MS23对多种刺激引起的血管环收缩具有对抗或舒张作用,对血管来源和刺激剂无明显的选择性.其血管舒张作用与NO产生及血管内皮是否存在无关.
作者：刘宇；张明升；王德锁；刘丹冰；薛文鑫；牛龙刚；梁月琴 刊期： 2009年第04期
目的 研究广西山银花绿原酸体外抗炎效应并探讨其分子机制.方法 分离大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages,PMΦ),MTT比色法分析绿原酸对PMΦ生长活性的影响,LPS长时间刺激PMΦ, 酶联免疫吸附法(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)含量,用PGE2的含量表示COX-2的活性;A23187短时间刺激PMΦ,放射免疫分析法测定培养上清液6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量,以此表示COX-1的活性.结果 绿原酸在31.25～1 000 mg·L-1范围内对细胞无抑制作用;除绿原酸50 mg·L-1组TNF-α含量与LPS刺激组无统计学意义外,其余各浓度组TNF-α、IL-6及PGE2含量与LPS刺激组比较差异有显著性,呈剂量依赖性;绿原酸体外低浓度抑制6-keto-PGF1α生成,高浓度则诱导6-keto-PGF1α生成.结果 绿原酸具有体外抗炎作用.其作用机制可能与抑制TNF-α、IL-6等炎症因子的活化以及影响花生四烯酸(AA)代谢有关.
作者：杨斌；丘岳；王柳萍；张锡流 刊期： 2009年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
