胡宪文；张野；李云；刘健；李伟彦
目的 以Caco-2细胞单层模型,首次研究了蜕皮甾酮的口服吸收与转运特性.方法 采用普通Caco-2细胞模型、表达活性CYP3A4酶的Caco-2细胞模型,分别从AP→BL方向和BL→AP方向研究蜕皮甾酮的摄取和跨膜转运规律.结果 蜕皮甾酮在2种模型中的表观渗透系数(Papp)在0.1×10-6～1×10-6 cm·s-1之间,药物吸收情况为1%～10%;在4 h的实验过程中,4种浓度蜕皮甾酮的ER值均小于1.5.结果 研究表明,蜕皮甾酮主要以被动扩散的方式被细胞摄取和转运,其跨膜转运特性未受到CYP3A4-介导机制的影响.
作者：郑姣妮；龙潇鸿；邱峰；邱宗荫 刊期： 2009年第04期
目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠高脂性脂肪肝的治疗作用.方法 以脂肪乳剂灌胃的方法建立高脂性脂肪肝大鼠模型,造模成功后将高脂性脂肪肝大鼠随机分为EGCG(10、20和40 mg·kg-1)3个剂量治疗组、非诺贝特治疗组(20 mg·kg-1)以及模型对照组.分别观察EGCG对高脂性脂肪肝大鼠的肝重和肝脏系数、血脂水平、肝功能指标以及抗氧化能力的影响;光镜和电镜观察大鼠肝组织脂质变性程度和超微结构的改变.结果 EGCG 10、20、40 mg·kg-1治疗6 wk后,高脂性脂肪肝大鼠肝重和肝脏系数、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平以及肝组织中TC和TG含量明显降低(P<0.05或P<0.01),血清高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平明显升高(P<0.05),肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性明显升高(P<0.05或P<0.01),同时肝组织中丙二醛(MDA)水平明显降低(P<0.05或P<0.01),并且具有一定的剂量依赖趋势.光镜和电镜观察结果表明,给予EGCG的大鼠肝组织脂质变性程度和肝细胞超微结构改变明显减轻(P<0.01).结果 EGCG 10、20、40 mg·kg-1治疗6 wk后,对高脂性脂肪肝大鼠具有较好的治疗作用,其作用机制可能与降低血脂水平和增强机体的抗氧化能力有关.
作者：葛斌；谢梅林；顾振纶；钱培刚；周文轩；郭次仪 刊期： 2009年第04期
血管紧张素Ⅱ作为肾素-血管紧张素系统中的主要效应分子,除了收缩血管,调节血压功能外,还参与肿瘤的发生发展、炎症反应以及血管形成转移,并且发挥重要作用.该文就血管紧张素Ⅱ及其受体在肿瘤中的表达及信号传通路研究进展做一综述.
作者：张艳春；周金培；吴晓明 刊期： 2009年第04期
目的 探讨大鼠急性心肌梗死后心肌内血红素加氧酶-1(HO-1)水平变化及辛伐他汀对HO-1表达的影响.方法 结扎♂ SD大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组)、辛伐他汀(Sim组)和假手术组(Sham组,只穿线不结扎).Sim组以辛伐他汀40 mg·kg-1·d-1灌胃,MI组和Sham组以等体积生理盐水灌胃.术后24 h、7 d、28 d处死动物,RT-PCR及Western bolt测定心肌非梗死区HO-1 mRNA和蛋白表达水平,并测非梗死区心肌超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果 HO-1 mRNA和蛋白表达水平均在心梗后24 h开始升高,7 d达峰,28 d恢复至基线水平.3个时间点MI组上述指标均高于Sham组;术后7 d和28 d Sim组上述指标均高于MI组(P<0.05).随HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD活性升高,MDA含量降低.结果 心肌内HO-1水平在急性心肌梗死后28 d内呈现动态变化.辛伐他汀可诱导HO-1表达,发挥抗氧化损伤的心脏保护作用.
作者：陈泓颖；覃数；向睿；张冬颖 刊期： 2009年第04期
目的 建立一套完善的中医证候动物模型的评价方法.方法 以2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型为切入点,借助代谢组学平台,通过对空白对照组及模型组大鼠尿液的代谢指纹数据及模型组不同时间段尿液的代谢组进行分析,探讨动物模型的评价方法.结果 通过代谢组学研究,结果表明2,4-二硝基苯酚诱导的动物模型符合中医临床的热病证候表征.结果 代谢组学可用于中医证候动物模型的评价研究.
作者：刘树民；卢芳；王喜军；孙文军；董培良 刊期： 2009年第04期
目的 应用前期比较蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定.方法 采用MTT法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;使用流式细胞仪,分析50 mg·L-1 DADS对SW480细胞的周期分布的影响;运用Western blot方法,分析50 mg·L-1 DADS处理SW480细胞系后泛肽和FKBP的表达水平.结果 MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞系生长增殖,呈浓度和时间依赖性,SW480细胞系经不同浓度DADS处理后,生长增殖速度明显减慢.流式细胞仪分析结果显示,50 mg·L-1 DADS将SW480细胞阻滞在G2/M期.应用Western blot分析结果显示,50 mg·L-1 DADS处理SW480细胞48 h,泛肽表达较对照组增强,而FKBP的表达明显降低,差异均为2倍以上.结果 DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与泛肽表达上调,FKBP表达下调,将细胞阻滞在G2/M期有关.
作者：赵其辉；邱青朝；贺修胜；胡波；罗桥；李常应；刘阳春 刊期： 2009年第04期
目的 探讨槲皮素和补骨脂素的雌激素作用以及调控雌激素受体亚型表达的作用机制.方法 10 μmol·L-1槲皮素和10 μmol0 μmol·L-1补骨脂L-1补骨脂素分别处理T47D细胞48 h,采用RT-PCR和Western blot方法测定对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D雌激素受体亚型Erα和Erβ表达的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价槲皮素和补骨脂素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系.结果 槲皮素、补骨脂素在10 μmol·L-1可明显诱导T47D细胞Erα mRNA和蛋白表达,而对Erβ表达没有影响.当与ICI182,780共孵育T47D细胞Erα表达被拮抗.结果 槲皮素、补骨脂素产生的促进ER阳性细胞增殖的雌激素样作用是通过增加Erα表达实现的.
作者：沈丽霞；牛建昭；王继峰 刊期： 2009年第04期
急性缺血性心脑血管病是临床死亡率、致残率很高的常见病,疗法以溶栓为主,而从天然药物中研发新型溶栓药始终是研究热点.近年发现中药地龙提取物有良好溶栓性,并开发出口服制剂如蚓激酶胶囊(主要成分是纤维蛋白水解酶)用于临床[1,2].地龙冻干粉针(DFDP)是在此基础上研发的新型制剂,以鲜地龙为原料,含有纤维蛋白溶解酶和纤溶酶原激活物,酶活性比蚓激酶活性多两倍以上.该制剂对血液流变学的作用目前尚未见报道,本文主要研究DFDP对家兔血液流变学的作用.
作者：陈军霞；龚冬梅；蔡本志；乔国芬 刊期： 2009年第04期
目的 通过研究丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞MMP-9 mRNA及细胞因子表达的影响,探讨丹皮酚抗皮肤炎症的可能机制.方法 采用RT-PCR法考察正常人真皮成纤维细胞中MMP-9 mRNA表达情况以及丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞MMP-9 mRNA表达的影响.采用ELISA法测定丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞表达IL-1β、IL-6及IL-8的影响.结果 MMP-9在正常真皮成纤维细胞上表达极弱,TNF-α可以诱导MMP-9 mRNA的表达,丹皮酚可以抑制TNF-α诱导引起的MMP-9 mRNA表达的上调.成纤维细胞可分泌少量的IL-1β、IL-6及IL-8,TNF-α可以明显增加成纤维细胞IL-1β和IL-8的分泌量,丹皮酚可以抑制TNF-α诱导的IL-1β和IL-8的产生,但对IL-6的分泌无影响.结果 丹皮酚可以抑制TNF-α诱导真皮成纤维细胞引起的MMP-9 mRNA及炎症因子IL-1β和IL-8表达水平的上调.
作者：王玫；刘继勇；韩盈；童晓霞；胡晋红 刊期： 2009年第04期
目的 研究芍药苷(Paeoniflorin,Pae)对重组人白细胞介素1α(rhIL-1α)诱导的人成纤维样滑膜细胞(FLS)功能的影响.方法 采用组织块培养法分离培养正常人FLS,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测FLS的增殖能力,放射免疫法(RIA)检测FLS产生的TNF-α含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测FLS产生的PGE2和cAMP水平.结果 在rhIL-1α (0.01、0.1、1、10、100 μg·L-1)的刺激下FLS增殖能力增强,产生的TNF-α和PGE2水平均不同程度升高,cAMP水平下降.Pae(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4 mol·L-1)体外作用可不同程度抑制由rhIL-1α诱导的FLS增殖,降低FLS产生的TNF-α和PGE2水平,升高cAMP水平.结果 rhIL-1α体外刺激可以促进正常人FLS的增殖和分泌功能 ;Pae可以逆转rhIL-1α对人FLS功能的影响.
作者：郭晓蓉；戴杏；张玲玲；魏伟 刊期： 2009年第04期
目的 基因工程方法建立人醛糖还原酶基因(AR)的蛋白分子模型,并将该模型应用于中草药AR抑制剂的初步筛选.方法 将含基因AR及融合基因AR::FP的重组质粒pcDNA3.1/myc-His-AR及pcDNA3.1/myc-His-AG瞬时转染HEK293细胞,分别命名为HAR、HAG细胞株.通过荧光显微镜观察AR::FP的绿色荧光直接判断转染效果及估计基因AR的表达;Western blot、紫外分光光度法检测AR蛋白表达及AR酶活性.应用此HAR模型对黄芩苷等5种中草药进行初步筛选,并与经典AR抑制剂Sorbinil、Zopolrestat的抑制效果比较.结果 GFP绿色荧光表达丰富,表明质粒转染效率较高;Western blot和紫外分光光度法显示:转染后HEK293细胞中AR蛋白表达量高,AR酶活性强(空白对照的2.5倍).AR抑制剂筛选实验揭示,黄芩苷、虎杖苷、蕨麻多糖JM等中草药表现出与Sorbinil相近的AR抑制活性.结果 AR的蛋白分子模型成功建立,此模型可得到较大量高活性AR酶蛋白,并可应用于AR抑制剂的初步稳定筛选;黄芩苷、虎杖苷、蕨麻多糖JM等中草药显示出潜在的AR抑制活性.
作者：杜明梅；刘静；翟冰；刘建伟；杨华；张志华；易红；叶玲 刊期： 2009年第04期
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤(MCAO)模型,缺血前经侧脑室分别给予不同剂量的PACAP,脑缺血2 h/再灌注24 h,测定脑含水量、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.结果 与NS组相比,PACAP各组脑含水量、MDA及NO含量均明显降低, SOD活性有不同程度的提高.结果 PACAP对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有明显的脑保护作用,中、高剂量组效果优于低剂量组,其机制可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关.
作者：唐黎黎；史秀丽；李光武；傅佳 刊期： 2009年第04期
目的 构建大鼠的热休克蛋白27 (heat shock protein 27, HSP27)RNA干扰慢病毒载体.方法 设计并合成3对互补针对大鼠HSP27 mRNA的oligoDNA片段.磷酸化和退火后,分别克隆入pSUPER-basic质粒载体,获重组的pSUPER-HSP27-oligoDNA.将其中表达shRNA的结构酶切插入慢病毒转移质粒pNL-IRES2-EGFP,产生pNL-HSP27-IRES2-EGFP,在293T细胞中与VSVG、pHelper包装产生慢病毒.48 h后收集上清液,离心过滤后进行病毒滴度测定.用构建正确的慢病毒质粒载体感染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),检测干扰效果.结果 酶切和测序两种方法结果证明3种质粒载体的插入序列完全正确,慢病毒载体构建成功并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为3.12×109 fu·L-1.重组慢病毒质粒pNL-HSP27-IRES2-EGFP-1的RNA干扰效率高,为0.771.结果 成功构建靶向大鼠HSP27基因RNAi慢病毒载体.为进一步研究HSP27功能和用慢病毒进行基因治疗奠定基础.
作者：黄捷；谢良地；许昌声；王华军 刊期： 2009年第04期
拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase, Topo)参与DNA复制、转录、重组、修复等所有关键的细胞核内过程,是抗肿瘤研究的重要靶点,以Topo Ⅰ为靶点的药物在肿瘤化疗中被广泛应用.目前临床使用或处于临床前研究的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂主要分为喜树碱类和非喜树碱类化合物.该文主要介绍了近年来Topo Ⅰ抑制剂研发领域的新进展和发展趋势,并就近年来涌现出的一些新的Topo Ⅰ抑制剂的抗肿瘤活性和药理学特性做一总结.
作者：谭慧心 刊期： 2009年第04期
民族药红活麻为分布于湖北恩施自治州、宜昌、神农架、襄樊等地市的以治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)为主的习用药材,又名蛆儿麻(恩施、神农架)、活麻草(恩施)、蛇麻草(宜昌、神农架),主要来源于荨麻科艾麻属植物珠芽艾麻Laportea bulbifera (Sieb et Zucc)Wedd的干燥根.鄂西民族医常用于治疗风湿关节痛、跌打损伤、营养不良性水肿,效果显著[1].目前对它的研究仅限于生药鉴定方面[2],基于红活麻民间良好的治疗价值及其潜在的开发应用前景,本实验拟进一步探讨其提取物的镇痛抗炎和免疫抑制活性,以逐步阐明民族药红活麻治疗类风湿关节炎的物质基础和作用机制.
作者：苏志强；赵增宇；谢胜男；侯文睿；陶恩；向明 刊期： 2009年第04期
目的 紫杉醇的耐药性由多种因素引起,本文研究乳腺癌细胞中的HER2蛋白水平是否影响细胞对紫杉醇的药物敏感性.方法 以HER2低表达的MCF-7/pcDNA3.1细胞和经稳定转染获得的HER2高表达的MCF-7/HER2细胞为研究对象,MTT方法测定紫杉醇对这两种细胞的生长抑制作用,流式细胞仪测定紫杉醇对细胞周期分布的影响,Annexin V-FITC/PI实验测定紫杉醇诱导的细胞凋亡,两种细胞的裸鼠移植瘤实验测定紫杉醇的抑瘤率.结果 紫杉醇对MCF-7/HER2细胞的IC50值是MCF-7/pcDNA3.1细胞的6.2倍;紫杉醇诱导细胞G2/M期阻滞,且是HER2非依赖性的;0.01、0.1和1.0 μmol·L-1紫杉醇诱导MCF-7/pcDNA3.1细胞凋亡的百分比分别是15.1%±2.1%、21.0%±2.9%和35.7%±3.8%,诱导MCF-7/HER2细胞凋亡的百分比分别是7.5%±1.7%、14.1%±2.3%和24.2%±3.4%,同一浓度的紫杉醇诱导两细胞的凋亡百分比差异有显著性;5、10和20 mg·kg-1的紫杉醇对裸鼠移植MCF-7/pcDNA3.1肿瘤生长抑制率分别是36.9%、58.7%和75.4%,对裸鼠移植MCF-7/HER2肿瘤生长抑制率分别是20.1%、33.3%和67.3%.在相同剂量下紫杉醇对裸鼠移植的两种肿瘤的抑瘤率差异有显著性.结果 HER2蛋白的高表达可降低乳腺癌细胞对紫杉醇的药物敏感性.
作者：师以康；张胜华；黄云虹；邵荣光；甄永苏 刊期： 2009年第04期
细胞外的嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸作用于P2受体产生生物学效应,P2受体分为P2X和P2Y受体.分子和功能学实验研究表明,骨骼系统的成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞有P2X和P2Y受体各种亚型表达.ATP和其他核苷酸释放到骨微环境,与P2受体结合调节骨和软骨的形成和活化,包括生长、发育、重建和修复等各方面的生物学功能.炎症条件下,核苷酸释放增加,刺激破骨细胞的活化和形成.异常的骨重塑可以产生不同的骨骼疾病.P2受体在炎症性骨疾病中起重要作用.
作者：徐昌水；梁尚栋 刊期： 2009年第04期
目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞上观察埃他卡林(iptakalim,IPT)对异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的影响.方法 采用SD大鼠乳鼠原代心肌细胞培养法,Lowry法测定心肌细胞总蛋白含量;激光共聚焦显微镜观察心肌细胞内游离Ca2+浓度.结果 ①剂量为1×10-5mol·L-1的异丙肾上腺素( isoprenaline,ISO)能有效地诱导心肌细胞肥大;② IPT能剂量依赖性抑制ISO诱导心肌细胞总蛋白含量和心肌细胞游离Ca2+浓度增加.结果 IPT能明显抑制 ISO诱导的心肌细胞总蛋白含量的增加,其机制可能与抑制Ca2+内流有关.
作者：高杉；龙超良；王汝欢；汪海 刊期： 2009年第04期
目的 探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达, 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达.放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量.MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响.结果 ①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调, TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加.②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少.③ MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强.结果 缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的.
作者：王丽晖；段惠军；史永红；刘青娟；刘淑霞 刊期： 2009年第04期
晚期糖基化终产物受体(the receptor for advanced glycation end products,RAGE)属于免疫球蛋白家族.在中枢神经系统,RAGE主要在神经元、小胶质细胞及血管内皮细胞上表达.阿尔采末病(Alzheimers disease,AD)人脑中RAGE的表达可被β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)上调,上调的RAGE进一步促进了AD的发展.神经元、小胶质细胞和血管内皮细胞膜上RAGE和Aβ结合,引起神经元毒性、持久性的炎症反应、血管功能紊乱.对RAGE-Aβ作用机制的深入理解,可为AD的临床治疗提供理论基础.
作者：孔卫娜；安胜军；柴锡庆 刊期： 2009年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
