黄志华；李良东；肖海；黄贤华；曾靖
拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase, Topo)参与DNA复制、转录、重组、修复等所有关键的细胞核内过程,是抗肿瘤研究的重要靶点,以Topo Ⅰ为靶点的药物在肿瘤化疗中被广泛应用.目前临床使用或处于临床前研究的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂主要分为喜树碱类和非喜树碱类化合物.该文主要介绍了近年来Topo Ⅰ抑制剂研发领域的新进展和发展趋势,并就近年来涌现出的一些新的Topo Ⅰ抑制剂的抗肿瘤活性和药理学特性做一总结.
作者：谭慧心 刊期： 2009年第04期
目的 紫杉醇的耐药性由多种因素引起,本文研究乳腺癌细胞中的HER2蛋白水平是否影响细胞对紫杉醇的药物敏感性.方法 以HER2低表达的MCF-7/pcDNA3.1细胞和经稳定转染获得的HER2高表达的MCF-7/HER2细胞为研究对象,MTT方法测定紫杉醇对这两种细胞的生长抑制作用,流式细胞仪测定紫杉醇对细胞周期分布的影响,Annexin V-FITC/PI实验测定紫杉醇诱导的细胞凋亡,两种细胞的裸鼠移植瘤实验测定紫杉醇的抑瘤率.结果 紫杉醇对MCF-7/HER2细胞的IC50值是MCF-7/pcDNA3.1细胞的6.2倍;紫杉醇诱导细胞G2/M期阻滞,且是HER2非依赖性的;0.01、0.1和1.0 μmol·L-1紫杉醇诱导MCF-7/pcDNA3.1细胞凋亡的百分比分别是15.1%±2.1%、21.0%±2.9%和35.7%±3.8%,诱导MCF-7/HER2细胞凋亡的百分比分别是7.5%±1.7%、14.1%±2.3%和24.2%±3.4%,同一浓度的紫杉醇诱导两细胞的凋亡百分比差异有显著性;5、10和20 mg·kg-1的紫杉醇对裸鼠移植MCF-7/pcDNA3.1肿瘤生长抑制率分别是36.9%、58.7%和75.4%,对裸鼠移植MCF-7/HER2肿瘤生长抑制率分别是20.1%、33.3%和67.3%.在相同剂量下紫杉醇对裸鼠移植的两种肿瘤的抑瘤率差异有显著性.结果 HER2蛋白的高表达可降低乳腺癌细胞对紫杉醇的药物敏感性.
作者：师以康；张胜华；黄云虹；邵荣光；甄永苏 刊期： 2009年第04期
血管紧张素Ⅱ作为肾素-血管紧张素系统中的主要效应分子,除了收缩血管,调节血压功能外,还参与肿瘤的发生发展、炎症反应以及血管形成转移,并且发挥重要作用.该文就血管紧张素Ⅱ及其受体在肿瘤中的表达及信号传通路研究进展做一综述.
作者：张艳春；周金培；吴晓明 刊期： 2009年第04期
成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)是近几年发现的一个不依赖胰岛素调节血糖的细胞因子,有望成为治疗2型糖尿病的备选药物.虽然该蛋白近才进入研究人员的视野,但是关于它的分子机制和生物活性正在被快速的揭示.很多蛋白因子和信号通路已被证明参与到FGF-21生物活性当中,令我们对FGF-21的认识不断完善和更新.该文主要阐述FGF-21的作用机制和药物研究的新进展.
作者：王文飞；李校堃；李德山 刊期： 2009年第04期
目的 观察环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂darbufelone对胃癌SGC-7901细胞生长的影响.方法 MTT法测定darbufelone对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;TUNEL法检测细胞凋亡;RT-PCR法分析SGC-7901细胞中5-LOX和COX-2 mRNA的表达;免疫细胞化学法检测胃癌SGC-7901细胞中5-LOX和COX-2蛋白质的表达.结果 darbufelone以时间剂量依赖的方式抑制SGC-7901细胞增殖;1.5×10-5、1.0×10-5和5×10-6 mol·L-1 darbufelone作用72 h后,细胞凋亡率分别为(30.3±2.1)%、(23.0±2.0)%和(15.0±1.5)%,均高于对照组(0.6±0.1)%(P<0.01);1.5×10-5、1.0×10-5和5×10-6 mol·L-1 darbufelone处理胃癌SGC-7901细胞72 h后,5-LOX和COX-2 mRNA 及其蛋白质表达均减少(P<0.05).结果 环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂darbufelone对人胃癌SGC-7901细胞株有抑制增殖、诱导凋亡的作用.
作者：潘敏；刘纯伦；方晓杰；石建华 刊期： 2009年第04期
目的 观察巯基氧化剂及还原剂对大鼠离体心脏心功能的影响,以探讨巯基氧化剂二酰胺(diamide)及还原剂二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)对心肌活动的调节意义,并观察其对硫化氢的离体心脏灌流效应的影响.方法 应用Langendorff灌流大鼠离体心脏,用生理浓度NaHS(100 μmol·L-1) 持续灌流20 min ,测量心率(HR) 、左室内压差(△LVP=左室收缩压-左室舒张压) 、左室内压变化速率(±dp/dtmax) 、冠脉灌流量(CPF)等指标;分别应用Diamide及DTT预灌流,后给予生理剂量NaHS灌流,观察其是否可以阻断NaHS的效应.结果 生理剂量NaHS持续灌流20 min内,可以明显抑制±dp/dtmax及△LVP(P<0.05) ,而对HR、CPF几乎没有影响.巯基氧化剂二酰胺可以大部分阻断H2S的心脏功能负性调节效应,而经巯基还原剂DTT灌流后,H2S可以发挥负性调节作用.结论内源性H2S可能通过作用于心肌组织蛋白质中Cys-SH位点,产生心肌的负性调节作用.
作者：孙燕；金红芳；魏红玲；张素清；唐朝枢；杜军保 刊期： 2009年第04期
目的 构建晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end-product, RAGE)胞外段基因的原核表达载体并诱导表达,应用噬菌体展示技术筛选其相互作用蛋白.方法 用RT-PCR方法扩增人RAGE胞外段cDNA,构建于原核表达载体pET14b,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导RAGE胞外段融合蛋白表达,用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化并行Western blot鉴定.以重组RAGE胞外段蛋白为靶分子,进行3轮噬菌体展示环七肽库的筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选分隔良好的噬菌体克隆扩增后进行ELISA鉴定.对获得的阳性噬菌体克隆分别进行扩增、纯化,提取DNA测序后翻译为氨基酸序列,用BLAST软件搜索GenBank中的同源序列.结果 成功构建并表达、纯化了RAGE胞外段融合蛋白.经过3轮筛选后,随机挑取的24个噬菌体克隆中11个可与RAGE胞外段结合.对11个噬菌体测序后用BLAST软件搜索同源序列,得到14个编码蛋白.结果 应用噬菌体展示技术筛选到与RAGE胞外段相互作用的蛋白,为进一步研究其功能和作用机制提供新线索.
作者：丁宁；肖慧；高巨；许立新；佘守章 刊期： 2009年第04期
目的 探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达, 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达.放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量.MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响.结果 ①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调, TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加.②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少.③ MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强.结果 缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的.
作者：王丽晖；段惠军；史永红；刘青娟；刘淑霞 刊期： 2009年第04期
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤(MCAO)模型,缺血前经侧脑室分别给予不同剂量的PACAP,脑缺血2 h/再灌注24 h,测定脑含水量、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.结果 与NS组相比,PACAP各组脑含水量、MDA及NO含量均明显降低, SOD活性有不同程度的提高.结果 PACAP对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有明显的脑保护作用,中、高剂量组效果优于低剂量组,其机制可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关.
作者：唐黎黎；史秀丽；李光武；傅佳 刊期： 2009年第04期
目的 研究芍药苷(Paeoniflorin,Pae)对重组人白细胞介素1α(rhIL-1α)诱导的人成纤维样滑膜细胞(FLS)功能的影响.方法 采用组织块培养法分离培养正常人FLS,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测FLS的增殖能力,放射免疫法(RIA)检测FLS产生的TNF-α含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测FLS产生的PGE2和cAMP水平.结果 在rhIL-1α (0.01、0.1、1、10、100 μg·L-1)的刺激下FLS增殖能力增强,产生的TNF-α和PGE2水平均不同程度升高,cAMP水平下降.Pae(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4 mol·L-1)体外作用可不同程度抑制由rhIL-1α诱导的FLS增殖,降低FLS产生的TNF-α和PGE2水平,升高cAMP水平.结果 rhIL-1α体外刺激可以促进正常人FLS的增殖和分泌功能 ;Pae可以逆转rhIL-1α对人FLS功能的影响.
作者：郭晓蓉；戴杏；张玲玲；魏伟 刊期： 2009年第04期
目的 建立一套完善的中医证候动物模型的评价方法.方法 以2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型为切入点,借助代谢组学平台,通过对空白对照组及模型组大鼠尿液的代谢指纹数据及模型组不同时间段尿液的代谢组进行分析,探讨动物模型的评价方法.结果 通过代谢组学研究,结果表明2,4-二硝基苯酚诱导的动物模型符合中医临床的热病证候表征.结果 代谢组学可用于中医证候动物模型的评价研究.
作者：刘树民；卢芳；王喜军；孙文军；董培良 刊期： 2009年第04期
晶状体具有良好的透光性与适度的折光性,是一个近乎完美的视觉器官.它来源于表皮外胚叶,由外向内依次为晶状体囊、晶状体上皮、皮质及核,其中晶状体上皮细胞是整个晶状体的生命中枢,不仅分泌Ⅳ型胶原形成外层晶状体囊,并在赤道部衍化为纤维细胞,构成皮质与核;而且提供了晶状体代谢所需的全部能量.在长期高糖环境下,醛糖还原酶被激活,造成大量高渗性物质--山梨醇在细胞内堆积,引起皮质高度吸水膨胀;近年来还发现p-糖蛋白、细胞容积型氯离子通道和水通道蛋白也参与了糖性白内障渗透性膨胀期的发生发展.
作者：冀立霞；申竹芳 刊期： 2009年第04期
目的 观察神经调节素B受体激动剂(NMBR)对孕鼠孕龄的影响并探讨其影响机制.方法 建立孕龄准确的孕鼠模型,随机分组,每组10只.妊娠18 d 2、6:00 pm分别腹腔注射NMB( 30、90、150 μg·kg-1)、缩宫素(50 mIU·kg-1)及等体积的溶剂,连续2 d,观察孕鼠孕龄及分娩间隔.妊娠18 d 6、8、10、12:00 am分别给予上述处理,末次给药后4 h取孕鼠子宫平滑肌组织,用NoShift转录因子分析法检测NF-κB P65的DNA结合活性,用半定量RT-PCR和Western blot检测HSP70及IL-6 mRNA和蛋白表达.结果 150 μg·kg-1 NMBR组孕龄明显短于对照组和低剂量组(P<0.05);且NF-κB P65 DNA结合活性、HSP70及IL-6 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05).结果 NMBR激动剂可能通过子宫平滑肌NF-κB P65-HSP70/IL-6通路缩短孕鼠的孕龄.
作者：张卫社；郭海燕；谢庆生；伍招娣；吴新华；梁清华 刊期： 2009年第04期
目的 通过研究丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞MMP-9 mRNA及细胞因子表达的影响,探讨丹皮酚抗皮肤炎症的可能机制.方法 采用RT-PCR法考察正常人真皮成纤维细胞中MMP-9 mRNA表达情况以及丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞MMP-9 mRNA表达的影响.采用ELISA法测定丹皮酚对TNF-α诱导的真皮成纤维细胞表达IL-1β、IL-6及IL-8的影响.结果 MMP-9在正常真皮成纤维细胞上表达极弱,TNF-α可以诱导MMP-9 mRNA的表达,丹皮酚可以抑制TNF-α诱导引起的MMP-9 mRNA表达的上调.成纤维细胞可分泌少量的IL-1β、IL-6及IL-8,TNF-α可以明显增加成纤维细胞IL-1β和IL-8的分泌量,丹皮酚可以抑制TNF-α诱导的IL-1β和IL-8的产生,但对IL-6的分泌无影响.结果 丹皮酚可以抑制TNF-α诱导真皮成纤维细胞引起的MMP-9 mRNA及炎症因子IL-1β和IL-8表达水平的上调.
作者：王玫；刘继勇；韩盈；童晓霞；胡晋红 刊期： 2009年第04期
癫痫是常见的神经系统变性疾病,其在临床上顽固难治的原因是癫痫敏感性的形成.国内外文献报道[1～4]阿片肽可能是癫痫敏感性形成的机制之一.脑啡肽(enkephalin,ENK)是脑内含量高的阿片肽,广泛存在于所有的脑区.蝎毒是传统的抗癫痫药物,蝎毒耐热蛋白是通过特殊工艺从蝎毒中提取的抗癫痫组分,本工作旨在探讨蝎毒耐热蛋白对抗癫痫敏感性形成的作用及其可能的阿片肽机制.
作者：封艳辉；赵杰；于德钦；张玉梅；殷盛明；吴雪飞；张万琴；孙艺平 刊期： 2009年第04期
目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞上观察埃他卡林(iptakalim,IPT)对异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的影响.方法 采用SD大鼠乳鼠原代心肌细胞培养法,Lowry法测定心肌细胞总蛋白含量;激光共聚焦显微镜观察心肌细胞内游离Ca2+浓度.结果 ①剂量为1×10-5mol·L-1的异丙肾上腺素( isoprenaline,ISO)能有效地诱导心肌细胞肥大;② IPT能剂量依赖性抑制ISO诱导心肌细胞总蛋白含量和心肌细胞游离Ca2+浓度增加.结果 IPT能明显抑制 ISO诱导的心肌细胞总蛋白含量的增加,其机制可能与抑制Ca2+内流有关.
作者：高杉；龙超良；王汝欢；汪海 刊期： 2009年第04期
目的 研究MS23对不同激动剂所致不同部位血管收缩的对抗作用或舒张作用.方法 大鼠主动脉环和小动脉环的张力舒缩状态分别采用PowerLab和DMT系统记录.结果 MS23浓度依赖性抑制去甲肾上腺(NA)引起的主动脉环收缩,使NA浓度-效应曲线非平行性右移,并抑制大反应,使大效应下降74.7%.MS23和氨茶碱对高钾和NA引起的大鼠主动脉环预收缩均表现出浓度依赖性舒张效应.去内皮和一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对MS23的血管舒张作用无明显影响.小动脉环实验结果为,MS23和氨茶碱浓度依赖性舒张高钾所致大鼠冠状动脉、大脑中动脉、肾动脉和肠系膜动脉环的收缩,此4脏器的小动脉对此二药舒张作用的敏感程度差异均无显著性.结果 MS23对多种刺激引起的血管环收缩具有对抗或舒张作用,对血管来源和刺激剂无明显的选择性.其血管舒张作用与NO产生及血管内皮是否存在无关.
作者：刘宇；张明升；王德锁；刘丹冰；薛文鑫；牛龙刚；梁月琴 刊期： 2009年第04期
目的 应用前期比较蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定.方法 采用MTT法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;使用流式细胞仪,分析50 mg·L-1 DADS对SW480细胞的周期分布的影响;运用Western blot方法,分析50 mg·L-1 DADS处理SW480细胞系后泛肽和FKBP的表达水平.结果 MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞系生长增殖,呈浓度和时间依赖性,SW480细胞系经不同浓度DADS处理后,生长增殖速度明显减慢.流式细胞仪分析结果显示,50 mg·L-1 DADS将SW480细胞阻滞在G2/M期.应用Western blot分析结果显示,50 mg·L-1 DADS处理SW480细胞48 h,泛肽表达较对照组增强,而FKBP的表达明显降低,差异均为2倍以上.结果 DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与泛肽表达上调,FKBP表达下调,将细胞阻滞在G2/M期有关.
作者：赵其辉；邱青朝；贺修胜；胡波；罗桥；李常应；刘阳春 刊期： 2009年第04期
目的 研究血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响.方法 体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和厄贝沙坦干预,采用RT-PCR及Western blot法分别检测CTGF和MT1-MMP的mRNA及蛋白的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量.结果 与对照组相比,高糖组各时间点系膜细胞CTGF表达明显上调,Ⅳ型胶原的分泌增加,且二者随时间持续增高;而MT1-MMP的表达则随时间呈明显下降趋势.厄贝沙坦能够抑制高糖引起的上述变化.结果 高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加,抑制MT1-MMP的表达.厄贝沙坦抑制肾小球系膜细胞基质分泌的作用可能部分通过抑制CTGF,增加MT1-MMP的表达而实现.
作者：姚芳；闫喆；史永红；郝军；段惠军 刊期： 2009年第04期
目的 研究恒河猴注射促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(GP38)后体内中和抗体的产生及其对药物暴露水平的影响.方法 恒河猴24只随机分成4组(即对照组、低、中、高剂量组),每组6只,♀♂各半,分别给予生理盐水、50、100、300 μg·kg-1 GP38;采用ELISA法测定GP38及抗体滴度,中和抗体的测定采用IC50法间接测定.结果 恒河猴给药2 wk后产生抗体,具有中和GP38活性的作用;GP38首次静脉注射50、100、300 μg·kg-1时,毒代动力学参数Cmax分别为(866±88)、(1466±113)、(5436±733) μg·L-1,AUC0-t分别为(322±33)、(587±93)、(2201±307) μg·h·L-1,MRT分别为(0.27±0.02)、(0.31±0.02)、(0.40±0.08) h;相同剂量反复给药,第7次(d 14)给药后的毒代动力学参数Cmax分别为(352±136)、(589±372)、(1013±642) μg·L-1,AUC0-t分别为(139±55、322±222)、(962±743) μg·h·L-1,MRT分别为(0.26±0.03)、(0.39±0.08)、(0.68±0.45) h;试验动物毒性反应在给药1～3 wk较严重,之后毒性反应逐渐减弱.结果 恒河猴反复静脉注射GP38,能够产生中和抗体,降低药物的体内暴露水平.
作者：YI Hui；易辉；孙云霞；朱平；彭霞；顾静良；刘存刚；左从林 刊期： 2009年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
