李景田；唐小卿；陈秀琴；职君利；崔宇；刘微；冯鉴强
目的 观察新型bcl-2反义寡核苷酸F951诱导人白血病细胞凋亡的作用.方法 不同浓度的F951与HL60细胞共培养后,采用流式细胞术,DNA Ladder分析,电镜观察,TdT酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞.结果 5,10,20 μmol·L-1F951分别与HL60细胞共孵育48 h后,线粒体凋亡细胞:未处理组、FNS对照组分别为3.00%、13.57%,F951 3个剂量分别为30.95%、38.08%、52.55%;Caspase活性细胞:未处理组、FNS对照组分别为0.08%、0.14%,F951 3个剂量组分别为43.68%、60.54%、80.37%.凝胶电泳分析:F951处理组可见典型的DNA Ladder,且随着药物浓度的提高诱导DNA Ladder的作用更加明显;TUNEL和电镜检查:未处理组与FNS对照组中仅偶见凋亡细胞, F951各剂量组凋亡细胞常见,且随着药物浓度的提高凋亡细胞增多.结论 F951具有诱导HL60细胞凋亡的作用;F951诱导肿瘤细胞凋亡的作用是通过抑制bcl-2基因,启动细胞凋亡调控通道而实现的.
作者：李东良；吕联煌；林振兴；陈英玉 刊期： 2007年第02期
近40年来,人们对细胞毒性药物治疗胃癌研究较多,也取得了一些进展,但其疗效一直不很理想.与此同时,随着肿瘤生物学的发展,人们对胃癌发病分子基础的研究也取得了长足的进步.目前,已经了解到在肿瘤发生过程中出现了一些基因的改变以及由此而产生的细胞功能的变化,此外也发现了多种癌细胞环境因子通过作用于其受体及信号转导通路而影响肿瘤细胞的功能.越来越丰富的关于胃癌细胞分子生物学等方面的知识,使利用信号转导通路为靶点研究新的抗癌药物成为可能.
作者：王立辉；杨静玉；吴春福 刊期： 2007年第02期
目的 研究二肽Lys-Glu (Vilon)的抗肿瘤活性.方法用液相法人工合成了抗肿瘤二肽Vilon,分子量为275.3.用细胞计数法和MTT法测定Vilon对人肠癌LOVO,人胃癌MKN45和人肝癌QGY7703 3种肿瘤细胞生长的抑制作用,以及对人体正常细胞生长的影响;并对其进行了体内实验.结果 Vilon对体外培养的LOVO,MKN45和QGY7703细胞具有剂量依赖性抑制作用,但对人正常白细胞无明显抑制作用.体内抑瘤实验表明,Vilon对小鼠肝癌H22的生长有抑制作用,有效剂量为15 mg·kg-1,当使用高剂量30 mg·kg-1时,对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的抑瘤率达0.60以上,且具有剂效关系.结论 Vilon具有明显的体外、体内抗肿瘤活性.
作者：谭婵媛；张昕；姜银凤；张冬梅；陈钧辉 刊期： 2007年第02期
目的 观察肉桂酸对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用.方法 肉桂酸(1、2和3 mmol·L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期、TRAP-银染法测定端粒酶活性.结果 肉桂酸作用24、48、72和96 h后胃腺癌细胞生长均明显受抑制,作用48 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变.端粒酶活性明显受到抑制.细胞集落形成率明显下降(P＜0.05).结论 肉桂酸对胃腺癌细胞有诱导分化作用.
作者：卢娟；汪晖；卢方安 刊期： 2007年第02期
目的 观察15d-PGJ2上调过氧化质体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达以及对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖凋亡的影响.方法 体外培养HSC-T6细胞, 取对数生长期的细胞,应用1、2、3 μmol·L-1不同浓度的PPARγ激动剂15d-PGJ2作用24 h,同时以不加药物只加无血清培养基做为对照组,24 h后应用RT-PCR的方法观察分析各组间肝星状细胞PPARγ mRNA表达的变化,Western blot检测相应的胞质内NF-κB抑制蛋白表达.MTT检测HSC增殖,吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期.结果 经15d-PGJ2处理的HSC细胞中PPARγ mRNA表达比例上调;胞质内NF-κB蛋白表达明显抑制.MTT结果显示不同浓度的15d-PGJ2对HSC-T6细胞的增殖均有抑制作用,以2 μmol·L-1组为明显;吖橙啶染色显示经PPARγ激动剂处理组凋亡细胞数明显增多,流式细胞仪结果显示15d-PGJ2处理组细胞产生了G1期阻滞作用.结论 15d-PGJ2能够上调PPARγ表达并抑制HSC-T6增殖及诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与抑制NF-κB活性有关.
作者：康谊；王天才；李修岭；杨玉秀；尚佳 刊期： 2007年第02期
目前临床上对缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemia entepholopathy,HIE)的治疗尚无特效疗法,孕酮(progesterone,PROG)在神经系统合成和分泌并具有活性作用,研究表明[1、2]外源性PROG处理脑缺血或挫伤的大鼠,可降低脑组织的Na+、K+、Ca2+含量,减轻脑水肿,促进认知能力的恢复.
作者：李东亮；王小引；韩华；赵红岗 刊期： 2007年第02期
目的 建立大鼠基底动脉平滑肌细胞培养的方法.方法取大鼠基底动脉,剪成约0.2 mm的小段,用含胶原酶Ⅱ型(0.5 g·L-1)、弹性酶(0.15 g·L-1)、透明质酸酶Ⅳ-S型(0.5 g·L-1)及脱氧核糖核酸酶Ⅰ型(0.1 g·L-1)的消化液在37℃消化1 h.而后用含20% FCS的DMEM/F12进行培养.结果 原代培养3 d后细胞可少量贴壁,1 wk左右可传代,细胞传代成活率达97%.光镜和免疫细胞化学染色检测第4代细胞纯度为98%.结论 与目前国内培养脑血管平滑肌细胞的方法相比,本方法操作简单,培养周期短,细胞纯度高.
作者：吕平；申海涛；张浩；王永利 刊期： 2007年第02期
各种病因所致的肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)是临床的常见病症,它是慢性阻塞性肺疾患(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)发展成肺心病的中心环节[1].PAH的发病机制相当复杂,但COPD所致的PAH主要是由于肺血管阻力增加所引起[2].
作者：曹禹；李智；封瑞 刊期： 2007年第02期
目的 探讨亚硒酸钠对沙土鼠海马CA1区神经元缺血/再灌注损伤的影响.方法 采用夹闭双侧颈动脉法制备沙土鼠前脑缺血/再灌注模型,双重染色,电镜下观察各组海马CA1区神经元的超微结构变化.TUNEL染色光镜下观察和计数凋亡神经元,计算凋亡密度.结果 硒处理组沙土鼠脑缺血/再灌注后,神经元超微结构的病理形态损伤减轻,凋亡细胞减少,与对照组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的海马CA1区神经元超微结构及凋亡细胞具有保护作用.
作者：胡冬梅；李义召；王海涛；张秋玲；史中沂；张敬军；黄庆玉；聂斌 刊期： 2007年第02期
氯化两面针碱为中药两面针的提取物,已有的研究主要涉及含量测定及其对心血管方面的作用,而对其抗癌作用研究较少.本实验中,我们对氯化两面针碱促进肺癌SPC-A-1,舌癌Tca8113两种肿瘤细胞株凋亡作用进行了研究.
作者：秦三海；刘华钢；王博龙；杨斌 刊期： 2007年第02期
目的 探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)配体罗格列酮对肺腺癌A549细胞粘附分子整合素β1表达的影响及其作用机制.方法 用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)和间接免疫荧光标记流式细胞仪分别测定罗格列酮对A549细胞PPARγ、整合素β1mRNA和蛋白表达的影响.结果 罗格列酮激动A549细胞PPARγ的表达,抑制整合素β1的mRNA及蛋白的表达,呈剂量依赖关系.用PPARγ阻断剂GW9662,可取消其对整合素β1的抑制作用(P＜0.05), 用丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路ERK抑制剂PD98059,可取消PPARγ对整合素β1的表达调控(P＜0.05).结论 罗格列酮活化PPARγ抑制整合素β1的表达,丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路参与此过程.
作者：杨洁；庄英帜；曹建国 刊期： 2007年第02期
T型钙通道广泛分布于心血管,神经和内分泌等系统,目前已成为药物靶点研究的热点.近年来编码T型钙通道的基因已被确定,它的重要功能也得到认识.许多药物可以非特异性的阻断T型钙通道.文章从分子结构、分布、功能、调控及作用药物等方面对T型钙通道目前的研究作一综述.
作者：张志国；张庆柱 刊期： 2007年第02期
目的 观察葛根素对视网膜色素变性rd小鼠外核层细胞和视网膜光感受器外段的病理、超微结构、凋亡和Bcl-2表达的影响,探讨葛根素对rd小鼠的干预作用和干预机制.方法 rd新生小鼠随机分为2组,实验组和对照组.实验组小鼠从出生时腹腔注射葛根素80 mg·kg-1,每天2次,至生后35 d,对照组同时注射等量生理盐水.分别在用药后当日和3、7、14、21、28、35 d取眼球,固定后,常规病理和电镜观察.用TUNEL方法检测视网膜光感受器细胞的凋亡,用免疫组化方法测定Bcl-2在视网膜的表达.结果 病理结果显示,经葛根素治疗后14、21、28、35 d,rd小鼠光感受器细胞层数与未用药的对照组相比较明显增加,P＜0.01.电镜结果显示,葛根素可减缓rd小鼠光感受器细胞及其外段盘膜部位线粒体的病变,减少盘膜和外界膜的破坏.rd小鼠经葛根素药物治疗后d 7、14、21、28、35,光感受器细胞的凋亡率比未用药的对照组明显减少,P＜0.01；d 3、7、14、21、28、35,Bcl-2在视网膜外核层及光感受器细胞外段的表达明显增强,P＜0.05或P＜0.01.结论 葛根素可延缓rd小鼠视网膜外核层细胞和视网膜光感受器外段损伤.
作者：邓新国；张清炯；何梅凤；黎仕强；肖学珊；胡世兴 刊期： 2007年第02期
目的 研究缺氧对培养大鼠视网膜神经元的影响及促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)预处理的保护作用.方法 取体外原代培养3 d的大鼠视网膜神经元, 利用1 mmol·L-1的连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖持续6 h,导致神经元缺氧性损伤.采用免疫组化染色技术检测了EPO受体在原代培养视网膜神经元的表达,乳酸脱氢酶(LDH) 释放率作为评价损伤的指标, TUNEL染色检测视网膜神经元的凋亡,并进行形态学观察.结果 原代培养的大鼠视网膜神经元正常下可见EPOR的弱阳性表达,表达部位定位于神经元的胞体和突起,缺氧后EPOR的表达明显增加;神经元LDH释放率和凋亡百分率增加;在损伤前加入浓度2.5～40 kU·L-1的rhEPO均可有效抑制LDH释放(P＜0.05).TUNEL结果显示rhEPO预处理能抑制神经元的凋亡,明显改善细胞缺氧性损伤的形态学变化.结论 EPO预处理对神经元的缺氧损伤具有保护作用,且具有浓度和时间依赖性.
作者：刘夫玲；牛膺筠；王红云；赵颖；曲虹 刊期： 2007年第02期
目的 观察鞘内注射T型钙通道(Cav 3.0)反义寡聚核苷酸对慢性背根节压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)大鼠痛阈的影响,初步探讨脊髓T型钙通道在神经病理性疼痛形成中的作用.方法 鞘内置管♂SD大鼠32只,随机分为4组(n＝8):CCD+NS组、CCD+Cav 3.0反义寡聚核苷酸组(CCD+Cav 3.0-AS)、CCD+Cav 3.0错义寡聚核苷酸组(CCD+Cav 3.0-MM)、假手术(sham)+NS组.各组大鼠在CCD或sham术后d 1始连续4 d每天2次鞘内分别注射12.5μg,容积均为10 μl的Cav 3.0-AS、Cav 3.0-MM或NS 10 μl,分别观察手术后1～14 d大鼠机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL). 结果 鞘内注射Cav 3.0反义寡聚核苷酸能延缓CCD大鼠痛敏的形成,在CCD术后d 8～9才形成与CCD+NS组类似的痛敏,而鞘内注射Cav 3.0错义寡聚核苷酸则与CCD+NS组差异无统计学意义.结论 脊髓T型钙通道参与神经病理性疼痛的形成,抑制脊髓T型钙通道基因的表达具有疼痛治疗作用.
作者：李张军；曾因明；方志源；陈志新；文先杰 刊期： 2007年第02期
目的 研究白藜芦醇( resveratrol ,RES ) 对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响.方法 酶解法分离单个豚鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录白藜芦醇对豚鼠单个心室细胞L型钙通道电流(ICa-L)的影响.结果 不同浓度的RES明显抑制ICa-L, 1、10、100 μmol·L-1L的RES使其峰电流密度从(12.96±1.48) pA/pF减少到(11.36±1.59)、(9.96±1.51)和(7.77±0.68) pA/pF(n=6,P＜0.01 ),冲洗后可恢复至(11.85±0.83) pA/pF.RES可使ICa-L的I-U关系曲线上移,其形状和峰值电压保持不变;RES还可使通道的激活曲线右移,但失活曲线和失活恢复时间无改变.结论 白藜芦醇通过延长L型钙通道激活过程而明显抑制ICa-L,减少细胞外的钙离子内流,延长有效不应期,从而发挥抗心律失常作用.
作者：刘妍妍；白云龙；王涛；杜娟；张妍；李宝馨；吕延杰；杨宝峰 刊期： 2007年第02期
目的 研究橙皮苷(hesperidin,HDN)对小鼠免疫调节的作用.方法 腹腔注射环磷酰胺(Cy)复制免疫功能低下的动物模型,测定胸腺、脾脏重量计算脏器指数;碳廓清法测定网状内皮系统吞噬功能;分光光度法测定血清溶血素IgM、IgG(HCIgM、HCIgG);绵羊红细胞(SRBC)的定量溶血测定法(QHS)测定脾溶血空斑形成细胞(PFC);噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应;二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应模型,观察HDN对小鼠迟发型变态反应(DTH)和T淋巴细胞亚群的影响.结果 HDN可提高免疫低下小鼠的脏器指数、碳廓清指数K和吞噬指数α;HDN可以改善免疫抑制小鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应,恢复小鼠DTH和提高CD4+、CD8+细胞数;对特异性HCIgM、HCIgG和PFC无影响.结论 HDN对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有促进作用,对特异性体液免疫反应无影响.
作者：李荣；李俊；胡成穆；张磊；张茜 刊期： 2007年第02期
目的 观察盐酸法舒地尔(hydroxyl fasudil, HF)对犬脑血管痉挛的舒张作用,并采用兔离体胸主动脉环进一步探讨其舒张血管的作用机制.方法经十二指肠给予麦角胺咖啡因片(0.5 mg+50 mg)·kg-1建立犬脑血管痉挛模型,观察给予HF后 2 h内脑血流量、脑血管阻力、股动脉血流量、股动脉血管阻力、心率、收缩压、舒张压及平均动脉压的变化;用离体血管环实验方法观察HF对血管舒缩作用的影响.结果 ①犬脑血管痉挛模型中,HF 1 mg·kg-1给药后脑血管阻力降低,5～120 min脑血流量增加;但对心率、收缩压、舒张压及平均动脉压影响较轻微.②离体血管实验中,HF对甲氧明(methoxamine, Met)及氯化钾(postassium, KCl)引发的收缩均有明显的舒张作用,且作用在去内皮与内皮完整的血管标本之间无差异(P＞0.05).结论 对犬痉挛脑血管HF静脉给药可明显扩张脑血管,降低脑血管阻力,增加脑血流量,对外周股动脉血管亦有扩张作用,但作用较弱.HF的舒血管作用与血管内皮细胞无明显相关,此作用为非内皮依赖性舒张作用.
作者：黄琳；李琴；王维亭；陈蔚江；郭莲军 刊期： 2007年第02期
目的 研究淫羊藿总黄酮对急性分离的大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流(IGly)的调控.方法 在急性分离的大鼠脊髓背角神经元上,采用全细胞膜片钳方法,研究淫羊藿总黄酮对甘氨酸激活的全细胞电流的调控.结果 淫羊藿总黄酮呈浓度依赖性地抑制IGly;淫羊藿总黄酮使甘氨酸的浓度-效应曲线平行右移;淫羊藿总黄酮没有改变甘氨酸受体的离子选择性.结论 淫羊藿总黄酮对甘氨酸介导的反应产生抑制作用可能是由于降低了甘氨酸与其受体的亲和力.
作者：程新萍；朱峰；周可青 刊期： 2007年第02期
目的 研究类叶升麻苷抗鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞损伤,对帕金森病相关蛋白Parkin、α-突触核蛋白(α-Synuclein, α-Syn)表达的影响,探讨类叶升麻苷抗细胞损伤的分子机制.方法 化学比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性,蛋白质印迹法(Western blot)检测Parkin、α-Syn的表达,免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞α-Syn分布.结果 ①类叶升麻苷(10,20或40 mg·L-1)可明显降低鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放;②0.5 μmol·L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48 h能引起Parkin蛋白的明显降解及α-Syn蛋白二聚体增加;③预先用类叶升麻苷(10,20或40 mg·L-1)处理细胞,能够有效减少鱼藤酮诱导的Parkin蛋白的降解,呈浓度依赖性;并能够抑制鱼藤酮诱导的α-Syn蛋白二聚体增加及α-Syn阳性细胞数增加.结论 类叶升麻苷对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤具有神经保护作用,其作用机制可能与减少Parkin蛋白的降解和抑制α-Syn蛋白的二聚体形成有关.
作者：高燕；蒲小平 刊期： 2007年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
